基于尿液代谢组学的土三七诱导大鼠肝损伤的机制研究

目的:采用代谢组学技术检测土三七干预后大鼠尿液中内源性代谢物的变化,分析土三七诱导大鼠肝脏损伤的可能机制。方法:12只SD大鼠,随机分为对照组和土三七组,每组6只。土三七组大鼠灌胃给予7.5 g·kg-1·d-1土三七水煎液,对照组大鼠灌胃给予等体积纯净水,连续给药14 d。末次给药后,代谢笼收集大鼠尿液,并分离大鼠血清和肝脏组织。生化分析仪检测血清ALT、AST、TBIL和TG水平; HE染色后光镜下观察肝组织病理形态学变化。液质联用(LC-MS)技术检测尿液样本,主成分分析评价组间代谢谱差异,筛选并鉴定差异性代谢物,分析代谢通路。结果:与对照组比较,土三七组大鼠血清ALT、AST和TBIL水平显著增高(P0.05,P0.01); HE染色结果显示,土三七组大鼠肝组织结构破坏,细胞排列紊乱,有炎性细胞浸润。代谢组学分析显示,组间代谢谱差异明显,尿液样本中共鉴定出马尿酸、苯丙氨酸、N-甲基烟酰胺、氧化三甲胺等40个差异代谢物,涉及缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸生物合成,苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成,苯丙氨酸代谢,烟酸和烟酰胺代谢,Vit B2代谢等主要代谢通路。结论:土三七诱导大鼠肝脏损伤,其机制可能与苯丙氨酸生物合成和代谢、烟酸和烟酰胺代谢、Vit B2代谢等有关。     

玄参提取物对甲亢模型大鼠肝脏代谢组学的影响

目的探讨玄参提取物对甲亢模型大鼠肝脏代谢组学的作用及作用机制。方法通过超高效液相色谱-飞行时间-质谱技术分析优甲乐及玄参提取物作用下的大鼠肝脏代谢物谱。应用正交偏最小二乘判别分析法研究空白组和模型组之间的代谢物谱差异,并通过变量重要性投影(VIP)在肝脏中发现了潜在生物标志物。通过比较潜在生物标志物的含量差异,探讨玄参的干预作用。结果在模型组大鼠肝脏代谢物中发现了21个潜在生物标志物,而玄参提取物显著回调的代谢物有14个,分别参与糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚生物合成、花生四烯酸代谢、嘌呤代谢、α-亚麻酸代谢、亚油酸代谢、谷胱甘肽代谢和甘油磷脂代谢。结论玄参提取物可能通过改善甲亢模型大鼠肝脏中相关潜在生物标志物表达及其相关代谢通路发挥治疗甲亢的作用。     

双侧颈上交感神经节阻断延缓主动脉夹层病理过程的机制

目的: 探讨双侧颈上交感神经节阻断对主动脉夹层病理过程的影响及机制。方法: 将45只SD大鼠随机分为空白对照组、手术对照组、交感阻断组。采用β-氨基丙腈建立主动脉夹层模型,交感阻断组注射β-氨基丙腈前接受颈上交感神经节阻断术。采用无创尾动脉血压监测大鼠的血压和心率,药物阻滞法间接监测交感神经活性,HE染色观察主动脉壁组织结构,天狼星红染色观察胶原纤维增殖,免疫组织化学法检测Apelin蛋白表达,蛋白免疫印迹法检测基质金属蛋白酶（MMP）-2、9蛋白表达。结果: 实验期间,手术对照组和交感阻断组体质量小于空白对照组（均P < 0.05）,且交感阻断组体质量大于手术对照组（均P < 0.05）。手术对照组的心率和交感神经活性较空白对照组增加（均P < 0.05）,而交感阻断组降低（均P < 0.05）。与空白对照组比较,手术对照组主动脉管壁增厚,而交感阻断组主动脉管壁增厚情况较手术对照组有所改善。空白对照组主动脉血管壁中大量胶原蛋白-1被天狼星红染成褐色,交感阻断组次之,手术对照组胶原蛋白-1染色最浅。与空白对照组比较,手术对照组Apelin、MMP-2、MMP-9蛋白表达增加（均P < 0.05）,而交感阻断组Apelin、MMP-2、MMP-9蛋白表达较手术对照组减少（均P < 0.05）。结论: 颈上交感神经节阻断术可有效减少诱导大鼠主动脉夹层的发生及死亡,可能与抑制交感神经活性,减少胶原蛋白1、Apelin、MMP-2、MMP-9蛋白表达有关。     

脓毒症小鼠髓源性抑制细胞氨基酸代谢特点

目的: 探讨脓毒症小鼠髓源性抑制细胞(myeloid-derived suppressor cells, MDSCs)氨基酸代谢组学特点。方法: 采用盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture, CLP)制备脓毒症小鼠模型,将小鼠随机分为假手术组(sham组, n = 10)和CLP组(n = 10)。术后第7天在各组存活小鼠中随机选取5只,分离小鼠骨髓MDSCs,采用安捷伦Seahorse XF技术测量MDSCs细胞的氧气消耗速率(oxygen consumption rate, OCR),采用超高效液相色谱-串联质谱联用技术靶向检测细胞内氨基酸及寡肽含量。通过单维和多维检验分析差异代谢物和潜在生物标志物,并对潜在生物标志物进行通路富集分析。结果: CLP组小鼠骨髓中MDSCs比例(75.53% ± 6.02%)显著大于sham组的MDSCs比例(43.15% ± 7.42%, t = 7.582, P < 0.001),且CLP组小鼠骨髓中MDSCs的基础呼吸速率[(50.03±1.20) pmol/min]、最大呼吸速率[(78.07±2.57) pmol/min]和腺嘌呤核苷三磷酸(adenosine triphosphate, ATP)产生[(25.30±1.21) pmol/min]均显著大于sham组的基础呼吸速率[(34.53±0.96) pmol/min, (t = 17.41, P < 0.001)]、最大呼吸速率[(42.57±1.87) pmol/min, (t = 19.33, P < 0.001)]和ATP产生[(12.63±0.96) pmol/min, (t = 14.18, P < 0.001)]。亮氨酸、苏氨酸、甘氨酸等17种氨基酸含量显著增加(均P < 0.05),是脓毒症MDSCs的潜在生物标志物。增加的氨基酸主要富集在苹果酸-天冬氨酸穿梭、氨回收、丙氨酸代谢、谷胱甘肽代谢、苯丙氨酸和酪氨酸代谢、尿素循环、甘氨酸和丝氨酸代谢、β-丙氨酸代谢、谷氨酸代谢、精氨酸和脯氨酸代谢等代谢途径。结论: CLP组小鼠MDSCs中线粒体氧化磷酸化增强,苹果酸-天冬氨酸穿梭和丙氨酸代谢增强,可能为线粒体有氧呼吸提供大量原料,从而促进MDSCs发挥免疫抑制功能,阻断上述代谢途径或将有助于调节MDSCs功能,为改善脓毒症预后提供新思路。     

低频脉冲电磁场通过IGF-1R/NO信号通路促进大鼠颅骨成骨细胞成熟及矿化

目的: 观察低频脉冲电磁场（PEMF）是否通过胰岛素样生长因子1受体（IGF-1R）/一氧化氮（NO）信号通路促进大鼠颅骨成骨细胞成熟及矿化。方法: 体外分离培养乳鼠颅骨成骨细胞,传代后随机分成9组,每天用50 Hz 0.6 mT PEMF处理不同的时间,通过检测成骨细胞中NO含量确定PEMF最佳处理时长。将传代后的成骨细胞随机分成空白对照组、PEMF组、GSK（IGF-1R阻断剂）组、PEMF+GSK组,PEMF处理成骨细胞3 d后,采用蛋白质印迹法检测蛋白激酶（AKT）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）和cGMP依赖性蛋白激酶（PKG）蛋白表达水平;PEMF处理第6天时测定碱性磷酸酶（ALP）活性;PEMF处理第12天时采用茜红素染色法观察钙化结节形成情况。结果: 经1.5 h电磁场处理后的成骨细胞中NO含量显著提高（P < 0.01）,遂后续采用PEMF处理1.5 h。与空白对照组比较,PEMF组AKT、iNOS、PKG蛋白表达量增加（均P < 0.01）,ALP活性升高（P < 0.05）,且茜红素染色面积增大（P < 0.01）;GSK组AKT、iNOS、PKG蛋白表达量减少,ALP活性降低（P < 0.05）,茜红素染色面积最小（P < 0.01）;PEMF+GSK组上述实验结果均高于GSK组但低于PEMF组（P < 0.05或P < 0.01）。结论: PEMF可能通过IGF-1R/NO信号通路促进大鼠颅骨成骨细胞成熟与矿化。     

基于代谢组学探讨扶正祛瘀通下法治疗脓毒症大鼠心肌损伤作用机制

目的基于代谢组学探讨扶正祛瘀通下法(参附桃红承气汤)治疗脓毒症大鼠心肌损伤的作用机制。方法将30只Wistar大鼠按照随机数字表法分为模型组、实验组和空白对照组,每组10只。采用腹腔注射脂多糖法制备脓毒症大鼠模型。实验组大鼠给予参附桃红承气汤灌胃,模型组给予等量生理盐水灌胃。造模成功后12h观察各组大鼠心功能,随后处死大鼠,取心脏组织并于电镜下观察,同时基于液相色谱-质谱联用技术对大鼠肠道代谢产物进行模式识别与分析,鉴定差异代谢物并分析其富集的代谢通路。结果实验组大鼠左心室射血分数较模型组大鼠显著升高[(72.15±8.09)%比(56.36±5.58)%,P0.05)],但低于空白对照组[(72.15±8.09)%比(82.42±4.12)%,P0.05];空白对照组大鼠心肌细胞线粒体结构完整无损伤,实验组出现少量线粒体损伤及脊线断裂,而模型组有大量线粒体肿胀、坏死,并且出现脊断裂及空泡化;代谢组学结果方面,在扶正祛瘀通下药物干预前后大鼠肠道代谢谱明显分离,最终筛选出山奈酚、异亮氨酸、柚皮素、芦荟苷、芹菜素、7-脱氢胆固醇、N-甲基酪胺、灵芝酸、5-羟基吲哚乙酸等9种差异代谢物,主要富集于黄酮类合成、氨基酸(异亮氨酸、酪氨酸、色氨酸)代谢、苯丙酸代谢、类固醇激素生物合成等6条代谢通路。结论扶正祛瘀通下法可改善脓毒症大鼠心肌损伤,其机制可能与黄酮类的合成、氨基酸代谢、苯丙酸代谢、类固醇激素生物合成密切相关。     

基于异常黑胆质证载体大鼠模型尿液代谢组学研究

目的探讨异常黑胆质证对大鼠尿液代谢谱的影响。方法在建立异常黑胆质证大鼠模型的基础上,运用代谢组学研究技术,对异常黑胆质证组(17只)及正常对照组(13只)大鼠尿液进行核磁共振氢谱检测,确定两组大鼠尿液中的差异代谢组分。结果与正常对照组相比,异常黑胆质证组大鼠尿液中胍基乙酸、肌酸酐、蛋氨酸、赖氨酸及色氨酸含量升高,苯丙氨酸、天冬氨酸的含量下降(P<0.05)。结论正常对照组与异常黑胆质证组大鼠尿液的代谢谱存在差异,异常黑胆质证大鼠存在糖、脂肪、蛋白质及磷酸肌酸代谢紊乱。     

黄芪膜分离小分子成分对CTX、HC诱导的免疫抑制模型血清代谢组学比较研究

目的 采用血清代谢组学方法分析黄芪膜分离M4部位对两种免疫抑制模型大鼠内源性代谢产物的影响,探究黄芪的免疫调节作用机制。方法 分别选用环磷酰胺(CTX)和氢化可的松(HC)建立两种免疫抑制大鼠模型,采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS)技术对两种模型对应各组大鼠血清样本进行代谢组学分析,运用多元统计分析及单变量统计分析方法筛选并鉴定差异代谢物,并基于MetaboAnalyst 5.0在线分析平台进行代谢通路分析。结果 从CTX诱导的免疫抑制模型中筛选得到26种差异代谢物,黄芪M4部位对所有差异代谢物均表现出显著回调作用;代谢通路富集结果表明,这些差异代谢物主要涉及6条代谢通路,主要为氨基酸代谢、花生四烯酸代谢、嘧啶代谢及视黄醇代谢。从HC诱导的免疫抑制模型中筛选得到9种差异代谢物,黄芪M4部位对其中6种差异代谢物表现出显著回调作用;代谢通路富集结果表明,这些差异代谢物主要涉及视黄醇代谢和初级胆汁酸生物合成2条代谢通路。结论 黄芪M4部位对免疫抑制生物标志物的调节趋势表明,其可能通过苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成调节,以及苯丙氨酸、视黄醇、嘧啶...     

慢性心衰心气阴虚证模型大鼠的粪便代谢组学研究

目的研究慢性心衰心气阴虚证大鼠的粪便代谢组学特征。方法 13只Dahl盐敏感大鼠随机分为空白对照组(6只)和模型组(7只),以高盐饲料(8%NaCl)饲养模型组大鼠20周复制心衰模型。成模后采集两组大鼠的粪便样本,运用超高效液相色谱-质谱(UPLC-MS)联用技术和多元统计分析其代谢成分。结果主成分分析和偏最小二乘判别分析得到的得分图显示,两组的代谢成分积分点完全分离,表明两组大鼠的代谢模式存在明显差异。与空白对照组比较,模型组神经氨酸、尿苷、丙氨酰色氨酸、酪氨酰缬氨酸、苯丙氨酰甘氨酸、牛磺脱氧胆酸、粪甾烷酸、白三烯E_4的水平上调,谷氨酸、酪氨酸、烟酸、鞘氨醇、二十四烷酸、二十二碳六烯酸、亚油酸的水平下调。15种差异代谢产物参与了19条代谢通路,其中氮代谢通路和氨酰tRNA的生物合成通路富集性较显著。结论慢性心衰心气阴虚证大鼠的代谢功能异常,其病理机制涉及氨基酸代谢紊乱、蛋白质代谢紊乱、脂代谢紊乱、炎症反应、肠道功能失衡等多个层面。     

辛弗林对CUMS大鼠抑郁样行为和血清代谢组学的影响

目的 通过观察分析大鼠慢性应激引起的行为学和血清代谢组变化以及辛弗林抗抑郁的有效治疗,发现潜在的抗抑郁新药先导化合物和生物标志物。方法 将24只大鼠分为正常组、模型组和辛弗林组。模型组为6周慢性温和不可预知应激(CUMS)模型大鼠,用体质量变化、糖水偏好、开场实验作为抑郁评估指标,后2周辛弗林(Syn 20 mg/kg)干预治疗后采集大鼠血清进行气相色谱-质谱联用(GC-MS/MS)测定,研究CUMS大鼠血清内源性代谢物变化,以及辛弗林的干预作用,寻找其抗抑郁潜在的先导化合物和生物标志物,并找到相关靶向代谢通路。结果 辛弗林干预后,在增加CUMS大鼠体质量、提高糖水偏好率、增加开场运动总距离和理毛次数的同时,还能逆转CUMS大鼠血清中磷酸乙醇胺、苯甲酸、胆固醇、谷氨酸等14种代谢物的变化使其趋于正常组,并发现谷氨酰胺和谷氨酸的代谢、缬氨酸和异亮氨酸的生物合成等9条主要牵涉辛弗林的靶向代谢通路。结论 辛弗林可能通过调节谷氨酰胺和谷氨酸的代谢、缬氨酸和异亮氨酸的生物合成等生物学途径发挥对CUMS大鼠抑郁样行为的调正作用。      

Antipyretic Effect of Herba Ephedrae-Ramulus Cinnamomi Herb Pair on Yeast-Induced Pyrexia Rats: A Metabolomics Study

Objective: To investigate the antipyretic mechanism of Herba Ephedrae(Eph)-Ramulus Cinnamomi(RC) herb pair on yeast-induced pyrexia in rats. Methods: Totally 30 qualified male SD rats were randomly assigned to the normal control(NC) group, the pyrexia model(model) group, the Eph, RC and Eph-RC treatment groups by a random digital table, 6 rats in each group. Each rat received a 20% aqueous suspension of yeast(10 m L/kg) except the NC group. The 3 treatment groups were administered 8.1, 5.4 and 13.5g/kg Eph, RC and Eph-RC respectively at 5 and 12h after yeast injection, the NC group and the model groups were administered equal volume of distilled water. Rectal temperatures were measured at 0,6,8,10,12,15,18,24 and 30h and urine was collected prior to yeast injection and at 6, 10, 18, 24, 30, and 36 h after yeast injection. Then urine metabolomic profiling by gas chromatography tandem mass spectrometry, coupled with multivariate statistical analysis and pattern recognition techniques were used to explore the antipyretic effects of Eph-RC. Partial least squares discriminate analysis was used to analyze the metabolomics dataset including classification and regression in metabolomics plot profiling. Results: Compared with the NC group, rectal temperatures were significantly higher in the model group(P0.01), while 3 treatment groups decreased significantly compared with the model group(P0.05 or P0.01). Rectal temperatures of Eph-RC-treated rats started to go down at 6 h, and markedly decreased at 8, 12, 15, 18 and 24h(P0.05 or P0.01), while those of the Eph and RC groups had decreased firstly at 8 h and were markedly lower at 12h(P0.05 or P0.01). Seventeen potential biomarkers related to pyrexia were confirmed and identified, including pyruvic acid, L-phenylalanine, L-tyrosine, phenylacetic acid, hippuric acid, succinic acid, citrate and so on. Eight potential alterations of metabolic pathways including phenylalanine metabolism, citrate cycle, tryptophan metabolism, biosynthesis of valine, leucine and isoleucine, were identified in relation to the antipyretic effects of Eph-RC using MetPA software. Conclusion: The antipyretic effect of Eph-RC herb pair on yeast-induced pyrexia in rats involved correction of perturbed amino acid, fatty acid, and carbohydrate metabolism according to the metabolic pathway analysis with MetPA.     

非布司他对高尿酸血症模型大鼠血清尿酸水平和肾组织中NLRP3蛋白表达水平的影响

目的：探讨非布司他对高尿酸血症模型大鼠血清尿酸水平和肾组织中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（NLRP3）蛋白表达水平的影响,并阐明其作用机制。方法：将45只大鼠随机分为对照组、高尿酸血症组和非布司他组,每组15只。高尿酸血症组和非布司他组大鼠采用氧嗪酸钾灌胃建立高尿酸血症模型,非布司他组大鼠每天给予7.2 mg·kg^-1非布司他,对照组大鼠每天给予等量生理盐水,共4周。HE染色观察各组大鼠肾组织病理形态表现。全自动生化仪测定各组大鼠血清尿酸、肌酐和尿素氮水平,酶联免疫吸附测定（ELISA）法测定各组大鼠血清白细胞介素1β（IL-1β）和白细胞介素18（IL-18）水平,免疫组织化学法测定各组大鼠肾组织中凋亡相关斑点样蛋白（ASC）和NLRP3蛋白表达水平。结果：与对照组比较,高尿酸血症组大鼠尿量和饮水量升高（t=5.317,t=3.674,P<0.05）,体质量降低（t=6.374,P<0.05）,血清尿酸、肌酐和尿素氮水平升高（t=21.463,t=15.342,t=4.603,P<0.05）,血清IL-1β和IL-18水平升高（t=35.761,t=44.168,P<0.05）,肾组织中ASC和NLRP3蛋白表达水平升高（t=17.064,t=26.314,P<0.05）;与高尿酸血症组比较,非布司他组大鼠尿量和饮水量降低（t=4.027,t=2.976,P<0.05）,体质量升高（t=3.694,P<0.05）,血清尿酸、肌酐和尿素氮水平降低（t=13.064,t=7.461,t=3.528,P<0.05）,血清IL-1β和IL-18水平降低（t=24.162,t=17.314,P<0.05）,肾组织中ASC和NLRP3蛋白表达水平降低（t=8.061,t=11.057,P<0.05）。结论：非布司他可能通过抑制大鼠肾组织中NLRP3炎症小体的激活及其下游炎性因子水平发挥对高尿酸血症模型大鼠的肾脏保护作用。     

早期阿尔茨海默病小鼠尿液核磁共振氢谱代谢组学研究

目的: 基于核磁共振代谢组学方法探索阿尔茨海默病（AD）模型APP/PS1小鼠发病早期（4月龄）尿液中代谢物的变化。方法: 通过代谢笼收集16周龄APP/PS1小鼠（n=13）和野生型小鼠（n=15）的尿液,利用一维NOESY脉冲序列采集核磁共振氢谱,积分数据导入SIMCA-P+12.0软件进行模式识别分析,从而在整体代谢水平上探索AD发病早期尿液中代谢物的变化。结果: 与野生型小鼠比较,APP/PS1小鼠尿液的代谢轮廓明显不同,能量代谢、甲胺代谢、氨基酸代谢等代谢产物出现变化,其中3-羟基丁酸、2-羟基丁酸、琥珀酸、2-酮戊二酸、柠檬酸、顺乌头酸和延胡索酸的水平降低,乙酸、三甲胺、牛磺酸、肌酐、马尿酸、甲酸、葫芦巴碱、尿素的水平升高,差异均有统计学意义（均P < 0.05）。结论: AD发病早期小鼠能量代谢、甲胺代谢等途径已发生紊乱,这一结论有助于进一步认识AD的发病机制并为临床诊断提供新的思路。     

多肽化合物urantide对动脉粥样硬化大鼠胸主动脉和VSMC中Ⅳ型胶原表达的影响

目的：探讨多肽化合物urantide对动脉粥样硬化（AS）大鼠胸主动脉和血管平滑肌细胞（VSMC）中Ⅳ型胶原（Col Ⅳ）表达的影响,阐明其防治AS的作用机制。方法：180只Wistar大鼠随机分为正常对照组（n=30）和AS模型组（n=150）,采用高脂饲料喂养和腹腔注射维生素D₃（VD₃）的方法建立大鼠AS模型。150只AS模型鼠随机分为AS组、氟伐他汀（Flu）组和urantide组（3、7和14 d组）（n=30）。免疫组织化学法检测大鼠胸主动脉壁内Col Ⅳ的表达水平,酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测大鼠血清和尿液中羟脯胺酸（HYP）水平。体外培养的VSMC随机分为正常对照组、尾加压素（UⅡ）（10^-8 mol·L^-1）组、Flu组和urantide （10^-10~10^-6 mol·L^-1）组,ELISA法检测各组大鼠VSMC培养上清中Col Ⅳ水平。结果：各组大鼠胸主动脉内膜下不规则斑块内Col Ⅳ表达水平比较差异有统计学意义（F=35.09,P<0.01）。与正常对照组比较,AS组大鼠主动脉中Col Ⅳ表达水平明显升高（P<0.01）;urantide组Col Ⅳ阳性染色强度和范围较AS组均减少（P<0.01）。各组大鼠血清和尿液中HYP水平比较差异有统计学意义（F=24.38,P<0.01;F=26.72,P<0.01）。与正常对照组比较,AS组大鼠血清中HYP水平明显升高（P<0.01）,尿液中HYP水平明显降低（P<0.01）;与AS组比较,urantide组大鼠血清中HYP水平均明显降低（P<0.01）,尿液中HYP水平明显升高（P<0.01）,接近或优于Flu组水平。各组大鼠VSMC培养上清中Col Ⅳ水平比较差异有统计学意义（F=31.04,P<0.01）。与正常对照组比较,UⅡ组大鼠VSMC培养上清中Col Ⅳ水平明显升高（P<0.01）;与UⅡ组比较,urantide组大鼠VSMC培养上清中Col Ⅳ水平明显降低（P<0.05或P<0.01）。结论：urantide可抑制AS大鼠胸主动脉和VSMC中Col Ⅳ的表达,缓解AS病变程度,为临床应用urantide治疗AS提供了实验依据。     

黄芪桂枝五物汤改善大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤:药理和代谢组学证据

  目的  研究黄芪桂枝五物汤对脑缺血损伤的神经保护作用,并探讨其可能作用机制。  方法  将50只大鼠随机分为假手术组, 模型组及黄芪桂枝五物汤低、中、高剂量组(5、10、20 g·kg-1),每组10只。除假手术组外,大鼠采用线栓法建立大脑中动脉闭塞(MCAO)模型。中药组大鼠灌胃给予复方水煎液,假手术组和模型组大鼠灌胃给予等量的生理盐水。连续灌胃7 d后,处死大鼠。通过神经功能缺损评分、脑梗死面积、脂质过氧化和炎症细胞因子水平检测来评估各组大鼠脑缺血性损伤程度。同时通过代谢组学研究黄芪桂枝五物汤对脑缺血再灌注损伤的可能机制。  结果  黄芪桂枝五物汤可显著降低神经功能缺损评分和脑梗死面积,减少脂质过氧化和炎症细胞因子水平,表明其可有效减轻MCAO诱导的大鼠脑缺血性损伤。进一步的代谢组学研究表明,脑缺血再灌注损伤后血清代谢紊乱,共筛选和鉴定出23种与缺血性中风相关的代谢物发生显著性变化,是脑缺血潜在的生物标志物。代谢通路分析显示,MCAO主要通过靶向乙醛酸和二羧酸代谢,以及苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸的生物合成来诱导脑缺血性损伤。黄芪桂枝五物汤干预后,大部分代谢标记物发生了逆转, 主要包括吲哚氧基硫酸、柠檬酸、3-羟基十二酸、3-甲基-2-丁烯酸、苹果酸、丁醛和尿酸等。  结论  黄芪桂枝五物汤可有效改善大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤, 其发挥神经保护作用的机制可能与抑制炎症、改善多种代谢途径有关。      

基于核磁共振1H谱的2型糖尿病肾病分时期尿液代谢组学研究

目的 分析高脂喂养联合低剂量链脲佐菌素(streptozocin,STZ)诱导的2型糖尿病肾病(type 2 diabetic nephropathy,T2DN)大鼠模型在不同时期尿液代谢组学的差异,寻找T2DN早期代谢标志物并分析T2DN发病机制.方法 18只SD大鼠随机分为T2DN组(n=12)和正常组(n=6),T2DN组采用高脂喂养4周后空腹注射STZ(40 mg/kg)建立T2DN模型;正常组正常饲料喂养并注射等剂量的柠檬酸缓冲液作为对照.分别于第8、12、16周代谢笼收集尿液,通过1 H NMR技术检测其尿液代谢组学特征,采用模式识别方法分析疾病进展过程中的代谢差异.结果 模型组中9只大鼠发展为T2DN模型,成模率为75％.模式识别方法分析显示正常组、T2DN组第8周、T2DN组第12周和T2DN组第16周大鼠的尿液有明显的代谢差异,这些差异代谢涉及能量代谢、三羧酸循环、脂代谢、氨基酸代谢及肠道菌群.结论 随着T2DN大鼠病程的进展,其尿液中的代谢谱发生显著的变化,这些具有显著性变化的代谢物可以为T2DN的早期诊断和探索T2DN的发病机制提供帮助.     

毛冬青三萜皂苷对动脉粥样硬化大鼠粪便和尿液代谢组学的影响

目的 探讨毛冬青三萜皂苷(IPTS)对动脉粥样硬化(AS)模型大鼠粪便和尿液代谢组学的影响.方法 采用高脂饮食联合腹腔注射维生素D3诱导大鼠AS模型,实验分为对照组、模型组、IPTS组.检测大鼠血清中血脂四项水平,应用核磁共振(NMR)技术对粪样和尿样进行代谢组学分析.结果 IPTS干预后,大鼠血清TG含量显著下降(P...     

二乙基亚硝胺诱导肝细胞癌模型鼠肠道微生态研究

目的：探索肝细胞癌模型鼠肠道微生态特征。方法：将2周龄C57BL/6雄鼠分为正常对照组和肝癌模型组。肝癌模型组在出生后2周给予单次腹腔注射二乙基亚硝胺（DEN）,其中存活小鼠自4周龄起腹腔注射1,4-双[2-(3,5-二氯吡啶氧)]苯,每2周一次,共8次。分别于小鼠出生后第10、18和32周随机处死部分实验动物,取肝脏进行组织病理学检查。其中,在小鼠出生后第32周处死动物前无菌条件下收集两组粪便标本,并进行V3～V4高可变区16S rRNA基因组测序,进而对菌群多样性、物种丰度差异、菌群相关性、表型预测以及功能预测进行分析。结果：α多样性分析结果显示Good’s coverage均已达到最大值1.00,且正常对照组与肝癌模型组肠道菌群Observed features、Chao1指数、Shannon指数和Simpson指数差异均有统计学意义（均P<0.05）。β多样性分析结果显示基于加权或未加权Unifrac距离的主坐标PCoA均R>0,标本的组内差异小于组间差异;两组标本的分离趋势明显（P<0.05）。拟杆菌门、厚壁菌门、放线菌门及髌骨菌门等菌群为正常对照组与肝癌模...