Intermedin1-53通过激活AMPK抑制内质网应激减轻心肌肥厚

<正>目的:研究intermedin(IMD)1-53在心肌肥厚中的作用和机制。方法:腹主动脉缩窄(AAC)制备大鼠心肌肥厚模型,血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导心肌细胞肥大。结果:AAC组大鼠HW/BW增加26%(P0.01),血流动力学指标血压、左室收缩压(LVSP)、左心室舒张压最大变化速率(LV-dp/dtmax)、左心室收缩压最大变化速率(LV+dp/dtmax)显著增加(P0.01),超     

压力超负荷对大鼠左室心肌肌型LIM蛋白mRNA和蛋白表达的影响

目的:了解压力超负荷大鼠左室肥厚心肌肌型LIM蛋白(MLP)mRNA和蛋白水平的变化, 探讨病理性左室肥厚心肌是否存在细胞骨架蛋白的缺失。方法:观察大鼠腹主动脉缩窄术后1、4、8、16周各组血流动力学参数、心室肥厚指数、MLPmRNA表达和蛋白水平的变化。结果:腹主动脉缩窄术后4周左室肥厚指数较术后1周组明显增加(P＜0.05), 术后8周组左室心肌MLPmRNA的表达较术后1、4周组明显下降(P＜0.05), 但各组左室心肌MLP蛋白水平差异无显著(P＞0.05)。结论:在病理性左室肥厚心肌出现明显心力衰竭前, MLP转录水平下调, 而MLP蛋白水平无明显改变。提示MLP作为心肌细胞骨架的基础, 对维持肥厚左室心肌的收缩功能起重要作用。     

川芎嗪对腹主动脉缩窄大鼠左室心肌Ⅰ型和Ⅲ型胶原及其mRNA表达的影响

目的:探讨川芎嗪对腹主动脉缩窄大鼠心肌Ⅰ型和Ⅲ型胶原及其mRNA表达的影响。方法:34只SD大鼠分为假手术组(12只)、模型组(10只)和川芎嗪组(12只)。模型组根据Doering等的银夹缩窄法造成腹主动脉部分狭窄(银夹内径0.7mm)。假手术组只分离腹主动脉而不缩窄。川芎嗪组手术同模型组。4周后川芎嗪组用川芎嗪注射液灌胃(25ml/kg)4周,手术组和模型组以等量双蒸水灌胃4周。之后处死动物,取其心脏测量左室心肌质量指数(LVMI);用免疫组化法进行左室心肌Ⅰ型和Ⅲ型胶原染色及定量图像分析,同时通过RT-PCR扩增并测定各组左室心肌Ⅰ型和Ⅲ型胶原mRNA的表达。结果:模型组造模8周时LVMI、Ⅰ型和Ⅲ型胶原及mRNA表达较假手术组显著升高(P0.01);免疫组化染色显示胶原纤维明显增多、增粗及排列紊乱。川芎嗪组左室心肌胶原纤维减少,排列转好,LVMI、Ⅰ型和Ⅲ型胶原及其mRNA表达明显降低(P0.01)。结论:腹主动脉缩窄大鼠反应性左室心肌Ⅰ型和Ⅲ型胶原及其mRNA表达升高;川芎嗪可延缓心肌纤维化进程。     

肾交感神经去除术对心肌肥厚和心肌纤维化的影响

 目的:观察肾交感神经去除术（renal sympathetic denervation, RDN）对心肌肥厚和心肌纤维化的影响,并探讨其可能机制。方法:选用12周龄的健康SD雄性大鼠60只,随机分为假手术组、假手术+RDN组、主动脉缩窄组、主动脉缩窄+RDN组,8周后用介入生理记录仪检测血流动力学和心功能指标,HE染色、苦味酸-天狼星红染色分别观察心肌肥厚和心肌纤维化情况,放射免疫分析法测量血浆肾上腺素浓度、肾素活性、血管紧张素II浓度及心脏血管紧张素II含量。结果:与主动脉缩窄组相比,RDN可显著改善主动脉缩窄大鼠心脏舒张功能［左室舒张末期压力（LVEDP）：(8.03±1.66) mmHg vs(15.77±2.14) mmHg;等容舒张期左室压力下降最大速率（-dp/dt）：(7 793±587) mmHg/s vs(6 353±475) mmHg/s;P＜0.01］、防止其心肌肥厚和纤维化［左心室重量指数：3.340±0.121 vs4.244±0.102;心肌细胞面积：(332.9±28.9) μm2 vs(401.6±33.2) μm2;胶原容积分数：7.76%±0.85% vs12.48%±1.82%;P＜0.01］。然而,RDN不能降低主动脉缩窄大鼠的血压（P＞0.05）。RDN导致主动脉缩窄大鼠的血浆肾上腺素浓度、肾素活性、血管紧张素II浓度及心脏血管紧张素II含量均明显减少（P＜0.01）。结论: RDN可以通过降低交感和肾素-血管紧张素系统活性直接抑制心肌肥厚和心肌纤维化,从而改善心脏功能。     

腹主动脉缩窄大鼠血浆心房利钠肽水平的变化

目的:通过建立腹主动脉缩窄大鼠模型,观察腹主动脉缩窄大鼠血浆心房利钠肽(ANP)浓度的改变。方法:30只雄性SD大鼠随机分为假手术组(14只)和模型组(16只)。模型组根据Doering等的方法,用银夹造成腹主动脉部分狭窄(银夹内径0.7mm);8周后计算左室心肌质量指数(LVMI),胶原染色观察心肌病理形态,放射免疫法测定血浆ANP水平。结果:造模8周时左室心肌胶原染色显示模型组有大量鲜红色胶原纤维,较假手术组有明显改变;模型组LVMI及血浆ANP水平较假手术组显著升高(P<0.01)。结论:腹主动脉缩窄大鼠造模8周时心肌符合纤维化改变,ANP在其过程中发挥重要作用。     

扎考比利改善压力超负荷致大鼠心室重构的作用

目的:研究扎考比利(zacopride,ZAC)对腹主动脉缩窄所致大鼠压力超负荷性心室重构的改善作用。方法:通过腹主动脉缩窄构建大鼠压力超负荷心室重构模型,预防性给予ZAC、氯喹(chloroquine,Chlor)及ZAC+Chlor。连续给药8周,超声心动图评价心功能;计算心重/体重比(HW/BW)和左心室/体重比(LVW/BW);左心室心肌组织HE染色;透射电镜观察心肌细胞超微结构;Western blot检测大鼠心肌组织内向整流钾通道(IK1)蛋白表达;RT-PCR法检测心肌组织Kir2.1的mRNA表达。结果:与模型(vehicle)组相比,ZAC组大鼠心功能明显改善,LVEDS和LVEDD明显降低(P 0.05),LVEF和LVFS显著升高(P 0.01),HW/BW和LVW/BW显著降低(P 0.05),心肌肥大程度降低,心肌细胞横断面积明显减小(P 0.01),心肌超微结构明显改善。Chlor明显阻断了ZAC对腹主动脉缩窄所致压力超负荷大鼠心室重构的保护作用。与vehicle组相比,ZAC组大鼠心肌组织IK1蛋白表达和Kir2.1的mRNA显著升高(P 0.01)。结论:心肌IK1激动剂ZAC显著减轻大鼠左心室压力超负荷诱发的心室重构。     

PARP-2在大鼠心肌肥大中的作用

目的:在细胞和整体水平研究多聚腺苷酸二磷酸核糖基聚合酶2(PARP-2)在心肌肥大过程中表达的变化规律以及PARP-2对心肌肥大的调控作用。方法:健康雄性SD大鼠采用腹主动脉缩窄法(AAC)建立心肌肥大动物模型,采用real-time PCR和Western blot检测PARP-2的mRNA和蛋白表达变化;使用PARP-2特异性的siRNA干扰序列来处理细胞后,通过检测心肌细胞表面积及ANF、BNP和β-MHC的mRNA表达变化来作为评判心肌细胞肥大状况。结果:AAC大鼠心脏组织中PARP-2的蛋白和mRNA表达均显著上调;在AngⅡ诱导的心肌细胞肥大模型中,AngⅡ能时间和剂量依赖性地上调PARP-2的mRNA和蛋白表达;用siRNA干扰序列沉默PARP-2能够逆转AngⅡ所诱导心肌细胞的肥大。结论:在AngⅡ诱导的心肌细胞肥大的体外模型和腹主动脉缩窄诱导的心肌肥大动物的体内模型中,PARP-2的mRNA和蛋白水平均显著上调;特异性沉默PARP-2能够抑制AngⅡ诱导的心肌细胞肥大。     

川芎嗪对腹主动脉缩窄大鼠血浆内皮素-1水平的影响

目的:探讨川芎嗪对腹主动脉缩窄大鼠血浆内皮素(endothelin-1,ET-1)水平的干预作用。方法:实验大鼠随机分为假手术组、模型组和川芎嗪组。银夹法建立腹主动脉缩窄大鼠模型,川芎嗪组用25mg/kg川芎嗪注射液,余两组用等量双蒸水(1.5ml/100g)灌胃4周后,比较各组血浆ET-1浓度、大鼠左室心肌质量指数(LVMI)和左室心肌病理形态胶原染色等的变化。结果:模型组LVMI、血浆ET-1浓度和心肌胶原纤维化较假手术组显著升高(P0.01),川芎嗪组较模型组显著降低(P0.01)。结论:川芎嗪可防治腹主动脉缩窄大鼠心肌纤维化,可能与影响血浆ET-1水平有关。     

PDCD5对肥厚心肌的保护作用及作用机制

<正>目的:探讨程序性细胞死亡分子5(PDCD5)在心肌肥厚发生发展过程中的作用及机制。方法:腹主动脉缩窄术(AAC)建立大鼠心肌肥厚病理模型;苯肾上腺素(PE)刺激分离培养的乳鼠心肌细胞肥大;RT-PCR和蛋白印迹实验分别检测mRNA及蛋白表达;含PDCD5 cD NA腺病毒或PDCD5 shRNA腺病毒转染心肌细胞以过表达或敲低PDCD5;萤光素酶报告基因系统及     

抑制肌球蛋白轻链激酶减轻大鼠压力超负荷诱导的心脏肥大

目的:通过抑制肌球蛋白轻链激酶(MLCK)和磷酸化肌球蛋白轻链2(p-MLC2),探究其对心脏肥大的影响。方法:原代乳鼠心肌细胞(NRCMs)经血管紧张素II(Ang II)诱导发生心肌细胞肥大,同时给予MLCK抑制剂ML-7处理,分为PBS组、Ang II组和Ang II+ML-7组。用RT-qPCR和免疫荧光法检测心肌细胞肥大标志物和心肌细胞表面积。此外,将大鼠随机分为6组:(1)腹主动脉缩窄(AB)0周组;(2)AB 2周组;(3)AB 4周组;(4)假手术组;(5)AB组;(6)AB+ML-7组。前3组分别在手术后0、2和4周取材,后3组在手术4周后通过超声心动图、组织病理学和RT-qPCR检测大鼠心脏结构、心功能、心肌细胞横截面积、心肌纤维化及心脏肥大标志物表达。Western blot用于检测心肌细胞和大鼠心脏组织中MLCK、p-MLC2和MLC2的表达水平。结果:Ang II处理可显著上调心肌细胞肥大标志物心房钠尿肽(ANP)、脑钠肽(BNP)与β-肌球蛋白重链(β-MHC)的表达,增加心肌细胞表面积,上调MLCK表达,增加p-MLC2水平,而抑制MLCK可明显减轻上述改变。MLCK和p-MLC2在大鼠AB术2周后增加,4周后减少。AB术4周后大鼠心功能降低,心重指数、心肌细胞横截面积、心肌纤维化和心脏肥大标志物表达增加,而抑制MLCK可明显减轻上述改变。抑制MLCK可在心肌细胞和心脏组织中降低p-MLC2水平而不影响MLCK的表达。结论:抑制MLCK和p-MLC2可减轻Ang II诱导的心肌细胞肥大和压力超负荷诱导的心脏肥大。     

坎沙曲联合缬沙坦与奥帕曲拉均减轻大鼠心肌肥厚

目的比较坎沙曲联合缬沙坦与奥帕曲拉(OMA)对大鼠心肌肥厚的保护作用。方法注射1 mg/kg异丙肾上腺素(ISO)制备大鼠心肌肥厚模型,随机分为对照组、心肌肥厚组、坎沙曲组、缬沙坦组、OMA组与坎沙曲+缬沙坦(半量及全量)组,每组n=8,染色后测定心肌细胞横截面积、心肌间质胶原容积分数及血管周围胶原面积;免疫组化学检测心肌组织p-PI3K和p-Akt表达;放免法测定血浆血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、心房利钠肽(ANP)、缓激肽(BK)水平。结果 1)坎沙曲+缬沙坦(全量)及OMA组均可降低心肌肥厚组大鼠心脏重量指数(分别为3.64±0.30、3.62±0.28和4.32±0.58)、心肌细胞横截面积、心肌间质胶原容积分数及血管周围胶原面积的明显上升(P<0.01),两组间无明显差异。2)与心肌肥厚组相比,坎沙曲+缬沙坦(全量)及OMA组均可降低血浆AngⅡ含量[分别为(741±89)、(682±66)和(479±62)ng/L],并显著上调ANP[分别为(117±33)、(298±91)和(288±95)μg/L]及BK[分别为(124±12)、(232±21)和(309±24)ng/L]水平(P<0.01),但坎沙曲+缬沙坦(全量)较OMA组BK的上调幅度低。3)坎沙曲+缬沙坦(全量)与OMA均下调心肌肥厚组心肌组织p-PI3K和p-Akt蛋白表达,且两者间无明显差异。结论坎沙曲联合缬沙坦与OMA均可减轻大鼠心肌肥厚,但对血浆激素水平的影响有差异。     

rAAV9介导的siRNA敲减p65对压力超负荷大鼠心肌纤维化和凋亡的影响

目的:探讨重组腺相关病毒血清型9(rAAV9)介导的敲减p65基因表达对压力超负荷大鼠心功能的作用及可能机制。方法:通过腹主动脉缩窄手术(AAC)构造大鼠左心室肥厚模型。将造模的SD大鼠随机分为假手术组、AAC组、AAC+rAAV9-eGFP组和AAC+rAAV9-eGFP-P65-siRNA组。假手术组大鼠开腹后直接关闭腹腔;其余3组大鼠开腹结扎腹主动脉后关闭腹腔,术后3 d对AAC大鼠分别尾静脉注射生理盐水、rAAV9-eGFP和rAAV9-eGFP-P65-siRNA。4周后,测定血流动力学相关指标;计算心脏质量参数;Masson染色检测心肌纤维化程度;TUNEL染色观察细胞凋亡水平;Western blot检测心肌P65的表达水平;ELISA检测各组大鼠血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的含量。结果:AAC组和AAC+rAAV9-eGFP组中P65表达量较假手术组上升(P<0.05);AAC+rAAV9-eGFP-P65-siRNA组中P65表达量较AAC组明显降低(P<0.05)。AAC组和AAC+rAAV9-eGFP组大鼠收缩压、舒张压、...     

后负荷增大引起的心肌肥厚过程中细胞凋亡的变化规律

增大心脏后负荷引起心肌肥厚可诱导细胞凋亡,但心肌肥厚早期形成过程的凋亡情况及规律还未了解,本实验通过缩窄大鼠腹主动脉建立心肌肥厚模型来研究心肌肥厚早期形成过程的调亡情况及规律,选取雄性SD大鼠,平均体重是220g,腹主动脉缩窄建立心肌肥厚模型并以缩窄时间的不同分组,采用脱氧核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（TUNEL）的方法和流式细胞仪记数（FCM）的方法检测细胞凋亡的比率,结果显示：随着缩窄时间的延长,心脏肥厚指数和左心以厚指数均逐渐升高,在第7d组达到最高值,维持此水平至91d组,然后出现下降的趋势,用流式细胞仪记数（FCM）的方法检测得到的细胞凋亡比率第4天高于0d组,但差异不显著,由第4d到第7d,细胞凋亡比率显著下降,从28d起,细胞凋亡比率出现回升的趋势,随着缩窄时间的延长,细胞凋亡比率逐渐升高,而TUNEL的结果与此结果基本一致,结论：细胞凋亡参与了心肌肥厚早期的形成过程,心肌由健康状态向肥厚转变的过程中,在腹主动脉缩3窄时间较短的时段内凋亡和肥厚这两个因素要互作用维持生长消亡的平衡,来调节心脏的功能,于腹主动脉缩窄时间较长的时段内,在病理因子的刺激下凋亡数目继续增多,主动的参与心肌重构的过程。     

心肌肥厚大鼠左室组织中肌醇磷脂途径特征

本研究观察了心肌肥厚大鼠左室组织中肌醇磷脂途径特征。对大鼠行腹主动脉部分缩窄术制作心肌肥厚模型 ,术后 10d处死动物测全心重 体重比值 ,以免疫印迹法测左室组织Gαq 11和PLC β3 蛋白含量 ,以放免法测左室组织 1,4,5 三磷酸肌醇 (IP3 )含量。结果显示术后 10d时腹主动脉部分缩窄 (CA)组大鼠全心重 体重比值明显高于假手术 (SO)组 (P <0 0 1) ,二组大鼠左室组织Gαq 11和PLC β3 蛋白含量无显著差异 ,CA组左室组织IP3 浓度明显高于SO组 (P <0 0 5 )。上述结果提示肌醇磷脂途径可能参与压力超负荷性心肌肥厚病理过程     

NO和AngⅡ对大鼠心室重构影响的实验研究

目的:探讨压力超负荷心肌肥大反应过程中心肌内分泌因子活动及相互间的作用。方法:利用腹主动脉缩窄性高血压大鼠模型,以平均动脉压(MAP)、心系数(LVW/BW)及心肌体积密度(VV)、表面积密度(SV)、比表面(S/V)及平均自由程(λ)等体视学参数作为指标,观察一氧化氮(NO)及血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)在压力超负荷高血压和心肌肥大反应过程中的作用及其相互关系。结果:腹主动脉缩窄的大鼠,其MAP、LVW/BW明显增高,心肌横断面积及平均直径明显增大,VV、SV、S/V及λ等与对照组相比均有显着性差异;NO前体L-Arg和AngⅡAT1受体拮抗剂Los能明显阻断腹主动脉缩窄大鼠的MAP、LVW/BW的增高效应,心肌横断面积、平均直径及VV、SV等明显变小,S/V及λ则增大;用NOS抑制剂L-NAME处理的腹主动脉缩窄大鼠,其MAP、LVW/BW值则进一步增高,心肌横断面积、平均直径及VV、SV等参数持续加大,而S/V及λ则变小。结论:NO和AngⅡ参与了腹主动脉缩窄后的高血压和心肌肥大反应。NO的降血压、抑制心肌肥大作用可能是通过降低AngⅡ的浓度来实现的。     

腹主动脉缩窄法致大鼠心肌纤维化模型的建立

目的用腹主动脉缩窄法建立大鼠心肌纤维化模型。方法16只雄性SD大鼠随机分为腹主动脉缩窄组（模型组）及假手术组。分别比较两组左室心肌质量指数、左室心肌病理形态HE染色及左室心肌胶原染色等指标造模4周及造模8周时的变化。结果模型组造模4周及8周时左室重量指数（LVMI）较假手术组显著升高（P〈0.05）。胶原染色、HE染色及超微结构等病理变化,模型组造模4周、8周较假手术组改变明显;假手术组4周及8周时基本一致。结论SD大鼠在腹主动脉缩窄术后4周即可达心肌纤维化模型。     

压力超负荷性心肌肥厚发病机制的研究

目的:探讨α1、β受体阻断剂派唑嗪(Prazosin,Pra)、心得安(Propra-nolol,Pro)及钙离子拮抗剂尼群地平(Nitrendipine,Nit)在压力超负荷性心肌肥厚发病学中的意义。方法:采用Pra、Pro和Nit治疗大鼠腹主动脉缩窄所致左室肥厚(LVH)。结果:Pra和Nit能抑制早期肥厚心肌c-fosmRNA表达,6周后Pra组和Nit组较LVH组之BP,LVW/BW均显著下降,同时心脏舒张功能改善,Na+-K+ATPase活性增强;而Pro不能有效改善LVH。结论:Pra和Nit治疗成功预防了心肌肥厚的发生,而Pro不能。提示儿茶酚胺参与压力超负荷性心肌肥厚的形成,其效应不仅涉及后负荷的高低,也可通过α1肾上腺素能受体而不是β肾上腺素能受体对心肌产生直接性致肥大作用,同时钙离子可作为第二信使参与引起心肌细胞肥大的信息传递。     

采用灌流分离的成年大鼠心肌细胞作为心肌肥厚基因水平研究的材料

心肌肥厚是心血管疾病常见的临床症状，它与冠心病，心衰，脑卒中等疾病均密切相关，对其发生机制的探讨将为心肌肥厚及相关疾病的研究和治疗提供有益的线索。本实验以腹主动脉缩窄的左心室肥厚大鼠为模型，采用体外灌流分离心肌细胞，同时提取RNA并通过反转录来检查所得HNA的质量，并探讨其应用于心肌肥厚基因表达水平研究的可能性。材料与方法一、动物模型的建立：压力负荷左心肥厚大鼠模型的建立采用常规的腹主动脉缩窄法［l］：雄性健康Wstar大鼠（体重IRO－220g份为两组，每组10只。模型组大鼠绑扎腹主动脉使其保留直径约0．7nun的…     

血管紧张素转换酶抑制剂防治实验性心肌肥厚的形态学研究

目的：观察血管紧张素转换酶抑制剂卡托普利防治心肌肥厚的作用,并比较倍他乐克对心肌肥厚的影响。方法：选用腹主动脉缩窄的大鼠实验性心肌肥厚模型,分心肌肥厚组、卡托普利组、倍他乐克组和对照组。常规电镜制样,除定性观察外,每组分别进行了有关体视学分析。结果：心肌肥厚组心肌细胞超微结构病变明显,间质胶质纤维增多;卡托普利组心肌细胞和间质超微结构基本正常。心肌肥厚和倍他乐克的心肌肥厚原纤维体密密度低于卡托普利     

异丙肾上腺素诱导的大鼠肥厚心肌组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达

目的 探讨Ⅰ、Ⅲ型胶原在肥厚心肌组织中的变化特征.方法 SD大鼠60只,分为对照组和实验组,两组分别再分为1、4、8周组,每组10只.对照组背部皮下注射生理盐水4ml/(kg·d);实验组背部皮下注射异丙肾上腺素4mg/(kg·d).两组分别注射1、4、8周,然后测定各组大鼠体重(BW)、心脏湿重(HW)、左室湿重(LVW),计算出HW/BW、LVW/BW;心肌组织冷冻切片,利用图像分析软件,测量心肌细胞横径(TDM)和心肌细胞截面积(CA).免疫组织化学法检测各组心肌组织Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达.Western blotting方法检测心肌肥厚大鼠心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达及其含量.结果 免疫组织化学结果显示,注射异丙肾上腺素1周后,Ⅰ和Ⅲ型胶原蛋白表达明显增加,4周后有所下降.Western blotting结果显示,实验各组Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达均多于对照组(P＜0.01);实验1周时Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达量最高,4周和8周均下降.实验4周和8周组与1周组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 心肌肥厚发生1周左右是Ⅰ、Ⅲ型胶原增加的高峰期,以后趋于稳定.心肌肥厚主要引起胶原量的变化,不破坏胶原纤维的网络结构.