高效液相色谱法同时测定蒙药阿那日-4散中3种成分的含量

目的：建立蒙药阿那日-4散（石榴、肉桂皮、白豆蔻、荜茇）中有效成分没食子酸、桂皮醛和胡椒碱的含量测定方法。方法：采用反相高效液相色谱法以Promosil C₁₈（4.6 mm×250 nm,5μm）为色谱柱;以乙腈-1%冰乙酸水溶液为流动相,梯度洗脱;流速为1.0 mL·min^-1;柱温为30℃;检测波长为290 nm。结果：没食子酸在0.08~0.4μg·mL^-1（r=0.9998）、桂皮醛在0.56~2.81μg·mL^-1（r=0.9996）、胡椒碱在0.52~2.59μg·mL^-1（r=0.9997）范围内与峰面积呈良好的线性关系;其平均回收率（n=6）分别为99.5%（RSD=2.3%）、99.3%（RSD=2.8%）和98.5%（RSD=2.2%）;6批样品中上述3种成分平均含量范围分别为0.198~0.241,2.44~2.61,1.41~1.54μg·g^-1。结论：所建立方法操作简便、稳定可靠、专属性强、准确度及重复性较好,为蒙药阿那日-4散质量检测提供依据。     

反相高效液相色谱法测定人血清中替考拉宁的浓度及其应用

目的：建立测定复杂用药环境下人血清中替考拉宁浓度的反相高效液相色谱法。方法：色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C₁₈柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为乙腈-0.02 mol·L^-1的NaH₂PO₄溶液（24：76,H₃PO₄调pH值为2.02）,流速1.0 mL·min^-1,检测波长240 nm,柱温28℃。结果：替考拉宁在2.01~80.67 μg·mL^-1（r=0.998 9,n=7）范围内浓度与校正因子f（替考拉宁峰面积/哌拉西林的峰面积）成良好的线性关系,定量限为50.5 ng,替考拉宁平均提取回收率为87.17%,方法平均回收率为100.7%,（RSD=1.93%,n=9）。结论：该法操作简便、灵敏、准确,适用于替考拉宁血药浓度的测定。     

大黄清胃丸中马兜铃酸A的限量检测

目的：建立马兜铃酸A在大黄清胃丸中的限量检测方法。方法：采用固相萃取法提取马兜铃酸A,以Phenomenex Luna C₁₈柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,以乙腈（A）-0.2%碳酸铵溶液（V/V）（稀盐酸调节pH至7.5）（B）为流动相,梯度洗脱,t：0～5 min（A：15%,B：85%）,t：5～15 min（A：15%→35%,B：85%→65%）;柱温35℃,流速1.0 mL·min^-1,检测波长λ250 nm。结果：在0.008～0.170 μg·mL^-1范围内马兜铃酸A有良好线性关系（r=0.999 8）,马兜铃酸A检测限（S/N=3）和定量限（S/N=10）分别为2.1 ng·mL^-1和7.0 ng·mL^-1,平均加样回收率为95.8%。结论：本方法灵敏度高、准确、重复性好,可用于大黄清胃丸中马兜铃酸A的限量检测。     

高效液相色谱法测定舒肝颗粒中黄芩苷和阿魏酸的含量

目的：建立舒肝颗粒的质量标准。方法：采用薄层色谱法（TLC）对其中柴胡、当归进行鉴别;建立高效液相色谱（HPLC）法测定其中黄芩苷和阿魏酸的含量,色谱柱：HYPERSIC ODS C₁₈柱（4.6 mm×200 mm,5 μm）;流动相：乙腈-0.1%磷酸溶液（22∶78）;流速：1.0 mL·min^-1;检测波长：280 nm;柱温：30℃。结果：TLC鉴别柴胡对照药材、当归对照药材均具有良好的分离效果,阴性对照无干扰;高效液相色谱（HPLC）法黄芩苷在12.64~126.40 μg·mL^-1范围内线性关系良好,r=0.999 7,平均回收率为97.7%（RSD=1.02%）;阿魏酸在9.46~94.60 μg·mL^-1范围内线性关系良好,r=0.999 9,平均回收率为97.5%（RSD=1.22%）。结论：所建立的薄层鉴别方法专属性强,含量测定方法简便,准确,可用于舒肝颗粒的质量控制。     

超高效液相色谱法同时测定瑞香狼毒中伞形花内酯和狼毒色原酮的含量

目的：建立超高效液相色谱（UPLC）法测定瑞香狼毒药材中伞形花内酯和狼毒色原酮的含量。方法：超高效液相色谱法,Waters BEH C₁₈（2.1 mm×100 mm,1.7 μm）色谱柱;流动相为乙腈（A）-0.1%磷酸水溶液（B）,进行梯度洗脱;检测波长伞形花内酯为327 nm,狼毒色原酮为297 nm;流速0.3 mL·min^-1;进样量2 μL,柱温25℃。结果：伞形花内酯、狼毒色原酮的线性范围分别为0.74~19.64 μg·mL^-1（r=0.999 9）、14.70~352.8 μg·mL^-1（r=0.999 8）,平均回收率分别为99.20%,99.63%,RSD分别为1.81%,1.65%。13批瑞香狼毒药材中伞形花内酯的含量范围为0~0.602 mg·g^-1,狼毒色原酮的含量范围6.08~33.37 mg·g^-1。结论：该方法操作简便、快速、重复性好、结果准确可靠,可用于中药瑞香狼毒的质量控制。     

HPLC-ELSD法快速测定生脉注射液中糖类成分含量

目的：利用高效液相色谱-蒸发光散射检测法（HPLC-ELSD）建立生脉注射液中糖类成分快速定量分析方法。方法：采用Alltech Prevail^TM Carbohydrate ES （4.6 mm×250 mm,5 μm）色谱柱,以乙腈和水为流动相梯度洗脱,流速0.8 mL·min^-1,柱温30℃,进样量20 μL,ELSD漂移管温度65℃。结果：生脉注射液中果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖成分达到基线分离,浓度在179.0~2 864 μg·mL^-1（r=0.996 8）,49~784 μg·mL^-1（r=0.998 1）,39~642 μg·mL^-1（r=0.996 8）,30~480 μg·mL^-1（r=0.999 3）范围内均呈现良好的线性关系。平均回收率（n=3）在98.34%~100.7%之间,RSD ≤ 3.8%。结论：该方法快速、准确,可用于生脉注射液中糖类成分的定量检测。     

UPLC-MS/MS法快速检测人血浆中5种磺酰脲类降糖药物

目的：建立并验证一种定性定量检测人血浆中5种常见磺酰脲降糖药的方法,并将其应用于临床检测。方法：血浆样品经乙腈沉淀蛋白后,采用液相-串联质谱联用仪测定。色谱柱为BEH C18,以含0.01%甲酸乙腈溶液-含0.01%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,流速为0.4 mL·min^-1,电喷雾正离子模式,多反应监测。结果：格列齐特、格列吡嗪、格列美脲、格列本脲、格列喹酮质量浓度分别在0.037~9（r=0.998 3）、0.037~9（r=0.999 2）,0.037~9（r=0.992 8）,0.037~9（r=0.996 8）,0.037~9（r=0.998 8）μg·mL^-1内线性关系良好;定量下限分别为0.004 6,0.009 2,0.004 6,0.004 6,0.009 2 μg·mL^-1;日内和日间精密度均小于<13.88%,相对回收率均在77.57%~100.83%之间;提取回收率均在69.69%~91.54%之间;基质效应均在84.32%~102.86%之间;在多种储存条件下,处理前后的血浆样品稳定性好。本方法应用于1例2岁小儿格列本脲中毒检测,结果表明当血浆中格列本脲浓度为6.2,0.21,0.09 μg·mL^-1时,均呈现降低血糖作用。结论：该方法检测速度快、专属性高、重复性好,可用于磺酰脲类药物中毒检测。经临床实践证明,本方法提供的检测数据可作为磺酰脲中毒的重要临床指标,对处于不同治疗阶段的中毒患者,均具有重要的临床指导意义。     

UPLC-MS/MS法测定儿童血浆中头孢呋辛的浓度

目的：建立UPLC-MS/MS 儿童血浆头孢呋辛浓度的检测方法。方法：采用蛋白质沉淀方法,以奥美拉唑为内标,色谱柱为Phenomenex Luna C₁₈柱（2.0 mm×50 mm,3 μm）,流动相甲醇-乙酸铵水溶液,柱温30℃,流速0.6 mL·min^-1,离子化方式（-）ESI多反应监测模式（MRM）。结果：头孢呋辛在0.05~25.00 μg·mL^-1线性良好（r=0.998 7）,定量下限为0.05 μg·mL^-1。日内、日间精密度的RSD均低于15%。结论：建立的UPLC-MS/MS法测定儿童血浆中头孢呋辛浓度的方法验证灵敏、准确、稳定,可用于药动学评价研究。     

高效液相色谱-二极管阵列检测器同时测定清热祛浊胶囊中6种活性成分的含量

目的：建立高效液相色谱同时测定清热祛浊胶囊中绿原酸、栀子苷、芍药苷、盐酸小檗碱、连翘苷和丹皮酚含量的方法。方法：采用Agilent Eclipse XDB-C₁₈色谱柱,流动相为乙腈（A）和0.1%的磷酸水溶液（B）,梯度洗脱;流速：1.0 mL·min^-1;柱温：30℃;检测波长：绿原酸为327 nm,栀子苷、芍药苷和连翘苷为230 nm,盐酸小檗碱和丹皮酚为274 nm。结果：绿原酸、栀子苷、芍药苷、盐酸小檗碱、连翘苷和丹皮酚的线性范围分别为8.64~216 μg·mL^-1（r=0.999 8）,4.08~102 μg·mL^-1（r=0.999 8）,4.20~105 μg·mL^-1（r=0.999 9）,9.12~228 μg·mL^-1（r=0.999 8）,3.28~82.0 μg·mL^-1（r=0.999 9）和4.84~121 μg·mL^-1（r=0.999 8）,6种成分的平均加样回收率（n=6）分别为99.2%,99.1%,98.6%,98.6%,98.9%和99.3%,RSD分别为1.0%,1.1%,1.2%,1.0%,0.8%和0.9%。结论：本法结果准确,重现性好,回收率高,可用于清热祛浊胶囊的质量控制。     

牛至油注射亚微乳中3种成分的含量测定

目的：通过HPLC法测定牛至油注射亚微乳中3种成分（麝香草酚、香荆芥酚、对聚伞花素）的含量。方法：采用Kromasil 100-5 C₁₈ column为分析柱,流动相为乙腈-0.2%磷酸水溶液（54∶46）,检测波长274 nm,柱温30℃,流速1.0 mL·min^-1。结果：香荆芥酚在0.48~7.2 μg的范围内线性关系良好,线性方程为：Y=319.09X+0.425 1,r²=1;麝香草酚在1.04~15.6 μg的范围内线性关系良好,线性方程为：Y=690.09X+0.353 4,r²=1;对聚伞花素在1.88~28.2 μg的范围内线性关系良好,线性方程为：Y=115.15X-18.037,r²=0.999 9。测得牛至油注射亚微乳中香荆芥酚的含量为1.033 mg·mL^-1,麝香草酚的含量为4.561 mg·mL^-1,对-聚伞花素的含量为0.185 mg·mL^-1。结论：该方法快速、准确、重复性好、分离度高,可同时测定3种成分的含量,可用于牛至油注射亚微乳的质量控制。     

亚胺培南血药浓度测定方法改进及其在血浆中稳定性考察

目的:建立高效液相色谱法测定人血浆中亚胺培南浓度,并重点考察亚胺培南血浆样品的稳定性。方法:采用Venusil XBP C₁₈ (5μm,4.6mm×250 mm)色谱柱,以10 mmol·L^-1磷酸二氢钾-含四丁基溴化铵(0.3 mmol·L^-1)甲醇液(96:4,V:V)为流动相,调节pH至7.2,柱温为30℃,内标为5-羟基吲哚-3-醋酸,检测波长300 nm。稳定剂0.5mol·L^-1 3-吗啉丙磺酸缓冲液(pH6.8)-乙二醇-水,体积比2:1:1。结果:低、中、高3个浓度提取回收率分别为(89.6±1.7)%,(93.9±2.2)%,(91.4±0.4)%,批内、批间RSD均小于15%;血浆中亚胺培南在0.1~100 μg·ml^-1浓度范围内线性关系良好(r=0.995~0.996),定量下限为0.1μg·ml^-1;不加稳定剂时,含亚胺培南的血浆样品在室温、4℃、-30℃条件下分别可以稳定2,6,8 h,加入稳定剂后分别为6,12,48 h。结论:本试验建立的分析方法线性范围宽,操作简便,准确度高,可用于亚胺培南血药浓度的测定,适用于重症感染患者治疗药物监测。     

微乳液相色谱法测定大鼠血浆中罗布麻甲素的浓度及其药动学研究

目的：建立测定大鼠血浆中罗布麻甲素的微乳液相色谱方法,并将其用于大鼠体内药动学的研究。方法：用微乳液相色谱法分别测定给药后不同时间点大鼠的血药浓度,并对其药动学参数进行研究。色谱条件为：色谱柱为Zorbax SB-C₁₈（150 mm×4.6 mm,5 μm）柱;流速0.8 mL·min^-1;检测波长360 nm;柱温30℃。采用经过优化后的微乳体系为流动相,其组成为：2.0% Genapol X-080-2.8%正丁醇-1.8%乙酸乙酯-0.4%三乙胺-93.0%水溶液（pH调至5.0）。结果：大鼠静脉注射罗布麻甲素后,其药动学模型符合二室模型。分布和消除相半衰期分别为7.3 min和28.7 min。药时曲线下面积AUC（μg·min^-1·mL^-1）为804.37。表观分布容积V_d（μg·mL^-1）为0.325。平均驻留时间MRT（min）为25.8。大鼠血浆中罗布麻甲素在0.1~10 μg·mL^-1内线性均良好（r=0.998 6）,最低定量浓度（S/N=10）为0.1 μg·mL^-1,日内和日间RSD均小于4.9%,平均加样回收率在96.3%~98.8%之间,RSD均小于5.1%。结论：本法快速、简便、准确、重现性好,可用于罗布麻甲素血药浓度测定及药动学研究。     

HPLC-MS/MS法测定人血浆中地拉罗司

目的：建立高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）法测定人血浆中地拉罗司的浓度,并在方法开发中对样品和HPLC-MS/MS系统中存在的Fe³⁺对地拉罗司浓度测定的干扰进行了排除。方法：本方法在流动相和样品中加入适量的乙二胺四乙酸（EDTA）,竞争性抑制地拉罗司与Fe³⁺的络合,从而解决了地拉罗司检测过程中不稳定的难题。以米非司酮为内标,血浆样品经乙腈沉淀蛋白后进行HPLC-MS/MS分析。色谱条件：采用Hanbon Hedera ODS-2（2.1 mm×150 mm, 5 μm）色谱柱,流动相为甲醇-0.1%甲酸溶液（含0.04 mmol·L^-1 EDTA）梯度洗脱,流速0.5 mL·min^-1;质谱条件：电喷雾（ESI）正离子模式,多反应监测（MRM）方式检测,m/z 430.1→m/z 372.2（地拉罗司）、m/z 374.2→m/z 108.1（内标米非司酮）。结果：地拉罗司标准曲线线性范围为0.04~40 μg·mL^-1,线性关系良好;无内源性杂质干扰;地拉罗司3个浓度水平质控样品的批内和批间精密度RSD在2.9%~11.8%之间,准确度的偏差RE在-3.1%~4.0%之间;提取回收率较高;地拉罗司和内标在人血浆样品中无基质效应。结论：在流动相及样品中加入EDTA保证了地拉罗司在检测过程中的稳定性。该方法操作简单,具有良好的特异性、可重复性和可靠性,并且成功应用于10名中国健康受试者口服地拉罗司后的药动学研究。     

液-质联用法测定人体血浆中万古霉素的浓度

目的:运用液-质联用技术(LC-MS/MS),建立测定人体血浆中万古霉素浓度的方法,监测万古霉素血药浓度。方法:以替洛福韦为内标,乙腈沉淀蛋白后,经LC-MS/MS方法分析。采用色谱柱为安捷伦Poroshell 120 EC-C₁₈柱(4.6 mm×100 mm,2.7 μm),流动相为混合有机相(乙腈:甲醇-2:1)-0.1%甲酸水溶液(10:90);流速0.4 mL·min^-1;采用质谱电喷雾电离源(ESI),正离子模式,多重反应监测方式(MRM)检测;待测物质万古霉素用于定量的母子离子对:m/z 725.6→m/z 144.2,内标替洛福韦用于定量的母子离子对:m/z 288.0→m/z 176.2。结果:万古霉素在0.2~100 μg·mL^-1范围内线性关系良好,最低定量限为0.2 μg·mL^-1;日内RSD均在6%以下,日间RSD均在12%以下。提取回收率为58.01%~66.58%。结论:该分析方法快速、准确、灵敏度高、专属性强、重复性好,可用于医疗机构检测人体血浆中万古霉素的药物浓度。     

高效液相色谱法同时测定八味龙钻颗粒中橙皮苷、氯化两面针碱及补骨脂素的含量

目的：建立HPLC同时测定八味龙钻颗粒中橙皮苷、氯化两面针碱及补骨脂素含量的方法。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱Phenomenex Gemini C₁₈ （250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液（梯度洗脱）；流速为1 mL·min^-1；检测波长为286 nm和245 nm（0~30 min，286 nm，30~40 min：245 nm）。结果：橙皮苷、氯化两面针碱及补骨脂素分别在0.081 30~0.487 8，0.016 57~0.099 42，0.005 284~0.031 68 mg·mL^-1范围内其峰面积与进样量呈良好的线性关系（相关函数r分别为0.997 4，0.999 9，1.000）；平均加样回收率分别为98.1%、99.9%、100.1%，RSD分别为1.3%、2.7%、2.5%（n=6）。结论：该法简单快速、准确可靠，可用于同时测定该复方制剂中橙皮苷、氯化两面针碱及补骨脂素的含量。     

超高效液相色谱法监测重症脑损伤患者血浆中丙泊酚的血药浓度

目的:建立测定重症脑损伤患者血浆中丙泊酚浓度的超高效液相色谱-荧光检测方法。方法:血浆样品经乙腈沉淀蛋白后,取上清液进样分析,色谱条件为采用Thermo Acclaim C18色谱柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相:左泵-水(含1‰甲酸)-乙腈(V∶V)=40∶60,流速1.0mL·min-1,右泵:0～1min:水-乙腈(V∶V)=90∶10,流速:1mL·min-1;2～4min:水-乙腈(V∶V)=70∶30,流速:1mL·min-1,6～10min:水-乙腈(V∶V)=10∶90,流速:0.3mL·min-1;10.01～16min:水-乙腈(V∶V)=90∶10,流速:0.3mL·min-1;柱温40℃;检测波长276nm;发射波长:310nm;进样量:100μL,sensitivity:6;lamp mode:longlife。采用肝素采血管收集血液样品,血液样品分别于给药前0h,开始给药后1,3,5,10,15,30,60,70,80,90min,停药后1,3,5,10,15,30,60,90,120min从患者给药部位对侧上肢静脉采样1mL。结果:丙泊酚血药浓度在0.025～2μg·mL-l内线性关系良好,R2=0.999 7,回归方程为Y=2.113 5 X-0.016 7,最低检测限为0.01μg·mL-1。低、中、高(0.025,0.5,2μg·mL-1)3个浓度的日内RSD分别为5.7%、1.37%和2.85%,日间RSD分别为14.15%、11.25%和9.21%,平均方法回收率分别为103.46%、96.16%和99.5%。监测10例重症脑损伤患者丙泊酚血药浓度,稳态浓度范围为0.25～0.81μg·mL-1。结论:本方法操作简单快速、灵敏、准确度高,无介质效应影响,所需血浆样本量少,可作为患者丙泊酚治疗浓度的常规监测方法。通过监测重症脑损伤患者丙泊酚血药浓度发现,重症脑损伤患者单纯镇静时,给药速度为20mg·h-1均可满足临床需要。     

维药青香茅中芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷含量测定

目的：测定维药青香茅中芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷含量。方法：采用高效液相色谱法,使用SinoChrom C₁₈色谱柱（5 μm,250 mm×4.6 mm）,以甲醇-0.2%磷酸水溶液（41：59）为流动相,检测波长324 nm。结果：芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷在5.25~52.50 μg·mL^-1范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0.999 9）,方法平均回收率为：97.29%（RSD为1.23%）,平均含量为57.912 1 μg·g^-1。结论：本方法简便,准确,重复性好,可用测定维药青香茅中芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷含量。     

氯吡格雷活性代谢物在人体内的血药浓度测定

目的：采用液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）建立人血浆中氯吡格雷活性代谢产物浓度测定的方法。方法：血浆经冷冻干燥处理,以Accucore C₁₈为色谱柱;乙腈（含0.01%甲酸）-水（含0.01%甲酸）为流动相,流速0.4 mL·min^-1,柱温30 ℃,进样量2 μL;通过正离子模式多反应监测扫描分析,离子通道分别为氯吡格雷活性代谢产物衍生物（CAMD）m/z 504.2→155.1,内标氯雷他定m/z 382.8→336.9。结果：血浆中氯吡格雷活性代谢产物衍生物在0.5~500 ng·mL^-1范围内线性关系良好;最低检测限为0.5 ng·mL^-1;提取回收率为83.81%~97.65%;日内和日间精密度的RSD均小于9.86%。结论：本方法准确可靠,简便快速且灵敏度高,适用于人血浆中氯吡格雷活性代谢物的测定,可进一步用于研究氯吡格雷活性代谢产物的药代动力学特征。