C—erbB—2P185蛋白在多形性腺瘤中的表达及意义

应用免疫组织化学ＳＡＢＣ法对５２ 例良性多形性腺瘤（ＢＰＡ）、１３ 例恶性多形性腺瘤（ＭＰＡ）患者及６ 例正常涎腺（对照组）者涎腺组织中的Ｃ－ｅｒｂＢ－２Ｐ１８５ 蛋白进行检测,结果：Ｃ－ｅｒｂＢ－２Ｐ１８５ 蛋白阳性表达率在对照组为０,ＢＰＡ组为６９．２３％ ,ＭＰＡ组为９２．３１％ ;ＢＰＡ组、ＭＰＡ组与对照组比较有极显著差异（Ｐ＜ ０．００１）,ＢＰＡ组与ＭＰＡ组之间亦有显著差异（Ｐ＜ ０．０１）。提示Ｃ－ｅｒｂＢ－２Ｐ１８５ 蛋白在涎腺多形性腺瘤的发生、发展过程中起重要作用。     

结肠癌异位表达PS2蛋白的研究

ＰＳ2蛋白属于三叶草肽家族成员之一,又名ＰＳ2三叶草蛋白,其仅在正常胃黏膜上皮细胞和某些肿瘤组织中异位表达,在正常结肠上皮细胞不表达[1]。鉴于目前结肠癌的诊断尚无特异性较高的组织学指标,为此,我们研究了结肠癌和正常结肠黏膜组织中ＰＳ2蛋白和癌胚抗原(ＣＥＡ)的表达,以了解ＰＳ2蛋白在结肠癌组织中异位表达的意义及其临床诊断价值。一、资料和方法1研究对象:结肠癌和溃疡性结肠炎分别取自1997年6月至1998年6月和1995年1月至1998年6月经病理证实的标本。结肠癌29例,其中男14例,女15例,年龄35～81岁,平均年龄615岁。溃疡性结肠炎30例…     

Syndecan-1对结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

背景:Syndecan-1是表达于上皮细胞表面的一种硫酸乙酰肝素蛋白聚糖,在多种肿瘤细胞中的表达下降,与肿瘤的多种生物学行为密切相关,但其在细胞水平上对结直肠癌发展的作用目前尚无深入的研究。目的:评估Syndecan-1对人结肠癌细胞株增殖、迁移和侵袭能力的影响,并初步探讨可能的分子机制。方法:分别将Syndecan-1高表达质粒和Syndecan-1 siRNA转染人结肠癌细胞株SW620和SW480,分别以转染空载质粒或无关序列作为阴性对照。采用CCK-8法检测细胞增殖,Transwell细胞迁移实验和Matrigel细胞侵袭实验分别检测细胞迁移、侵袭能力,蛋白质印迹法检测上皮细胞间质转化主要分子标记物E-cadherin的蛋白表达。结果:与阴性对照组相比,转染Syndecan-1高表达质粒的SW620细胞生长速度、迁移细胞数和侵袭细胞数均明显降低,同时E-cadherin表达升高;转染Syndecan-1 siRNA的SW480细胞生长速度、迁移细胞数和侵袭细胞数均明显升高,同时E-cadherin表达降低。结论:Syndecan-1能抑制结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,其机制可能与上皮细胞间质转化有关。     

ROCK2与肿瘤侵袭转移的相关性

肿瘤的侵袭转移是患者死亡的主要因素，其机制仍不清楚。近年来研究发现，Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶（ROCK）异常表达在肿瘤发生、发展中扮演重要角色，尤其是ROCK2在膀胱癌、肝癌、乳腺癌、胰腺癌等恶性肿瘤中呈高表达，其通过多种机制参与肿瘤的恶性转型、浸润转移等进程。目前ROCK2已成为研究的热点之一，在心血管等方面报道较多，而与肿瘤关系报道较少。现对ROCK2与肿瘤的侵袭、转移综述如下。     

RhoGDI2蛋白的高表达与结直肠癌侵袭和转移的相关性分析

目的通过检测RhoGTP酶解离抑制因子2（RhoGTPase dissociation inhibitor 2,RhoGDI2）在结直肠癌和癌旁组织中的表达并结合临床病理特点进行分析,探讨RhoGDI2的蛋白表达水平与结直肠癌侵袭转移的关系及在肿瘤发生发展中的作用。 方法选取山东省医学科学院附属医院2012年07月至2014年07月采取手术切除的153例结直肠癌病例,采用免疫组织化学检测153例肿瘤组织标本和癌旁标本中RhoGDI2蛋白的表达水平。 结果RhoGDI2蛋白在结肠癌组织中呈阳性表达,且主要在胞浆中表达;但在癌旁正常组织中无阳性表达（57.5% vs 0.00%）。结直肠癌组织中RhoGDI2蛋白的表达在低分化组显著高于高中分化组（χ²=2.090,P<0.05）。RhoGDI2的阳性表达与结直肠肿瘤的大小呈正相关,肿瘤越大阳性表达率越高（χ²=4.293,P<0.05）,并随着肿瘤浸润深度阳性表达率增加（χ²=1.711,P<0.05）,其在有淋巴结转移者表达显著高于无淋巴结转移者（χ²=5.925,P<0.05）、有远处转移者显著高于无远处转移者（χ²=5.519,P<0.05）,并且与临床分期密切相关,分期较晚的显著高于分期较早的（χ²=5.683,P<0.05）。RhoGDI2在结直肠癌中的阳性表达与年龄（<60 years vs ≥60 years）（χ²=0.054,P>0.05）,性别（χ²=0.037,P>0.05）无相关性。 结论RhoGDI2在结直肠癌中高表达,并且与结直肠癌的局部侵袭和远处转移呈正相关。RhoGDI2可能在结直肠的发生发展和侵袭转移过程中起着重要的作用。     

活化的肝星状细胞通过CCL22/CCR4轴促进肝癌细胞侵袭能力

目的探讨肝星状细胞通过CCL22/CCR4轴促进肝癌细胞侵袭的作用和可能机制。方法 TGF-β1(10 ng/ml)处理肝星状细胞LX-2不同时间,Western印迹检测处理前后肝星状细胞的活化标志物desmin及α-SMA的表达变化以及肝星状细胞LX-2和不同肝癌细胞系CCL22、CCR4表达。Transwell实验检测星状细胞LX-2或CCL22基因沉默后的MHCC-LM3侵袭的影响,Westem印迹检测上皮标志E-cadherin和间质标志N-cadherin及Vimentin的表达变化。结果肝星状细胞LX-2能被TGF-β1(10 ng/ml)活化,其活化的标志物desmin(24h:2.038±0.341;36h:2.562±0.248,相对于0h:1.329±0.172,P=0.008及P0.001)和α-SMA(24h:2.741±0.439;36h:3.126±0.521,相对于0h:1.271±0.182,P0.001)在处理24、36h后显著升高,星状细胞的趋化因子CCL22也随之高表达(24h:1.523±0.263;36h:1.836±0.319,相对于0h:3.126±0.634,P0.001),3株人肝细胞癌细胞系均有CCR4的表达,其中MHCC-LM3细胞表达最强。肝星状细胞LX-2活化后与肝癌细胞MHCC-LM3共培养能诱导其上皮间质分化,活化24h和36h后上皮标志物Ecadherin表达明显下降(24h:1.273±0.207;36h:1.405±0.141,相对于0h:3.126±0.634,P0.001),间质化指标Ncadherin(24h:2.516±0.384;36h:2.392±0.416,相对于0h:1.058±0.021,P0.001)和Vimentin(24h:2.875±0.437;36h:2.924±0.353,相对于0h:1.452±0.121,P0.001)表达则升高,并促进其侵袭。通过RNA干扰技术靶向沉默肝星状细胞CCL22则不能增强肝癌细胞侵袭能力,也不能诱导肝癌细胞MHCC-LM3发生上皮间质分化。结论肝星状细胞通过趋化因子CCL22/CCR4轴促进肝癌细胞侵袭,其机制可能与诱导肝癌上皮间质化有关。     

ACE2的表达和结肠癌患者生存期的相关性分析

目的探讨ACE2在结肠癌患者中的表达并分析其与结肠癌患者生存期的相关性。 方法应用TCGA数据库对结直肠癌患者进行数据分析,通过生物信息学分析,阐明ACE2的表达和结肠癌患者生存期的相关性。 结果ACE2在结肠癌组织中呈高表达（t=0.034,P<0.05）,ACE2低表达的结肠癌患者与ACE2高表达的结肠癌患者相比,其生存期延长。 结论ACE2的表达和结肠癌患者生存期的相关。     

miR27a对结肠癌细胞增殖和侵袭能力的影响

目的探讨miR196a、miR146a、miR27a和miR200a在结肠癌患者中的表达及对结肠癌细胞功能的影响。方法用PCR检测miR196a、miR146a、miR27a和miR200a在结肠癌患者癌组织中的表达情况;用转染技术高表达和低表达miR27a后,检测结肠癌细胞的增殖能力和侵袭能力。结果结肠癌组miR27a的表达水平与正常组和大肠炎组相比显著增加;miR27a mimics转染组结肠癌细胞的增殖速度和侵袭能力显著增高,且miR27a inhibitors转染组结肠癌细胞的增殖速度和侵袭能力明显降低。结论结肠癌患者miR27a的表达水平显著增高,且miR27a能增强结肠癌细胞的增殖能力和侵袭能力。     

Cox2与结肠肿瘤的关系

Ｃｏｘ２基因的扩增及其过度表达与结肠肿瘤的发生发展和转移关系密切。近年研究表明，非巢体类抗炎药（ＮＳＡＩＤ）的应用可抑制结肠腺瘤和腺癌的发生和发展。ＮＳＡＩＤ的主要作用机制为抑制Ｃｏｘ２酶的活性。本主要综述Ｃｏｘ２与结肠肿瘤的关系。     

CO2气腹对结肠癌细胞表面粘附分子表达影响的研究

目的 探讨不同压强持续性CO2气腹对结肠癌细胞表面粘附分子表达的影响.方法 建立体外气腹模型,选用人结肠癌细胞株SW1116,分别在不同压强医用CO2气体下暴露1 h,使用流式细胞技术和实时荧光定量PCR检测粘附分子E-cadherin,ICAM-1,CD44,CD44v6,E-selectin的表达.结果 荧光定量PCR结果显示SW1116经6 mm Hg压强的持续CO2气体处理后,ICAM-1和CD44v6出现表达增高;9 mm Hg及12 mm Hg CO2气体处理后,E-cadherin,CD44和CD44v6表达增高;15 mm Hg CO2气体处理后CD44v6表达增高,与处理前表达水平的差异均有统计学意义（P＜0.05）,上述粘附分子的表达在处理后72 h内均会降至处理前水平（P＞O.05）,或低于处理前水平（P＜0.05）.E-cadherin、CD44v6和ICAM-1随着压强增高,其表达量逐渐降低.结论 不同压强CO2气腹能对肿瘤细胞表面的粘附分子表达产生一过性双向影响,随CO2气腹压强的增高,可抑制粘附分子的表达.     

姜黄素对结肠癌细胞SW480 FasL基因表达和侵袭能力的影响

目的研究姜黄素对人结肠癌SW480细胞FasL mRNA表达及对其侵袭能力的影响,为中药抗肿瘤提供实验依据。方法根据MTT法得到姜黄素对SW480细胞的半数有效抑制浓度（IC50）,确定药物作用浓度。SW480细胞分别经姜黄素不同浓度（0．5 IC50、IC50）作用后,应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测姜黄素作用前后人结肠癌SW480细胞FasL mRNA的变化;应用Transwell细胞侵袭试验检测姜黄素对SW480细胞侵袭能力的影响。结果姜黄素处理后SW480细胞FasL mRNA表达水平均明显高于对照组（P〈0．01）;而且FasL mRNA表达水平随姜黄素作用浓度增加显著上调,姜黄素不同浓度组比较均有显著性差异（P〈0．01）;随姜黄素作用浓度升高,SW480细胞侵袭能力明显增强,不同浓度组比较均有显著性差异（P〈0．01）。结论姜黄素在一定时间内均可上调人结肠癌SW480细胞FasL mRNA的表达,而且这种上调作用在一定范围内呈剂量依赖性,可使结肠癌细胞的侵袭能力增强。     

P16抑制基因在腮腺多形性腺瘤预后判断中的作用

目的　探讨 P1 6 基因在腮腺多形性腺瘤发生、发展及在判断预后中的作用。方法　采用 SABC法行免疫组织化学染色 ,利用计算机图像处理系统 ,对 P1 6在腮腺多形性腺瘤中的蛋白表达进行定量检测 ,结合肿瘤细胞核形态学参数等相关数据 ,进行统计学分析处理。结果　多形性腺瘤的发生与 P1 6抑制基因密切相关 ,P1 6蛋白表达与肿瘤细胞分化程度紧密相关 ,与肿瘤生长时间呈负相关 ,P1 6蛋白的低表达、缺失可导致肿瘤的恶性发展 ,使其生物学行为恶化。结论　 P1 6 抑制基因与多形性腺瘤的生物学行为关系密切 ,P1 6 蛋白可作为肿瘤分级和区别肿瘤增殖潜能的有效指标。 P1 6 蛋白缺失及低表达者应视为预后较差 ,应加强随访观察     

人结肠癌细胞胃泌素-黏着斑激酶通路的研究

目的研究胃泌素对人结肠癌细胞信号分子黏着斑激酶(FAK)酪氨酸磷酸化和蛋白质表达的影响。方法使用胆囊收缩素2受体(CCK2R)的真核表达载体pCR3.1/CCK2R,转染人结肠癌细胞株Colo320,上调胃泌素作用;使用胃泌素拮抗剂下调胃泌素作用。使用胃泌素按浓度和时间梯度刺激细胞,以免疫沉淀和蛋白质印迹法检测FAK酪氨酸磷酸化和蛋白质表达情况。结果胃泌素能够引起FAK酪氨酸磷酸化,具有时间和剂量依赖性;CCK2R表达上调可以增强此作用;胃泌素拮抗剂具有相反作用。结论FAK是胃泌素发挥效应的下游信号分子,以酪氨酸磷酸化的形式发挥作用。胃泌素CCKRFAK信号通路在胃泌素引起的肿瘤细胞增殖过程中发挥重要作用。     

结肠腺瘤和结肠癌基因表达谱分析

目的 研究结肠腺瘤、结肠癌基因表达谱,筛查结肠癌相关基因.方法 用BRB-Array Tools对公共基因芯片数据库GEO中的结肠腺瘤、结肠癌基因芯片表达数据进行统计学分析,找出在结肠腺瘤和结肠癌发生发展中均发生变化的基因及二者的特异性基因,进一步分析其功能.结果 样本聚类表明各类组织分类正确,比较后得到在腺瘤和腺癌中共同表达的104条基因,其中48条共同上调,56条共同下调;差异基因的功能涉及物质代谢、内环境稳态、细胞间通讯、细胞黏附、细胞增殖等多种肿瘤发生发展的重要生物学过程.结论 生物信息学方法发现的结肠腺瘤、结肠癌基因表达谱可为结肠癌的发病机制及治疗靶位的研究开辟新思路.     

黄连素抑制结肠癌细胞环氧合酶-2的作用

目的 探讨黄连素对结肠癌细胞系HT—29的作用及其相关机制,为阐明黄连素作为一种新的结肠癌化学治疗药物进行理论上的准备并提供相关实验结果。方法 黄连素0．1、0．3、3．0、30．0μmol／L加入到HT—29结肠癌细胞系培养液中,每天测量各有关值。同时以NS—398为环氧合酶(COX-2)活性抑制剂,对比观察黄连素对COX—2活性的影响。采用氮蓝四唑盐实验法检测细胞的生长和增殖,逆转录—PCR法检测COX—2 mRNA,免疫细胞化学法检测COX—2蛋白表达,ELISA法检测前列腺素(PG)E2的含量。结果 黄连素在浓度大于0．3μmol／L时则有明显的量效关系。黄连素在浓度大于0．3μmol／L时对COX—2 mRNA水平和蛋白的表达有明显的抑制作用。黄连素对PGE2的生成有显著抑制作用。结论 黄连素抑制COX—2在mRNA水平和蛋白质水平的表达,同时也抑制COX—2活性,进而抑制PGE2的生成,这可能为黄连素抑制HT—29细胞生长和增殖的机制之一。     

结肠癌细胞微小核糖核酸-200c表达和上皮间质转化与吉非替尼敏感性关系

目的 探讨微小核糖核酸(miRNA)-200c及上皮间质转化(EMT)与结肠癌细胞对吉非替尼治疗敏感性的关系.方法 细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测吉非替尼对4种人结肠癌细胞系HT29、SW620、HCT116、SW480的生长抑制作用;以实时定量PCR法检测4种结肠癌细胞中miRNA-200c,上皮标志物(E-钙黏蛋白),间质标志物[波形蛋白、具锌指E盒结构的同源异性盒1(ZEB 1)]mRNA水平表达,Western印迹检测E-钙黏蛋白、波形蛋白、ZEB 1蛋白水平表达.外源性上调或下调miRNA-200c表达,观察EMT相关基因表达变化及细胞对吉非替尼敏感性的变化.结果 HT29细胞对吉非替尼最为敏感[半数抑制浓度(IC50)=(7.70±0.31) μmol/I],其miRNA-200c与E-钙黏蛋白表达量均为最高,波形蛋白及ZEB 1表达水平极低;HCT116及SW480细胞系对吉非替尼为中度敏感[IC50=(11.88±0.97),(16.63士0.45)μmol/L],其miRNA-200c、E-钙黏蛋白呈中等程度表达;SW620细胞系对吉非替尼最不敏感[IC50=(26.43±3.68) μmol/L],miRNA-200c与E-钙黏蛋白表达量最低,波形蛋白及ZEB 1表达量均显著高于其他3种细胞系.外源性上调miRNA-200c表达后,SW620细胞中E-钙黏蛋白表达上调,ZEB 1及波形蛋白表达下调,同时细胞对吉非替尼的敏感性亦显著提高;相反,外源性下调miRNA-200c表达后,HT29细胞中E-钙黏蛋白表达下调,ZEB 1及波形蛋白表达上调,同时细胞对吉非替尼的敏感性显著降低.结论 miRNA-200c可能通过调控EMT,上调E-钙黏蛋白表达,进而影响结肠癌细胞对吉非替尼的敏感性.     

微核糖核酸506在人结肠癌细胞中的靶基因预测和鉴定

目的 预测并验证微核糖核酸506(miR-506)的真实靶基因.方法 通过多个生物信息学软件对miR-506可能调控的靶基因进行预测,结合其生物学功能和前期基因芯片结果,确定候选靶基因.根据miR-506结合候选靶基因的3'UTR位点,构建相应的报告基因载体及突变体.将所构建的报告基因载体或突变体、β半乳糖苷酶对照报告酶载体和miR-506前体共转染至SW1116细胞中,24 h后检测荧光报告酶变化.结果 过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)α和维甲酸受体(RXR)α皆为has-miR-506的可能靶基因,miR-506作用于PPARα基因3'UTR区可能存在3个位点,RXRa基因3'UTR区可能存在2个位点.针对于PPARα基因的三组报告基因载体中,位点7930-7936组变化最为明显[(2.68±0.55)倍],位点3547-3553组和位点8335-8341组的荧光报告酶表达变化为其突变体的(1.43±0.22)倍和(1.34±0.20)倍.针对于RXRa基因的两组报告基因载体的荧光报告酶变化则并不显著.结论 PPARα为miR-506的真实靶基因,而RXRα非miR-506的靶基因.     

过氧化物体增生激活受体-γ在结肠腺瘤及腺癌中的表达

目的 观察过氧化物体增生激活受体-γ(PPAR-γ)在结肠腺瘤及腺癌中的表达，初步探讨PPAR-γ在结肠肿瘤发病中的作用。方法 采用免疫组化方法分别测定结肠腺瘤及腺癌中PPAR-γ的表达。结果 PPAR-γ主要表达在细胞核中，腺瘤及腺癌患者PPAR-γ的表达均上升，并与分化趋势相反，分化越高，表达越低。结论 PPAR-γ可能与肿瘤的发生、发展有一定的关系。     

Polymorphism of thymidylate synthase gene associated with its protein expression in human colon cancer

AIM： To correlate the polymorphisms in the 5＇-untranslated region with thymidylate synthase （TS） protein expression in Han Chinese colonic neoplasms. METHODS： Adenocarcinoma samples were from 68 patients who received no treatment before surgery. Tandem repeat length of TS gene was determined by PCR amplification of genomic DNA. Intratumoral TS protein expression was studied immunohistochemically in corresponding sections from paraffin-embedded primary loci. Immunoreactivity was semiquantitatively evaluated by immunoreactivity score （IRS）. RESULTS： Double-（2R） and triple-repeated （3R） sequences of the TS gene were found in the cancer tissues. Three genotypes of TS were found： 2R/2R （n = 6）, 2R/3R （n = 22） and 3R/3R （n = 40）. Patients who were homozygous for triple-repeated （3R/3R） sequences showed significantly higher IRS of TS than patients who were homozygous for double-repeated （2R/2R） sequences or heterozygous patients （2R/3R）： 5.73 ±3.25 vs 2.17 ± 1.47 or 3.77 ±2.64, P = 0.008 or P = 0.015. But no statistical significance of IRS in cancer tissues was observed between 2R/3R genotype and 2R/2R genotype. CONCLUSION： There is a relationship between TS genotype and TS protein expression in clinical specimens. The data might offer an advantage for selection of Chinese cancer patients to receive fluoropyrimidines treatment.