EPO多克隆抗体抑制EPO促CFU-E形成研究

目的:探讨EPO多克隆抗体是否具有对抗EPO促红系形成的功能。方法:对大鼠骨髓进行定向体外红系集落形成单位(CFU-E)培养,观察CFU-E数量,判定EPO多克隆抗体对红系增殖活性的影响。结果:与常规培养组比较,EPO多克隆抗体培养组CFU-E明显减少,P<0.01,差别有非常显著性。结论:EPO抗体可抑制EPO促红系形成,其可作为治疗高原红细胞增多症病人的药物进一步研究。     

EPO单克隆抗体抑制CFU-E研究

目的 探讨EPO单克隆抗体是否具有抑制红系集落形成单位（CFU-E）形成的功能.方法 对大鼠骨髓进行定向体外CFU-E培养,按以下条件进行分组培养：空白对照组（不加EPO）、常规组（加EPO,不加EPO单克隆抗体）、EPO单克隆抗体干预组（EPO＋EPO单克隆抗体）.培养168 h后,观察各组CFU-E数量.结果 空白对照组、常规组、EPO单克隆抗体干预组的CFU-E集数落分别为0.0±0.0、151.8±23.3和10.7±3.9.EPO单克隆抗体干预组与常规组比较,CFU-E集落数存在非常显著性差异（P＜0.01）.结论 该EPO单克隆抗体可明显抑制CFU-E形成,即抑制红细胞系的增殖,是治疗高原红细胞增多症的可能药物.     

干扰素γ联合红细胞生成素对多发性骨髓红系祖细胞的体外作用研究

为研究干扰素γ(IFN-γ)联合红细胞生成素(EPO)对多发性骨髓瘤(MM)红系祖细胞(CFU-E)的作用，采用细胞体外培养对10例MM患者进行了CFU-E培养。结果表明，单一IFN-γ对MM患者CFU-E即有明显促增殖作用；与EPO联合时，其促增殖作用更加明显，使MM患者CFU-E接近正常对照。提示IFN-γ联合EPO对MM红系祖细胞具有显著促增殖作用，可能提供可靠的实验依据。     

Epo多克隆抗体对抗Epo活性的研究

目的:探讨促红细胞生成素(Epo)多克隆抗体是否具有拮抗Epo所致的高原红细胞增多症患者骨髓红系增殖活性的功能。方法:抽取高原红细胞增多症病人骨髓,分离单个核细胞,进行红系定向体外培养,观察加入Epo及Epo多克隆抗体对红系集落形成单位(CFU-E)的影响。结果:Epo多克隆抗体体外能抑制高原红细胞增多症病人骨髓红系增殖。结论:Epo抗体可以显著拮抗Epo促红细胞增生作用。     

用人尿中提取的红细胞生成素进行人骨髓红系祖细胞体外培养

本文介绍用从再生障碍性贫血病人尿中提取的EPO制剂进行人骨髓红系祖细胞体外培养的结果.在EPO为0.1～1u/ml的剂量范围内,CFU-E产率与EPO剂量呈良好线性关系,与同时用日本EPO制剂培养所得的结果相同.在BFU-E培养中,加入EPO 1u/ml,集落产率也与日本制剂相似.用普通显微镜和电子显微镜对集落和细胞进行的观察说明,集落中大部分是幼稚红细胞.     

高原红细胞增多症骨髓红系祖细胞体外培养的研究

目的 了解高原红细胞增多症(HAPC)骨髓红系组细胞增殖状况。方法 HAPC患者25例,正常对照22例身体健康者,应用造血祖细胞体外培养技术了解骨髓红系祖细胞(BFU-E,CFU-E)增殖能力,BFU-E及CFU-E对红细胞生成素(Epo)的反应能力。结果 HAPC患者骨髓BFU-E,CFU-E集落数分别高于正常对照。Epo对HAPC患者骨髓BFU-E,CFU-E刺激明显,与正常对照组比较BFU-E集落数差异显著(P<0.05);CFU-E集落数差异显著(P<0.01)。结论 HAPC骨髓红系祖细胞增殖能力增强,对Epo敏感性增高。     

红细胞生成素(EPO)对脑源性神经干细胞增殖与分化的调控作用

目的探讨红细胞生成素(EPO)对大鼠海马神经干细胞(NSCs)体外增殖和分化的影响。方法利用无血清培养、单细胞克隆技术,体外培养SD大鼠海马组织源NSCs,在NSCs增殖和分化过程中添加不同剂量EPO,以免疫细胞化学方法对NSCs及其分化后的细胞进行鉴定。结果与对照组相比,不同接种密度条件下的NSCs加入EPO后,增殖期表达Nestin的细胞增加2～4倍,分化期表达Nestin的细胞数明显减少;表达Tuj1和GFAP的细胞出现早,且Tuj1阳性细胞较对照组明显增加(P<0.05),加入antiEPO后Tuj1阳性细胞较对照组明显减少(P<0.01);相同细胞接种密度下,添加不同剂量EPO后Tuj1阳性细胞数呈剂量依赖性增加。结论EPO可促进大鼠海马源NSCs的增殖,并使其呈剂量依赖性的向神经元分化。     

高原红细胞增多症骨髓红系祖细胞体外培养的研究

目的了解高原红细胞增多症(HAPC)骨髓红系组细胞增殖状况。方法 HAPC患者25例，正常对照22例身体健康者，应用造血祖细胞体外培养技术了解骨髓红系祖细胞(BFU，CFu-E)增殖能力，BFU-E及CFU-E对红细胞生成素(Ep0)的反应能力。结果HAPc惠老骨髓BFU-E，CFUE集落数分别高于正常对照。Ep0对HAPc患者骨髓BFUE，CFu-E刺激明显，与正常对照组比较BFu-E集落数差异显著(P＜0．05)；CFU-E集落数差异显著(P＜0.01)；结论HAPc骨髓红系祖细胞增殖能力增强，对Epo敏感性增高。     

人类造血干细胞研究进展

在生长发育过程中,多能造血干细胞首先自我增殖,然后分化成为各系造血祖细胞如中性粒-巨噬细胞系祖细胞(CFU-GM)、红系造血祖细胞(CFU-E)、巨核系造血祖细胞(CFU-Meg)以及嗜酸粒系造血祖细胞(CFU-Eo)等,最后由各系造血祖细胞进一步分化为成熟的外周血细胞,从而维持外周血细胞数量的稳定,保证了血液系统正常生理功能的完成。     

人白介素9在大肠杆菌中的高表达

1989年杨育中教授成功地克隆与表达了人成熟白介素9(IL-9),各国学者对其生物学活性进行了深入研究,发现人IL-9与造血调控密切相关。富集人骨髓及外周血中细胞膜表面标志CD34~+DR~+/CD34~+DR~+D33的红系造血祖细胞或早期红系造血细胞,观察IL-9单独或协同促红细胞生成素(EPO)均可明显增加红系爆式集落(BFU-E)及红系集落形成(CFU-E),且与多种造血因子有较好的协同作用。最近还发现IL-9可提高T细胞系存活率,IL-9与其相应受体结合,传递生物信息,进一步拓宽了细胞因子的生物学活性范围。运用基因工程手段获得大量IL-9,无疑对基础医学研究及潜在临床应用具有较重要意义。通过PCR扩增获得IL-9基因片段,然后优化转译起始序列,选取大肠杆菌(E.coli)偏性碱基终止密码子TAA等条件,构建了人IL-9重组表达质粒pBV-HIL-9,重组人IL-9约占菌体总蛋白的20%,实现了人IL-9在大肠杆菌中高表达。     

脐带血清与细胞因子在造血细胞培养中的效应比较

目的：比较人脐带血清（CBS）与细胞因子在骨髓血细胞培养中的效应。方法：在体外人骨骨CFU－GM、CFU－E、BFU－E、CFU－GEMM、CAFC、LTC－IC培养体系中,加入CBS或／和细胞因子,观察所形成的集落。结果：与细胞因子比,CBS中含有较高的GM－CSF、EPO、SCF、IL－3、IL－6等活性,能直接刺激骨髓造血细胞形成。结论：CBS内的造血刺激活性能刺激CFU－GM、CFU－E、BFU－E、CFU－GEMM的生长,使CAFC、LTC－IC、得到明显扩增,具有一定应用前景。     

Effects of peritoneal lavage fluid from radiation or/and burn injured rats on the growth of hematopoietic progenitor cells

PURPOSE: To evaluate the effects of peritoneal lavage fluids from radiation injury, burn injury and combined radiation-burn injury on the growth of hematopoietic progenitor cells (HPC). MATERIALS AND METHODS: Rats were divided into four groups: A radiation group (RG), a burn group (BG), a combined radiation-burn group (CRBG) and normal control group (NG). RG and CRBG rats were irradiated with 12 Gy, and burns of 30% total body surface area were generated in group BG and group CRBG. Peritoneal lavage fluids were collected and tested for their effects on the growth of erythrocyte progenitor cells or granulocyte-macrophage progenitor cells of BALB/c mice in vitro. RESULTS: The numbers of colony forming units-erythroid (CFU-E), burst forming units-erythroid (BFU-E) and colony-forming units-granulocyte-macrophage (CFU-GM) formed after treatment with lavage fluids from BG or CRBG were significantly higher than those from NG. However, fewer CFU-E, BFU-E or CFU-GM colonies were found after treatment with lavage fluid from the RG. In lavage fluid from BG and CRBG, the concentration of interleukin-6 (IL-6), interleukin-8 (IL-8) and tumor necrosis factor alpha (TNFalpha) was increased in comparison to NG and RG. Treatment with these cytokines had similar promoting effects on the growth of hematopoietic colonies and neutralizing antibodies inhibited these effects significantly. CONCLUSIONS: Burns increase the responsiveness of the system and help the proliferation of hematipoietic progenitor cells, while radiation decreases all these responses relative to both the controls and the burn plus radiation group.     

急性低压缺氧和间断缺氧习服对血浆与肝肾组织内红细胞生成素的影响

目的　探讨急性低压缺氧和间断缺氧习服对大鼠血液内红细胞数量、红细胞生成素(EPO)浓度以及肝、肾组织内EPO基因表达的影响。　方法　 2 4只Wistar大鼠分为常压空气组 (对照组 )、急性低压缺氧组和间断缺氧习服组。急性低压缺氧组直接在低压舱中模拟海拔 80 0 0m缺氧12h ,间断缺氧习服组模拟海拔 30 0 0m缺氧 2周后 ,再模拟海拔 5 0 0 0m缺氧 2周 ,每天 4h后 ,再在模拟 80 0 0m缺氧 12h。以红细胞计数法检测血液内红细胞数量 ;用MTT法检测血浆内EPO浓度 ,用逆转录 多聚酶链反应 (RT PCR)方法检测肝、肾组织内EPO基因表达。　结果　与对照组相比 ,急性低压缺氧组大鼠血浆内EPO浓度显著升高 (P <0 0 5 ) ,肝、肾组织内该基因表达显著增强 ;间断缺氧习服后的大鼠再经缺氧处理 ,血液内红细胞数量较对照组显著升高 (P <0 0 5 ) ,而血浆内EPO浓度和肝、肾组织中EPO基因的mRNA含量明显低于急性低压缺氧组 (P <0 0 5 )。　结论　急性低压缺氧导致EPO显著升高可能是血液内红细胞数量增加的机制 ;间断缺氧习服大鼠耐缺氧能力增强 ,抑制急性低压缺氧诱导的EPO含量和基因表达升高。     

Effects of peritoneal lavage fluid from radiation or/and burn injured rats on the growth of hematopoietic progenitor cells

Purpose:?To evaluate the effects of peritoneal lavage fluids from radiation injury, burn injury and combined radiation-burn injury on the growth of hematopoietic progenitor cells (HPC).

Materials and methods:?Rats were divided into four groups: A radiation group (RG), a burn group (BG), a combined radiation-burn group (CRBG) and normal control group (NG). RG and CRBG rats were irradiated with 12 Gy, and burns of 30% total body surface area were generated in group BG and group CRBG. Peritoneal lavage fluids were collected and tested for their effects on the growth of erythrocyte progenitor cells or granulocyte-macrophage progenitor cells of BALB/c mice in vitro.

Results:?The numbers of colony forming units-erythroid (CFU-E), burst forming units-erythroid (BFU-E) and colony-forming units-granulocyte-macrophage (CFU-GM) formed after treatment with lavage fluids from BG or CRBG were significantly higher than those from NG. However, fewer CFU-E, BFU-E or CFU-GM colonies were found after treatment with lavage fluid from the RG. In lavage fluid from BG and CRBG, the concentration of interleukin-6 (IL-6), interleukin-8 (IL-8) and tumor necrosis factor α (TNFα) was increased in comparison to NG and RG. Treatment with these cytokines had similar promoting effects on the growth of hematopoietic colonies and neutralizing antibodies inhibited these effects significantly.

Conclusions:?Burns increase the responsiveness of the system and help the proliferation of hematipoietic progenitor cells, while radiation decreases all these responses relative to both the controls and the burn plus radiation group.     

真皮多能干细胞促进大鼠急性放射损伤造血恢复的研究

目的 观察真皮多能干细胞移植对大鼠急性放射损伤后造血恢复的作用。方法 分离新生大鼠真皮多能干细胞体外培养至第10代用于研究，观察干细胞层体外对正常大鼠骨髓粒-巨噬系祖细胞和红系祖细胞集落生长的影响；进一步将真皮多能干细胞经尾静脉输入5Gyγ射线全身照射的大鼠体内，检测移植后骨髓有核细胞、粒-巨噬系祖细胞集落CFU—GM、红系祖细胞集落CFU—E和外周血白细胞数量、血红蛋白含量等指标的恢复情况，观察4周后动物的存活率。结果 真皮多能干细胞层体外可促进正常大鼠CFU—GM和CFU—E集落的生长；全身输入干细胞促进了5Gyγ射线全身照射动物的外周血白细胞和骨髓有核细胞、CFU-GM和CFU—E集落数的恢复。实验组动物4周后的存活率也明显高于对照组。结论 真皮多能干细胞具有一定支持造血的功能，可促进急性放射损伤大鼠的造血恢复，为造血损伤相关疾病的干细胞治疗提供新的细胞来源途径。     

促红细胞生成素对肾缺血再灌注损伤的保护作用

目的：探讨促红细胞生成素（Erythropoietin，Epo）对肾缺血再灌注损伤的保护作用。方法：观察Epo对肾缺血再灌注损伤大鼠血丙二醛（MDA）、肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）和肾组织匀浆超氧化物歧化酶（SoD）、白介素-6（IL-6）变化。结果：Epo治疗组血浆MDA、Cr、BUN水平较缺血再灌注组显著下降（P〈0．05）；肾组织匀浆SOD显著升高、IL-6显著降低（P〈0．05）。结论：Epo可提高SOD，降低IL-6对肾缺血再灌注损伤具有保护作用.     

长期递增负荷跑台运动和营养补充对大鼠肝脏组织形态和EPO水平的影响

目的:观察长期递增负荷跑台运动和营养补充对大鼠肝脏组织形态、EPO水平的影响,为探讨运动性贫血发生的机理和防治方法提供依据.方法:雄性Wistar大鼠30只,随机均分为3组:对照组、运动组、运动 营养补充组.运动方式为11周递增负荷跑台训练,营养补剂为铁复合剂.应用组织学光镜、酶联免疫吸附法(ELISA)观察3组大鼠肝脏组织形态、EPO水平.结果:运动组大鼠肝脏组织肝细胞结构模糊、多数肝细胞表现出浑浊肿胀或一定程度的水样变性,而运动 营养组肝脏形态基本正常.运动 营养组肝脏组织匀浆液EPO活性水平分别高于对照组、运动组.