VIPmRNA在鸡形觉剥夺性近视眼球后壁组织中的表达

目的:探讨雏鸡高度近视眼眼球后壁组织血管活性肠肽(vasoactiveintestinalpeptide,VIP)mRNA的动态表达及意义。方法:选择出生1d来亨雏鸡共30只,15只右眼遮盖作为实验组,分别持续遮盖1,2和4wk;另15只双眼均未遮盖作为正常对照组。两组均采用检影验光检测屈光度;眼科A超测定活体眼轴长度;对两组3个时间段眼球后壁行RT-PCR检测VIPmRNA的动态表达。结果:实验组由实验前远视眼快速演变为高度近视眼,并随遮盖时间延长,近视度数加深,眼轴延长;两组眼球后壁均有VIPmRNA阳性表达;随出生时间延长两组VIPmRNA表达均逐渐增强。与对照组相比,实验组VIPmRNA表达明显上调(P<0.01)。结论:形觉剥夺可导致高度近视眼;高度近视眼较正常眼VIPmRNA表达明显上调。VIP可能参与了近视眼形成与发展的调控。     

鸡形觉剥夺性近视眼视网膜电图改变

目的：研究鸡形沉剥夺眼视网膜电图改变。方法：测定２９只鸡雏于不同遮盖及去遮盖时期双眼视网膜电图的变化。结果：形沉剥夺造成实验眼ＯＰｓ波幅较对照眼明显降低（Ｐ〈０．０５）,去除遮盖,实验眼ＯＰｓ波幅恢复到与对照眼无明显差异。实验眼与对照眼ａ、ｂ滤幅值差异无显著性;各波潜伏期差异无显著性。结论：伴随形沉剥夺性近视的形成,剥夺眼视网膜内层功能下降。     

NGF在鸡巩膜中的表达及其与形觉剥夺性近视眼形成的关系

目的探讨神经生长因子(NGF)在鸡形觉剥夺性近视形成中巩膜中的表达和变化情况。方法鸡雏30只,随机分为3组,每组10只,于出生后第2 d将右眼以半透明眼罩遮盖作为遮盖眼,左眼开放作为对照眼。分别遮盖3、7、14d。运用免疫组织化学和原位杂交技术探测NGF蛋白及其mRNA在鸡巩膜软骨细胞中的表达。结果NGF蛋白及其mRNA均表达于巩膜的软骨细胞中尤其在双核细胞中;两者在各时间段遮盖眼巩膜中阳性细胞数均明显高于对照组(P<0.05);免疫组织化学(FDG=20.556P<0.01)和原位杂交(FDG=25.520P<0.01)在对照组(或遮盖组)各组间阳性细胞的表达数目随时间变化明显下降。结论NGF对鸡巩膜软骨层的发育和形觉剥夺性近视的形成密切相关。     

形觉剥夺性近视眼中血管活性肠肽的动态表达

目的:探讨高度近视眼视网膜-脉络膜-巩膜血管活性肠肽(vasoactiveintestinalpeptide,VIP)分子的动态表达及意义。方法:选择出生1d龄黄鸡共42只,其中21只小鸡右眼遮盖作为实验组,分别持续遮盖1,2,4wk,每周7只小鸡。另21只小鸡双眼均未遮盖作为对照组。两组均采用检影验光检测屈光度;眼科A超测定新鲜离体眼轴长度;对两组3个时间段后部眼球壁组织行SP法免疫组织化学染色检测VIP的动态表达。结果:实验组由实验前远视眼快速演变为高度近视眼,并随遮盖时间延长,近视度数加深,眼轴延长。两组视网膜、脉络膜均有VIP表达:广泛表达于视网膜内核层、内网状层和脉络膜;在神经节细胞层和神经纤维层也有弱表达;强阳性表达位于视网膜光感受器外节。随出生时间延长两组VIP表达均上调。与对照组相比,实验组VIP表达明显上调(P<0.01)。结论:形觉剥夺可导致高度近视眼;VIP表达主要位于视网膜光感受器外节、内核层、内网状层和脉络膜,神经节细胞层和神经纤维层也有弱表达;高度近视眼较正常眼VIP表达明显上调。     

鸡形觉剥夺性近视眼后极部巩膜IGF-1R/IGF-2RmRNA的表达

目的：观察鸡形觉剥夺性近视眼后极部巩膜IGF-1R/IGF-2RmRNA表达水平的变化,探讨IGF-1R/IGF-2R在实验性近视眼发生机制中的信号转导作用.方法：孵化1d的白色来亨鸡36只,右眼为遮盖眼,左眼为自身对照眼;测量实验前、单眼遮盖1,2,3wk时遮盖眼和对照眼的屈光度和眼轴长度,并检测不同遮盖时间鸡眼后极部巩膜IGF-1R/IGF-2RmRNA的表达水平.结果：鸡眼后极部巩膜可检测到IGF-1R/IGF-2RmRNA的表达,随着眼球的生长发育其表达水平明显升高;随着遮盖时间的延长,IGF-1R/IGF-2RmRNA在遮盖眼后极部巩膜的表达水平显著升高;遮盖眼后极部巩膜IGF-1RmRNA的表达水平自遮盖1wk起明显高于对照眼;IGF-2RmRNA表达水平则在对照眼与遮盖眼无显著差异.结论：形觉剥夺可能通过上调鸡眼后极部巩膜IGF-1RmRNA表达水平,IGF-1R通过结合IGF并启动下游信息转导途径,从而调控巩膜细胞的增殖和分化,导致近视的发生.     

生长因子在形觉剥夺性近视形成中的作用

通过对形觉剥夺性近视(form-deprived myopia,FDM)动物模型的大量研究证实,FDM的形成过程中视网膜表达的生长因子的量发生变化,从而通过受体机制作用于巩膜,引起巩膜的变化,导致近视形成。多种生长因子与此过程的关系密切,但它们在FDM中发挥作用的具体机制仍不清楚。本研究对生长因子与近视形成和发展的关系做一综述。     

视黄酸在形觉剥夺性近视眼巩膜中作用的研究

剥夺新生动物视网膜正常成像可导致轴性近视的发生,这种近视称为形觉剥夺性近视(FDM).高度近视形成过程中的眼轴过度延长及巩膜变薄,可能是受局部视网膜信息调控的巩膜细胞外基质(ECM)主动重塑的结果.巩膜主动重塑在眼球生长发育及正视化形成中起重要作用.视黄酸(RA)及其受体在FDM形成中对巩膜基质、软骨层和成纤维细胞层及基质降解相关蛋白酶的改变具有重要调节作用.它可能是调节FDM眼球伸长的信号分子,在巩膜重塑中扮演重要角色.     

形觉剥夺性近视豚鼠视网膜中神经生长因子及其受体的表达

目的 探讨视网膜神经生长因子（NGF）及其受体（TrkA）在豚鼠形觉剥夺性近视（FDM）视网膜中的表达.方法 对出生7 d豚鼠以半透明眼罩遮盖右眼2个月制备FDM动物模型,左眼作为对照.遮盖前及遮盖2、4、8周后,检影验光检测双眼屈光度,A型超声测量双眼眼轴长度.免疫组织化学和逆转录一聚合酶链式反应（RT-PCR）检测视网膜NGF和TrkA的表达变化.结果 形觉剥夺使豚鼠眼轴增长,近视屈光度增加,遮盖眼与对照眼相比屈光度差异有统计学意义（P＜0.01）.遮盖眼NGF与TrkA免疫活性逐渐降低,NGF与TrkAmRNA表达下调,与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.01）.结论 NGF和TrkA可能参与调控FDM的形成.     

豚鼠形觉剥夺性近视眼巩膜胶原密度变化

目的探讨新生豚鼠形觉剥夺性近视发生时巩膜胶原密度的变化.方法 20只新生花豚鼠随机分成形觉剥夺组(单眼眼睑缝合组)和正常对照组(无处理组),21 d后测量屈光度,眼球冰冻切片行VanGieson氏天狼猩红染色,以锯齿缘为界分别分析前、后部巩膜胶原密度.结果新生豚鼠21 d的形觉剥夺缝合眼后部巩膜胶原密度明显低于对照眼和正常对照组双眼(P＜0.001);前部巩膜胶原密度在形觉剥夺组和正常对照组相比较,差异无统计学意义(P＞0.05);形觉剥夺组缝合眼和对照眼屈光度差值与后部巩膜胶原密度差值呈明显正相关(r=0.866,P＜0.001).结论新生豚鼠眼形觉剥夺性近视时后部巩膜胶原密度减少,影响胶原代谢的机制需进一步研究.     

国产bFGF在鸡形觉剥夺性近视形成中的作用

目的 建立形觉剥夺性近视模型。观察碱性成纤维细胞生长因子（bFGF)对近视发生的抑制作用。方法 出生后第2天的小鸡应用半透明塑 料眼罩行右眼单眼遮盖,随机分成4组,每组8只鸡,其中3组遮盖眼分别结膜下注射bFGF、阿托品和bFGF联合用药、阿托品。单纯遮盖组（MD）不作任何治疗。14天后测定结果,并衡量药物疗效。结果 单纯遮盖组眼与阿托品组（AI）、联合用药组（Abl)的遮盖眼相比眼球明显增大,而与bFGF组相比仅略有增大,阿托品组及联合用药组治疗眼的屈光度、眼轴长度、赤道径麦收单纯遮盖眼相比均有显著性差异。而bFGF组与单纯遮盖眼相比没有显著性差异。阿托品组及联合用药组与bFGF组相比有显著性差异。结论 早期形觉剥夺可导致近视的形成,阿托品可以完全抑制形觉剥夺性近视的发生,而bFGF抑制近视形成的作用甚微。     

外源性bFGF对鸡形觉剥夺性近视眼球后壁组织中VIP表达的影响

目的:观察外源性bFGF (basic fibroblast gosh factor) 对雏鸡形觉剥夺性近视眼 (form deprivation myopia.FDM)眼球后壁组织血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide.VIP)表达的影响.方法:将出生2d龄的40只来亨雏鸡随机分为对照组和实验组,两组右眼为遮盖眼,左眼为自身对照眼.对照组遮盖眼注射1g/L牛血清白蛋白 (bovine scrum albumin,BSA)溶液201μL,共10只鸡;实验组遮盖眼玻璃体腔注射bFGF 1,2,4ng 1g/L BSA溶液20μL,每种剂量10只鸡.1wk后采用SP法免疫组织化学染色和逆转录聚合酶链反应检测眼球后壁组织VIP的表达.所有实验数据,对照组和实验组比较采用单因素方差分析,不同浓度实验组间采用SNK-q检验.结果:VIP的表达主要位于视网膜光感受器外节、内核层、内丛状层和脉络膜,在神经节细胞层和神经纤维层有较弱表达.所有组自身对照眼的VIP表达两两比较均无明显差异(P＞0.05);实验组与对照组遮盖眼相比较差别有统计学意义,VIP表达在实验组明显上调(P＜0.01),并且VIP的表达在实验组组间的差别有统计学意义,随药物剂量增加有逐渐上调的趋势(P＜0.05).结论:外源性bFGF可上调鸡FDM眼球后壁组织VIP的表达.     

鸡形觉剥夺性近视眼后极部巩膜胰岛素样生长因子-1/胰岛素样生长因子-2 mRNA表达的动态变化

目的观察鸡形觉剥夺性近视眼后极部巩膜胰岛素样生长因子(insulinlikegrowthfactor,IGF)IGF1/IGFmRNA表达水平的变化,探讨IGF1/IGF2在实验性近视眼发病中的作用。方法取孵化1d的白色来亨鸡36只,右眼为遮盖眼,左眼为自身对照眼。测量实验前以及单眼遮盖后第7天、第14天、第21天时实验眼和对照眼的屈光度和眼轴长度,并检测不同遮盖时间时鸡眼后极部巩膜IGF1/IGF2mRNA的表达水平。结果随着遮盖时间的延长,IGFmRNA在试验眼和对照眼后极部巩膜的表达水平均升高,但两者之间差异无显著性(P>0.05);实验眼后极部巩膜的IGF2mRNA表达水平在遮盖7d后即明显高于对照眼(P<0.001),随着遮盖时间的延长,实验眼后极部巩膜IGF2mRNA表达水平明显升高,而对照眼则逐渐下降,两者的差值明显增大。结论形觉剥夺可能通过上调鸡眼后极部巩膜IGF2mRNA表达水平,影响巩膜的发育和重塑,从而导致近视的形成。     

形觉剥夺在儿童近视中的表达

目的:通过调查处于生长发育期的儿童由于各种原因的形觉剥夺会否造成双眼在近视发生、发展中的不一致,从临床层面上证实形觉剥夺性近视,揭示近视发病的环境因素和机制,从而采取有效措施进行防治。方法:抽取门诊近视患儿114例,均常规行视力、眼位、主导眼、眼底、裂隙灯、规范的散瞳检影等检查,并通过问诊了解家族史及是否存在剥夺因素。比较双眼的视力、屈光度,并就形觉剥夺眼与屈光度的高低进行相关性统计分析。结果:双眼视力(P=0.000)及屈光度(P=0.006)均存在显著性差异,即形觉剥夺眼与双眼屈光度高者相关(P=0.005)。结论:处于生长发育期的儿童由于各种原因的单眼形觉剥夺可以造成双眼近视发生不一致,剥夺眼近视发生早,屈光度高。应引起重视并积极采取有效措施进行早期干预。     

bFGF对鸡形觉剥夺性近视眼的抑制作用

目的：探讨碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,bFGF）抑制鸡形觉剥夺性近视眼（form deprivation myopia,FDM）的作用及机制。方法：半透明眼罩遮盖法建立90只鸡FDM模型,随机分成6组：正常对照组（A）,FDM组（B）,FDM＋PBS组（C）,FDM＋bFGF 100ng组（D）,FDM＋bFGF 500ng（E）,FDM＋bFGF 1000ng组（F）。按预定时间把bFGF注入小鸡玻璃体腔。眼罩遮盖15d后检影验光,游标卡尺测眼轴长度,RT-PCR检测后极部巩膜基质金属蛋白酶-2（matrix metalloproteinase-2,MMP-2）的表达。结果：与A组比较,B组眼轴延长,近视形成,后极部巩膜MMP-2 mRNA表达升高。玻璃体腔注射bFGF能明显抑制FDM形成,且下调后极部巩膜MMP-2 mRNA表达。随剂量加大,bFGF抑制作用增强,1000ng bFGF能完全抑制小鸡FDM形成。结论：玻璃体腔注射bFGF能通过下调后极部巩膜MMP-2 mRNA表达,有效抑制鸡FDM形成。     

形觉剥夺性近视中巩膜重塑机制的研究

近视是全球发病率最高的屈光不正,发病机制至今不明。形觉剥夺性近视（FDM）动物模型的建立为近视的病因学研究开辟了新局面。形觉剥夺主要通过“局部视网膜机制”来调控邻近巩膜的生长。外界刺激作用于视网膜,启动视网膜一视网膜色素上皮层一脉络膜信号转导系统,把局部视网膜信号转化为调控巩膜重塑的信号,诱导细胞外基质异常表达,巩膜胶原纤维改变等,引起巩膜重塑。就FDM中不同种属动物间巩膜重塑发生的形态学变化及相关因素等做一综述。     

Adenosine receptor protein changes in guinea pigs with form deprivation myopia

Acta Ophthalmol. 2010: 88: 759–765

Abstract.

Purpose: Recent results have shown that treatment with the non‐selective adenosine antagonist 7‐methylxanthine (7‐MX) reduces the development of form deprivation myopia (FDM) in guinea pigs. The aims of this study were to identify the presence of adenosine receptors (AdoRs) in the eye wall of the guinea pig and to determine their possible changes during form deprivation. Methods: Three‐week‐old guinea pigs were monocularly treated with a translucent lens to induce FDM. After 21 days, samples were taken from the posterior eye wall and examined with immunofluorescence confocal microscopy for the presence of AdoRA1, AdoRA2A, AdoRA2B and AdoRA3 proteins. Western blot analysis was used to quantitate AdoRs in samples from the retina, choroids and sclera. Results: All four subtypes of AdoR were expressed in the posterior wall of the guinea pig eye, although AdoRA3 only weakly. Twenty‐one days after the induction of myopia, we observed a significant decrease in protein expression for AdoRA1 (? 25.5%) and an increase in protein expression for AdoRA2B (+ 66.7%) in the retina of FDM eyes. Conclusions: AdoRs of all subtypes are expressed in the retina, choroids and sclera in guinea pigs and may play a role in the regulation of eye growth. The changed pattern of AdoR expression during form deprivation confirms that pharmaceutical intervention targeting AdoRs may reduce myopia progression.     

实验性近视鸡模型眼形态学改变的研究

本实验选用出生当天的彼得逊肉食鸡雏,将实验组右眼睑缝合作为实验眼,左眼为对照眼。于小鸡出生当天检测其屈光状态,用Ａ超测量其前房深度、晶体厚度和眼轴长度,计算玻璃体腔长度。分别于小鸡出生后１５、３０、４５天对小鸡作上述检查后处死实验组、空白对照组各１０只,作病理切片观测鼻、颞侧及后极部巩膜软骨层、纤维层厚度,做相应部位巩膜软骨细胞、双核细胞计数。取４５天小鸡实验、对照眼后极部巩膜做透射电镜切片。结果发现：小鸡被形觉剥夺后,实验眼出现明显轴性近视,眼轴延长主要以玻璃体腔延长为主;后极部巩膜软骨层变厚,纤维层变薄,巩膜软骨基质呈嗜酸性红染,提示有退行性变化。