Aβ1-42海马注射对大鼠海马细胞的影响及黄精多糖的干预研究

目的:探讨Aβ1-42海马直接注射对大鼠海马细胞的影响及黄精多糖干预的作用。方法:将45只SD雄性大鼠分为3组:假手术组、Aβ模型组(Aβ组)和黄精多糖干预组(PP组)。Aβ组直接注射Aβ1-42于大鼠海马组织;PP组用16%黄精多糖溶液给予大鼠连续灌胃45 d。采用HE和甲醇刚果红染色观察Aβ及黄精多糖干预对海马组织细胞的影响。结果:海马的形态学在大鼠的假手术组没有显著变化,在PP组大鼠基本正常,Aβ组的锥体细胞层明显减少,细胞排列稀疏、不规则地变小,可见核固缩、空泡变性细胞。Aβ组相比于PP组,海马组织细胞出现明显Aβ沉积;Aβ组大鼠的阳性斑块数量高于PP组大鼠。结论:Aβ海马注射可以模拟大鼠海马组织阿尔茨海默病病理改变;黄精多糖可显著改善阿尔茨海默病大鼠海马的病理改变。     

二氮嗪对Alzheimer病模型大鼠行为学及其相关凋亡因子的影响

目的   建立β-淀粉样蛋白1-42（Aβ1-42）致Wistar大鼠阿尔茨海默病(AD)模型,探讨二氮嗪干预后大鼠行为学及其相关凋亡因子表达的变化。方法   大鼠双侧侧脑室注射Aβ1-42两周后诱导建立AD模型,部分大鼠同时注射二氮嗪干预。通过Y型迷宫电刺激评价大鼠学习和记忆能力,采用蛋白电泳方法检测大鼠大脑皮层和海马部位神经细胞内凋亡因子（Bcl-2）、半胱天冬氨酸蛋白酶 3（Caspase-3）表达水平的变化。结果  与正常对照组和生理盐水组比较,Aβ1-42组大鼠学习记忆能力下降,大脑皮层和海马部位神经细胞Bcl-2表达量减少,Caspase-3表达量增加（P<0.01）。与Aβ1-42组比较,二氮嗪+ Aβ1-42组大鼠学习记忆能力有所提高,神经细胞Bcl-2表达量增加,Caspase-3表达量减少（P<0.05）。结论  二氮嗪能提高Aβ1-42组大鼠的学习记忆能力,可能具有抗细胞凋亡的作用。     

人参皂甙Rg1对海马电损伤大鼠的学习记忆功能和海马神经细胞形态的影响

摘要：目的研究人参皂甙Rg1对海马电损伤SD大鼠的学习记忆功能和海马神经细胞形态的的保护作用。方法选用成
年雌性SD大鼠,分成4组：人参皂甙Rg1治疗组、生理盐水组、假手术组和假手术+人参皂甙Rg1治疗组;通过立体定向仪
精确定位大鼠海马,导入电极并通直流电损伤海马,制备海马电损伤的大鼠模型。假手术组和假手术+人参皂甙Rg1治疗
组不通电,模型制备完成后,人参皂甙Rg1治疗组和假手术+人参皂甙Rg1治疗组用50 mg/(kg·d)人参皂甙Rg1灌胃,生理
盐水对照组和假手术组均使用用生理盐水灌胃连续14 d。给药结束后,通过Morris水迷宫测试观察人参皂甙Rg1对海马
电损伤SD大鼠学习记忆功能的保护作用。然后通过灌注固定大鼠大脑神经细胞,并且石蜡切片,对切片进行神经元HE
染色和神经元尼氏染色,来观察各组大鼠海马神经元存活状态,神经元细胞的排列情况和神经元尼氏小体的数量。结果
人参皂甙Rg1可明显改善海马电损伤SD大鼠学习记忆功能;假手术组和假手术+人参皂甙Rg1治疗组的存活神经元数目
没有明显差别（P>0.05）,同时生理盐水组的尼氏小体数目明显低于其他各组。结论人参皂甙Rg1可改善海马电损伤SD
大鼠学习记忆功能,人参皂甙Rg1对电损伤神经元的的保护作用可能与其保护保护神经细胞结构和排列的完整性有关。     

姜黄素对阿尔茨海默病模型大鼠海马区GSK3β蛋白表达的影响

目的 探讨姜黄素对阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆及海马区糖原合成酶激酶3β(GSK3β)蛋白表达的影响.方法 将60只SD雄性大鼠分为4组,即假手术组、Aβ模型组、低剂量姜黄素干预组和高剂量姜黄素干预组.假手术组注射生理盐水,模型组和干预组直接注射Aβ1-42于大鼠海马区,姜黄素干预组分别采用剂量150、300mg/kg...     

积雪草苷改善阿尔茨海默病大鼠记忆能力

目的:探讨积雪草苷对Aβ1-42诱导阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆能力,海马细胞线粒体形态影响。方法:60只SD大鼠随机分为模型组、假手术组、空白组,积雪草苷5、15、45 mg.kg-1组,Morris水迷宫检测大鼠空间和学习记忆能力,HE染色观察大鼠海马区细胞病理改变,免疫组化检测β淀粉样沉积,电镜观察大鼠海马细胞线粒体结构改变。结果:与假手术组相比,模型组大鼠逃避潜伏期显著增加、跨越平台次数显著降低,与模型组比较,积雪草苷干预组大鼠学习记忆能力明显改善,有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,积雪草苷干预组大鼠海马区细胞形态完整,β淀粉样沉积明显减少,电镜结果线粒体结构比较完整,肿胀明显减轻,呈剂量依赖性,其中积雪草苷5mg.kg-1改善不明显。结论:积雪草苷能够改善Aβ1-42致阿尔茨海默病模型大鼠的学习记忆能力,改善海马细胞线粒体结构。     

丹参酮IIA对AD大鼠脑组织p53，pp53表达及细胞凋亡的影响

目的：观察丹参酮IIA(tanshinone IIA,Tan IIA)对β-淀粉样蛋白(Aβ)诱导的阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)模型大鼠脑组织中p53与磷酸化p53(phosphate p53,pp53)表达以及细胞凋亡的影响。方法：将30只雄性SD大鼠随机分为假手术组、AD模型组和Tan IIA治疗组。在大鼠海马内注射Aβ建立AD动物模型,采用免疫组织化学法和Western印迹检测AD大鼠脑组织p53与pp53的表达水平,TUNEL法检测大鼠脑组织中的细胞凋亡。结果：Aβ在假手术组中无表达;而在AD模型组和Tan IIA治疗组均有表达且两组间差异无统计学意义(P>0.05),证明AD模型建造成功。AD模型组p53与pp53的表达水平明显高于假手术组(P<0.05)和Tan IIA治疗组(P<0.05)。AD模型组凋亡细胞数显著多于假手术组(P<0.05)和Tan IIA治疗组(P<0.05)。结论：Aβ引起脑组织p53与pp53的表达明显增高,凋亡细胞增多;Tan IIA可能是通过降低大鼠p53与pp53的表达而抑制细胞的凋亡,从而起到神经保护作用。     

脑灵汤对阿尔茨海默病大鼠模型行为学及海马CA3区小胶质细胞和IL-6表达的影响

目的:探讨脑灵汤对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠CA3区小胶质细胞和IL-6表达的影响,初步揭示脑灵汤治疗AD的机制。方法:选用纯系SD大鼠(雌雄各半)30只随机分为5组, 每组6只, 分别为正常组、假手术组、模型组、西药(脑复康)组、中药(脑灵汤)组。采用Aβ_1-42双侧海马注射建立AD模型,造模后喂养28天,采用Y-水迷宫和Morris水迷宫进行行为学检测,免疫组织化学法检测小胶质细胞特异性标记物OX-42和IL-6在大鼠海马CA3区组织神经元中的表达。结果:Morris水迷宫实验显示:与正常组比较,模型组隐匿平台搜索实验中逃避潜伏期延长(P<0.05),探索实验中平均穿越次数减少(P<0.05);Y-迷宫实验显示:模型组躲避电刺激所需的次数增加(P<0.05),脑灵汤可以明显改善模型鼠上述指标(P<0.05);免疫组织化学结果显示:与模型组相比,脑灵汤组大鼠海马CA3区的OX-42和IL-6表达明显下降(P<0.05)。结论:脑灵汤能明显改善AD模型大鼠学习记忆能力,抑制模型大鼠CA3区小胶质细胞活性,减少IL-6的表达,这可能是脑灵汤治疗AD的部分机制。     

脑灵汤对阿尔茨海默病模型大鼠海马 CA3区域iNOS蛋白表达的影响

目的：探讨脑灵汤对阿尔茨海默病（AD）模型大鼠海马CA3区iNOS蛋白表达的影响,初步揭示脑灵汤可能的作用机制。方法：选取40只SPF清洁级SD大鼠,随机分为正常对照组、假手术组、AD组、脑灵汤组和脑复康组,每组8只,喂养1周后,采用Aβ1-42注射大鼠海马法制成大鼠模型,再喂养28 d,免疫组织化学法观察iNOS蛋白在大鼠海马CA3区中的表达。结果：AD组大鼠海马CA3区iNOS蛋白表达较正常对照组增多(P<0.05),脑灵汤治疗后iNOS蛋白的表达降低。 结论：脑灵汤能明显改善AD模型海马CA3区iNOS表达,对老年性痴呆大鼠有治疗作用。     

PFT-α对隐睾所致生精细胞凋亡的影响

目的：通过研究PFT-α对隐睾生精细胞中p53和bcl-2/bax表达的影响,探讨生精细胞凋亡的分子机制。方
法：将雄性SD大鼠随机分为假手术组、隐睾组、隐睾+p53抑制剂(p-fifty three inhibitor-alpha,PFT-α)组、隐睾+ PFT-α溶
媒(DMSO)组。后三组建立单侧隐睾模型,后两组分别于大鼠腹腔内注射PFT-α和PFT-α溶媒,每天1次,定时定量。
7 d后处死所有大鼠,取双侧睾丸称湿重。观察手术侧睾丸生精细胞组织形态,采用TUNEL法结合流式细胞术(flow
cytometry,FCM)检测生精细胞凋亡程度,免疫组织化学和Western 印迹分别检测p53和bcl-2/bax的表达。结果：隐睾+PFT-α组
与隐睾组和隐睾+PFT-α溶媒组比较,生精上皮排列有序,细胞层数厚,凋亡指数较低,p53和bax表达弱,bcl-2表达强。结
论：PFT-α可能通过上调bcl-2,下调p53和bax的表达,抑制隐睾生精细胞的过度凋亡。     

甲状腺激素对慢性脑缺血大鼠海马细胞的保护作用和机制

目的明确甲状腺激素能否减少慢性脑缺血大鼠海马的细胞凋亡,及其作用是否通过上调Bcl-2的表达实现。方法将50
只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组、双侧颈总动脉永久性结扎术（2VO）组与缺血后T3干预组,分别于术后7 d与14 d处死,
对脑组织切片行Nissl染色观察海马CA1区的组织结构,TUNEL染色计算凋亡指数,Western Blotting检测Bcl-2的表达情况。
结果Nissl染色可观察到缺血后海马CA1区的细胞排列杂乱和神经元数量减少,三碘甲腺原氨酸（T3）干预组较之结构完整性
强,神经元数量多。缺血7 d三组齿状回的细胞凋亡指数从高到低依次为2VO组（20.868±2.090）、T3组（20.365±1.055）及假手
术组（17.714±2.553）,但差异无统计学意义（P=0.060）;此时海马Bcl-2的表达量从高到低依次为T3组、2VO组及假手术组。缺
血14 d齿状回的细胞凋亡指数以2VO组最高（66.532±3.249,P<0.001）,T3组明显降低（56.153±4.556,P=0.001）;此时Bcl-2的
表达量以T3组最多,2VO组最低。结论甲状腺激素可以减少缺血海马的细胞凋亡,其作用可能与上调海马Bcl-2的表达有关。
     

AD模型小鼠海马和小脑Aβ的沉积与相关miRNAs表达的变化

目的通过对比观察AD模型小鼠海马与小脑Aβ沉积和相关miRNAs表达的变化,探讨AD模型小鼠小脑是否存在Aβ沉
积和相关miRNAs的差异表达。方法选择12月龄大小的APPswe/PS△E9双转基因AD小鼠作为实验组（EG）,同月龄的同种
系的野生型小鼠C57为对照组（CG）,每组各12只。将小鼠脑组织分为左右两部分,右侧脑组织行刚果红染色检测淀粉样物质
在海马及小脑的沉积;左侧脑组织分别用于提取海马及小脑的miRNA,应用实时荧光定量PCR方法分别检测两组小鼠海马及
小脑组织的miRNA-135a-5p、miRNA-298-5p、miRNA-466b-3p和miR-669f-3p的表达情况。结果刚果红染色：实验组小鼠海马
及小脑均可见橘红色的Aβ沉积,对照组小鼠海马及小脑均未见橘红色的Aβ沉积。实时荧光定量PCR：四种miRNAs在实验组
海马的表达均低于对照组（P<0.05）;miRNA-135a-5p、miRNA-298-5p 和miR-669f-3p 在实验组小脑的表达低于对照组（P<
0.05）;miRNA-298-5p和miR-669f-3p在实验组海马的表达低于小脑（P<0.05）。结论APPswe/PS△E9双转基因AD小鼠小脑中
也存在Aβ沉积,其形成可能与miRNA-135a-5p、miRNA-298-5p和miR-669f-3p的表达下调有关。
     

Apelin-13对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤的保护作用

目的探讨Apelin-13对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤（CIRI）的保护作用及其可能的机制。方法改良线栓法建立S-D大
鼠局灶性CIRI模型,分假手术组、模型组、小剂量Apelin-13干预A组、中剂量B组、大剂量C组共5组,Apelin-13进行侧脑室注
射,分别进行神经功能评分,脑水肿、脑梗死体积测定,观察细胞凋亡;检测脑组织丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）的活
性和细胞外调节蛋白激酶1/2（ERK1/2）。结果（1）B、C组较模型组神经功能评分降低（P<0.05）,含水量、脑梗死体积降低（P<
0.05）;模型组梗死组织可见水肿、坏死,较多深染、固缩核细胞;B组、C组TUNEL阳性细胞数低于模型组（P<0.05）;（2）B、C组
缺血周边脑组织MDA含量降低,SOD的活性增加（P<0.05）;（3）各组ERK1/2 蛋白表达无差异性（P>0.05）;模型组和干预组
p-ERK1/2蛋白表达高于假手术组（P<0.05）;干预组高于模型组（P<0.05）。结论Apelin-13可能通过抑制氧化应激反应对大鼠
局灶性CIRI起保护作用;ERK1/2信号通路可能参与了Apelin-13保护作用机制。
     

骨髓间充质干细胞经肾动脉移植修复小鼠输尿管损伤的方法学研究

目的：从方法学上研究骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells，BMSCs)经肾动脉移植对小
鼠输尿管损伤的修复作用，探讨经肾动脉移植BMSCs的有效性。方法：显微血管夹夹毕49只3~4周龄Balb/c小鼠的
左侧输尿管，10 d后取出显微血管夹以解除左侧输尿管梗阻，然后将这些实验小鼠随机分为实验组(n=25)及对照组
(n=24)。实验组小鼠取出显微血管夹后立即经肾动脉移植荧光素酶标记的Balb/c小鼠BMSCs，对照组小鼠取出显微血
管夹后随即关闭切口，不移植BMSCs。磁共振成像对实验小鼠进行扫描，通过测量不同时间点的实验小鼠的左肾盂
容积，比较实验组与对照组小鼠左侧输尿管梗阻解除后的左输尿管复通率，评估BMSCs对输尿管损伤的修复作用。
结果：实验小鼠左侧输尿管梗阻后的左肾盂容积明显大于梗阻前(P﹤0.01)；实验组与对照组小鼠左侧输尿管梗阻后10
d的左肾盂容积差异无统计意义(P=0.693)；实验组小鼠左侧输尿管梗阻解除后的左输尿管复通率较对照组小鼠明显增
高(P=0.012)。结论：BMSCs经肾动脉移植可促进小鼠输尿管损伤的修复。     

急性失血对老年自发性高血压大鼠术后认知功能的影响

目的研究围术期老年自发性高血压大鼠（SHR）血容量对术后认知功能的影响。方法40只老年雄性SHR随机分为假失
血组（A,n=13）、失血量20%组（B,n=13）和失血量40%组（C,n=14）。经股动静脉建立急性失血模型,补液量按失血量：乳酸钠林
格液为1∶3的比例进行。采用Morris 水迷宫测试大鼠的空间记忆及学习能力,之后断头取脑,观察大鼠海马区的病理变化。结
果C组参考记忆中逃逸潜伏期较术前显著延长（P=0.002）。各组工作记忆无差别。与A组比较,B、C组海马CA1区免疫组化
结果分析显示p-CREB的表达量无明显差别。C组CA1区部分椎体神经元体积缩小。结论不同程度急性失血对术后认知功
能的影响是有差异的,急性失血至全身血容量的40%时可影响老年SHR的参考记忆,但不影响工作记忆和学习能力。
     

肺粪类圆线虫重症感染2例并文献复习

目的：提高对肺粪类圆线虫感染的认识。方法：分析湖南省湘雅医院呼吸ICU确诊的2例肺粪类圆线虫重
度感染患者的临床表现、实验室检测、影像学及病理学资料,并复习1973年至2013年国内报道的87个案例。结果：
本次发现的2例患者均为消化道症状起病,仅在肺发现粪类圆线虫。89例死亡病例血常规检测中有嗜酸性粒细胞
(EOS)的13例,其中10例EOS≤0.05×109/L。结论：农民为主要感染者。患有基础疾病或长期接受糖皮质激素治疗使机
体免疫低下的患者感染粪类圆线虫后容易发展成重症感染致死。患者EOS减少提示预后较差,需早期诊断和治疗。