巴戟天不同炮制品补肾壮阳作用的比较研究

为了比较巴戟天不同炮制品补肾壮阳药理作用,采用腺嘌呤灌胃给药的方法建立小鼠肾阳虚模型,分别给予巴戟天、巴戟肉、盐巴戟、制巴戟4种炮制品,以桂附地黄丸为对照,以小鼠体征、体重、睾丸系数、精囊腺系数、血清睾酮(T)、血清皮质醇(cortisol)、血清肌酐(Cr)、组织病理学检查等为评价指标。结果表明,各炮制品均可以改善肾阳虚小鼠的症状,其中盐巴戟组治疗效果最为显著,其次是制巴戟、巴戟肉、巴戟天。该实验结果可为阐明巴戟天炮制原理和补肾壮阳机制提供实验数据。     

巴戟天生、制品对免疫抑制小鼠免疫功能的影响

目的:考察巴戟天生、制品对免疫功能低下小鼠免疫功能的影响。方法:采用环磷酰胺制备免疫功能低下小鼠模型,通过检测血清IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α和IFN-γ的水平、红细胞和白细胞数量、胸腺及脾脏指数、T淋巴细胞亚群等指标,并观察小鼠胸腺病理切片,探讨巴戟天生、制品对小鼠免疫功能的调节作用。结果:与模型组相比,给药组中IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α、INF-γ的水平、胸腺和脾脏指数、血液红细胞和白细胞数量、CD4~+/CD8~+均有不同程度的升高(P0.05或P0.01),且盐巴戟天组各指标恢复程度均优于巴戟肉组。结论:巴戟天生、制品均能显著改善免疫低下小鼠的免疫功能,且盐制后巴戟天的作用增强,这可为进一步研究治疗免疫抑制药物提供新思路。     

巴戟天不同炮制品对大鼠肝药酶CYP3A的影响

目的通过研究巴戟天不同炮制品对大鼠CYP3A的影响,探索巴戟天盐制和甘草汁制的机理。方法将110只大鼠随机分为空白对照组、苯巴比妥0.1 g/kg剂量组和生/制/盐巴戟天2.0、1.0、0.5 g/kg剂量组,予相应剂量药液灌胃给药7 d。采用体外温孵法、Western blot和荧光定量PCR技术分析CYP3A酶活性、蛋白和mRNA表达。结果与空白对照组比较,除生巴戟天2.0 g/kg组外,其余各给药组的6β-羟基睾酮生成速率均明显增加(P<0.05);在蛋白和mRNA表达上,仅有制巴戟天1.0 g/kg组CYP3A蛋白的表达、盐巴戟天1.0 g/kg组CYP3A1 mRNA的表达和生巴戟天1.0 g/kg组CYP3A2 mRNA的表达与空白对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),其余各给药组CYP3A蛋白和mRNA表达均明显升高(P<0.05)。与生巴戟天对应剂量组比较,制巴戟天2.0 g/kg组、盐巴戟天1.0和2.0 g/kg组的6β-羟基睾酮生成速率均明显增加(P<0.05),制巴戟天1.0 g/kg和盐巴戟天2.0 g/kg组CYP3A蛋白的表达、制巴戟天2.0 g/kg和盐巴戟天1.0 g/kg组CYP3A1 mRNA的表达、制巴戟天1.0 g/kg组CYP3A2 mRNA的表达差异具有统计学意义(P<0.05)。结论巴戟天对CYP3A有诱导作用,用甘草汁和盐炮制后诱导作用增强。     

巴戟天寡糖对小鼠精子生成作用的研究

 目的探讨巴戟天寡糖促进雄性小鼠生精的药理作用。方法采用环磷酰胺(CTX)引起的精子减少雄性小鼠模型。小鼠随机分为对照组、CTX模型组、巴戟天水提液组、巴戟天体积分数80%乙醇提取液组、巴戟天寡糖结晶组、甲睾酮组。建模后连续给药4周,观察给药组、模型组与对照组小鼠性器官以及精子数的差异。结果与模型组比较,巴戟天水提液组、巴戟天体积分数80%乙醇提取液、巴戟天总寡糖结晶组均具有明显的促进精子生成作用,其中以总寡糖结晶组作用最明显。结论巴戟天寡糖可能是巴戟天促进雄性小鼠生精作用的主要物质。     

益智仁盐炙前后对肾阳虚多尿大鼠肾脏改善作用研究

目的比较益智仁盐炙前后对肾阳虚多尿模型大鼠脏器指数和肾脏病理变化的影响,初步探讨益智仁温肾缩尿机制。方法采用腺嘌呤致大鼠肾阳虚多尿模型,比较益智仁盐炙前后石油醚部位对大鼠尿量,肾上腺、肾脏、脾脏、胸腺指数及肾脏病理变化的影响。结果与模型组相比,益智仁生品和盐炙品组有显著缩尿作用(P<0.05);脏器指数除肾上腺外,各给药组肾、脾、胸腺指数与模型组比较均显著改善作用(P<0.05);模型组大鼠肾脏肾小球萎缩、代偿性肥大,肾小管有萎缩变小或扩张等病理改变,给药各组与模型组相比均有不同程度的改善。结论益智仁盐炙前后对腺嘌呤所致肾阳虚多尿模型大鼠肾脏指数和病理变化均具较好改善作用,但盐炙后作用明显增强。     

巴戟天雌激素样作用的实验研究

目的探讨巴戟天的雌激素样作用。方法 60只雌性ICR小鼠进行腹腔假手术或切除双侧卵巢,随机分为假手术组、去卵巢对照组、尼尔雌醇对照组(0.5 mg/kg)和巴戟天低剂量组(2.5 g/d)、巴戟天中剂量组(5 g/d)和巴戟天高剂量组(10 g/d)。术后连续给药4周,观察各组小鼠子宫质量、体内雌激素水平及子宫组织病理学的差异。结果与模型组比较,巴戟天高剂量给药组能显著增加去卵巢小鼠子宫重量及血清雌二醇含量(P<0.05),减轻子宫萎缩程度。结论巴戟天具有雌激素样作用。     

益肾降浊汤对慢性肾功能衰竭模型小鼠肾功能影响的实验研究

目的:观察益肾降浊汤对腺嘌呤引起的慢性肾功能衰竭小鼠的治疗作用。方法:以腺嘌呤诱导小鼠慢性肾功能衰竭模型,予以益肾降浊汤治疗28天。测定血清尿素氮、肌酐、血磷、血钙、胆固醇、甘油三酯、尿酸、体质量、肾脏系数等指标。取肾脏做病理学检查。结果:与模型组比较,益肾降浊汤高、中、低剂量组和尿毒清组可明显降低血中尿素氮、肌酐、磷、胆固醇、甘油三酯水平,升高血钙水平,病理学显示模型小鼠肾脏损害减轻。结论:益肾降浊汤对腺嘌呤导致的慢性肾功能衰竭小鼠有一定的治疗作用。     

化毒胶囊对腺嘌呤所致慢性肾衰竭小鼠肾功能及病理形态学的影响

目的观察化毒胶囊对腺嘌呤所致慢性肾衰竭(CRF)小鼠的保护作用。方法将40只雄性昆明种小鼠随机分为空白对照组、腺嘌呤模型组和化毒胶囊低、高剂量组,各10只。除空白对照组外,其余各组均按250mg/kg灌胃给予腺嘌呤,造成CRF动物模型,空白对照组予蒸馏水。将上述造模成功动物中的化毒胶囊低、高剂量组(分别0.6、1.2g/kg)均每日灌胃给药化毒胶囊1次,连续给药1个月;空白对照组与腺嘌呤模型组予蒸馏水。在给药1个月期间,除空白对照组外,其余各组每周予腺嘌呤(250mg/kg)1次,持续造成肾损害。测定各组小鼠体质量、肾质量、血肌酐(Cr)与尿素氮(BUN)含量,观察肾脏病理形态学变化。结果腺嘌呤模型组体质量、肾质量均低于空白对照组(P0.05),Cr、BUN均高于空白对照组(P0.05),说明造模成功。化毒胶囊高剂量组体质量高于腺嘌呤模型组(P0.05),化毒胶囊低、高剂量组Cr、BUN均低于腺嘌呤模型组(P0.05,P0.01)。肾脏组织学观察可见肾小球病变、肾小管病变、间质内炎细胞浸润、管型等病理学改变。结论化毒胶囊对腺嘌呤所致CRF小鼠有保护作用。     

益智仁盐炙品缩泉丸对肾阳虚模型小鼠血清Bun、Crea等组分及肾脏形态的影响

目的:考察盐炙益智仁配方缩泉丸对肾阳虚小鼠血清Bun、Crea、K~+、Na~+、Cl~-及肾脏形态的影响,探讨缩泉丸中益智仁不同炮制方法对模型小鼠疗效的影响。方法:分别以生品益智仁和盐炙益智仁配方制备缩泉丸。取昆明种雄性小鼠60只,随机分为空白组、模型组、生益智仁缩泉丸组、盐益智仁缩泉丸组,每组15只;空白组给予纯水,模型组给予腺嘌呤;两个缩泉丸药物组在给予腺嘌呤的同时分别给予生益智仁缩泉丸和盐益智仁缩泉丸,最后一次给药/给水1 h后于小鼠眼眶静脉取血,测其血清中Bun、Crea、K~+、Na~+、Cl~-的含量;将小鼠处死,取其肾脏制备切片,显微镜下观察其形态组织变化。结果:模型组小鼠血清Bun、Crea含量明显高于空白组,肾脏生理学形态有损伤;盐益智仁缩泉丸组能显著降低肾阳虚模型小鼠血清Bun、Crea的含量,同时对模型小鼠肾脏损伤有一定的修复作用;生益智仁缩泉丸组小鼠血清Bun、Crea含量与模型组比较,差异无统计学意义(P0.05),且生益智仁缩泉丸组对模型小鼠肾脏损伤的修复程度低于盐炙组。结论:根据"盐炙入肾"这一传统中医药炮制理论,使用盐炙品益智仁而非生品配方缩泉丸具有科学性和正确性,提示在生产/制备缩泉丸时切不可使用益智仁生品替代盐炙品,以确保其治疗作用。     

巴戟天对小鼠肿瘤细胞增殖及Bax、Bcl-2蛋白表达的影响

目的:探讨巴戟天小鼠肿瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法:小鼠腋下接种EAC、S180及肝癌荷瘤瘤株,随机分成4组:模型组、环磷酰胺组及巴戟天水提液高、低剂量组;灌胃给药,1次/d,连续给药10 d。结果:巴戟天水提物能显著抑制EAC、S180肿瘤和肝癌肿瘤的生长(P<0.01)。结论:巴戟天水提物能抑制小鼠EAC、S180、肝癌并抑制小鼠S180、EAC体内、外细胞生长;其机制与促进凋亡蛋白Bax的表达,减少抑制凋亡蛋白Bcl-2的表达有关。     

巴戟天不同炮制品对肾阳虚不育大鼠改善作用研究

目的:观察巴戟天不同炮制品对于用腺嘌呤灌胃诱导的肾阳虚不育大鼠的比较研究,综合评价巴戟天不同炮制品中盐巴戟对生殖功能低下大鼠的改善作用。方法:使用腺嘌呤复制大鼠的肾阳虚模型,用ELISA法测定大鼠血清中促卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素(LH)、睾酮(T)、促性腺释放激素(GnRh)、雌二醇(E2)、肌酐(Cr)的含量,计算肾脏、睾丸、精囊腺脏器系数。用HE染色法观察睾丸和肾脏的组织病理形态,免疫组化染色法(SABC法)测定大鼠睾丸中细胞色素P-19(CYP19)和芳香化酶P450(P450arom)蛋白表达。结果:CYP19和P450arom在大鼠睾丸间质细胞质中均有表达,巴戟天不同炮制品均能使P450arom、CYP19蛋白表达得到不同程度增高与降低。在血清激素水平方面,各给药组均能提高FSH、LH、T、GnRh的含量,降低E2、Cr的含量,其中以盐巴戟的治疗效果最为明显。结论:巴戟天具有较好的补肾壮阳作用,对生殖功能低下的大鼠具有改善作用,且不同炮制品具有显著差异,其中盐巴戟的疗效最佳。本实验结果可为临床合理使用巴戟天不同炮制品提供科学依据。     

巴戟天及其炮制品对肾阳虚大鼠HPA轴功能的改善作用

目的比较巴戟天、巴戟肉、盐巴戟天对肾阳虚大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA轴)功能的改善作用。方法建立肾阳虚大鼠模型后,ELISA法测定血清皮质酮(CORT)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、睾酮(T)、促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)水平,HE染色法观察肾上腺组织病理形态,免疫组织化学染色法测定肾上腺Fas、Bax、Casepase3、Bcl-2、Fas L蛋白表达。结果与模型对照组比较,巴戟天组、巴戟肉组、盐巴戟天组CORT、ACTH、T、CRH水平(除巴戟天组CORT水平外)均显著升高(P 0. 01),Bcl-2蛋白表达均显著增加(P 0. 01),Bax、Fas、Fas L、Casepase3蛋白表达均显著降低(P 0. 01),均以盐巴戟天组最明显(P 0. 05,P 0. 01)。结论巴戟天、巴戟肉、盐巴戟天均可改善肾阳虚大鼠HPA轴功能,调节脏器功能水平,从而达到补肾壮阳作用,其中盐巴戟天效果最佳。     

杜仲补天素胶囊对己烯雌酚诱导雄性小鼠生精障碍的实验研究

目的观察杜仲补天素胶囊对己烯雌酚诱导雄性小鼠生精障碍的影响,并初步探讨其作用机制。方法将60只小鼠随机分为正常组、溶剂对照组、己烯雌酚(DES)模型组(40 mg/kg)、阳性药生精胶囊组(0.8 g/kg)、杜仲补天素胶囊低剂量组和高剂量组(0.347、1.388 g/kg)。每天灌胃给药4 h后,造模,连续7 d,观察杜仲补天素胶囊对己烯雌酚诱导雄性小鼠生精障碍的影响。结果与正常组相比,模型组睾丸病理变化显著,睾丸、胸腺、脾脏、肾脏系数以及精子数量和精子活力显著下降;E2、T水平和GSH-Px活力显著下降,FSH、LH、MDA水平显著上升;原代肾细胞凋亡率和ROS水平以及TLR4和MyD88蛋白表达水平显著升高。给药后,与模型组相比,杜仲补天素胶囊组睾丸病理学有明显改善,胸腺、肾脏、睾丸系数以及精子数量和活力显著上升,E2、MDA水平显著上升,GSH-Px活力、原代细胞凋亡率和ROS水平、TLR4和MyD88蛋白表达水平均显著降低。结论杜仲补天素胶囊对己烯雌酚诱导的雄性小鼠生精障碍具有一定的改善作用,其可能与改善肾脏氧化应激水平及TLR4/MyD88信号通路有关。     

心阳片通过抑制心肌细胞自噬改善心力衰竭小鼠心功能的作用研究

目的探讨心阳片调节心肌细胞自噬改善心力衰竭(Heart failure,HF)小鼠心功能的作用机制。方法将48只雄性C57BL/6J小鼠随机分为假手术组,模型组,心阳片低、中、高剂量组(455、910、1820 mg·kg^-1)及3-甲基腺嘌呤组(15 mg·kg^-1,腹腔注射给药),每组8只;采用主动脉弓缩窄术复制HF小鼠模型;按上述剂量灌胃给药,灌胃体积为8 mL·kg^-1,每天给药1次,连续4周。采用心脏彩超检测各组小鼠心功能:小鼠左心室射血分数(LVEF)及左室短轴缩短率(LVFS);采用q PCR法检测小鼠心脏组织HF生物标记物B型钠尿肽(BNP)mRNA的表达;采用Western Blot法检测小鼠心肌细胞自噬相关蛋白Beclin-1及LC3BⅡ/Ⅰ的表达。结果与假手术组比较,模型组小鼠的LVEF、LVFS显著降低(P<0.05),BNP mRNA及Beclin-1、LC3BⅡ/Ⅰ蛋白表达明显上调(P<0.05)。与模型组比较,心阳片低、中、高剂量组及3-甲基腺嘌呤组小鼠的LVEF、LVFS显著升高(P<0.05),BNP mRNA及Beclin-1、LC3BⅡ/Ⅰ蛋白表达明显下调(P<0.05)。结论心阳片可能通过抑制心肌细胞过度自噬改善HF小鼠的心功能。     

清达颗粒对AngⅡ诱导的高血压小鼠肾脏损害的干预研究

目的:探讨清达颗粒对AngⅡ诱导的高血压肾损伤小鼠血压及相关病理的影响。方法:将18只小鼠随机分为3组:对照组、模型组及给药组,其中模型组及给药组予AngⅡ通过植入式胶囊渗透压泵连续灌注28d以建立高血压模型。给药组予清达颗粒灌胃给药,剂量为22. 9mg/天/0. 2ml,对照组和模型组予等体积的生理盐水灌胃,每天1次,连续给药28d。结果:与模型组对比,清达颗粒能够抑制血压的升高幅度,差异具有统计学意义(P 0. 05);与模型组比较,清达颗粒能够明显改善肾小动脉及肾小球硬化,降低肾小球内胶原阳性比例(P 0. 05)。结论:清达颗粒能降低AngⅡ诱导的高血压小鼠的血压、减轻肾脏损伤。     

槟榔十三味丸对小鼠抗抑郁作用的实验研究

目的:初步探讨槟榔十三味丸的抗抑郁效应和作用机理.方法:采用抑郁症小鼠强迫游泳模型,观察槟榔十三味丸7天连续给药对小鼠不动时间的影响;采用利血平诱导小鼠抑郁模型,观察槟榔十三味丸7天连续给药对小鼠眼睑下垂和运动不能的影响及对脑内单胺类神经递质的作用.结果:与空白对照组比较,槟榔十三味丸高、中剂量组均可显著缩短小鼠强迫游...     

承气生血方抗肿瘤及调节细胞免疫作用的研究

目的:研究承气生血方抗肿瘤及调节细胞免疫作用,分析其对敏感肿瘤凋亡率和T淋巴细胞亚群的影响。方法:选用S180腹水型和Lewis肺癌实体型荷瘤小鼠筛选敏感瘤株。55只敏感瘤株负荷小鼠进行抗肿瘤治疗,随机分为5组:模型组、环磷酰胺组(30 mg.kg^-1)和承气生血方2.4,1.2,0.6 g.kg^-13个剂量组。治疗后以流式细胞术分析小鼠敏感肿瘤外周血T淋巴细胞亚群百分比和肿瘤细胞凋亡率的变化。结果:Lewis肺癌实体型肿瘤为承气生血方敏感肿瘤。PI染色法分析,承气生血方高、中剂量组能明显诱导肿瘤细胞凋亡,与模型组比较有显著性差异(P<0.05)。AnnexinⅤ与PI双染法分析,各给药组均出现肿瘤细胞早期凋亡(P<0.01)。T淋巴细胞亚群结果分析,模型组CD3,CD4和CD4/CD8与正常组比较明显降低(P<0.01),CD8变化不明显;给药组CD3,CD4和CD8比正常组明显降低(P<0.01),CD4/CD8变化不明显。结论:承气生血方可选择性抑制小鼠Lewis肺癌实体型肿瘤生长,并具有抗转移作用,其抗肿瘤作用可能通过诱导肿瘤细胞凋亡而实现。承气生血方通过提高CD4/CD8改善小鼠细胞免疫功能。     

寄生软化汤诱导骨肉瘤小鼠的免疫效应

目的:探讨寄生软化汤对骨肉瘤小鼠免疫功能的诱导作用,为肿瘤的中药辅助治疗提供参考。方法:选取昆明种小鼠,随机分为模型给药组、模型组、空白模型组、正常组,其中模型给药组腹腔注射给予25 mg/kg顺铂及给予13 mg/kg寄生软化汤灌胃,模型组给予相同剂量的顺铂和生理盐水,空白模型组和正常组分别给予相同剂量的生理盐水。疗程结束后统计分析小鼠体重、肿块近似体积、脏器指数及T细胞亚群。结果:与模型组比较,寄生软化汤可明显提高骨肉瘤小鼠的体重及CD3~+T细胞、CD4~+T细胞、CD8~+T细胞百分率及CD4~+/CD8~+比值(P0.05)。运用寄生软化汤的小鼠较模型组肿块体积减少,胸腺和脾脏指数增加,但变化并不显著。结论:寄生软化汤对骨肉瘤小鼠的免疫功能具有调节和诱导作用。中药与化疗联合治疗肿瘤可增强机体免疫功能,抑制肿瘤生长。     

巴戟天不同炮制品中水晶兰苷的大鼠体内血药浓度及组织分布研究

目的探讨炮制对巴戟天中水晶兰苷在大鼠体内血药浓度及组织分布的影响。方法分别给予SD大鼠灌胃巴戟肉、盐巴戟天、制巴戟天的正丁醇萃取物,采用HPLC,Venusil MP C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-0.4%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱,柱温25℃,检测波长235 nm,测定血浆及各组织中水晶兰苷的含量。结果巴戟肉、盐巴戟天、制巴戟天中水晶兰苷高、中、低剂量(0.177、1.77、17.7μg/m L)的药代动力学特征符合二室模型,在所研究的剂量范围内,AUC与给药剂量呈现良好的线性相关性,符合线性动力学特征。灌胃给药60 min后,水晶兰苷在肾、肺、肝、脾的浓度达到最大,在肾组织和肝组织中的浓度分布为盐巴戟天巴戟肉制巴戟天,在脾组织中浓度分布为制巴戟天盐巴戟天巴戟肉。结论不同炮制方法对巴戟天在大鼠体内血药浓度及组织分布有一定影响。     

生血丸对小鼠低剂量辐射损伤的预防与修复作用及机制

目的 探讨生血丸对低剂量辐射致小鼠肝、脾、骨髓细胞、外周血淋巴细胞损伤的预防与修复作用及机制.方法 将小鼠随机分为5组:对照组、生血丸预防给药组(预防给药组)、生血丸治疗给药组(治疗给药组)、模型1组(对应治疗给药组)、模型2组(对应预防给药组).ELISA法检测肝、脾细胞中羟自由基、超氧阴离子自由基、鸟氨酸脱羧酶(ODC)的活性.高倍镜下观察骨髓细胞及外周血淋巴细胞的微核率.结果 与对照组相比,2个模型组小鼠肝细胞内羟自由基、超氧阴离子自由基的量显著增加;与各自模型组相比,治疗给药组、预防给药组上述指标显著减小.与对照组相比,2个模型组小鼠肝细胞内ODC活性显著增强,外周血淋巴细胞与骨髓细胞的微核率显著增加;与各自模型组相比,预防给药组和治疗给药组ODC活性显著减弱,外周血淋巴细胞与骨髓细胞的微核率显著降低.各组小鼠脾细胞中各指标间未见明显差异.结论 生血丸能有效预防和改善小鼠肝细胞、外周血淋巴细胞和骨髓细胞由于低剂量辐射所造成的损伤.