毛细管电泳技术在新生儿α-地中海贫血筛查诊断中的应用

目的毛细管电泳技术在新生儿α-地中海贫血筛查诊断中的应用价值探讨。方法本次所有研究对象均来自于我市新生儿筛查中心2019年1月-2019年9月所接收的新生儿筛查标本共有631例,使用毛细管电泳技术对新生儿干血斑样本进行定量分析,然后对阳性样本数量进行统计,对于血液阳性结果的患儿需要借助于PCR基因分析技术来对其进行α-地中海贫血筛查诊断,以此来分析该技术应用效果。结果在对631例新生儿血液干血斑阳性样本进行检测后,结果显示,有593例新生儿血液样本检测结果为阳性,阳性样本检测率为93.98%。593例新生儿进行了PCR地中海贫血诊断,结果显示486例患儿确诊为α-地中海贫血阳性,阳性诊断率为81.96%。结论毛细管电泳技术在新生儿α-地中海贫血筛查诊断中的应用价值较为显著,能够具有较高的诊断符合率,同时在操作过程中也十分的简便、迅速且经济,能够有效实现早期诊断,值得推广应用。     

毛细管电泳技术在产前对胎儿地中海贫血诊断的应用分析

搜集本院妇产科2014年5月~2015年7月产前检查确诊为地中海贫血的80例孕妇,根据诊断方式不同分为两组,研究组给予毛细管电泳技术,参照组给予琼脂糖凝胶电泳技术,分析最终的检测结果。研究组孕妇地中海贫血的检出率97.5%(78/80)显著高于参照组的87.5%(70/80)(P0.05);α-地中海贫血的MCV和MCH值显著高于参照组(P0.05)。毛细管电泳技术在产前对胎儿地中海贫血诊断效果显著,能够通过引产方式来有效降低问题幼儿的诞生。     

中国深圳地区孕妇毛细管血红蛋白电泳筛查地中海贫血截断值的探讨

目的:了解深圳地区孕妇毛细管血红蛋白电泳筛查地中海贫血的截断值(cut-off值)。方法:回顾性研究2122例产前检查的孕妇毛细管血红蛋白电泳结果与α-和β-地中海贫血基因结果。每个孕妇都抽血做血红蛋白电泳和α-、β-地中海贫血基因检测,用Capillarys 2型全自动毛细管电泳仪进行血红蛋白电泳,采用gap-PCR方法对α基因、反向斑点杂交法对β基因进行基因诊断。通过受试者工作曲线确定筛查地中海贫血的截断值,并以确定的截断值分析Hb A2和Hb F在地中海贫血筛查中的应用价值。结果:Hb A2诊断α-、β-地中海贫血携带者曲线下面积(AUC~(Roc))分别为0.75和0.981,Hb F诊断β-地中海贫血携带者AUC~(Roc)为0.787。Hb A2≤2.55作为诊断α-地中海贫血携带者的最佳临界值时敏感度、特异度、阳性似然比、阴性似然比分别为89.5%、54.8%、1.98、0.19;Hb A2≥3.9作为诊断β-地中海贫血携带者的最佳临界值时敏感度、特异度、阳性似然比、阴性似然比分别为96.1%、99.8%、480.5、0.04;HbF≥0.75作为诊断β-地中海贫血携带者的最佳临界值时敏感度、特异度、阳性似然比、阴性似然比分别为83.6%、61.8%、2.19、0.27。结论:Capillarys 2型全自动毛细管电泳仪在地中海贫血筛查中Hb A2和Hb F的截断值与传统的血红蛋白电泳方法如醋酸纤维薄膜、琼脂糖凝胶电泳不同,实验室应建立各自的截断值。     

全自动电泳分析系统筛查地中海贫血的临床应用价值探讨

目的探讨全自动电泳分析系统筛查地中海贫血（简称地贫）的应用价值。方法选择2008年1～12月已被基因诊断确诊的138例地贫患者和69例非地贫患者,对其血红蛋白电泳结果进行回顾性分析。结果与基因分析法相比,全自动电泳分析系统筛查α地贫的敏感性为95．0％,特异性为91．3％,诊断准确性为93．3％,阳性预测值95．0％,阴性预测值94．0％;筛查β地贫的敏感性为98．3％,特异性为95．7％,诊断准确性为96．9％,阳性预测值95．0％,阴性预测值98．5％。结论全自动电泳分析系统具有较高的特异性和较好的敏感性,是一种筛查地贫的理想方法。     

毛细管电泳在β地中海贫血中的应用研究

目的：研究全自动毛细管电泳仪检测血红蛋白A2(HbA2)在β地中海贫血筛查中的临床应用价值。方法986例需进行地贫筛查者,分别采用全自动毛细管电泳和琼脂糖凝胶电泳进行血红蛋白A2检测,并与基因分析结果进行对比,分析两种方法的灵敏度和特异度。结果以HbA2≥4.8％,毛细管电泳诊断β地贫灵敏度和特异度分别为82.3%和87.6%,琼脂糖凝胶电泳诊断β地贫灵敏度和特异度分别为77.6%和81.7%,毛细管电泳对β地中海贫血诊断的灵敏度和特异度较高。结论毛细管电泳比琼脂糖电泳能更准确区分HbA2、HbF等条带,对β地贫筛查效果更佳。     

地中海贫血筛查及其联合试验的临床应用评价

目的了解龙岩地区血红蛋白痛的检出率及其类型以及舜口红细胞平均体积（HCV）、血红蛋白（Hb）电泳联合试验在地中海贫血（简称地贫）中的诊断价值。方法用日本Sysmex,KX2000全自动血细胞分析仪、法国sebia全自动毛细管血红蛋白泳仪,对1500例病人进行血红蛋白电泳分析,同时分别对确诊的148例地贫及81例非地贫样品进行HCV及Hb电泳测定,并对结果相关统计学分析。结果在1500例病人中,检出血红蛋白病516例,检出率为34．4％,其中α-地贫135例（26．1％）,β地贫212例（60．4％）,异常血红蛋白病69例（13．5％）。MCV及血红蛋白电泳对诊断地中海贫血的灵敏度和特异度分别为91．3％、69．1％及71．3％、91．8％。MCV及血红蛋白电泳平行联合试验的灵敏度和特异度分别为97．5％和63．6％,串联联合试验的灵敏度和特异度分别为71．2％和97．3％。结论龙岩地区血红蛋白病检出率高：血红蛋白电泳技术的运用,对大规模开展人群筛查和婚前、产前遗传咨询和诊断,指导优生优育具有重大意义。且在地贫的诊断试验中,MCV、Hb电泳平行联合试验可提高灵敏度。串联联合试验可提高特异度,联合试验较单项试验有一定的优越性。     

高效液相色谱法与琼脂糖电泳法检测β-地中海贫血携带者HbA2结果的比较

目的 比较高效液相色谱法（HPLC）与琼脂糖电泳法检测β-地中海贫血携带者HbA2的结果,探讨二者筛查β-地中海贫血的灵敏性和可靠性.方法 产前筛查疑似β-地中海贫血携带者154例,同时检测β-地中海贫血基因、HbA2.HbA2分析采用法国Sebia琼脂糖凝胶电泳系统和HPLC分析系统同时进行分析.β-地中海贫血基因诊断采用反向点杂交法进行17种常见突变基因检测,以基因诊断结果作为金标准分别对HPLC分析仪和琼脂糖电泳的HbA2结果进行评价分析.结果 在154份临床样本中,基因诊断为阳性的样本为65例;以HbA2〉3.5%作为诊断β-地中海贫血携带者的最佳临界值,琼脂糖电泳共筛查出57例阳性,与基因诊断符合率为87.6%;HPLC分析共筛查出63例阳性,与基因诊断符合率为96.9%;琼脂糖电泳与HPLC分析仪诊断β-地中海贫血的灵敏性、特异性分别为84.6%、97.7%、96.9%及98.9%.HPLC分析仪阳性符合率、灵敏性明显高于琼脂糖电泳,差异有统计学意义（P〈0.05）;而HPLC特异性也稍高于琼脂糖电泳法,但比较无显著差异（P〉0.05）.结论 HPLC筛查β-地中海贫血与基因诊断有较高的符合率,是一种筛查β-地中海贫血灵敏性、特异性和准确度都较高的理想方法.     

基因芯片检测缺失型α地中海贫血的研究

目的：建立基因芯片检测技术为缺失型α-地中海贫血基因检测诊断提供良好的方法。方法：应用基因芯片检测技术对515例深圳市人民医院进行产前检查及产前诊断的妇女进行筛查。结果：其中85例缺失型α-地贫诊断为：-^SEA型65例占12．62％，-α^3.7型14例占2．72％；-α^4.2型4例占0．78％；-^SEA／-α^3.7型2例占0．39％。结论：应用基因芯片检测技术检测缺失型α-地中海贫血的诊断比用传统方法如：southern杂交、跨越断裂点PCR方法更具备微量、高效、敏感、自动化等特点，更能准确地从分子水平诊断疾病，从而可代替传统检测方法成为筛查的常规方法。     

广东省茂名地区地中海贫血基因型分析

目的研究广东省茂名地区α和β地中海贫血基因型分布特征。方法对2009年4月至2013年6月本院检验科遗传学实验室检测的2198例地中海贫血基因诊断结果进行分析。其中α-地中海贫血采用跨越断裂点PCR（Gap—PCR）基因诊断技术,β-地中海贫血采用PCR结合反向点杂交RDB（PCR-RDB）方法。结果2198例地中海贫血标本中,检测出缺失型α-地贫l083例．最常见的基因类型是-SEA/αα;检验出β-地贫622例,共有11种基因型,最常见的基因型是CD41／42（-TCTT）,其次是IVS—II-654（C〉T）;检出p复合仅地贫基因84例。结论茂名地区α缺失型地贫以-SEA/αα为主;β-地贫突变类型排在前四位的是CD41／42（-TCTT）、IVS-Ⅱ-654（C〉T）、-28（A〉G）和CD17（A〉T）;β复合α地贫基因检出率为13．5％。本研究为茂名地区制定人群筛查地中海贫血预防计划和遗传咨询、产前诊断提供了有价值的基础资料;基因检测对于地中海贫血的临床诊断、治疗和预防有重的意义。     

血红蛋白电泳在地中海贫血筛查中的应用价值

目的应用血红蛋白(Hb)电泳技术筛查疑似α-或β-地中海性贫血,为地贫基因确诊提供参考价值,对干预地中海性贫血出生缺陷提供有利保障。方法开展Hb电泳,通过电脑扫描系统分析Hb组分的含量,筛查疑似α-或β-地中海性贫血患者。追踪调查基因诊断确诊符合率。结果血红蛋电泳分析报告疑似α-地中海性贫血为126例,疑似β-地中海性贫血为103例。调查基因确诊结果,回顾性对比研究发现,α-地中海性贫血的确诊符合率为73.81%,β-地中海性贫血确诊符合率为80.58%。结论血红蛋白电泳技术在地贫筛查中起到了非常重要的作用,能够定量检测血红蛋白A(HBA)、血红蛋白F(HbF)、血红蛋白A2(HbA2)含量,其结果与基因检测结果符合率高,有效地筛查出地贫携带者及高危育龄夫妇,为进一步进行基因诊断和遗传咨询提供初步诊断依据。     

全自动毛细管电泳仪在珠蛋白生成障碍性贫血筛查中的应用

目的评价法国Sebia公司Capillarys 2全自动毛细管电泳仪在珠蛋白生成障碍性贫血筛查中的应用。方法采集2011年8～12月经血分析(红细胞平均体积小于80fL,红细胞平均血红蛋白浓度小于26pg的8岁以上患者)筛选后的292份标本用法国Sebia公司Capillarys 2全自动毛细管电泳仪对入选标本进行血红蛋白(Hb)毛细管电泳、血清铁、铁蛋白检查,同时作α-及β-珠蛋白生成障碍性贫血基因检查。结果 (1)共检测了292例临床标本,符合α-珠蛋白生成障碍性贫血表型者36例,β-珠蛋白生成障碍性贫血表型者135例。同时出现α-及β-珠蛋白生成障碍性贫血表型者2例。(2)高压毛细管电泳法用于α-珠蛋白生成障碍性贫血诊断的灵敏度为86.11%,特异度为98.37%,准确度为95.60%,阳性预测值为93.94%,阴性预测值为96.03%。(3)高压毛细管电泳法用于β-珠蛋白生成障碍性贫血诊断的灵敏度为97.04%,特异度为98.35%,准确度为97.66%,阳性预测值为98.50%,阴性预测值为96.75%。HbA2值大于4.0%时,β-珠蛋白生成障碍性贫血基因法检测阳性率达100.00%。结论法国Sebia公司Capillarys 2全自动毛细血管电泳仪对Hb区带分辨及定量准确度高,可为Hb病(包括珠蛋白生成障碍性贫血及异常Hb病)的初筛提供快速的诊断依据。     

清远地区新生儿珠蛋白生成障碍性贫血筛查结果分析

目的分析清远地区新生儿珠蛋白生成障碍性贫血(简称地贫)筛查和基因诊断情况,为早期治疗和遗传咨询等干预措施及地贫防治政策的制定提供依据。方法应用法国Sebia Capillarys全自动毛细管电泳仪对2015年5月至2016年3月清远地区出生的新生儿进行滤纸干血斑血红蛋白成分分析,初筛阳性者召回抽静脉血应用裂口-聚合酶链式反应(Gap-PCR)和聚合酶链反应(PCR)结合反向点杂交技术进行地贫基因确诊。结果 1 056例初筛阳性者标本中共检出地贫908例,符合率为85.90%。α-地贫确诊符合率为95.05%(691/727),β地贫确诊符合率为65.00%(208/320),α-地贫筛查符合率显著高于β地贫,筛查为HbE的13例新生儿中共召回9例,全部确诊为HbE杂合子,筛查符合率100.00%。确诊为α-地贫650例,检出率为61.60%,其中静止型210例(19.90%)、标准型408例(38.60%)、血红蛋白H病32例(3.00%);检出β地贫204例,检出率为19.30%;α-地贫复合β地贫41例(3.90%),重型β地贫4例(0.35%),异常血红蛋白9例(0.85%)。结论通过新生儿滤纸干血斑进行血红蛋白成分分析可有效筛查出地贫患儿,值得推广应用,清远地区属于地贫高发区,在该地区开展新生儿地贫筛查很有必要,从而提高出生人口素质。     

全自动毛细管电泳仪筛查珠蛋白生成障碍性贫血应用研究

目的了解成都地区珠蛋白生成障碍性贫血(又称地中海贫血,简称地贫)患者的基因型,探讨全自动毛细管电泳仪在地贫筛查中的应用价值。方法以3 262例接受健康体检的成人为研究对象,以血常规检查进行初筛。对初筛阳性者和150例健康者进行血红蛋白(Hb)毛细管电泳检测。以基因检测结果确定地贫患者基因型。以基因检测结果为参比标准,计算毛细管电泳法检测在HbA2取不同截断值时对地贫的诊断效能。以受试者工作特征曲线(ROC曲线)确定最佳截断值。结果 3 262例体检者中,基因检测确诊地贫患者111例(3.40%),其中α地贫检出率为2.21%,β地贫检出率为1.19%,主要的基因型为--SEA/αα。以基因检测结果为参比标准,以试剂盒提供的HbA2参考区间作为诊断标准,则电泳法诊断β地贫的灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值和阴性预测值最高分别为100.00%、98.00%、92.86%、100.00%、98.41%,诊断α地贫分别为29.17%、97.33%、84.00%、74.11%、75.23%。在ROC曲线中,当截断值为HbA2≤2.5%时,诊断α地贫的灵敏度和特异度达到最佳值分别为48.61%、62.00%;当截断值未HbA2≥3.5%时,诊断β地贫的灵敏度和特异度则达到100.00%、99.33%。结论成都地区为地贫低发病率区域。全自动毛细管电泳仪可用于β地贫常规筛查,但对α地贫的筛查诊断效能较低。     

滤纸干血片法毛细管电泳Hb Bart′s带筛查新生儿α-珠蛋白生成障碍性贫血的应用价值评价

目的评估滤纸干血片毛细管电泳技术检测Hb Bart′s带在新生儿期筛查α-珠蛋白生成障碍性贫血的临床应用价值。方法对2 987例新生儿足跟血标本应用滤纸干血片毛细管电泳技术检测Hb Bart′s带水平并同时做基因分析,采用四格表法分析Hb Bart′s带对α-珠蛋白生成障碍性贫血的筛查价值。结果共检出Hb Bart′s带阳性标本131例,筛查阳性率为4.39%(131/2 987)。经基因分析,共检出2类6种α-珠蛋白生成障碍性贫血基因共226例。Hb Bart′s带对α-珠蛋白生成障碍性贫血诊断敏感度为50.00%(113/226),假阳性率为0.65%(18/2 761);特异性为99.35%(2 743/2 761);假阴性率(即漏诊率)为50.00%(113/226);其中Bart′s带对H病的筛查敏感度高达100.00%,标准型α-珠蛋白生成障碍性贫血的筛查敏感度为90.99%(101/111),对-α(3.7)/αα、-α(4.2)/αα静止型及非缺失型α-珠蛋白生成障碍性贫血的筛查敏感度较低。结论滤纸干血片毛细管电泳Hb Bart′s带在新生儿期筛查α-珠蛋白生成障碍性贫血有很高的特异性。对H病及标准型α-珠蛋白生成障碍性贫血亦有较高的筛查敏感度,但是对静止型及非缺失型α-珠蛋白生成障碍性贫血的筛查价值有限。     

HbA2对不同类型地中海贫血的诊断价值

目的:通过分析血红蛋白A2(HbA2)对不同地中海贫血类型的灵敏度和漏诊率,探索HbA2对不同类型地中海贫血的诊断价值.方法:选取重庆市妇幼保健院妇女保健科1 178对孕前检查夫妇,抽取外周静脉血,进行平行的血常规检查、血红蛋白电泳和地中海贫血基因的检测与分析.结果:1 178对夫妇共筛查出265例地中海贫血基因携带者...     

毛细管电泳在HbCS-H病中的诊断价值

目的探讨毛细管电泳分析仪在诊断血红蛋白（Hh）cs—H病中的应用价值。方法用SebiaCapillar—ys2型毛细管电泳仪分别对经地中海贫血基因分析确诊的34例HbCS—H病患者和70例非HbCS—H病患者（包括42例-SEA／-0-a、19例-SEA／-a4.2、7例HbWS—H、2例HhQs—H）进行Hb电泳。采用缺口聚合酶链反应（Gap—PCR）和反向斑点杂交的方法对2组患者进行地中海贫血基因分析。结果毛细管电泳分析HbCS—H组的HbCS带含量为（1．89±1．33）％,HbH带含量为（1．07±0．86）％,HbA,带含量为（1．17±0．68）％;非HbCS—H组均未能检测到HbCS带,有部分标本未检出HbH带,HbA：带含量为（1．81±1．21）％。2组HbA：带含量比较差异有统计学意义（P〈0．05）。毛细管电泳仪诊断HbCS—H病的敏感性和特异性分别为88．2％和100．0％,阳性预测值为100．0％,阴性预测值为94．6％,诊断效率为96．2％,与地中海贫血基因分析比较差异无统计学意义（P=0．134）。结论毛细管电泳可以用来快速诊断HbCS—H病,能够为患者减轻部分经济负担。     

常用筛查方法在地中海贫血诊断中的临床应用

目的探讨常用地中海贫血(简称地贫)筛查方法红细胞平均体积(MCV)、红细胞脆性试验(一管定量法)、血红蛋白(Hb)电泳分析等单项或联合检测在地贫诊断中的应用。方法研究对象来自肇庆市第一人民医院产检、婚检及健康体检者,经基因确诊为地贫200例,非地贫80例,分析其MCV、红细胞脆性试验、Hb电泳分析等不同检测方法单项或联合检测诊断地贫的灵敏度和特异度。结果 MCV、红细胞脆性试验、Hb电泳分析等3种方法单项检测对地贫诊断的灵敏度分别为97.5%、86.0%和82.0%,特异度分别为76.3%、88.8%和93.8%,MCV与红细胞脆性试验联合检测的灵敏度和特异度分别为80.5%、90.0%,红细胞脆性与Hb电泳分析的灵敏度和特异度分别为75.5%和95.0%,MCV与红细胞脆性及Hb电泳3项联合检测的灵敏度和特异度为72.0%、100%。结论用MCV筛查地贫灵敏度较高,可作为筛查的首选方法 ,MCV、红细胞脆性试验及Hb电泳联合检测能大大提高诊断特异度。但这些方法对α地贫,尤其是轻型及静止型α地贫漏诊率较高。     

毛细管电泳血红蛋白A_2增高对诊断β-珠蛋白生成障碍性贫血符合率分析及应用价值

目的分析毛细管电泳血红蛋白A2增高患者β-珠蛋白生成障碍性贫血(简称地贫)确诊符合率,探讨其在β-地贫中诊断中的应用价值。方法选择该院2014年5月至2015年5月门诊及住院血红蛋白A2增高患者260例进行地贫基因检测。结果 260例血红蛋白A2增高患者中,有257例检测到β-地贫基因突变,符合率达98.85%,另外3例未检测出常见的17种β-地贫基因突变,后续经进一步进行罕见型β-地贫基因检测及β珠蛋白基因测序,发现1例为SEA-HPFHβ缺失型,1例为Taiwaneseβ缺失型,1例为Codon 89-93(-AGT GAG CTG CAC TG)杂合突变,证实3例未检测出17种常见β-地贫基因突变的血红蛋白A2增高标本仍为β链发生突变或大片段缺失引起。同时257例β-地贫基因突变标本中有42例复合α-地贫,占β-地贫的16.34%。结论毛细管电泳血红蛋白A2增高能为β-地贫的诊断提供快速准确的依据,但不能排除复合α-地贫的可能,当患者血红蛋白A2增高时,应同时进行α-地贫和β-地贫基因诊断。     

4657例深圳市盐田区户籍人口珠蛋白生成障碍性贫血基因分析

目的：通过研究深圳市盐田区户籍人口珠蛋白生成障碍性贫血基因型及人群携带率,为开展深圳盐田区地中海贫血的遗传咨询、产前诊断和预防计划提供科学依据。方法抽取3 mL EDTA-K2抗凝血进行全血细胞分析,以平均红细胞体积（MCV）＜80 fL 作为初筛试验,初筛后可疑病例进行 DNA 提取后用于基因检测。其中α-地中海贫血基因检测使用4对 PCR 引物,在同一反应体系进行扩增,琼脂糖凝胶电泳鉴定,根据条带分析结果。β-地中海贫血基因型检测,采用 PCR 产物测序进行分析。结果初筛后可疑病例4657例全部进行基因检测,检出地中海贫血基因携带者510例,地中海贫血基因携带率10．95％;其中α-地中海贫血基因携带者389例,携带率8．35％,以α-3．7、α-4．2、α-SEA,为主;β-地中海贫血基因携带者121例,携带率2．59％,以 CD41/42、LVS-Ⅱ-654、box-28、CD17、CD71为主。结论盐田区户籍人口珠蛋白生成障碍性贫血基因携带率与省内其他地区基本接近,检测出的8种地中海贫血基因类型均为常见类型。