PTEN基因在胃癌中的表达及其意义

目的　探讨PTEN基因mRNA及蛋白在胃癌中的表达规律及其临床意义。方法　应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)和免疫组织化学方法 ,对 46例胃癌中PTEN基因mRNA及蛋白的表达进行分析。结果　胃癌组织中PTEN基因mRNA及蛋白的表达明显降低 ,分别为43 .5 % ( 2 0 /4 6)和 47.8% ( 2 2 /4 6) ,P <0 .0 1;且其表达与患者的年龄、性别以及肿瘤的大小无关 (P>0 .0 5 ) ;而与胃癌的分化程度高低 (P <0 .0 1)、浸润深度 (P <0 .0 1)、是否有淋巴结转移 (P <0 .0 5 )和临床分期 (P <0 .0 5 )关系密切。结论　PTEN参与了胃癌的发展过程 ,并与胃癌的部分生物学行为有关 ,可能成为胃癌诊断和判断其生物学特性的重要的分子生物学检测指标。     

抑癌基因PTEN和p16在肝细胞性肝癌中的表达及其意义

目的探讨PTKN和p16基因在肝细胞性肝癌（HCC）中的表达及其意义。方法采用免疫组化技术S—P法检测PTKN蛋白及p16蛋白在43例HCC及其相应癌旁组织中的表达。结果PTKN蛋白在HCC组织中的阴性表达率明显高于在癌旁组织中的阴性表达率（P〈0．01）;PTKN蛋白表达阴性率与HCC的分化程度、临床分期呈负相关,与AFP甲值及有无转移、HBV感染相关,与p16蛋白缺失率呈正相关,而与患者年龄、性别、肿瘤直径无关。比较PTKN阴性表达和阳性表达的HCC患者的术后1,3,5年生存率,差异在统计学上有显著性意义。结论PIEN失活部分参与了HCC的发生、发展进程。PIEN基因、p16基因的失活及HBV感染可能在HCC的发生、发展中存在协同关系。PTEN蛋白表达的检测可为HCC患者术后的预后判断提供参考。     

PTEN蛋白在肝细胞癌中的表达及其意义

目的 通过检测肿瘤抑制基因产物PTEN蛋白在肝癌中的表达情况,探讨其作为一种评估肝细胞癌(HCC)生物学特征的分子标记的意义。方法 用免疫组化技术检测3组共43例(孤立性大肝癌、小肝癌及多结节肝癌组)HCC病例与6例正常肝组织中PTEN蛋白的表达。分析HCC中的PTEN蛋白表达与各临床病理特征的关系。结果 PTEN蛋白在正常肝组织及HCC癌旁组织中表达水平高于癌组织,差异具有显著性(P<0.05),但正常肝组织与癌旁组织间表达无显著性差异(P>0.05)。分化程度高的HCC中PTEN表达高于低分化者,无静脉浸润者高于有静脉浸润者,Child A级者高于B级和C级,差异均具有显著性(P<0.05)。PTEN蛋白在大肝癌组表达高于多结节组,但大、小肝癌组间表达无显著性差异(P>0.05)。结论 PTEN蛋白可作为检测肝癌生物学特征的一种分子标记。PTEN检测结果支持孤立性大肝癌较多结节肝癌具有更好的预后。     

P27蛋白在肝细胞肝癌组织中的表达及意义

目的 探讨P^27蛋白在肝细胞肝癌组织中的表达及其与临床病理学特征关系。方法 采用免疫组织化学S-P染色法检测33例肝细胞癌组织中P^27蛋白表达，并分析其与临床病理学特征的关系进行分析。结果 P^27蛋白的表达在进展期肝癌组织中显著降低，P^27阳性表达率在高TNM分期5），中低分化（6/20），有癌栓（3/14），直径大于3cm(9/12)的肝癌组织中显著低于TNM分期（13/18），高分化（10/13），无癌栓（13/19），直径小于3cm(7/12)的肝癌组织，P值分别为0.005,0.013,0.013,0.032。结论 p27蛋白表达量的减少和肝细胞肝癌的恶生程度及侵袭性密切相关，可能成为一个新的预后指标。     

多药耐药相关蛋白基因在原发性肝细胞癌组织中的表达及意义

目的　研究原发性肝细胞癌及其癌周肝组织中多药耐药相关蛋白 (MRP)基因的表达及意义。方法　用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)技术检测 2 5例新鲜原发性肝细胞癌及其癌周肝组织中MRPmRNA的表达 ,用免疫组织化学技术LSAB法检测 60例肝细胞癌组织中MRP蛋白的表达 ,并结合流式细胞仪对体外化疗药物敏感性的检测结果进行统计学分析。结果　原发性肝细胞癌组织中MRPmRNA与MRP蛋白表达阳性率分别为 44 .0 0 % (11/2 5 )和 45 .0 0 % (2 7/60 ) ,均以中、低表达为主 ,明显高于癌周肝组织中MRPmRNA和MRP蛋白的表达阳性率〔2 8.0 0 % (7/2 5 )、2 6.67% (16/60 )〕 ,P<0 .0 5 ;5例复发性肝癌的MRP蛋白表达阳性率和表达强度呈增高的趋势。在RT PCR检测的 2 5例患者中 ,该两项指标具有良好的一致性 (P<0 .0 5 )。肝细胞癌在体外对化疗药物 5 FU、DDP、ADM、MMC及CTX的敏感性分别为 (15 .80± 7.63 ) %、(18.45± 9.5 9) %、(17.95± 7.99) %、(16.60± 8.69) %和 (17.40± 10 .14 ) %。MRP蛋白表达阳性者对 5 FU、ADM的敏感性低于阴性者 (P<0 .0 5 )。结论　MRP基因在原发性肝细胞癌组织中的表达可能在肝癌内在性和获得性耐药中起重要作用 ,检测MRP基因表达有助于预测化疗反应和选择合理的化疗方案。     

PEG10和c-MYC基因在肝细胞肝癌中的表达及意义

我们通过采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测PEG10和c—MYC mRNA在HCC及对应癌旁组织中的表达．分析两者的表达与临床病理因素的关系，探讨PEG10和c—MYC与HCC发生发展的关系。     

hTERT在原发性肝癌中的表达及其临床意义

目的探讨端粒酶逆转录酶(hTERT)在原发性肝癌(HCC)中的表达,为肝癌早发现、治疗方案的选择、预后分析提供理论根据。方法 (1)采用免疫组化、RT-PCR法检测HCC及其癌旁组织和正常肝组织中hTERT基因表达水平。(2)比较hTERT检测和影像检查的诊断阳性率并对部分患者进行随访。结果 (1)hTERT在HCC和癌旁组织的阳性表达差异有显著性(P<0.01)。正常肝组织未见阳性表达。(2)hTERT检测诊断小肝癌阳性率高于影像学诊断;hTERT与影像学在癌旁组织的诊断阳性率差异有显著性(P<0.01)。(3)18例患者在随访期内有7例发生转移复发,均为hTERT阳性表达者。结论 (1)hTERT在肝癌组织中呈高表达水平;(2)hTERT在肝癌组织诊断中,小肝癌阳性率高于影像学诊断,癌旁组织诊断中,hTERT优于影像学诊断。(3)hTERT具有预示肝癌复发、转移的作用,可能成为辅助诊断和预后判断的指标之一。     

RhoC基因在肝细胞癌中的表达及其意义

目的探讨RhoC基因与肝细胞癌 (HCC)的发生发展和侵袭转移的关系。方法采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)在半定量水平检测 2 5例HCC及其相对应的癌旁肝组织和 4例门静脉主干癌栓或肝外转移灶中RhoCmRNA的表达 ;同时采用PCR产物单链构象多态性 (PCR SS CP)银染法检测RhoC基因的突变情况。结果本组 2 5例HCC中RhoCmRNA的表达较癌旁肝组织高 ,其光密度比值分别为 1 8± 1 1和 1 0± 0 7,P <0 0 1,差异有显著意义 ;4例门静脉主干癌栓或肝外转移灶中的RhoCmRNA的表达较相对应的肝内肝癌病灶高 ,其光密度比值分别为 3 3± 0 5和 2 0± 0 7,P <0 0 1,差异有显著意义 ;将 2 5例HCC分为RhoC基因过表达组和高表达组后发现 ,过表达组中肝癌细胞分化较差 ,静脉受侵严重 ,且以结节性肝癌居多 (P <0 0 5 ) ;而 2 5例HCC经PCR SSCP银染法分析未发现异常泳动条带。结论RhoC基因与HCC的发生发展和侵袭转移密切相关 ,且可能是通过表达升高而非突变发挥作用。     

NORE1B、RASSF1A mRNA在肝细胞癌中的表达及其相关性

目的 探讨肝细胞癌(HCC)组织中NORE1B、RASSF1A的转录表达及其临床意义.方法 应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分析41例HCC及对应癌旁组织中NORE1B、RASSF1AmRNA的表达情况,以及与临床病理特征的关系,并探讨两者表达的相关性.结果 NORE1B mR-NA在HCC中的缺失率为63.4%,癌旁组织中为34.1%(P<0.01).RASSF1A mRNA在HCC中的缺失率为75.6%,癌旁组织中为39.0%(P<0.05).两者的差异表达与乙肝、肝硬化以及Edmondson分级均存在相关性(P<0.05),而与年龄、性别、肿瘤大小、术前肝功能Child-Push分级和血清AFP检测值均无显著相关.NORE1B与RASSF1A mRNA在HCC中的表达呈正相关性(P<0.05).结论 NOBE1B与RASSF1A在HCC的发生发展中可能存在协同作用.     

抑癌基因PTEN在肝细胞癌中的表达及其意义

目的：探讨肝细胞癌（HCC）组织中抑癌基因PTEN蛋白的表达及其意义。方法：应用免疫组织化学SP法，检测53例HCC组织和癌周组织中PTEN蛋白的表达水平。结果：53例HCC中PTEN蛋白阳性率（52．8％）和阳性强度明显低于癌旁组织（92．5％）（P〈0．01，P〈0．05）；HCC组织中PTEN蛋白的表达与HCC的分化程度密切相关（P〈0．05），HCC分化愈差，PTEN蛋白表达愈弱；PTEN蛋白表达还与癌拴形成有关（P〈0．005）。结论：PTEN的异常表达在HCC发生、发展过程中可能起重要作用，其表达水平有可能作为反映HCC进展和预后的生物学指标。     

FHIT、FN和PTEN在肝癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨脆性组氨酸三联体基因蛋白(fragile histidine triad,FHIT)、纤黏连蛋白(fibronectin,FN)、张力蛋白同源基因蛋白(phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten,PTEN)在肝癌组织中的表达及与患者预后的关系.方法 应用免疫组化方法检测138例肝癌组织标本的FHIT,FN,PTEN的表达情况,分析表达与患者临床病理因素的关系.差异检验采用Log-rank检验.结果 FHIT,FN,PTEN在肝癌组织中的表达与癌旁组织比较差异有统计学意义(分别x2=5.968,7.380,4.962,均P＜0.05),与肿瘤大小,分化程度,肿瘤数目,淋巴结转移,癌栓形成等比较差异有统计学意义(P＜0.05),FHIT,FN表达阳性患者组较阴性患者组生存时间短(分别x2=4.443,9.867;均P＜0.05),而PTEN表达阳性患者较阴性患者生存时间长(分别x2=4.199,P＜0.05).结论 FHIT,FN,PTEN在肝癌组织中存在异常表达,FHTT,FN表达提示患者预后不良,PTEN表达提示患者预后较好.     

原发性肝癌PTEN和p27表达的相关研究

目的：研究PTEN和p27两种抑癌基因在原发性肝癌中的表达和两者间的关系。方法：应用免疫组化方法，对43例原发性肝癌患者、21例份肝硬化患者和16例正常对照的正常肝脏组织进行PTEN和p27的免疫组化研究。结果：原发性肝癌组PTEN的阳性表达率为41．9％（18／43），比肝硬化组和正常对照组明显下降：原发性肝癌组p27的阳性表达率为86．0％，比肝硬化组和正常对照组显著升高。PTEN的表达与肿瘤数目、分化高低、有无血管侵犯有关；p27的表达与原发性肝癌的大小、肿瘤数目、分化高低、有无血管侵犯有关。PTEN蛋白和p27蛋白在原发性肝癌中无相关关系。结论：PTEN作为抑癌基顺在原发性肝癌中发挥作用，p27有其组织特异性，PTEN和p27表达在原发性肝癌中无相关性。     

RASSF1A基因在肝癌组织中的表达及其临床意义

目的观察人肝癌组织RASSF1A的表达情况。方法应用半定量反转录聚合酶联反应技术检测62例人中晚期肝癌及其癌旁正常组织中RASSF1A的表达情况。结果69．4％（43/62）的肝癌组织中RASSF1A表达缺失，而癌旁组织中仅30．6％（19／62）该基因表达缺失，两者差异有统计学意义（P〈0．05）。结论中晚期肝癌中RASSF1A表达处于失活状态，其可作为一种有潜在应用价值的生物分子指标来用于肝癌的早期发现、早期诊断以及预后的判断。     

原发性肝细胞癌中错配修复基因hMLH1的表达及其意义

目的　探讨错配修复基因hMLH1在原发性肝细胞癌(HCC)组织中的表达及其意义。方法　采用免疫组织化学和逆转录 聚合酶链反应(RT PCR)检测48例肝癌组织、2 3例癌旁组织和2 5例正常肝组织中hMLH1蛋白和mRNA的表达情况,同时采用原位末端标记法测定癌组织的细胞凋亡指数。结果　48例肝癌组织、2 3例癌旁组织和2 5例正常肝组织的hMLH1mRNA表达分别为62 .5 % (3 0 /4 8)、10 0 .0 % (2 3 /2 3 )和10 0 .0 % (2 5 /2 5 ) ,蛋白表达分别为60 .41% (2 9/4 8)、91.3 0 % (2 1/2 3 )和10 0 .0 0 % (2 5 /2 5 )。hMLH 1表达与肝癌组织的临床分期有明显相关,hMLH1表达阳性的肝癌组织的细胞凋亡指数升高为(3 .5 62±0 .2 3 3 ) %。结论　hMLH1在肝癌组织中低表达,提示错配修复基因hMLH1功能缺陷在肝癌的发生、发展过程中起重要作用     

Genistein调节肝癌细胞PTEN和survivin蛋白表达的实验研究

目的探讨genistein对肝癌HepG2细胞株PTEN和survivin蛋白表达的影响及在诱导凋亡中的作用。方法以肝癌HepG2细胞培养72 h为对照组,实验各组以60μmol／L的genistein作用于HepG2细胞不同时间后,应用同位素试剂盒检测细胞IP3含量,Western-blotting分析细胞PTEN和survivin蛋白表达,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果对照组IP3含量为(29．2±0．6)pmol／106 cells,PTEN蛋白与内参Actin蛋白灰度和面积之积的比值V-PTEN／V-actin为0．12±0．001, survivin蛋白与内参actin蛋白灰度和面积之积的比值V-survivin／V-actin为0．63±0．06,细胞凋亡率为2．6％±0．1％。Genistein作用于肝癌Hep G2细胞12 h、24 h、48 h、72 h后IP3分别为(12．0±1．4) pmol／106cells、(7．5±0．8)pmol／106cells、(5．6±0．5)pmol／106cells、(3．3±0．6)pmol／106cells; V-PTEN／V-actin分别为13．13±0．20、19．17±1．09、28．51±2．18、41．12±3．80;V-survivin／V-actin分别为0．36±0．13、0．33±0．03、0．23±0．04、0．18±0．04;细胞凋亡率分别为2．7％±0．2％、7．4％±0．5％、20．5％±2．0％、30．7％±1．6％。与对照组相比,genistein作用于肝癌Hep G2细胞12 h后各时相IP3和survivin蛋白显著降低,24 h后各时相细胞凋亡率显著增高。结论Genistein能减少IP3生成,上调PTEN基因表达,下调survivin基因表达,诱导肝癌细胞凋亡。     

肝细胞癌中SEMA3B基因的表达及其意义

目的 通过对SEMA3B基因在原发性肝细胞癌（HCC）组织中表达的检测，探讨该基因与HCC发生机制的关系。方法 采用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）方法检测35例HCC组织及癌旁肝组织SEMA3BmRNA表达水平。结果 （1）在所有受检的癌旁肝组织中，SEMA3BmRNA表达率为85．7％（30／35），明显高于癌组织的表达率20．0％（7／35），差异有统计学意义（P〈0．01）；（2）合并有肝硬化（20／28）或者乙肝（19／28）的患者，其癌组织中SEMA3B基因的表达缺失率显著高于无肝硬化（8／28）或乙肝阴性（9／28）患者（P〈0．05）；（3）SEMA3B基因的异常表达情况与年龄、性别的差异无统计学意义（P〉0．05），与HCC患者术前肝功能Child—Pugh分级评价和血清AFP的检测值高低无相关（P〉0．05）；（4）SEMA3B的表达缺失率与TNM分期关系无统计学差异，低分化型癌组织中SEMA3B基因缺失率高于中、高分化型，但差异无统计学意义（P〉0．05）。此外，该基因的缺失与肿瘤大小无关（P〉0．05）。结论 SEMA3B基因在HCC组织中的高频表达缺失说明该基因的失活与HCC的发生密切相关。SEMA3B基因是定位于染色体3p21．3区域的与HCC相关的抑癌基因，并且可能在HCC的发生发展方面起重要作用。     

人类新的肝癌高表达基因HCCA3的克隆、鉴定及其临床病理学意义

目的 克隆新的肝癌相关基因并探索其在肝癌发生发展中的作用机制。方法 采用mRNA差异显示技术，分析肝癌和癌旁组织差异表达基因谱，获得的差异表达基因片断作为探针，筛选胎盘cDNA文库，以获得全长cDNA序列。通过Northern印迹杂交的方法，分析所获得的新基因在42例肝癌组织中的表达情况，并分析其临床和病理学意义。结果 克隆了一个新的肝癌相关基因，命名为HCCA3，该基因的全长cDNA 1706 bp，编码一个264个氨基酸的蛋白质，在人类肝癌中广泛表达(78．6％，33／42)，并与肝癌的浸润转移密切相关。结论 HCCA43是一个新的人类基因，在肝癌中的异常高表达可能对肝癌的发生发展具有重要的促进作用。     

Skp2、PTEN和p27在胶质瘤中的表达及其意义

目的探讨Skp2、PTEN和p27在胶质瘤中的表达及其意义，及其相互关系。方法用免疫组织化学方法检测33例胶质瘤和6例正常脑组织标本中Skp2、PTEN和p27蛋白的表达。结果Skp2在正常脑组织中表达不明显，在低级别胶质瘤中表达较少，在高级别胶质瘤中表达较多，两两比较差别有统计学意义（P〈0．01）。PTEN和p27在正常脑组织中表达明显，在低级别胶质瘤中表达较少，在高级别胶质瘤中表达不明显，两两比较差异有统计学意义（P〈0．01）。胶质瘤中Skp2蛋白表达与p27蛋白表达呈负相关（r=-0．809，P〈0．01），PTEN蛋白和p27蛋白的表达呈正相关（r=0．865，P〈0．01）。Skp2蛋白和PTEN蛋白的表达呈负相关（r=-0．814，P〈0．01）。结论在胶质瘤中PTEN的缺失突变导致Skp2在胶质瘤中表达升高，进一步促进p27的泛素化降解，使p27表达降低，失去对细胞周期的调控，从而促进胶质瘤的恶性进展和增殖。