PNH患者红细胞膜乙酰胆碱酯酶缺失的研究

用间接免疫荧光流式细胞术测定阵发性睡眠性血红蛋白尿症（ＰＮＨ）患者和正常人红细胞乙酰胆碱酯酶（ＡｃｈＥ）表达量，发现ＰＮＨ的ＡｃｈＥ表达远远低于正常，而且蛇毒溶血试验与ＡｃｈＥ的缺失呈正相关。由于ＰＮＨ正常和异常血细胞同时并存，为进一步研究ＰＮＨ的ＡｃｈＥ（－）红细胞，采用ＰｒｏｔｅｉｎＡＳｅｐｈａｒｏｓｅ６ＭＢ结合ＡｃｈＥ单抗亲和层析法分离出ＰＮＨ的ＡｃｈＥ（－）红细胞。用￣３Ｈ－肌醇标记实验证明，正常红细胞膜在区带４．１有较高放射活性，而ＰＮＨ红细胞膜放射活性极低，ＰＮＨ的ＡｃｈＥ（－）红细胞膜完全无放射活性；用免疫印渍实验证明区带４．１是ＡｃｈＥ存在部位。用酶联免疫方法直接检测ＰＮＨ患者和正常人血浆中ＡｃｈＥ含量，结果发现ＰＮＨ患者血浆中有ＡｃｈＥ存在，而正常人未能检出。     

乌圆补血口服液对拟老年痴呆症小鼠脑乙酰胆碱酯酶的影响

目的：探讨乌圆补血口服液对拟老年痴呆症小鼠的预防和治疗效果.方法：实验于2004-06-10/10-03在右江民族医学院重金属与氟砷毒物研究实验室内进行.选用昆明种小白鼠60只,随机分为正常对照组、模型组、乌圆补血口服液预防组、乌圆补血口服液治疗组、脑复康治疗组,每组12只.除正常对照组外,其他各组均用12 mg/mL的氯化铝蒸馏水溶液,按303 mg/kg灌胃,1次/d,连续115 d,制作拟老年痴呆症小鼠模型.乌圆补血口服液预防组从造模开始就用乌圆补血口服液灌服;造模第8周后,乌圆补血口服液治疗组用乌圆补血口服液灌服治疗,脑复康治疗组用脑复康治疗;正常对照组,模型组用等量生理盐水灌胃,1次/d.分别于造模前,造模第8周,治疗后从鼠尾部取血,采用高铁氰化钾法测定各组大鼠血红蛋白,分离血清,采用酶法、改良赖氏法、脲酶-波氏比色法分别测定各组小鼠血清乙酰胆碱酯酶活力、丙氨酸氨基转移酶活力、尿素含量,实验结束后处死各组小鼠,取大脑和肝脏,冰冻下匀浆,用生理盐水制成10%匀浆,测定脑乙酰胆碱酯酶活力、脑丙二醛和肝丙二醛含量（TBA反应法）,组间比较采用方差分析,t检验,实验数据以x&;#177;s表示,P＜0.05有显著性差异. 结果：实验纳入小鼠60只,全部进入结果分析.①血红蛋白含量的变化：与造模前比较,造模后第8周乌圆补血口服液预防组及脑复康治疗组的血红蛋白含量明显降低（P＜0.01）.治疗后,模型组的血红蛋白含量明显低于造模后第8周（P＜0.01）,脑复康治疗组在造模后第8周时血红蛋白含量明显低于模型组（P＜0.05）.②血清尿素、丙氨酸氨基转移酶、乙酰胆碱酯酶活性活力测定：模型组乙酰胆碱酯酶活性明显高于其他各组[（138.97&;#177;16.52）nkat/L,（128.04&;#177;12.79,120.46&;#177;31.21,117.87&;#177;19.45,114.86&;#177;16.37）nkat/L,（P＜0.05）].各组小鼠血清尿素含量、丙氨酸氨基转移酶活力各组间无显著性差异（P＞0.05）.③脑丙二醛、脑乙酰胆碱酯酶活力和肝丙二醛测定：正常对照组、乌圆补血口服液预防组、乌圆补血口服液治疗组及脑复康治疗组的脑乙酰胆碱酯酶活性明显低于模型组[（12.17&;#177;3.17,16.34&;#177;15.00,15.00&;#177;1.83,14.50&;#177;2.00）nkat/L,（23.00&;#177;2.67）nkat/L,（P＜0.01）].脑、肝丙二醛含量各组比较无显著性差异（P＞0.05）.结论：拟老年痴呆症模型小鼠大脑胆碱能系统受到明显的损害,乌圆补血口服液对其有一定的改善作用.     

乌圆补血口服液对拟老年痴呆症小鼠脑乙酰胆碱酯酶的影响

目的:探讨乌圆补血口服液对拟老年痴呆症小鼠的预防和治疗效果。方法:实验于2004-06-10/10-03在右江民族医学院重金属与氟砷毒物研究实验室内进行。选用昆明种小白鼠60只,随机分为正常对照组、模型组、乌圆补血口服液预防组、乌圆补血口服液治疗组、脑复康治疗组,每组12只。除正常对照组外,其他各组均用12mg/mL的氯化铝蒸馏水溶液,按303mg/kg灌胃,1次/d,连续115d,制作拟老年痴呆症小鼠模型。乌圆补血口服液预防组从造模开始就用乌圆补血口服液灌服;造模第8周后,乌圆补血口服液治疗组用乌圆补血口服液灌服治疗,脑复康治疗组用脑复康治疗;正常对照组,模型组用等量生理盐水灌胃,1次/d。分别于造模前,造模第8周,治疗后从鼠尾部取血,采用高铁氰化钾法测定各组大鼠血红蛋白,分离血清,采用酶法、改良赖氏法、脲酶-波氏比色法分别测定各组小鼠血清乙酰胆碱酯酶活力、丙氨酸氨基转移酶活力、尿素含量,实验结束后处死各组小鼠,取大脑和肝脏,冰冻下匀浆,用生理盐水制成10%匀浆,测定脑乙酰胆碱酯酶活力、脑丙二醛和肝丙二醛含量(TBA反应法),组间比较采用方差分析,t检验,实验数据以x±s表示,P<0.05有显著性差异。结果:实验纳入小鼠60只,全部进入结果分析。①血红蛋白含量的变化:与造模前比较,造模后第8周乌圆补血口服液预防组及脑复康治疗组的血红蛋白含量明显降低(P<0.01)。治疗后,模型组的血红蛋白含量明显低于造模后第8周(P<0.01),脑复康治疗组在造模后第8周时血红蛋白含量明显低于模型组(P<0.05)。②血清尿素、丙氨酸氨基转移酶、乙酰胆碱酯酶活性活力测定:模型组乙酰胆碱酯酶活性明显高于其他各组[(138.97±16.52)nkat/L,(128.04±12.79,120.46±31.21,117.87±19.45,114.86±16.37)nkat/L,(P<0.05)]。各组小鼠血清尿素含量、丙氨酸氨基转移酶活力各组间无显著性差异(P>0.05)。③脑丙二醛、脑乙酰胆碱酯酶活力和肝丙二醛测定:正常对照组、乌圆补血口服液预防组、乌圆补血口服液治疗组及脑复康治疗组的脑乙酰胆碱酯酶活性明显低于模型组[(12.17±3.17,16.34±15.00,15.00±1.83,14.50±2.00)nkat/L,(23.00±2.67)nkat/L,(P<0.01)]。脑、肝丙二醛含量各组比较无显著性差异(P>0.05)。结论:拟老年痴呆症模型小鼠大脑胆碱能系统受到明显的损害,乌圆补血口服液对其有一定的改善作用。     

神经肌肉接头中乙酰胆碱酯酶的研究进展

哺乳动物的神经肌肉接头（NMJ）作为运动神经末端和肌肉相连接的部位，是目前研究最多、了解最清楚的突触结构。NMJ乃至整个神经系统突触的发育过程就是突触前后膜特化性改变的过程：轴突末梢释放神经递质被突触后细胞接收，经过电一化学一电的转换，完成有效和准确的信息传递。早在20世纪30年代人们就开始了对NMJ的研究，到了20世纪70年代，大量有关NMJ发育的实验使人们认识到，运动系统突触的形成与神经和肌肉之间精确的信号传导有关。许多研究报道，乙酰胆碱酯酶（ACHE）可能作为一种特异性神经分泌蛋白，在胞内或胞外对神经元的增殖、突起的生长、NMJ的发育及AChR的丛聚有重要的作用，有关NMJ中AChE的研究不但对探讨中枢神经系统突触功能和作用提供了重要线索。也为临床研究运动系统损伤和修复奠定了理论依据。有关对NMJ中AChE的研究主要集中在20世纪70～80年代，在此之后关于NMJ和AChE的研究较少且进展缓慢。     

红细胞乙酰胆碱酯酶的连续监测法

目的 建立一种新的连续监测红细胞乙酰胆碱酯酶（AChE)自动化方法。方法 AChE催化底物乙酰巯基胆碱（ACTI），生成巯基胆碱，蓝色的氧化型二氯酚吲哚酚（DPIP）被还原成无色化合物，在600nm处监测吸光度变化即可测定AChE活力单位。结果 在日立7060生分分析仪上测定85例健康人AChE，参考值为46.6-61.6U/gHb。批内CV2.23%-2.66%，批间CV4.31%-4.78%。灵敏度0.015U/gHb。结论 该法可连续监测，不受溶血和胆红素干扰，适用于临床实验室自动化测定AChE。     

运动后大鼠小脑乙酰胆碱酯酶的动态变化及其对运动调节的作用

目的:通过动态检测运动后大鼠小脑乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AchE)活性,以期探讨胆碱能系统在小脑运动调节中的意义及小脑对运动调节的中枢机理。 方法:39只SD大鼠随机分为5组:对照组,运动力竭即刻组,大负荷运动后6,18,24h各组,采取无负重游泳,分别测定小脑AchE活性。 结果:①力竭组小脑AchE活性(mmol/g)明显升高(0.631±0.088),与对照组(0.480±0.036)相比,差异有显著性意义(t=4.506,P=0.000)。②大负荷运动后18h组小脑AchE活性明显升高(0.714±0.203),与对照组、大负荷运动后6h组(0.578±0.063),24(0.479±0.047)各组相比,显示差异有显著性意义(F=7.749,P=0.000,0.021,0.000)。 结论:①AchE在运动调节中有重要意义。②AchE活性变化与运动负荷相关,力竭运动后出现早,大负荷运动后出现相对较迟。     

库存血红细胞乙酰胆碱酯酶水平变化的观察

目的 :测定不同保存天数库存血红细胞乙酰胆碱酯酶 (AchE)活性 ,观察保存天数与活性水平变化的关系。方法 :随机留取无偿献血者血液 10人 ,血库专用冰箱保存 ,前 3天每隔 12小时测定 ,第 4天起间隔时间为 2 4小时测定。试剂和仪器皆由中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所提供 ,仪器为“舜博———预医”便携式生化测定仪。结果 :随着保存时间的延长AchE水平变化不明显 ,经Hb校正后的AchE　r =0 0 95P >0 0 5 ,无显著性变化。结论 :库存血红细胞随着保存天数的增加 ,AchE活力无显著性变化。在抢救有机磷农药中毒病人时 ,在洗胃、药物综合治疗基础上 ,对chE显著下降病人可采取输注库存红细胞支持疗法     

乙酰胆碱酯酶抑制剂治疗阿尔茨海默病的研究

阿尔茨海默病(Alzheimerdisease,AD)是由神经退化失调引起的一种进行性认知和记忆功能丧失的疾病,目前尚无特异性的有效的治疗手段。乙酰胆碱酯酶抑制剂是治疗AD的研究中最活跃的领域。     

乙酰胆碱酯酶在脂多糖诱导肺泡巨噬细胞中的变化

目的 观察脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激大鼠肺泡巨噬细胞NR8383后乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,ACHE)的表达变化,为研究胆碱能抗炎通路的调控提供新的实验依据.方法 将体外去致热源培养的NR8383细胞分为对照组及LPS(1μg/mL)刺激组,于刺激后3、6、12、24 h各时间点分别离心收集上清液及细胞沉淀,采用酶联免疫吸附法(enzyme-linkedimmunosorbent assay,ELISA)测定上清液中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的变化,实时定量PCR检测细胞中AChE mRNA的表达改变,蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测细胞中AChE蛋白的表达变化,乙酰胆碱酯酶T-CHE测试盒检测上清液中AChE活性的变化.组间多重比较采用单因素方差分析,进一步采用LSD-t检验进行两两比较,P＜0.05为差异具有统计学意义.结果 与对照组相比,TNF-α的含量在LPS刺激NR8383细胞后3h开始显著上升(P＜0.05),12 h达高峰,24 h下降但仍明显高于对照组水平(P＜0.05).与对照组相比,AChE mRNA于刺激后3h开始上升,升高(3.19±0.44)倍(P＜0.05),6h后达高水平并维持于此水平,6、12、24 h分别上调[(5.65±0.63)、(5.40±0.71)、(5.35±0.77)[倍(与对照组相比,均P＜0.05);AChE蛋白的表达及上清液中AChE的活性在LPS刺激后12 h与各自对照组相比均上升[AChE蛋白:(1.37±0.01) vs.(1.05±0.02),P＜0.05; AChE活性:(6.14±1.13) U/mLvs.(2.64±0.85) U/mL,P＜0.05],随后呈下降趋势,于LPS作用24 h时均低于各自对照组[AChE蛋白:0.65±0.05,P＜0.05,AChE活性:(0.56±0.19)U/mL,P＜0.05].结论 LPS刺激大鼠肺泡巨噬细胞后,AChE的表达增加,提示其可能参与肺泡巨噬细胞炎症反应的调控;LPS刺激后24 h,AChE mRNA仍处于高表达水平,AChE蛋白及活性却下降,提示在肺泡巨噬细胞炎症反应中可能存在AChE转录后水平的调控.     

运动后大鼠小脑乙酰胆碱酯酶的动态变化及其对运动调节的作用

目的：通过动态检测运动后大鼠小脑乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase，AchE)活性，以期探讨胆碱能系统在小脑运动调节中的意义及小脑对运动调节的中枢机理。方法：39只SD大鼠随机分为5组：对照组，运动力竭即刻组，大负荷运动后6，18，24h各组，采取无负重游泳，分别测定小脑AchE活性。结果：①力竭组小脑AchE活性(mmol／g)明显升高(0．631&;#177;0．088)，与对照组(0．480&;#177;0．036)相比，差异有显著性意义(t=4．506．P=0.000)。②大负荷运动后18h组小脑AchE活性明显升高[0．714&;#177;0．203)，与对照组、大负荷运动后6h组(0．578&;#177;0．063)，24(0．479&;#177;0．047)各组相比，显示差异有显著性意义(F=7．749，P=0．000，0．021，0．000)。结论：①AchE在运动调节中有重要意义。②AchE活性变化与运动负荷相关，力竭运动后出现早，大负荷运动后出现相对较迟。     

铅对小鼠卵母细胞成熟和体外受精的影响

目的 :探讨铅对小鼠生殖作用的影响。方法 :采用小鼠卵母细胞体外培养、体外受精的方法研究了铅对小鼠卵母细胞的成熟和体外受精的影响。结果 :铅对小鼠卵母细胞生发泡破裂没有影响 ,但可以抑制卵母细胞第一极体的释放 ,影响卵母细胞的存活率并可降低体外受精率和超排卵的卵母细胞数量。随着培养时间的延续 ,卵母细胞的第一极体的释放率和体外受精率都有显著提高。结论 :铅可以破坏卵母细胞减数分裂进行 ,降低卵母细胞的受精能力 ,影响小鼠的正常生殖功能     

己酮可可碱改善血液流变性作用的研究概况

己酮可可碱（PTX）及代谢产物改善全血滤过性，过去认为与改善红细胞变形性有关，现在研究认为可能与改善白细胞的变形性更直接相关。此外还表明，ＰＴＸ不仅能改善血液的流变性，而且还能抑制白介素－Ｉ和肿瘤坏死因子，在机体内起免疫调节作用。     

微波杀菌规律的研究

试验结果表明，在６５０Ｗ微波照射下，杀灭敷料包中枯草杆菌黑色变种芽胞的Ｄ_（１０）值为１．９４分钟。随着微波的功率增大、物品含湿率增高、物品包装密封及与洗必泰协同，均有助于微波的杀菌。枯草杆菌黑色变种芽胞对微波的抗力强于嗜热脂肪杆菌芽胞。     

克大克消毒液抗菌作用的研究

为评价以聚烯烃基胍为杀菌成分的消毒液的抗菌活性 ,应用琼脂打孔扩散和试验稀释法 ,测定了该液对 8种常见细菌的抑菌效果和最小杀菌浓度。结果 ,以含 5 0 0mg/L聚烯烃基胍的消毒液对白色念珠菌和枯草杆菌的抑菌活性较强 ,抑菌圈 >16mm ;对大肠杆菌、伤寒杆菌、金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌、绿脓杆菌及变形杆菌有一定的杀菌作用 ,抑菌圈为 10～ 14mm。测出的该消毒液最低杀菌浓度分别是白色念珠菌为 10 0mg/L ,金黄色葡萄球菌和伤寒杆菌为 2 5 0mg/L ,其它菌为 5 0 0mg/L。结论 ,该消毒液具有广谱的抗菌作用     

TBZ乳胶涂料的防霉试验研究

TBZ乳胶涂料为一新研制的苯丙乳胶墙壁涂料。实验室试验表明,该涂料对青霉、曲霉等9种霉菌的抑菌圈直径>4.0cm者占88.9％。涂料经水淋、紫外线照射和热处理,仍能保持较好的抗霉效果。用于墙壁,4年内无发霉现象。用无防霉剂涂料墙壁,2周后即有霉斑出现。     

升白素治疗白细胞减少症的临床药效学研究

本文通过两种剂型升白素临床药效学研究证明：外用鼻腔给药治疗肿瘤患者因放射、化学疗法引起的白细胞减少症,效果显著,给药后２４小时白细胞即可升高,对血液中其它生指标无影响,无副作用。     

非缺失型HbH病基因突变类型的研究

采用选择性聚合酶链反应扩增技术及等位基因特异寡核苷酸探针斑点杂交，分析了１２例经血液学检测及基因图谱分析确认为非缺失型ＨｂＨ病的样品。结果显示，１２例非缺失型ＨｂＨ病样品中，ＨｂＣｏｎｓｔａｎｔＳｐｒｉｎｇ８例（６６．７％），Ｈｂ广西２例（１６．７％），２例为未知突变类型（１６．７％），对这２例未知样品的α＿２％基因外显子ＩＩＩ及其旁侧的突变热点区域进行了扩增、克隆和测序，结果发现这２例的α＿２基因密码子１２４均有ＴＣＣ→ＴＣＧ突变，其中１例的α＿２基因３＇非编码区第３６位碱基发生Ａ→Ｃ突变。     

不同剂量肾上腺素对心脏骤停者心肺复苏效果的影响(附71例分析)

对71例心脏骤停患者行心肺复苏术的同时，给予三种不同剂量肾上腺素弹丸式静脉注射．结果大剂量肾上腺素组（0．1mg／kg／次）心律恢复率7033％，血压恢复率62．5％，呼吸恢复率41．76％，与中剂量组门．omg／首次～0.1mg／kg／次）相近．显著高于小剂量组（0．5～1．0mg／次，P＜0.05）；大剂量组存活出院率33．33％，明显高于另两组（P＜O．05）、结果提示，在对心脏骤停者进行心肺复苏时，应尽量早期使用大剂量肾上腺素。     

胃窦部病理改变的血液流变学研究

慢性萎缩性胃炎（简称ＣＡＧ）是一常见多发病。目前与胃癌的关系尚未定论。但重度腺体萎缩伴胃粘膜肠化及非典型增生做为癌前表现这一点已被许多学者公认。因此，本文对ＣＡＧ窦部病理改变者进行了血液流变性观察。     

无纺布在灭菌中耐辐射性的研究

试验表明,对维尼纶与涤纶无纺布用25 kGy γ射线照射,其扯断强度、白度与红外光谱无明显改变。用15kGy照射,未检出细菌与真菌。