白血病基因治疗的研究概况

白血病基因治疗的研究概况杜楠（综述）王庆余（审校）关键词白血病基因转移基因治疗中图号Ｒ７３３·７０５Ｒ７３０·５１现代分子生物学研究表明越来越多的白血病特异基因及相关基因已被克隆和分离，这对于其发病机理有了更深的了解。同时，由于基因转移技术的迅速发展...     

RNA干扰在白血病基因治疗中的研究进展

 RNA干扰（RNAi）是双链RNA特异抑制靶基因表达的转录后基因沉默方式，以白血病特异性融合基因和白血病广谱表达的WT1基因为靶标的siRNA治疗是白血病基因治疗的有效方式之一。然而，RNAi应用于临床仍面临许多问题有待解决     

肿瘤的基因治疗途径

肿瘤的基因治疗途径李亮平广州中山医科大学肿瘤研究所（·５１００６０）近十多年来对肿瘤分子生物学的大量研究已确定肿瘤的发生主要是由于癌基因表达失控或抑癌基因失活所致。癌基因和抑癌基因原本是机体正常基因组的一部分，能把生理生化信号从细胞外传入细胞内，在控...     

肿瘤自杀基因疗法的靶细胞

自杀基因疗法是利用转基因方法将自杀基因转导入目的细胞,该基因表达的产物可以将无毒的药物前体转化为毒性药物,从而影响细胞DNA的合成,引起该细胞的死亡。尽管只有一部分细胞转染了自杀基因,但由于其特有的旁观者效应,在一定程度上弥补了载体系统转染率低的缺点,从而提?..     

人核糖核酸酶抑制因子对小鼠B16黑素瘤的基因治疗研究

目的　观察人核糖核酸酶抑制因子(RI)逆转录病毒真核表达载体(p L NCX- ri)对小鼠B16黑素瘤生长的抑制作用。方法　将转染细胞PA317- p L NCX和PA317- p L NCX- ri分别置于DMEM培养基上,经G4 18筛选培养。用Sepharose CL- 4 B凝胶过滤层析纯化病毒颗粒。经G4 18筛选培养,在倒置相差显微镜下计数克隆细胞数。用RT- PCR方法和Western blotting方法检测被感染的NIH3T3细胞及B16黑素瘤组织中RI基因的表达。给接种B16黑素瘤细胞的C5 7BL/ 6 J小鼠分别皮下注射纯化的p L NCX- ri病毒和空载体病毒,观察C5 7BL/ 6 J小鼠肿瘤的生长状况,并对肿瘤组织称重。镜下观察肿瘤组织切片的血管密度。结果　RI在感染了p L NCX- ri病毒的NIH3T3细胞和B16黑素瘤组织中得到有效表达。p L NCX- ri病毒治疗组的瘤组织重量(0 .6 0±0 .2 6 ) g明显低于p L NCX病毒对照组(1.84±1.6 4 ) g(P<0 .0 1)和生理盐水对照组(1.77±1.13) g(P<0 .0 1)。p L NCX病毒对照组(1.84±1.6 4 ) g和生理盐水对照组(1.77±1.13) g无显著性差异(P>0 .0 5 )。与p L NCX病毒对照组和生理盐水对照组相比,p L NCX- ri病毒治疗组肿瘤组织的血管密度明显减少,而两对照组间无明显差异。结论　人核糖核酸酶抑制因子(RI)对小鼠B16黑素瘤的生长有明显的抑制作用     

肿瘤的基因治疗

基因治疗(Gene Therapy)是指在基因水平上对疾病进行治疗,具体讲就是通过基因操作,将正常有功能的基因转入人体内并使之表达,或使有害基因关闭,从而达到治疗的目的。自从1990年9月在美国开展的世界首例腺苷脱氨酶(ADA)缺乏症的4岁女孩的基因治疗获得巨大成功以来,短短不到两年时间,基因治疗这一领域发展迅速,它不仅为遗传病的治疗开拓了广阔的前景,而且也可以应用于肿瘤、传染病及老年性疾病等治     

逆转录病毒介导高效的白血病细胞基因转移

目的建立安全高效的逆转录病毒介导的基因转移系统,为白血病基因治疗提供实验基础。方法分别用脂质体转染和小鼠逆转录病毒转导方法,将含标志基因ＮｅｏＲ的逆转录病毒载体ｐＬＸＳＮ导入双嗜型包装细胞ＧＰ＋ｅｎｖＡｍ１２,获得重组逆转录病毒;用含病毒上清感染白血病细胞系（ＮＢ４、Ｕ９３７和ＴＨＰ－１）,并分析对Ｋ５６２细胞的转导效率。结果脂质体ＤＯＳＰＥＲ转染法获得病毒滴度为８．０×１０５ＣＦＵ／ｍｌ,而病毒感染法高达１．６×１０７ＣＦＵ／ｍｌ。经Ｇ４１８选择,ＰＣＲ证实ＮｅｏＲ基因被整合到白血病细胞基因组中,巢式ＰＣＲ与补救分析均未检测到辅助病毒存在。单个集落Ｋ５６２细胞的ＰＣＲ分析证实,基因转移效率可达９３．３％～１００％。结论逆转录病毒介导的基因转移系统是高效、安全的,有助于人类白血病的基因治疗研究。     

恶性肿瘤的联合基因治疗

恶性肿瘤的联合基因治疗张景迎陈诗书恶性肿瘤基因治疗是指将某些有意义目的基因，通过适宜的基因转移方法导入受体细胞（主要是肿瘤细胞）中，借其表达的产物达到治疗恶性肿瘤的目的。近１０年来，人们在这方面进行了大量动物实验研究，并且开展了一些Ⅰ期或Ⅱ期临床试验...     

受体介导的基因转移与基因治疗

基因治疗成功的关键在于将治疗基因靶向性转移到细胞或组织，受体介导的基因转移能满足此要求，很有发展潜力的基本转移方法。然而，要将这种转移方法用于基因治疗，与转移系统有关的万分的化学特性与物理反应，靶细胞的受体表达水平，DNA配体复合物怎样逃逸溶酶体的降解以及包含在复合物中的外源基因的表达等都是至关重要的。本文综述了受体介导的基因转移的基本原理。DNA配体复合物形成的最佳条件与性质，影响基因转移与表达的各种因素以及近年来国内外受体介导的基因转移用于基因治疗取得的进展。     

骨肉瘤基因治疗的研究进展

目前基因治疗骨肉瘤已取得了一定程度上的进展。现就功能性p53蛋白的导入、p53蛋白衍生物、细胞因子基因、自杀基因、骨钙蛋白启动子的应用等一系列研究在骨肉瘤的基因治疗实验中取得的疗效加以综述，尤其是应用Ad-OC-Ela(OCaPl)在对肺转移骨肉瘤的治疗已经到了临床实验的阶段。     

恶性肿瘤基因治疗的研究进展

由于分子生物学技术的高速发展,基因治疗技术发展的速度比任何领域都快,尤其是肿瘤基因治疗进展更为迅速,走在了基因治疗的前列。在国际批准的100余个基因治疗方案中,肿瘤基因治疗就有70个左右,建     

壳聚糖作为基因治疗载体的可行性研究

背景与目的:壳聚糖作为非病毒性基因载体因其带有阳离子特性,近来受到广泛关注。本课题研究壳聚糖-pDNA微粒性质及转染活性,以探讨其作为基因载体的可行性,为今后进一步研究提供依据。方法:质粒DNA通过转化带有目的基因感受态大肠杆菌JM109扩增,按Qiagen公司操作说明提取质粒DNA;复凝聚法制备壳聚糖-pDNA微粒;透射电镜测定壳聚糖-pDNA微粒形态、粒径;紫外分光光度计测定其负载力、负载率及释药实验;凝胶电泳阻滞实验分析pDNA在微粒中位置;体外基因转染实验评价壳聚糖转染活性。结果:壳聚糖-pDNA微粒多呈球形,直径为100～200nm,平均(138±43)nm,其负载力及负载率分别为(46.8±9.0)%和100%;凝胶电泳阻滞实验证明pDNA被完全包裹在壳聚糖-pDNA微粒内部;壳聚糖-pDNA微粒通过突释和缓释两个过程释放pDNA;壳聚糖能有效转染pEGFP基因并使之表达。结论:壳聚糖能有效转染DNA进入哺乳细胞中,能持续释放DNA并使之稳定表达。因此壳聚糖是一种有效的基因治疗载体。     

白细胞介素6基因转染的白血病细胞体内抗白血病浸润…

应用白细胞介素６基因转染的高分泌ＩＬ－６的ＦＢＬ－３红白血病克隆株体外扩增后，接种至Ｃ５７ＢＬ／６小鼠，通过动态常规病理检查，观察了ＩＬ－６基因转染的高分泌ＩＬ－６的ＦＢＬ－３细胞体内抗白血病细胞浸润的作用。     

抑癌基因p16INK4a与p53抑制白血病细胞株生长作用的比较

目的比较野生型p16INK4a、p53抑癌基因的表达对白血病细胞株K562和HL60的生长抑制。方法采用脂质体介导野生型p16INK4a、p53抑癌基因转染K562、HL60细胞并进行G418筛选,免疫印渍检测p16INK4a、p53基因的表达,通过细胞生长曲线检测细胞活力,流式细胞仪进行细胞DNA周期分析及细胞凋亡分析,采用联苯胺氧化试验检测K562细胞的分化。结果转染后p53、p16INK4a在K562及HL60细胞中表达;与对照细胞相比,实验组细胞生长受到明显的抑制,G1期细胞数增加,S期细胞减少。与p16INK4a相比,抑癌基因p53使细胞表达Annexin V增加,显示出更强的致凋亡现象,尤其在HL60细胞株。结论抑癌基因p16INK4a、p53能有效抑制白血病细胞株的生长,可能更适合复发、难治性白血病的基因治疗。     

肿瘤基因治疗前景

肿瘤基因治疗前景上海医科大学（２０００３２）孔宪寿癌症发生的分子基础是原癌基因的活化或（和）抑癌基因的失活或缺失，导致某些细胞分化不良和增植失控而形成肿瘤，因此癌症是一类基因异常所致的疾病。对癌症的根本治疗途径为基因治疗（ｇｅｎｅｔｈｅｒａｐｙ）。基...     

抑癌基因p16INK4a与p53抑制白血病细胞株生长作用的比较

 目的 比较野生型p16INK4a、p53抑癌基因的表达对白血病细胞株K562和HL60的生长抑制。方法 采用脂质体介导野生型p16INK4a、p53抑癌基因转染K562、HL60细胞并进行G418筛选，免疫印渍检测p16INK4a、p53基因的表达，通过细胞生长曲线检测细胞活力，流式细胞仪进行细胞DNA周期分析及细胞凋亡分析，采用联苯胺氧化试验检测K562细胞的分化。结果 转染后p53、p16INK4a在K562及HL60细胞中表达；与对照细胞相比，实验组细胞生长受到明显的抑制，G1期细胞数增加，S期细胞减少。与p16INK4a相比，抑癌基因p53使细胞表达Annexin V增加，显示出更强的致凋亡现象，尤其在HL60细胞株。结论 抑癌基因p16INK4a、p53能有效抑制白血病细胞株的生长，可能更适合复发、难治性白血病的基因治疗。     

基因治疗的产业化

对国内外基因治疗产业现状及前景作了较为详尽的叙述。     

肿瘤基因治疗的受体细胞研究进展

选择一种理想的受体细胞是关系到基因治疗效果的重要因素。在肿瘤基因治疗众多的受体细胞中，以Ｔ细胞为主的免疫细胞的研究较为深入，某些与之有关的项目已试用于临床；作为一种理想的肿瘤基因转染的受体细胞，人们在增加其数量及提高基因转染效率两方面对造血于细胞开展了研究；此外，肿瘤细胞、巨噬细胞、成纤维细胞、肝细胞等也都是肿瘤基因治疗研究中常用的受体细胞；选择理想的受体细胞、构建高效稳定表达的载体是该方面研究的