虎红平板凝集试验、标准试管凝集试验、酶联免疫吸附方法在布鲁氏菌病中检测的特性及诊断效能

目的 研究虎红平板凝集试验（Rose-Bengal plate agglutination test, RBPT）、标准试管凝集试验（standard tube agglutination test, SAT）、酶联免疫吸附（enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA）方法在布鲁氏菌病中检测的特性及诊断效能。方法 选取兴安盟人民医院2020年3月—2021年5月接诊的且有完整记录的489例疑似布鲁氏菌病患者。以接触史+临床症状+血清学检测/布鲁氏菌分离培养为诊断金标准,分析SAT、RBPT和ELISA对布鲁氏菌病的诊断价值。结果 489例疑似患者确诊阳性183例（37.42%）,而RBPT、ELISA、SAT分别检出阳性234例（47.85%）、148例（30.27%）、195例（39.88%）;RBPT诊断布鲁氏菌病的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确度分别为95.08%、80.39%、74.36%、96.47%、85.89%,ELISA诊断布鲁氏菌病的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确度分别为78.69%、98.69%、97...     

一种改进的微量凝集试验检测布鲁氏菌病抗体

目的通过试管凝集试验(tube agglutination test, SAT)和微量凝集试验(micro tube agglutination test)两种方法的对比,探求一种简便而实用的布鲁菌病检测方法。方法在实验条件完全相同的情况下,以阳性、阴性标准血清为标准,优化微量凝集试验的反应时间、反应温度。选择2016-2018年确诊的布病患者62例作为阳性组,同期健康人群54例作为阴性组,同时进行SAT和微量凝集试验,以SAT结果作为诊断标准,分析微量凝集试验的灵敏度、特异度等指标,以评价结果的准确性。结果确定21个小时反应最优时间,确定反应最佳温度为37℃。两种方法结果差异无统计学意义(t=0.405,P0.05)。微量凝集试验的灵敏度为96.77%、特异度为100.00%,约登指数为0.967 7、Kappa值为0.84。结论 SAT和微量凝集试验结果一致,而且微量凝集试验更简便、节约试验原材料。因此,微量凝集试验更适合在基层布鲁菌病大量样本检测、诊断中推广应用。     

布鲁氏菌病3种检测方法的比较分析

目的分析虎红平板凝集试验(Rose-Bengal Plate Test,RBT)、试管凝集试验(Standard-tube Agglutination Test,SAT)和酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay,ELISA)在布鲁氏菌病(简称布病)中的检测结果,客观评价3种方法在布病检测中的意义。方法同时采用虎红平板凝集试验(RBT)、试管凝集试验(SAT)及酶联免疫吸附试验(ELISA:IgG,IgM) 3种方法对内蒙古自治区综合疾病预防控制中心门诊部收集的1 000份样本进行血清学检测并比较分析。结果 3种方法的检测结果为:RBT阳性169份,SAT阳性143份,IgG阳性345份,IgM阳性361份。以SAT作为布病诊断的金标准对其他3种方法进行对比分析,SAT和RBPT差异有统计学意义(χ~2=19.53,P 0.05);SAT和IgG差异有统计学意义(χ~2=159.39,P 0.05);SAT和IgM差异有统计学意义(χ~2=160.55,P 0.05)。RBT与SAT相比:灵敏度97.90%(140/143)、特异度96.62%(828/857)。IgG和SAT相比:灵敏度81.12%(116/143)、特异度73.28%(628/857)。IgM和SAT相比:灵敏度72.73%(104/143)、特异度70.01%(600/857)。结论RBT的灵敏度和特异度均在95%以上,IgG有相对较高的灵敏度和特异度,灵敏度也高于IgM。因此,RBT适合于布病的大面积筛查,再使用较稳定的SAT进行确诊,这对布病的早期诊断有重要的意义。     

楚雄市首起布鲁氏菌病疫情流行病学调查分析

目的调查楚雄市首起布鲁氏菌病疫情感染来源和传播危险因素。方法采用现场流行病学和血清学检测方法进行调查。结果采集重点人群血清样品12份,试管凝集试验(serum agglutination test,SAT)阳性2份,阳性率16.67%;急性感染病例1例,隐性感染病例1例;采集139份羊血清样品,虎红平板凝集试验(rose Bengal plate agglutination test,RBPT)均为阴性,其中13份可疑羊血清样品经试管凝集试验(SAT)复检为阴性。结论楚雄市发生首起人间布鲁氏菌病散发疫情,建议开展多方面多因素的调查,进一步明确感染来源和传播危险因素。     

2009—2021年河南县布鲁菌病流行病学调查结果分析

目的 对2009—2021年河南县布鲁菌病(简称“布病”)监测结果进行分析，为制定有效防控措施提供数据支持。方法 采用虎红平板凝集试验(rose-bengal plate agglutination test, RBT)和试管凝集试验(standard tube agglutination test, SAT)方法，实验结果结合流行病学个案调查确定患病病例，数据使用Excel 2007软件录入，采用描述性流行病学方法分析流行特征。结果 确诊布病病例71例，患病率为1.41%,男性31例，女性40例，男女比例为0.78∶1。年龄最小为15岁，最大为77岁，>15～55岁年龄组病例数最多为69例；民族为藏族；职业为牧民。结论 青海省布病流行仍是小范围、点状、分散发生，相关部门需建立“群防、群治”机制，才能遏制布病疫情的回升趋势。     

5种血清学布鲁杆菌病检测方法在现场调查中的效果评估

目的布鲁氏菌病(以下简称布病)5种血清学检测方法对青海省三江源地区6 310份人血清进行检测,通过几种方法的对比制定现场调查中最有效、最实用的血清学检测方案。方法以虎红平板凝集试验(RBPT)对三江源地区样本进行布病血清学抗体检测,对RBPT阳性血清进行其它4种试验的检测,分别为试管凝集试验(SAT)、抗人球蛋白试验(Coomb's)、补体结合试验(CFT)、酶联免疫吸附试验(ELISA)。结果用RBPT方法作为筛查方法对6310份血清进行现场检测,阳性结果为141份,对这141份RBPT阳性血清进行其它4种试验的检测。SAT与ELISA对比,阳性符合率为90.32%、阴性符合率为62.72%、总符合率为68.79%,差异有统计学意义(χ2=29.88,P﹤0.01),ELISA方法的灵敏度为90.32%、特异度为62.73%、约登指数为0.559。SAT与CFT对比阳性符合率为61.29%、阴性符合率为90.91%、总符合率为84.40%,两种血清学试验方法差异无统计学意义(χ2=0.045,P0.05)。结论目前还没有能用某一种血清学试验方法检测出不同时期出现的抗布鲁氏菌抗体,为能够减少漏检率,建议多种方法联合使用。     

胶体金法在内蒙古布鲁氏菌病病区的试验

目的评价胶体金法在内蒙古布鲁氏菌病监测地区的现场应用效果。方法选择内蒙古布鲁氏菌病监测地区重点人群,采用虎红平板凝集试验（RBPT）、试管凝集试验（SAT）和胶体金法进行检测,并对血清学结果进行对比分析。结果共检测1088份疑似布病患者血清,在RBPT、SAT检测均为阳性的645例中胶体金法检测为阳性的483例、阴性162例,吻合率为74。8％;在RBPT、SAT检测均为阴性或达不到布病诊断标准的443例中胶体金法检测为阳性的11例,假阳性率为2．5％。结论布鲁氏菌抗体检测试剂（胶体金法）检测布鲁氏菌病与RBPT和SAT检出的阳性布病患者的吻合率不高,该试剂的推广使用价值还需更多实验数据进一步支持。     

布鲁氏菌病实验室初筛阳性而确认实验阴性标本的分析

目的了解平顶山市2011-2013年布鲁氏菌病(简称布病)高危人群血清学筛查中初筛假阳性的现状,指导今后布病实验室检测工作。方法采用虎红平板凝集试验(Rose Bengal Plane Test,RBPT)进行初筛,阳性标本再进行试管凝集试验(Standard Tube Agglutination Test,SAT)确诊。结果 33份标本为RBPT初筛阳性SAT确认阴性,假阳性比例为40.24%。各年度间和不同人群间的假阳性比例差异均无统计学意义(χ2年度=0.89,P=0.64;χ2性别=0.46,P=0.50;χ2年龄=0.94,P=0.63;χ2职业=2.52,P=0.47;χ2民族=1.71,P=0.19)。对其中21份低滴度进行回顾性SAT检测,有2份转阳。结论要对RBPT阳性而SAT阴性的标本进行回顾性检测,进一步规范布病实验室检测,减少漏诊。     

布鲁杆菌感染血清学与细菌学检测结果的比较

目的 通过比较琥红平板试验(RBPT)、布病试管凝集试验(SAT)和血培养检测布鲁杆菌结果,探讨3种方法对布鲁杆菌病的诊断效率.方法 按照试剂操作说明和实验室标准操作规程对163例确诊的布鲁杆菌感染患者血标本采用3种试验方法进行测定.结果 163例标本血培养均为阳性;SAT法161例阳性,2例阴性;RBPT法156例阳性,7例阴性.3种方法对布鲁杆菌的检出率间差异无统计学意义(P>0.05).结论 3种方法相互结合,可以提高布鲁杆菌检出率.     

酶联免疫吸附试验(ELISA)在诊断布鲁氏菌病的应用

我们以布鲁氏菌感染者血清,慢性布病病人血清及健康人血清和作布鲁氏菌病病人血清为对象,做酶联免疫吸附试验(ELISA),试管凝集试验(Standard tube aggluti nation test(SAT),抗人球旦白试验(Anti human globuin test(AGT)虎红平板凝集试验(Rose bengal plate test(RBPT)比较其敏感性和特异性,探讨ELISA在诊断布鲁氏菌病上的应用价值,现将结果报告如下:     

2008年四川省阿坝州布鲁杆菌病调查结果分析

目的了解四川省阿坝州布鲁杆菌病(简称布病)感染状况,分析感染来源和传播途径。方法按全国布病监测方案要求,对重点人群进行流行病学调查和血清学检查(试管凝集试验SAT、平板凝集试验PAT);对牦牛、绵羊血清用SAT试验、虎红平板凝集试验(RBPT)进行检测。结果2008年阿坝州发现人间布病9例,男性2人,女性7人;流行病学调查430人,人血清530份,阳性13人,检出率为2.45%(13/530)。共检疫牛羊5801头,阳性182头,检出率3.13%(182/5801);其中牛5.00%(146/2922)、羊1.25%(36/2879)。结论阿坝州人畜间布病疫情呈上升趋势,主要原因是牛羊进行检疫、免疫力度不够,病畜作为传染源长期存在,牧民群众缺乏布病自我防护意识。     

布鲁氏菌病血清试管凝集试验前带现象的产生及其对策

目的布鲁氏菌病特异性血清凝集试验(serum agglutination test,SAT)的前带现象,是影响急、慢性期布病患者的诊断的重要干扰因素,常造成假阴性结果而延误病情的治疗。因此我们对布鲁氏菌病特异性SAT检测是否存在前带现象及其程度进行了探讨,为进一步有针对性的寻找清除的方法提供依据。方法按照《布鲁氏菌病诊断标准》(WS269-2007),对5 838人份血清,先用琥红平板做初筛试验,对筛查出的阳性者,用SAT检测进行确诊试验。结果共诊断出布病患者359例,并且26例患者的SAT出现前带现象,占总病例数的6.15%。结论布鲁氏菌病特异性SAT检测存在前带现象,在日常检测中血清稀释倍数要达到1:400以上,防止假阴性结果的发生。     

随州市羊种3型布鲁氏菌首发病例的病原学检测

目的分离和鉴定布鲁氏菌,为病例的诊断、治疗及疫情的控制提供科学依据。方法虎红平板凝集试验（RBPT）、试管凝集试验（SAT）、酶联免疫吸附试验（ELISA）检测病人血清中特异性抗体,用血清凝集试验、噬菌体试验、PCR试验法对菌株进行分型鉴定。结果虎红平板凝集试验出现絮状抗原抗体结合物100%凝集为阳性;试管凝集试验结果为阳性1：200（＋＋＋）;发病期血清IgM抗体阳性、IgG阴性;M5布鲁氏菌疫苗株和病人菌株提取的基因组进行扩增和电泳,均在223和731bp附近出现阳性条带,而711、976和285 bp处无条带,说明该病人分离出的菌株为布鲁氏菌属羊种布鲁氏菌;经CO2、硫化氢、染料抑菌、菌株表面抗原凝集、噬菌体裂解试验,鉴定该菌株为羊种3型。结论随州市布病首发病例病原体为羊种3型布鲁氏菌,应加强布病监测,采用RBPT、SAT、ELISA、PCR等方法可快速检测病原体,为临床诊断、疫情控制提供依据。     

长治市2014年布鲁杆菌病血清学检测结果分析

目的：：了解我市布病疫情流行特征,为防治工作提供科学依据。方法：检测对象为来自全市13个县市区布病就诊患者、可疑病例排查者,采集患者静脉血5 mL,采用血清琥红平板凝集试验(RBPT)和试管凝集试验(SAT)检测。结果：检测标本473份,阳性109份,阳性率为23.04%。其中男性阳性率为30.00%,女性阳性率为9.82%。男∶女=5.81∶1;45~59岁年龄组阳性率最高,为26.04%。职业分布以养羊养殖户人群检出率最高,达60.42%;地区分布以襄垣、平顺较高,分别为37.50%、36.36%。结论：长治市布病疫情持续不断,呈现散发、多发趋势。实验室接受各类检测样本数量逐年增高,但无局部爆发疫情发生。故做好布病散发疫情的防治是我市现阶段布病防控工作的关键。     

慢性布鲁氏菌病内科血清学实验检出率的比较

青海是个布病的老疫区,经过人、畜间的防治,已控制了暴发流行,急性患者少见,慢性期布病患者大量存在。过去对慢性期布病的诊断主要依靠临床症状和皮内变态反应。而试管凝集试验(SAT)阳性率很低,不能为临床诊断慢性布病提供客观依据。为此,我们在布病疫区平行地做了 SAT,半胱氨酸试验,Coombs 试验及虎红平板反应(RBPT),对照临床     

2007-2011年宁夏红寺堡区高危人群布鲁氏杆菌病监测结果分析

目的 为了解红寺堡地区布鲁杆菌病高危人群感染率及其相关因素.方法 对高危人群采取填写问卷调查,有临床症状和体征的人员做虎红平板试验(RBPT)和试管凝集试验(SAT),SAT以滴度≥1∶100为阳性,按照布鲁氏菌病诊断标准(WS269-2007)进行诊断.结果 5年共血清学检测3 823人,检出RBPT阳性532人,SAT滴度≥1∶100 为473人,阳性率为13.92%.确诊布病473例,总患病率12.37%.患者分布在4个乡镇33个村,男女性别比为2.67∶1;时间集中在3～5月份,占56.45%(267/473);直接接触病死(流产)羊羔感染的占80.42%(380/473),家庭中多发病例增加是当前布病暴发流行的一个突出特点,占17.34%(82/473);患者同时具有3种以上临床症状和体征,占53.70%(254/473).结论 本地区高危人群布病患病率较高,疫情流行蔓延速度快,临床症状典型,应采取综合防治措施,有效降低发病率.     

2009年宁夏红寺堡开发区人间布鲁氏菌病流行病学调查及危险因素分析

目的 了解宁夏红寺堡开发区布鲁氏菌病(简称布病)的流行规律及特征.方法 采用多阶段抽样方法对宁夏红寺堡开发区7岁以上布病重点人群进行入户流行病学调查,并采集血样,采用虎红平板凝集试验(RBPT)和试管凝集试验(SAT)进行实验室血清学检测.按照<布鲁氏菌病诊断标准>(WS269-2007)诊断病例.结果 共调重点人群1 267人,收集血样1 267份,血清阳性48例,感染率3.79%,其中确诊39例,患病率为3.08%.性别、民族、亲自接羔、卫生习惯差等因素是重点人群患布病的主要危险因素.结论 红寺堡开发区布病疫情较重,重点职业人群卫生习惯差、防护意识淡薄,应加强对重点人群的宣传教育及行为干预.     

两种凝集法检测布鲁菌病抗体的比较

目的 以试管凝集试验(SAT)结果 为标准,比较虎红平板凝集试验(RBPT)检测布鲁菌病的抗体检测结果 .方法 按照《布鲁菌病诊断标准》(WS269-2007)中规定方法 进行检测.结果 800份血清标本,试管凝集试验检出阳性标本25份,阳性率为3.13%;虎红平板凝集试验检出阳性标本46份,阳性率为5.75%.结论 在实际工作中可以先用虎红平板凝集试验进行筛查,阳性样品再用试管凝集试验复核,以作出准确的判断.     

一例羊种3型布鲁氏菌感染病例的实验室检测分析

目的通过对布鲁氏菌的血清学和病原学检测,为研究布鲁氏菌病的流行特征及防治措施提供实验依据。方法采集一例柳江区疑似布病病例的血液标本进行虎红平板凝聚试验(Rose Bengal Plane Test,RBPT)和试管凝聚试验(Standard Tube Agglutination Test,SAT),采用双相血培养瓶进行血液培养。结果血清RBPT初筛阳性,SAT效价为1∶1 600(++),从血液中分离出1株布鲁氏菌,经鉴定为羊种3型布鲁氏菌。结论该病例为实验室确诊的羊种3型布鲁氏菌感染病例,建议临床上对长期不明原因的发热者及时进行布鲁氏菌血清学检测和血液培养,早发现、早诊断、早治疗。     

布病检验中出现问题的解决方法

在国标GB15988-1995中，关于布病的常用的检验方法有虎红平板凝集试验（RBPT）和试管凝集试验（SAT）。在实际检验工作中，我们发现有许多因素对上述实验都有影响，如血液样品是否经过离心处理，是否进行室温平衡等。在试验过程中生物安全问题也不容忽视。