嘌呤碱(黄嘌呤、次黄嘌呤)的酶法测定

嘌呤碱的测定方法有Klineberg改良法和HPLC法,因操作繁杂,设备昂贵故在临床不能广泛应用,作者探讨了用黄嘌呤氧化酶和过氧化物酶测定嘌呤碱,介绍如下:原理:次黄嘌呤、黄嘌呤在黄嘌呤氧化酶(XOD)作用下分解为尿酸和H_2O_2, H_2O_2在过氧化物酶(POD)作用下与BCMA〔(bis〔3-bis(4-chlorophenyl)-methyl-4-dimethyl-aminophenyl〕amine〕反应产生绿色,在755nm测定吸光度并计算求嘌呤碱的量,对测定有影响的抗坏血酸用抗坏血酸氧化酶预先清除.试剂:1.Good's缓冲液.pH6.5.50mmol/L2.POD溶液.POD及抗坏血酸氧化酶用Good's缓冲液溶解,POD最终浓度20.0unit/ml,抗坏     

Na+/Ca2+交换抑制剂对慢性阻塞性肺疾病患者肺泡巨噬细胞功能的影响

目的观察Na /Ca2 交换抑制剂Benzamil对慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肺泡巨噬细胞(AM)胞浆中游离钙离子(〔Ca2 〕i)浓度及其对生成肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、丙二醛(MDA)的影响。方法采用支气管肺泡灌洗、细胞培养和荧光指示剂的方法,测定36例COPD稳定期患者及36例健康体检者AM内〔Ca2 〕i浓度及其生成的TNF-α和MDA含量。结果1COPD组患者AM内〔Ca2 〕i〔(68.26±7.24)nmol/L〕、TNF-α〔(5.74±0.42)ng/L〕和MDA〔(3.77±0.61)μg/L〕水平均较健康对照组〔分别为(60.61±6.26)nmol/L、(2.06±0.20)ng/L、(1.91±0.19)μg/L〕明显增高(P均<0.01);2给予缺氧后,COPD组AM内〔Ca2 〕i浓度〔(168.34±17.58)nmol/L〕、TNF-α〔(9.67±1.01)ng/L〕和MDA〔(11.21±1.01)μg/L〕水平均较刺激前增高(P均<0.01);3先加Benzamil孵育AM再缺氧,可使胞浆内〔Ca2 〕i浓度〔(129.21±14.33)nmol/L〕、TNF-α〔(6.78±0.52)ng/L〕和MDA〔(8.47±0.79)μg/L〕水平均较单纯缺氧时明显减少(P均<0.01)。结论Benzamil可抑制由缺氧引起AM内〔Ca2 〕i浓度增高及其产生的TNF-α、MDA含量;提示通过调节AM激活可抑制TNF-α、MDA的分泌。     

介绍一种阴道毛滴虫的鞭毛染色方法

用瑞氏染剂及姬氏染剂染阴道毛滴虫,常不易获得满意的鞭毛染色效果,给疾病诊断及寄生虫教学带来困难.我们介绍一种新的鞭毛染色方法,使滴虫的虫体与鞭毛完整清晰可见,介绍如下.一、试剂1.染色液61.54mmol/L 三氯化铁(分析纯)溶液40ml,加无水乙醇20ml,加20g/L 伊红B 水溶     

尿液中高香草酸(HVA)的简易比色测定法

收集24小时尿标本置于含10ml浓盐酸的瓶中,贮存于4℃在一周内进行测定.抽提是在两只50ml提取管中进行,每只测定管和测定空白管各加尿液3ml和H_2O 1.5ml;于每只标准管和标准空白管中加入10m mol/L HVA(在10mmol/L HCl中的)溶液0.01ml和H_2O4.5ml.向所有的各管加6mol/L HCl 0.5ml和NaCl 1g.     

用手工操作和日立726自动分析仪—邻苯三酚红-钼酸盐法测定尿蛋白

测定尿蛋白的方法已有很多报道,然而,这些方法的线性范围和重复性不完全令人满意.本文作者对Fujita等应用邻苯三酚红——钼酸盐与蛋白质显色反应的方法进行了改良.本法是根据颜料与蛋白质在pH2.5条件下相结合,光谱吸收峰由460nm改变为600nm.试剂:①PR溶液(1.5mmol/L):邻苯三酚红(PR)60mg溶于100ml甲醇中.⑦钼酸盐溶液(10mmol/L):钼酸钠(2H_2O)0.24g溶于100ml蒸馏水中.③PR—钼酸盐试剂:丁二酸5.9g,草酸钠0.14g,苯甲酸钠0.5g,溶于900ml重蒸馏水中,加PR溶液40ml,钼酸盐溶液4ml,用0.1mol/LHCl调节pH至2.5.最后用蒸馏水稀释至1000ml.操作:手工操作,分别取尿液标本或1g/L白蛋     

超微量免疫比浊法测定补体C_3

一、材料与方法1.DG-3021酶联免疫检测仪:南京华东电子管厂.2.C_3抗血清:上海生物制品研究所.3.43.5g/L 聚乙二醇溶液:聚乙二醇(PEG6000)4.35g、氟化钠2.1g、氯化钠0.9g,加水至100ml 溶解过滤备用。     

血气分析的理论与临床

一、基本概念 (一)pH、 HCO_3和H_2CO_3:这是血气分析使用的三个主要酸碱平衡指标。pH表示体液的酸碱度,等于〔H~-〕的负对教,即pH=-log〔H~+〕=log1/〔H~+〕。正常血浆pH为7.35～7.45(平均7.40),〔H~+〕为45～35nmo1(毫微克分子)/L,细胞内pH为6.9,〔H~+〕为125nmo1/L_o HCO_3~-代表细胞外液真实碳酸氢根(AB),反映酸碱变化的代谢成分,在代谢性酸碱失衡时HCO_3~-原发性降低或升高。H_2CO_3反映     

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者手术前后血中CRP、TNF-α、IL-8的变化

目的探讨阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者手术前后血中C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-8(IL-8)水平的变化。方法选取67例经多导睡眠监测仪(PSG)证实的重度OS-AHS患者作为研究组,同时以30例与研究对象相匹配的健康人群做对照。用放射免疫法检测血清中TNF-α及IL-8,用乳胶增强免疫比浊法检测血清中CRP。结果术前OSAHS组血清CRP〔(7.01±0.33)mg/L〕、TNF-α〔(1.82±0.36)μg/L〕、IL-8〔(227.18±88.17)ng/L〕水平明显高于对照组〔(2.87±0.21)mg/L、(0.99±0.31)μg/L、(153.23±62.11)ng/L〕(P均<0.05);术后OSAHS组血清CRP〔(3.27±0.33)mg/L〕、TNF-α〔(1.11±0.27)μg/L〕、IL-8〔(149.73±66.12)ng/L〕水平较术前明显下降(P均<0.05),与对照组水平比较差异无统计学意义(P均>0.05)。结论 OSAHS患者术前血清中CRP、TNF-α、IL-8水平失衡,经过鼻持续正压通气及手术治疗后,3种因子水平可下降至正常水平。CRP、TNF-α及IL-8可做为OSAHS诊治的有效指标。     

急性冠脉综合征患者血清C-反应蛋白浓度的变化及意义

目的　研究急性冠脉综合征 (ACS)患者血清C -反应蛋白 (CRP)浓度水平并与对照组比较 ,探讨CRP是否为ACS的一种危险因子。方法　测定ACS患者和对照组血清CRP浓度 ,同时检测冠心病的常见危险因子并与CRP一起做Logis tic回归分析。结果　①ACS患者血清CRP浓度〔(18.5 0± 2 3.98)mg/L(SE 2 .5 1,n =91)〕显著高于对照组〔(3.89± 7.14 )mg/L(SE 0 .5 1,n =194 )〕 (P <0 .0 1)。②急性心肌梗死 (AMI)急性期患者CRP浓度〔(18.6 5± 2 4 .12 )mg/L〕和不稳定型心绞痛(UAP)CRP浓度〔(17.95± 2 4 .10 )mg/L〕显著高于正常对照组、稳定型心绞痛 (SAP)CRP浓度〔(3.94± 7.5 0 )mg/L〕、AMI患者恢复期〔(5 .93± 13.0 7)mg/L〕和陈旧性心肌梗死 (OMI)患者〔(4 .5 7± 8.2 7)mg/L〕(均P <0 .0 1) ;SAP患者、AMI患者恢复期和OMI患者之间CRP浓度无差别 (P >0 .0 5 ) ,并与正常人群比较无显著性差别 (P >0 .0 5 )。③每增加CRP 5mg/L ,ACS发生危险增加到近 2倍 (用Logistic回归 ,OR =1.6 5 ) ,故CRP是ACS一种潜在决定因子。结论　血清CRP浓度升高与ACS有极大的相关性 ,并提出CRP是ACS的一种新的危险因子。     

黄芪对急性脑损伤后大鼠脑组织一氧化氮合酶活性影响的实验研究

目的 :观察黄芪对脑损伤后脑组织一氧化氮合酶 (NOS)活性的影响 ,探讨黄芪对急性颅脑损伤的治疗作用及机制。方法 :建立大鼠脑外伤模型 ,采用化学定量法对大鼠脑外伤后脑组织中 NOS含量进行检测。结果 :大鼠脑皮质中 NOS活性在伤后 0 .5 h〔(46 .4 4± 13.4 5 ) nmol/ L〕较正常对照组 (40 .4 6± 12 .85 ) nm ol/ L明显升高 (P<0 .0 5 ) ,2 h较对照组升高更显著 (P<0 .0 1) ,6 h开始下降 (P<0 .0 1) ,2 4 h降至基础水平〔4 1.2 3±12 .5 7) nm ol/ L〕。黄芪治疗组伤后 2 h〔(6 4 .2 6± 19.78) nmol/ L〕、6 h〔(5 2 .91± 2 1.36 ) nmol/ L〕NOS活性较损伤组明显降低〔分别为 (6 7.4 9± 2 2 .4 5 ) nmol/ L 和 (6 3.4 6± 2 4 .6 8) nmol/ L,P<0 .0 1和 P<0 .0 5〕。结论 :颅脑损伤后 ,受损脑组织中 NOS活性升高 ;黄芪可通过抑制损伤后 NOS活性 ,起到保护创伤神经元的作用     

一氧化氮合酶抑制剂L-精氨酸对创伤性休克大鼠存活率的影响

目的　探讨一氧化氮合酶 (NOS)抑制剂左旋精氨酸 (L Arg)对创伤性休克大鼠存活率的影响。方法　通过外力致大鼠双侧股骨骨折 ,建立创伤性休克模型。复苏时分别给予非选择性 NOS抑制剂 L 硝基精氨酸甲酯 (L NAME) 10 m g/kg、选择性诱导型 NOS(i NOS)抑制剂氨基胍 (AG) 10 0 m g/kg和一氧化氮(NO)合成底物 L Arg10 0 mg/kg;观察给药前后血流动力学及组织氧分压变化 ,并记录存活时间和存活率。结果　与休克对照组〔分别为 (18.78± 4 .6 4 ) h和 10 %〕比较 ,L NAME组大鼠存活时间和 2 4 h存活率均无显著变化〔分别为 (2 3.80± 9.0 9) h和 4 0 % ,P均 >0 .0 5〕;AG组和 L Arg组大鼠存活时间均显著延长〔分别为 (2 8.72± 6 .2 5 ) h和 (30 .6 4± 8.77) h,P均 <0 .0 1〕,2 4 h存活率提高 (均为 80 % ,P均 <0 .0 1)。结论　选择性 i NOS抑制剂 AG及 L Arg对创伤性休克具有保护作用。     

氨甲喋呤治疗急性胰腺炎的实验研究

目的 :观察氨甲喋呤 (MTX)对急性胰腺炎时炎症性细胞因子和抗炎症细胞因子的调节作用 ,探讨氨甲喋呤治疗急性胰腺炎的作用机制。方法 :实验用雄性 SD大鼠随机分为 3组 :1正常对照组 (6只 ) ;2胰腺炎组 (8只 ) :采用开腹胰管注射质量分数为 5 %的牛磺胆酸钠 (1.0 m l/ kg)制备急性胰腺炎模型 ;3氨甲喋呤组(6只 ) :胰腺炎诱导成功后 0 .5小时静注氨甲喋呤 (1.2 m g/ kg)。制模后 2、6和 2 4小时处死动物 ,分别取血查肿瘤坏死因子α(TNFα)、白介素 1(IL 1)、IL 6、IL 10和转移生长因子β(TGFβ)及胰淀粉酶、胰腺湿重、白细胞计数。结果 :急性胰腺炎时血中炎症细胞因子和抗炎症细胞因子均显著升高 ;使用氨甲喋呤治疗后 ,上述细胞因子均下降 ,其中 TNFα、IL 1和 IL 6在 2、6、2 4小时均明显下降 (P均 <0 .0 5 ) ,IL 10和TGFβ在 2 4小时均下降明显 (P均 <0 .0 5 ) ;制模后 2 4小时大鼠胰腺湿重〔(1.5 3± 0 .13) g〕和血淀粉酶含量〔(1817.2 5± 4 5 9.35 ) U/ L〕均较正常对照组〔(0 .5 3± 0 .0 9) g和 (374 .2 0± 92 .84 ) U/ L〕增高 ;经氨甲喋呤治疗后 2 4小时 ,胰腺湿重和淀粉酶均明显下降〔(0 .88± 0 .13) g和 (76 6 .33± 373.37) U / L ,P均 <0 .0 5〕。结论 :氨甲喋呤可以同时抑制急性胰腺炎时     

川芎嗪对脑缺血/再灌注后脑组织肿瘤坏死因子-α含量及髓过氧化物酶活性的影响

目的:观察川芎嗪对大鼠脑缺血/再灌注后脑组织肿瘤坏死因子α(TNFα)含量及髓过氧化物酶(M PO)活性的影响,探讨其对脑缺血/再灌注损伤保护作用的机制。方法:36只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和川芎嗪组。假手术组插入栓线但不阻塞大脑中动脉。模型组制备脑缺血/再灌注损伤模型。川芎嗪组于制模前30 m in腹腔注射川芎嗪注射液33 m g/kg。分别采用放射免疫分析法及分光光度计法测定各组大鼠脑组织缺血/再灌注6 h时TNFα含量及缺血/再灌注24 h时的M PO活性。结果:脑缺血/再灌注大鼠TNFα含量〔(1.576±0.153)μg/L〕及M PO活性〔(0.409±0.044)U/g〕较假手术组〔(0.601±0.089)μg/L和(0.026±0.008)U/g〕均显著升高(P均<0.01);川芎嗪组TNFα含量〔(1.035±0.092)μg/L〕及M PO活性〔(0.293±0.039)U/g〕较模型组均显著降低(P均<0.01)。结论:川芎嗪可通过降低缺血/再灌注后大脑皮质TNFα含量及M PO活性来减轻炎症反应,发挥其脑保护作用。     

血清降钙素原水平检测对系统性红斑狼疮发热鉴别诊断的意义

目的探讨检测血清降钙素原(PCT)水平在系统性红斑狼疮(SLE)发热患者感染与否的判断中的临床意义。方法检测48例伴有发热的SLE住院患者以及同期门诊缓解期SLE患者20例的PCT值、C反应蛋白(CRP)值、红细胞沉降率(ESR)、白细胞计数、免疫球蛋白、补体、24h尿蛋白定量、自身抗体系列、病原学检查等,比较PCT、CRP对诊断非病毒感染的敏感性、特异性,评价其在SLE患者发热的鉴别诊断中的意义。结果 PCT值在非病毒性感染(包括细菌、真菌、结核等)组为(1.95±0.67)μg/L,明显高于病毒感染组〔(0.30±0.11)μg/L,P<0.05〕、非感染组〔(0.13±0.03)μg/L,P<0.05〕及对照组PCT(0.12±0.04)μg/L,P<0.05〕;CRP值在非病毒感染组为(45.7±15.2)mg/L,明显高于病毒感染组〔(10.9±3.2)mg/L,P<0.05〕、非感染组〔(16.7±5.6)mg/L,P<0.05〕及对照组〔(2.80±0.9)mg/L,P<0.05〕;而血清PCT值在病毒感染组、非感染组及对照组之间的差异无统计学意义(P>0.05)。以PCT≥0.5μg/L为诊断非病毒感染的阳性阈值,其诊断敏感性为73.3%,特异性为93.9%;以CRP≥8mg/L为诊断非病毒感染的阳性阈值,其敏感性为86.7%,特异性为45.5%,PCT特异性明显高于CRP(P<0.05)。结论检测血清PCT对SLE患者并发非病毒性感染具有重要鉴别诊断意义。     

新的色原试剂用于血清铁测定

血清铁测定最常用的色原试剂是亚铁嗪〔3-(2-吡啶基)-5,6-双(4-苯磺酸)-1,2,4-三嗪;ferrozine〕。作者采用新的铁铬合剂ferene-S〔3-(2-吡啶基)-5,6-双(2-〔5-呋喃基磺酸〕)-1,2,14-三嗪〕比亚铁嗪的吸收系数大约高25%。这种新方法既可用手工操作也可用RA-1000分析仪或其它仪器测定。材料及方法:醋酸盐缓冲液。取60ml 醋酸、60g 无水醋酸钠、16g 盐酸羟胺、2ml Triton X—405,70mg neocuproine,加蒸馏水溶解后至1升,     

硫酸葡聚糖—MgCl_2沉定技术测定血清中HDL及其亚类

沉淀法测定血清HDL 及其亚类(HDL_2相HDL_3),方法简便,已广泛应用。本文介绍一个简便的方法:在恒定的硫酸葡聚糖(DS)浓度下,用二种不同浓度的MgCl_2分离HDL 及其亚类,然后用酶法测定分离组分的胆固醇(C)含量。试剂:2%DS 溶液:2g DS50000溶于含5.0mgNaN_3,50mg 硫酸庆大霉素和0.1g 氯霉素的去离子水中,校准pH 值7.0,加水到100ml.MgCl_2溶液(0.6ml/L 和3.0ml/L)用去离子水     

血浆血管紧张素原在动脉粥样硬化性血栓性脑梗死发病中的变化及意义

目的 :探讨血浆血管紧张素原 (ATG)在动脉粥样硬化性血栓性脑梗死 (ACI)发病中的变化及意义。方法 :对 5 7例 ACI患者和 32例健康对照者以放射免疫法测定血浆 ATG和血管紧张素 (AT )浓度。结果 :ACI患者急性期血浆 ATG浓度为 (194.47± 43.83) ng/ L ,显著高于恢复期〔(16 3.45± 42 .6 4) ng/ L〕及健康对照者〔(15 9.34± 45 .2 4) ng/ L〕;重型者为 (2 36 .91± 48.5 3) ng/ L ,显著高于轻型者〔(173.84± 33.87) ng/ L〕;而血浆 ATG浓度与是否伴高血压以及病变部位无关 ;血浆 ATG浓度变化与 AT 浓度变化呈直线正相关。结论 :脑梗死可致血浆 ATG浓度应激性升高 ,可能与缺血性脑损伤程度有关     

用CPDA-1、CPDA-2、或CPDA-3抗凝在4℃贮存35天的红细胞浓缩物经生化改良,在原先的聚氯乙烯塑料收集袋中用40%(w/v)甘油于-80℃冰冻贮存

本文报告了用CPDA-1、CPDA-2或CPDA-3(CPDA-1保存液每升含枸橼酸钠(2H_2O)26.30g、构橼酸(H_2O)3.27g、磷酸二氢钠(H_2O)2.22g、葡萄糖(H_2O)31.9g、腺嘌呤0.27g。CPDA-2保存液中葡萄糖44.6g、腺嘌呤0.54g。CPDA-3中葡萄糖(H_2O)51.0g、腺嘌呤0.54g,其余成份同CPDA-1。——译者注)抗凝的血比积85土5%的红细胞浓缩物(RCC)4℃贮存35天后,再用含有100mM/l丙酮酸盐、100mM/l次黄嘌呤核苷、100mM/l磷酸氢二钠和5mM/l腺嘌呤的溶液50ml进行生化处理,以增加红细胞在液态保存时2,3-DPG和ATP的浓度。经生化改良后的红细胞在原先的聚氯乙烯塑料收集袋中用40%(w/v)甘油置-80℃冰冻贮存。大     

各种污染对象的常用消毒方法(试行)

1.地面、墙壁、门窗:用0.2％～0.5％过氧乙酸溶液或500mg/L～1000mg/L二溴海因溶液或1000mg/L～2000mg/L有效氧含氯消毒剂溶液喷雾。泥土墙吸液量为150 ml/m~2～300 ml/m~2,水泥墙、木板墙、石灰墙为100 ml/m~2。对上述各种墙壁的喷洒消毒剂溶液不宜超过其吸液量。地面消毒先由外向内喷雾一次,喷药量为200 ml/m~2～300ml/m~2,待室内消毒完毕后,再由内向外重复喷雾一次。以上消毒处理,作用时间应不少于60min。 2.空气:房屋经密闭后,每立方米用15％过氧乙酸溶液7 ml(1g/m~3),放置瓷或玻璃器皿中加热蒸发,熏蒸2 h,即可开门窗通风。或以2％过氧乙酸溶液(8ml/m~3)气溶胶喷雾消毒,作用30min～60min。     

生长抑素在急性粘连性肠梗阻中的应用

目的探讨生长抑素在急性粘连性肠梗阻治疗中的临床应用和疗效。方法将急性粘连性肠梗阻患者80例机分为常规治疗组和生长抑素治疗组各40例,2组患者入院时均采用非手术治疗,生长抑素治疗组在常规治疗基础上加用生长抑素(250μg/h持续静脉滴注2～5d)。2组患者治疗过程中出现手术指征则立即手术。结果生长抑素治疗组与常规治疗组相比,腹痛、腹胀缓解时间缩短〔(2.7±0.9)dvs(3.9±1.1)d,P<0.05〕,肛门排气时间提前〔(3.60±0.77)dvs(5.30±0.97)d,P<0.05〕,胃肠减压引流量减少〔(424.75±55.52)ml/dvs(602.95±108.07)ml/d,P<0.05〕,手术比率减低〔12.5%vs45.0%,P<0.05〕,平均住院日缩短〔(7.3±1.3)dvs(10.3±2.0)d,P<0.05〕。结论在常规治疗基础上加用生长抑素治疗急性粘连性肠梗阻可有效缓解症状,减少患者手术的比率,缩短平均住院日。