GPVI与湖北地区汉族人群冠状动脉疾病发生风险的关联研究

目的:冠状动脉疾病(CAD)是威胁人类健康的主要疾病之一。血小板的活化及其与细胞外基质的粘附在CAD的发生、发展中发挥重要的作用。GPVI基因编码的GPα2β1是一种血小板膜蛋白,通过Ca2+离子通道传导信号引起血小板聚集而形成血栓。湖北地区汉族人群中关于CAD易感基因的分子特征尚不明确。因此,我们开展了编码GPα2β1血小板膜蛋白的GPVI基因与CAD易感性的相关研究。方法:将102例CAD患者GPVI基因的启动子区、外显子区、剪切区及非翻译区进行重测序,查找引起CAD的致病突变;采用病例-对照研究评价c.940CG(p.Pro314Ala)突变对CAD发生风险的优势比;并用生物信息学工具评价c.430GA(p.Ala144Thr),c.655CT(p.Pro219Ser),c.940CG(p.Pro314Ala)突变的危害性。结果:本研究发现,GPVI c.940CG(p.Pro314Ala)与CAD不存在明显的相关性(OR=0.984,95%CI 0.746-1.298,P=0.908 94)。结论:本研究发现存在于湖北地区汉族人群中GPVI基因突变体c.940CG(p.Pro314Ala)可能不是导致CAD患病风险增加的遗传学因素。     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ2基因Pro12→Ala可能是我国汉族人2型糖尿病的保护性等位基因

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ2(PPARγ2)基因的Pro12→Ala多态性与2型糖尿病(T2DM)的相关性。方法利用聚合酶链反应限制性片段长度多态性技术分析了270例T2DM病人、200例非T2DM对照者的PPARγ2基因的Pro12→Ala多态性。结果对照组的Ala等位基因频率为6.75%,T2DM组为3.7%,对照组显著高于T2DM组(P=0.034)。在T2DM组中,具有Ala等位基因人群的空腹血糖和甘油三酯均显著低于无Ala等位基因人群(均P<0.05)。结论PPARγ2基因Pro12→Ala的多态性(Ala等位基因)可能是抑制T2DM发病的保护性因子;对胰岛素抵抗有一定的改善作用。     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ2基因Pro^12→Ala可能是我国汉族人2型糖尿病的保护性等位基因

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ2(PPARγ2)基因的Pro12 →Ala多态性与2型糖尿病(T2DM)的相关性. 方法利用聚合酶链反应限制性片段长度多态性技术分析了270例T2DM病人、200例非T2DM对照者的PPARγ2基因的Pro12 →Ala多态性. 结果对照组的Ala等位基因频率为6.75%,T2DM组为3.7%,对照组显著高于T2DM组(P=0.034).在T2DM组中,具有Ala等位基因人群的空腹血糖和甘油三酯均显著低于无Ala等位基因人群(均P<0.05). 结论 PPARγ2基因Pro12→Ala的多态性(Ala等位基因)可能是抑制T2DM发病的保护性因子;对胰岛素抵抗有一定的改善作用.     

基于高通量转录组测序探究儿童支气管哮喘发病的新途径

目的探究支气管哮喘患儿的转录组变化。方法共招募9名哮喘患儿以及9名健康儿童作为研究对象,并将该18名儿童的外周血样本进行RNA测序分析。进行基因富集分析以鉴定受差异表达基因影响的途径。在另外单独招募的20例哮喘儿童及20例健康儿童中,通过定量RT-PCR(qRT-PCR),western印迹验证靶基因的变化。结果共有592个基因在实验组中差异表达。在实验组中差异表达基因主要富集于炎症相关反应,例如CSF3、IL-1b,IL-6。KEGG通路分析证实,上调的基因参与炎症途径,如NF-KB和AGE-RAGE。在氧化应激途径中通过实验验证了两个具有显著意义的基因(FRA1和PTX3)。结论本研究为哮喘患儿外周血样本的转录组测序分析提供了新的研究方向。而鉴定的差异表达基因与氧化应激的关系,能够进一步揭示诱发支气管哮喘的新途径。     

支气管哮喘患儿血清mir-98-5p及IL-13的表达水平及临床意义

目的探讨支气管哮喘患儿血清中mir-98-5p及IL-13的表达水平及临床意义。方法选取在我院确诊的支气管哮喘患儿60例为研究对象,其中哮喘急性期患儿30例,哮喘缓解期患儿30例;另选进行健康体检的健康儿童30例作为健康对照组。采集患儿及健康儿童清晨空腹静脉血检测血清miR-98-5p与IL-13的表达水平。结果支气管哮喘患儿血清IL-13水平显著高于健康对照组儿童(P0.01),哮喘急性期患儿血清IL-13水平显著高于哮喘缓解期患儿(P0.01)。支气管哮喘患儿血清miR-98-5p水平显著低于健康对照组儿童(P0.01),哮喘急性期组患儿血清miR-98-5p水平显著低于哮喘缓解期患儿(P0.01)。在哮喘急性期患儿中,中度组与重度组患儿血清IL-13水平显著高于轻度组患儿(P0.05),重度组显著高于中度组(P0.05);中度组与重度组患儿血清miR-98-5p水平均显著低于轻度组患儿(P0.05),重度组显著低于中度组(P0.05)。支气管哮喘患儿血清miR-98-5p的表达与IL-13的表达水平呈负相关(r=-0.863,P0.05)。结论支气管哮喘患儿血清miR-98-5p表达与IL-13的表达水平呈负相关,IL-13的过度分泌在哮喘的发病中起重要作用,miR-98-5p、IL-13的表达水平与患儿哮喘发病的严重程度有关,miR-98-5p可能会通过影响IL-13的表达水平而影响支气管哮喘的发生发展。     

结核分枝杆菌对左氧氟沙星与莫西沙星的交叉耐药性及gyrA和gyrB基因突变分析

目的研究结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)对左氧氟沙星(levofloxacin,LVF)与莫西沙星(moxifloxacin,MXF)的交叉耐药性,分析gyrA和gyrB基因突变位点分布及突变位点与耐药水平的关系。方法采用改良罗氏培养基检测MTB标准菌株H37Rv、66株LVF耐药和55株LVF敏感的MTB临床分离菌株LVF和MXF的最低抑菌浓度(minimal inhibition concentra-tion,MIC)。通过PCR直接测序法测定gyrA和gyrB耐药基因片段。结果 MXF的MIC比LVF低2~4倍,MXF抗MTB菌株的活性是LVF的2~4倍。MTB标准菌株H37Rv未见gyrA和gyrB基因突变。66株LVF耐药和55株LVF敏感菌株均存在gyrA AGC95ACC(Ser→Thr)突变;55株LVF敏感菌株gyrA和gyrB基因未见其他突变。66株LVF耐药菌株中,40株(60.6%)gyrAGAC94(AAC或GGC或GCC或CAC或TAC)(Asp→Asn或Gly或Ala或His或Tyr)突变;19株(28.8%)gyrA GCG90GTG(Ala→Val)和1株(1.5%)gyrA GCG90AAG(Ala→Lys)(未见报导)双碱基突变;3株(4.6%)gyrA TCG91CCG(Ser→Pro)突变;1株(1.5%)gyrB GAC500AAC(Asp→Asn)突变;2株(3.0%)呈gyrA GAC94(AAC或GCC)(Asp→Asn或Ala)与gyrB GGG551AGG(Gly→Arg)(未见报导)双位点突变。gyrA GAC94(AAC或GGC)(Asp→Asn或Gly)突变引起FQs药物较高水平耐药;GAC94GCC(Asp→Ala)和GCG90GTG(Ala→Val)突变引起FQs药物较低水平耐药。结论 LVF与MXF之间存在交叉耐药,MXF MIC随LVF MIC增高而增高,但耐药水平不同。GyrA基因突变位点可能与耐药水平有关,有可能根据基因突变的位点分析耐药水平。     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ2基因Pro-12Ala多态性与代谢综合征的相关性研究

目的旨在探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ2（PPARγ2）基因Pro12Ala多态性对β细胞功能储备、胰岛素抵抗作用及与代谢综合征的相关性.方法随机选取湖北地区无亲缘关系的新诊断的2型糖尿病汉族人289例,其中伴高血压病组（HTD）132例,血压正常组（NTD）157例.应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术,进行基因突变检测.结果（1）湖北地区汉族人群体中2型糖尿病Ala12携带者（和Ala/Ala基因型）及Ala12等位基因频率分别为0.042;0.015,与正常人群没有差异;本研究中PPARγ2 Pro12Ala与2型糖尿病患者性别、年龄、体重指数、血脂谱无相关性.（2）PPARγ2Pro12Ala多态性与2型糖尿病的高血压呈负相关.（3）在HTD组中PPARγ2Pro12Ala与保护β细胞对葡萄糖刺激胰岛素分泌反应（P＜0.05）、减少胰岛素抵抗有关（P＜0.05）.结论PPARγ2基因是2型糖尿病、高血压病的重要遗传因素,PPARγ2基因负性突变是2型糖尿病和胰岛素抵抗相关疾病的保护因素.     

支气管哮喘患儿血清IgE和TNF-α检测的临床意义

目的 探讨支气管哮喘患儿血清IgE和TNF-α检测的临床意义.方法 观察32例支气管哮喘急性发作期患儿治疗前后血清IgE和TNF-α的动态变化,并与28例正常健康儿童进行比较.结果 哮喘发作期患儿血清IgE和TNF-α含量均明显高于对照组(P＜0.01);哮喘症状明显缓解后14 d患儿IgE和TNF-α含量较哮喘发作期明显下降(P＜0.01),但仍较对照组高(P ＜0.05);TNF-α与IgE含量呈正相关(r=0.597,P＜0.01).结论 临床检测IgE和TNF-α含量可作为判断支气管哮喘病情严重程度和治疗效果的重要指标.     

TLR4和TNF-α基因多态性与支气管哮喘的相关性研究

目的探讨Toll样受体4和肿瘤坏死因子-α基因多态性与支气管哮喘的关系。方法采用病例对照研究和PCR-DNA测序的方法,检测50例支气管哮喘患者和30例对照组的TLR4的Asp299Gly和TNF-308的基因多态性。结果 （1）在支气管哮喘和健康对照组间,未发现TLR4Asp299Gly突变型。（2）支气管哮喘和正常对照组间未发现存在TNF-308G-A替换多态性。结论 （1）TLR4Asp299Gly基因多态性与支气管哮喘的易感性不相关,TNF-α基因多态性与支气管哮喘的易感性无相关性。     

TIM-3-574G>T基因多态性与中国汉族人群支气管哮喘的相关性分析

目的采用Meta分析评价T细胞免疫球蛋白黏蛋白域蛋白-3(TIM-3)-574 G>T(rs10515746)基因多态性与中国汉族人群支气管哮喘易感性的关系。 方法检索中外文献数据库中TIM-3-574 G>T基因多态性与中国汉族人群支气管哮喘易感性关系的病例对照研究，末次检索时间为2017年12月20日。采用RevMan 5.0对TIM-3-574 G>T基因多态性与哮喘易感的显性模型OR值进行合并、敏感性分析和亚组分析，以及采用Stata对纳入文献的发表偏倚情况进行评估。 结果共纳入5篇文献，其中病例组患者1 241例，对照组患者1 005例。Meta分析显示中国汉族人中TIM-3-574 G>T基因上突变型GT者的支气管哮喘发病风险较野生型纯合子GG者增加3.06倍(OR＝4.06，95%CI：2.34，7.05)，携带突变基因T者患支气管哮喘的风险比携带野生型G基因者增加3.31倍(OR＝4.31，95%CI：2.50，7.43)。亚组分析显示携带GT基因型的成人和儿童患病风险均较纯合子GG高(儿童组：OR＝4.07，95%CI：1.62，10.20；成人组：OR＝3.09，95%CI：1.40，6.85)。 结论T细胞免疫球蛋白黏蛋白域蛋白-3-574 G>T基因多态性与中国汉族人群支气管哮喘易感性有密切相关，突变T基因携带者患支气管哮喘的风险更高。     

中国潍坊地区汉族人过氧化体增殖物激活型受体γ2基因Prol2Ala多态性与糖尿病的相关性

目的 观察中国潍坊地区汉族人过氧化体增殖物激活型受体2γ基因Prol2Ala多态性的分布情况,探讨其与2型糖尿病的相关性.方法 利用聚合酶链反应限制片长多态性测定170例2型糖尿病患者和54例健康人过氧化体增殖物激活型受体γ2基因Prol2Ala基因型,比较基因型和等位基因频率在不同组间的差异.结果 在224例潍坊地区汉族人中,过氧化体增殖物激活型受体γ2基因Prol2Ala多态性分布以Pro/Pro基因型为主,Pro/Pro、Pro/Ala及Ala/Ala基因型频率分别为0.902、0.094及0.004,Pro等位基因的频率为0.9487,Ala等位基因频率为0.0513.正常对照组中Ala等位基因的频率为0.093,明显高于糖尿病组(0.041,P=0.039).结论 潍坊地区汉族人过氧化体增殖物激活型受体γ2基因Prol2Ala多态性(Ala等位基因)可能是2型糖尿病发病的保护性因子.     

哮喘儿童规范治疗停药后复发的高危因素分析

目的探讨影响哮喘儿童规范治疗停药后复发的高危因素。方法我院2015年1月-2017年1月收治的229例哮喘儿童作为研究对象,所有患儿均采取规范治疗后停用吸入性糖皮质激素,根据停药后1年内哮喘儿童的复发情况分为复发组和未复发组,对影响复发的危险因素进行统计分析。结果 229例哮喘患儿随访1年复发141例(复发组),未复发88例(未复发组),复发率为61. 57%。单因素分析显示,复发组和未复发组患儿在发病年龄、ICS疗程、治疗后哮喘缓解时间、治疗前哮喘严重程度、是否合并过敏性鼻炎、是否合并慢性鼻窦炎、停药时呼出一氧化氮浓度、是否联合沙美特罗治疗方面,差异具有统计学意义(P 0. 05)。多因素Logistic回归分析显示,发病年龄≥6岁、ICS疗程 24个月、治疗后哮喘缓解时间 8个月以及联合沙美特罗治疗是影响儿童哮喘复发的保护因素,而治疗前为重度哮喘、合并过敏性鼻炎及停药时呼出一氧化氮浓度为高水平是影响儿童哮喘复发的危险因素(P 0. 05)。结论重度哮喘、合并过敏性鼻炎以及停药时呼出一氧化氮浓度为高水平的哮喘患儿应预防短期复发,延长ICS疗程以及联合支气管扩张剂治疗对防止复发有一定的作用。     

胰蛋白酶原基因新突变胰腺炎患者的临床分子生物学特征

目的:分析1例胰蛋白酶原基因新突变慢性胰腺炎患者的分子生物学特征.方法:收集患者的一般资料,并对胰腺炎易感基因-胰蛋白酶原基因(protease serine 1,PRSS1)进行PCR扩增,纯化后直接测序.进行文献回顾,初步分析其发病原因.结果:慢性胰腺炎患者的胰蛋白酶原基因3号外显子区存在c.369C→T突变为杂合性突变,造成p.141 Ala→Pho.携带胰蛋白酶原基因突变的胰腺炎患者与普通的胰腺炎患者具有一样的胰腺酶谱规律.结论:PRSS1基因3号外显子的c.369C→T杂合性突变与胰腺炎有关.     

支气管哮喘患儿血清及痰液气道重塑因子、促炎因子水平变化及其临床意义研究

目的分析支气管哮喘患儿血清及痰液气道重塑因子、促炎因子水平变化及其临床意义。方法选取2016年9月—2017年10月上海市奉贤区奉城医院收治的支气管哮喘患儿86例作为观察组,同期体检健康儿童86例作为对照组;根据病情严重程度将观察组患儿分为轻度组26例、中度组35例、重度组25例。比较对照组与观察组儿童、不同病情严重程度支气管哮喘患儿血清及痰液气道重塑因子、促炎因子水平。结果 (1)观察组患儿血清及痰液转化生长因子β1(TGF-β1)、骨桥蛋白(OPN)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)水平高于对照组(P0.05)。重度组患儿血清及痰液TGF-β1、OPN、MMP-9水平高于轻度组、中度组,中度组患儿血清及痰液TGF-β1、OPN、MMP-9水平高于轻度组(P0.05)。(2)观察组患儿血清及痰液肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素6(IL-6)、白介素8(IL-8)水平高于对照组(P0.05)。重度组患儿血清及痰液TNF-α、IL-6、IL-8水平高于轻度组、中度组,中度组患儿血清及痰液TNF-α、IL-6、IL-8水平高于轻度组(P0.05)。结论支气管哮喘患儿血清及痰液气道重塑因子、促炎因子水平明显升高,且血清及痰液气道重塑因子、促炎因子水平随病情加重而升高,气道重塑、局部炎性反应在儿童支气管哮喘发生发展过程中具有重要作用。     

哮喘患儿血浆内皮素含量变化的临床意义

目的探讨血浆内皮素(ET-1)含量变化与哮喘之间的关系。方法应用SN-682型放射免疫r仪计数仪,对50例哮喘患儿在急性期与缓解期分别测定血浆ET-1含量,并与50例正常儿童血浆ET-1含量进行对照,并同期测定血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量。结果哮喘急性期患儿血浆ET-1含量显著高于正常儿童(P<0.01)及缓解期患儿(P<0.05)并与TNFα含量测定呈显著正相关。结论内皮素与哮喘病病情相关,是反映哮喘病病情变化一个有价值的指标。皮质激素治疗能显著降低血浆ET-1含量,可能是其抗气道炎症的作用机制之一。     

我国西部地区支气管哮喘儿童血清Periostin、TSLP检测的临床意义

目的 探究血清Periostin、TSLP,在我国西部地区儿童支气管哮喘发病过程中可能的作用及其临床意义.方法 选择2017年1月-2019年10月我院收治的确诊支气管哮喘急性发作期患儿60例(发作组)、选择同期哮喘缓解期患儿60例(缓解组)、健康儿童60例(对照组),通过呼出气一氧化氮(fractional ex-h...     

CETP新突变点Ala373Pro和Arg451Gln及其座位关系

收集在脂质专科门诊就诊者中血清高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)高于1.8mmol/L者的全血标本,通过聚合酶链反应(PCR)技术扩增胆固醇酯转运蛋白(CETP)基因,继而采用荧光直读法进行CETP基因组DNA序列分析,首次发现一女性先驱者同时携带CETP基因两个新的突变点,即CETP第373位丙氨酸为脯氨酸取代(Ala373Pro)和第451位精氨酸突变为谷氨酰胺(Arg451Gln).采用等位基因特异性长片段PCR技术进一步研究表明该先驱者所携带的两个CETP基因新突变点Ala373Pro和Arg451Cln位于同一染色体.     

湖北地区儿童地中海贫血基因型分析

目的:了解湖北地区儿童地中海贫血(地贫)基因型的分布情况。方法:选取接受α、β地贫基因筛查后确诊为地贫的0~12岁患者,进行基因结果分析。结果:1 431例儿童标本中经基因确诊者有273例,其中189例为β-地贫,占69.23%,共检出10种突变基因,以CD41-42、IVS-Ⅱ-654及CD17为主,占突变的85.92%;78例为α-地贫,占28.57%,最常见的是α-SEA突变基因,占突变的72.84%;检出α-合并β-地贫6例,占2.20%。结论:湖北地区α-地贫以α-SEA突变为主,β-地贫排在前3位的基因突变分别是IVS-Ⅱ-654、CD41-42和CD17,α-合并β-地贫占地贫基因检出阳性病例的2.20%。本研究对湖北地区地贫基因型及其构成比进行分析,建立湖北地区地贫基因库,可以为预防计划和遗传咨询、产前诊断提供基础资料,从而对减少重型地贫患儿的出生具有重要意义。     

慢性淋巴细胞白血病患者外周血p53基因突变观察

目的观察慢性淋巴细胞白血病(CLL)患者外周血中p53基因突变情况,并探讨其临床意义。方法采用PCR联合测序技术检测80例CLL患者及10例健康体检者外周血中的p53基因,CLL患者中25例应用FC方案(氟达拉滨25 mg/m2,环磷酰胺250 mg/m2,第1～3天静滴)化疗,28 d为1个疗程,治疗2～6个疗程。结果 80例CLL患者中12例(15.0%)检测到p53基因突变,其中错义突变11例、无义突变1例,未检测到插入和缺失;突变位点均发生在外显子(exon)5～9,其中发生在exon 5 2例、exon 6 3例、exon 7 1例、exon 8 5例、exon 9 1例,exon2～4、exon 10、exon 11未检测到突变。健康体检者中均未检测到p53基因突变。二者p53基因突变率比较,P<0.05。p53基因突变与Binet分期、p53基因缺失、IgVH突变有关(P均<0.05)。80例CLL患者中25例化疗后CR5例、PR 11例,总反应率(OR)为64.0%;p53基因突变者OR为14.3%,低于p53基因无突变者的83.3%(P<0.05)。结论 CLL患者外周血中存在p53基因突变,其可作为预后判定的指标。     

CYP11B1基因突变致11β-羟化酶缺陷症五例随访研究

目的探索11β-羟化酶缺陷症(11β-hydroxylase deficiency, 11β-OHD)患者的临床和遗传学特点, 以提高对该病的认识。方法回顾性分析2016年至2021年在河南省儿童医院确诊的5例11β-OHD患儿的临床表现、激素水平、影像学检查、基因突变特点及随访结果。结果 5例患儿中3例男性, 2例女性, 诊断时年龄1岁5个月～7岁(平均3岁9个月), 骨龄3岁6个月～16岁(平均10岁3个月), 均无阳性家族史, 被误诊为21-羟化酶缺陷症(21-hydroxylase deficiency, 21-OHD)2例, 且长期合用盐皮质激素治疗。3例合并高血压, 1例睾丸肾上腺残余瘤。5例肾上腺CT均提示肾上腺增粗, 5例患儿ACTH、17-羟孕酮、睾酮、雄烯二酮不同程度地升高, 低钾血症1例。基因分析结果为1例纯合突变, 4例复合杂合突变, 携带错义突变的4例, 2例患者携带缺失, 1例患者携带有CYP11B2 exon1-6/CYP11B1 exon7-9形成的嵌合基因。其中CYP11B1 c.1385T>C(p.L462P)、c.1354G>A(p.G...