人脑胶质瘤中整合素αvβ3与VEGF、PCNA表达的相关性研究

目的 研究人脑胶质瘤中整合素αvβ3与血管内皮生长因子（VEGF）、增殖细胞核抗原（PCNA）表达的关系及其意义。方法 采用免疫组化链霉亲和-生物素-过氧化物酶复合物（SABC）法和图像分析技术检测7例正常脑组织和65例不同病理级别的人脑胶质瘤标本中整合素αvβ3与VEGF、PCNA表达水平，并分析整合素αvβ3与VEGF、PCNA表达的相关性。结果 整合素αvβ3、VEGF、PCNA在正常脑组织的表达均为阴性，在人脑胶质瘤的表达均为阳性．且三者的表达水平与肿瘤的病理级别密切相关；人脑胶质瘤中整合素αvβ3与VEGF、PCNA的表达水平明显正相关（r=0．817和r=0．835，P〈0．05）。结论 合素αvβ3在人脑胶质瘤的恶性生物学行为中可能起重要的正性调节作用，可能成为人脑胶质瘤治疗的一个很有前途的靶点。     

人脑胶质瘤中PCNA的表达及临床意义

目的探讨增殖细胞核抗原(PCNA)在人脑胶质瘤中的表达与肿瘤生长、侵润、转移、复发的关系及在胶质瘤发生发展中的作用,拟为手术治疗及疗效提供客观依据。方法采用免疫组织化学染色方法检测正常脑组织及胶质瘤细胞中增殖细胞核抗原PCNA阳性表达率。结果对照脑组织增殖细胞核抗原表达阴性;不同级别胶质瘤细胞增殖细胞核抗原阳性表达率依次为WHOⅣ级100%(6/6)、WHOⅢ级94.44%(17/18)、WHOⅡ级62.50%(10/16)和WHOⅠ级42.86%(3/7);增殖细胞核抗原表达率与胶质瘤组织病理学分级呈正相关(rs=0.589,P=0.000);WHOⅢ-Ⅵ级与WHO I-Ⅱ级之间差异具有统计学意义(H=13.239,P=0.000)。结论胶质瘤组织中增殖细胞核抗原表达水平和肿瘤组织病理学分级呈正相关。提示,增殖细胞核抗原与胶质瘤恶性进展密切相关。     

人脑胶质瘤中cyclin E的表达及其对细胞增殖活性的影响

目的研究人脑胶质瘤中细胞周期素E(cyclin E)表达与胶质瘤细胞恶性程度及细胞增殖活性的关系.方法采用免疫组化方法检测52例人脑胶质瘤和8例正常脑组织标本中cyclin E和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达水平,观察并分析各病理等级中两者表达的阳性率和标记指数.结果正常脑组织中无cyclin E或PCNA表达.随着人脑胶质瘤病理分级的增高,cyclin E的阳性率和平均标记指数均明显升高,在高、低度恶性度肿瘤之间也存在明显差异(P<0.05).双元相关性分析发现cyclin E与PCNA的平均标记指数呈明显正相关(Pearson相关系数r=0.576,P<0.01).结论人脑胶质瘤中cyclin E的表达与细胞增殖活性和病理学分级关系密切,很可能对肿瘤细胞的增殖和恶性转化产生重要的推动作用.     

人脑胶质瘤中CyclinD1和PCNA联合检测与肿瘤分级及患者预后相关性研究

目的 探讨细胞周期素D1(CyclinD1)和增殖细胞核抗原(PCNA)在脑胶质瘤中的联合检测与该肿瘤恶性程度及患者预后的相关性.方法 采用免疫组化SP法联合检测63例脑胶质瘤组织中CyclinD1和PCNA表达水平,并行临床随访,对比分析脑胶质瘤不同病理分级和不同生存期组间CyclinD1和PCNA单独检测标记指数(LI)及联合检测LI的差异.结果 PCNA和CyclinD1联合检测LI随着脑胶质瘤恶性程度的增高而增大,各级别间联合检测LI的差异均有显著性(P<0.05).同时该联合检测LI随着脑胶质瘤患者生存期限的延长而减少,不同生存期组问的联合检测LI均有显著性差异(P<0.05).结论 CyclinD1和PCNA联合检测LI较PCNA或CyclinD1单独检测LI能更为准确地反映脑胶质瘤恶性程度及患者预后,可作为评估脑胶质瘤恶性程度及患者预后的辅助指标.     

VEGF及PCNA表达与脑胶质瘤分级的相关性研究

目的　研究血管内皮细胞生长因子 (VEGF)与增殖性细胞核抗原 (PCNA)蛋白在各级脑胶质瘤中的表达率及与胶质瘤病理分级的关系。方法　利用免疫组化方法检测 4 5例胶质瘤手术标本中VEGF与PCNA蛋白的表达水平 ,并比较二者的相关性。结果　随着胶质瘤病理级别的升高 ,VEGF及PCNA的表达率渐之升高 ,Ⅰ Ⅳ级病理分组中 ,VEGF阳性率分别为 2 2 .2 9± 7.6 4 ,5 3.75± 10 .74 ,70 .2 7± 14 .2 7,PCNA阳性率分别为 15 .86± 4 .5 5 ,32 .4 1± 7.4 4 ,4 7.92± 10 .31,且并各级之间有显著差异 (P <0 .0 5 )。结论　VEGF与PCNA蛋白的表达对判断胶质瘤病理分级及生物学行为有一定意义。     

胶质瘤Polo样激酶1的表达与肿瘤细胞增殖活性及预后的关系

目的探讨Polo样激酶1(PLK1)在人脑胶质瘤组织上的表达及其与胶质瘤细胞增殖活性、临床病理和预后的关系。方法应用免疫组化法检测47例胶质瘤和8例正常脑组织中的PLK1和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,并随访病人。结果正常脑组织未见PLK1明显表达。Ⅰ～Ⅱ级、Ⅲ级和Ⅳ级脑胶质瘤中PLK1表达阳性率分别为64.3%、93.8%和100%,Ⅲ和Ⅳ级分别与Ⅰ～Ⅱ级比较差异有显著性意义(P<0.05)。PLK1表达与胶质瘤病理级别和PCNA表达均呈正相关(r=0.424,P<0.05;r=0.745,P<0.01)。PLK1高表达组和低表达组患者两年生存率分别为41.4%(12/29)和72.2%(13/18),差异显著(P<0.05)。结论PLK1在胶质瘤的发生发展和增殖中起重要作用,与肿瘤分化程度和患者预后密切相关。     

人脑胶质瘤中血管内皮生长因子表达与胶质瘤微血管数及肿瘤增殖活性关系的研究

目的　研究血管内皮生长因子 (VEGF)表达与胶质瘤微血管数、肿瘤增殖活性及其与胶质瘤恶性程度的相关性。方法　应用免疫组化方法检测 5 0例胶质瘤、8例正常脑组织中VEGF、血小板内皮细胞粘附分子 (CD3 1)和增殖细胞核抗原 (PCNA)的表达 ,测定其阳性细胞数和阳性血管数。结果　胶质瘤中均有VEGF、CD3 1及PCNA表达。其表达水平与肿瘤恶性程度呈显著正相关 ,其r分别为 0 .745 ,0 .765及 0 .685。结论　VEGF、CD3 1和PCNA在胶质瘤中的高表达是胶质瘤恶性表型之一 ,可作为病理诊断的补充。     

人脑胶质瘤基质金属蛋白酶2、9和增殖细胞核抗原的表达

胶质瘤细胞侵袭性生长包括细胞粘附、细胞外基质降解和细胞运动等过程,其中关键事件是基质金属蛋白酶(Matrix Metallo-proteinases,MMPs)通过与细胞粘附分子相互作用降解细胞外基质(extracellular matrix,ECM),促进肿瘤细胞向周围脑组织生长[1]。已有研究表明MMP2、9与胶质瘤关     

肌腱生长蛋白在人脑胶质瘤中的表达与增殖性细胞核抗原的相关性研究

目的 探讨肌腱生长蛋白（Tenascin,TN)和增殖性细胞核抗原（Proliferation cell nuclear antigen,PCNA)在不同级别人脑胶质瘤中的表达情况。分析它与胶质瘤的侵袭相关性。方法 采用免疫组织化学方法，检测54例不同级别人脑胶质瘤组织中Tenascin和PCNA的表达。结果 Tenascin表达于胶质瘤新生血管，瘤细胞周围基质以及胶质瘤细胞；PCNA表达于细胞核，随着胶质瘤病理级别的升高，肿瘤新生血管和瘤细胞周围基质中的Tenascin表达增强，瘤细胞中PCNA表达亦增强，Tenascin与PCNA的表达呈正相关。结论 Tenascin在胶质瘤血管形成，瘤细胞增殖转移过程中发挥了重要作用，Tenascin和PCNA可作为评价胶质瘤生物学行为的有用指标。     

IGF-IR反义寡核苷酸对胶质瘤细胞增殖的影响

目的 根据胰岛素样生长因子-受体（IGF-IR）基因序列设计了IGF-IR mRNA起始密码子下游的硫代磷酸型反义寡核苷酸和正义寡核苷酸，研究其对C6胶质瘤细胞增殖作用。方法 实验分为反义核酸组、正义核酸组和空白对照组，经细胞计数、MTT法研究反义核苷酸对胶质瘤细胞生长和增殖的抑制作用。并应用免疫细胞化学方法检测胶质瘤细胞IGF-IR和增殖细胞核抗原（PCNA）蛋白的表达。结果 反义寡核苷酸能有效地降低IGF-IR基因的表达，抑制体外培养的胶质瘤细胞的增殖，其抑制作用24h显效，96h仍有作用，反义寡核苷酸的抑制效果与其作用浓度有关。而正义寡核苷酸对其无抑制作用。同时可见反义寡核苷酸抑制增殖作用中，能明显下调PCNA蛋白的表达。结论 IGF-IR介导的IGF-I-IGF-IR的自（旁）分泌环对胶质瘤生长极其重要，通过IGF-IR反义寡核苷酸治疗能较有效地抑制胶质瘤细胞的增殖。     

β-catenin蛋白在成人脑干和幕上胶质瘤中的表达及其意义

目的 通过检测β-eatenin蛋白在正常脑组织、脑干和幕上胶质瘤中的表达,探讨Wnt/β-catenin信号转导途径在脑干和幕上胶质瘤发生中的作用.方法 采用免疫组织化学和Western blot方法检测β-catenin在6例正常脑组织、10例Ⅱ级脑干胶质瘤和10例Ⅱ级幕上胶质瘤中的表达.结果 β-catenin在正常脑组织中为胞膜表达,在脑干和幕上胶质瘤中为胞质表达.半定量分析β-catenin电泳条带表明其在三组中的表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 Wnt/β-catenin信号转导途径虽然参与了脑干和幕上胶质瘤的发生,但尚不能认为其是导致脑干胶质瘤患者较幕上胶质瘤患者预后差的决定性因素.     

人脑胶质瘤中CCND1基因的转录与表达

目的检测和分析人脑胶质瘤中CCND1基因的转录与表达,及其对肿瘤发生、发展的生物学意义.方法采用免疫组化、原位杂交法检测52例人脑胶质瘤及8例正常人脑组织中Cyclin D1 mRNA蛋白以及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达水平.结果脑胶质瘤中CD1蛋白及mRNA呈过度表达,其标记指数和阳性率随肿瘤的恶性程度增高而增加.两者的标记指数之间、以及与PCNA标记指数之间均为显著正性相关.结论人脑胶质瘤中CCND1过度转录和表达,随胶质瘤临床病理分级增加而增高,同时与肿瘤细胞增殖状态密切相关,提示CCND1基因的异常转录和表达在胶质瘤的发生与发展中起着重要的促进作用.     

β-catenin介导蛋白激酶D2对脑胶质瘤细胞增殖的影响

目的研究蛋白激酶(PKD2)是否通过β-catenin来调控脑胶质瘤细胞的增殖。方法采用EDU掺入实验观察下调PKD2或β-catenin后U251细胞增殖能力的变化;免疫印迹实验检测下调PKD2后β-catenin总蛋白水平及其在细胞膜、细胞浆及细胞核中的变化。结果与对照组相比,下调PKD2后U251细胞增殖能力降低;β-catenin总蛋白水平无明显变化,但细胞浆β-catenin水平明显增多,细胞核中明显减少,差异有统计学意义(均P0.01)。与对照组相比,下调β-catenin后,U251细胞增殖能力降低,差异有统计学意义(P0.01)。结论下调PKD2可能通过抑制β-catenin向细胞核转位而抑制脑胶质瘤细胞的增殖。     

VEGF在人脑胶质瘤中的表达与肿瘤增殖及肿瘤血管生成的关系

目的研究血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在人脑胶质瘤中的表达与肿瘤增殖及血管生成的关系。方法应用免疫组化技术和形态定量分析法,检测98例手术切除脑胶质瘤中VEGF表达、PCNA标记指数(PCNA LI)、微血管密度(Microvessel density,MVD)表达。结果(1)肿瘤细胞及血管内皮细胞均可以表达VEGF,阳性颗粒分布于肿瘤胞浆中;(2)高级别肿瘤PCNA、LI、MVD显著高于低级别肿瘤(P<0.05);VEGF表达阳性肿瘤的PCNA、LI、MVD显著高于VEGF表达阴性肿瘤(P<0.05);(3)在星形细胞肿瘤中,随着MVD的增大,VEGF在肿瘤血管内皮的染色率逐渐增加,与肿瘤的MVD存在正相关关系(r值为0.44,P<0.01)。结论脑胶质瘤的VEGF表达与MVD呈正相关关系,VEGF在肿瘤细胞增殖及血管再生过程中起重要作用。     

P16基因改变与脑胶质瘤生物学特性相关性的研究

目的 研究Ｐ１６基因改变与脑胶质瘤恶性程度分级及肿瘤细胞增殖活性之间的关系。方法 检测４１例不同级别脑胶质瘤标本和７例正常脑组织Ｐ１６基因改变和ＰＣＮＡ蛋白表达情况。结果 实验组Ｐ１６基因缺失和突变２２例（５４％）,ｍＲＮＡ和蛋白表达缺失分别为２３例（５６％）和２７例（６６％）,三者改变非一对一关系。Ｐ１６基因改变和ＰＣＮＡ指数随脑胶质瘤恶性程度级别增高呈上升趋势（Ｐ〈０．０５）。Ｐ１６基因改变与     

NF-κB、EGFR、PCNA在人脑胶质瘤细胞中的表达及其相关性研究

目的 探讨NF-κB在人脑胶质瘤中的表达及其与EGFR、PCNA的关系。方法 应用免疫组化方法对56例脑胶质细胞瘤、8例正常脑组织标本中NF-κB、EGFR、PCNA蛋白进行检测。结果 NF-κB在正常脑组织中未见表达，在脑胶质细胞瘤标本中的阳性率为67．9％，在病理级别较高的胶质瘤中的表达明显高于在较低级别胶质瘤中的表达。EGFR、PCNA蛋白在胶质瘤中均有异常高表达，且表达强度与胶质瘤病理级别有关。NF-κB与EGFR表达、PCNA LI呈明显正相关。结论 NF-κB在胶质细胞瘤组织中有异常高表达，其表达与胶质瘤EGFR、PCNA呈正相关。     

β-catenin/Tcf-4转录调控AKT2基因表达促进人脑胶质瘤细胞恶性转化的研究

目的 探究胶质瘤中β- catenin/Tcf -4转录调控AKT2基因以促进其恶性表型转化的机制.方法 CHIP - PCR及荧光素酶实验确立AKT2启动子区的Tcf -4结合位点及活性.阿司匹林( ASA)阻断β- catenin/Tcf -4转录复合物活性及恢复AKT2基因的表达后,流式细胞术检测细胞周期,Annexin V检测凋亡及Transwell实验检测侵袭能力.结果 CHIP - PCR表明,AKT2基因启动子区存在两个Tcf -4结合位点- 349/- 343 bp(位点1)和- 3491/- 3497 bp(位点2).荧光素酶实验结果显示位点2的活性比位点1的强.抑制β - catenin/Tcf -4转录活性后,细胞周期阻滞于G0/G1期,侵袭能力下降;恢复AKT2的表达后,细胞S期比例增加,侵袭能力增强.结论 β- catenin/Tcf -4可以直接转录调控AKT2来促进胶质瘤细胞的增殖和侵袭.     

脑胶质瘤细胞中HIF-1α表达及其与细胞凋亡、增殖关系

目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在人脑胶质瘤中的表达及其与肿瘤细胞增殖、细胞凋亡和肿瘤恶性程度的关系。方法采用免疫组化法检测60例脑胶质瘤HIF-1α、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,用TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡情况,对结果进行综合分析。结果HIF-1α总阳性表达率为73.3%,其中强表达19例(31.7%),中度表达14例(23.3%),弱表达11例(18.3%),不表达16例(26.7%);胶质瘤Ⅰ~Ⅱ级、Ⅲ~Ⅳ级HIF-1α的阳性率分别为50.0%、86.8%,组间有统计学差异(P<0.01)。脑胶质瘤标本PCNA及细胞凋亡均阳性,胶质瘤Ⅰ~Ⅱ级、Ⅲ~Ⅳ级PCNA阳性细胞数分别为54.9±8.2、121.6±15.6,凋亡细胞阳性数分别为85.4±10.4、52.1±7.6,比较均有显著性差异(P<0.01)。HIF-1α表达与肿瘤细胞的PCNA阳性数呈正相关(P<0.01),与肿瘤细胞的凋亡数无明显关系(P>0.05)。结论脑胶质瘤细胞HIF-1α表达与肿瘤的恶性程度有一定相关性;HIF-1α表达水平与肿瘤细胞增殖呈正相关,而与肿瘤细胞的凋亡无关。     

人脑胶质瘤细胞的原代培养及生长活性观察

目的 研究人脑胶质瘤细胞原代培养的方法,观察培养细胞的生长活性与肿瘤级别之间的关系.方法 用消化培养法原代培养24例人脑胶质瘤细胞,酶消化法 振荡贴壁法 机械划除法纯化,增殖细胞核抗原(PCNA)免疫组化染色及甲基噻唑基四唑(MTT)法观察培养细胞的生长活性.结果 20例原代培养成功,第4代以后肿瘤细胞纯度达98%以上,PCNA、MTT法显示肿瘤细胞的生长活性与肿瘤级别成正比.结论 采用消化培养法可成功培养原代胶质瘤细胞,酶消化法 振荡贴壁法 机械划除法的纯化方法可获得较高的肿瘤细胞纯度;肿瘤细胞的生长活性与肿瘤的恶性程度有关,离体细胞的生长活性可作为判断肿瘤恶性程度的一个指标;检测细胞生长活性MTT法比PCNA染色更具敏感性.     

N-cadherin与β-catenin蛋白在胶质瘤中的表达及意义

目的探讨Wnt信号转导途径及N-cadherin/β-catenin复合物在脑胶质瘤发生及迁移中的特性和作用。方法利用免疫组化及Western blot方法检测各级别脑胶质瘤标本及正常对照脑组织中β-catenin及N-cadherin的表达。结果临床各级脑胶质瘤病理组织中存在β-catenin的表达,而且高级别胶质瘤中表达水平明显高于低级别胶质瘤(P=0.015)和正常组织(P=0.001)。N-cadherin在高级别胶质瘤中的表达水平明显低于低级别胶质瘤(P=0.007),但在正常脑组织和星型细胞瘤则没有明显差异(P=0.124)。结论经典的Wnt信号转导途径可能在胶质瘤的发生发展中存在作用,N-cadherin/β-catenin复合物调节障碍可能参与了胶质瘤迁移过程。