尖锐湿疣患者外周血Foxp3+CD4+CD25+调节性T细胞的检测及意义

目的 了解尖锐湿疣患者外周血Foxp3+CD4+CD25+调节性T细胞的表达水平,探讨其在尖锐湿疣发生发展机制中的作用.方法 分别收集30例尖锐湿疣患者(复发15例,初发15例)及20例健康者外周抗凝静脉血,分离出外周血单个核细胞.藻红蛋白(PE)标记抗CD4单抗,异硫氰酸荧光素(FITC)标记抗CD25单抗,细胞破膜后PE标记的抗Foxp3单抗行细胞内染色,三色流式细胞术分析Foxp3+CD4+CD25+调节性T细胞比例.组间比较采用ANOVA检验.结果外周血中Foxp3+CD4+CD25+调节性T细胞水平在尖锐湿疣患者组为(3.4±1.0)%,在复发组为(4.7±1.2)%,均显著高于健康对照组的(1.2±0.5)%(P<0.01).外周血Foxp3+CD4+CD25+调节性T细胞水平在初发组为(2.1±1.0)%,高于健康对照组,但差异无统计学意义,而在复发组明显高于初发组(P<0.05).结论 尖锐湿疣患者外周血Foxp3+CD4<"+>CD25+调节性T细胞数量增加,这种细胞免疫功能失调可能与其免疫学发病机制有关.     

强直性脊柱炎患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的研究

目的 观察强直性脊柱炎(AS)患者外周血CD4+CD25调节性T细胞(Treg)的数量、功能及肿瘤坏死因子(TNF)-a 抑制剂治疗的影响.方法 活动性AS患者25例,10例给予etanercept治疗12周,健康对照21名,分离外周血单个核细胞(PBMC),流式细胞术检测CD4+CD25high T细胞比例;实时定量聚合酶链反应检测FOXP3 mRNA表达;免疫磁珠法去除CD25+细胞,可溶性噻唑盐(WST-1)法检测T细胞增殖.结果 活动性AS组CD4+CD25high T细胞比例与对照组差异尤统计学意义,但FOXP3 mRNA表达明显低于对照组(P＜0.01),并与C反应蛋白(CRP)呈负相关(P＜0.01).两组的CD4+CD25+细胞体外均能抑制T细胞增殖(P均＜0.01). Etanercept治疗明显增加CD4+CD25highT细胞比例和FOXP3 mRNA表达(P均＜0.01),与CRP降低呈负相关(P＜0.05;P＜0.01).结论 AS患者外周血表达FOXP3的CD4+CD25+Treg细胞异常,可能参与AS发生和发展;Etanercept治疗上调Treg细胞,可能是抗TNF-α治疗的一个机制.     

CD4+CD25+调节性T淋巴细胞在慢性乙型肝炎发病机制中的作用

乙型肝炎的发病机制复杂,目前认为慢性乙型肝炎(CHB)患者机体针对HBV产生的免疫反应较弱,病毒在体内不能彻底被清除,感染持续存在,组织损伤迁延不愈.对于乙型肝炎的治疗主要为抑制病毒复制,但不能彻底清除病毒.     

初发系统性红斑狼疮患者外周血CD4+调节性T细胞CD73表达

目的 研究CD73在初发活动性系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CD4+调节性T细胞的表达情况,探讨其在SLE发病中的作用.方法 采用流式细胞术检测29例初发未经治疗的活动期SLE患者(SLE组)和22例健康人(健康对照组)外周血CD4+CD25+CD73+T细胞百分率及CD4+CD73+、CD4+CDhi25、CD4+CD25+T细胞中叉头状转录因子3(FOXP3)蛋白表达,同时对CD73表达水平与SLE活动指标进行相关性分析.结果 SLE组患者外周血CD4+ CD25+ CD73+T细胞百分率低于健康对照组[(1.25±1. 32)%vs(2.35±1.09)%,P＜0.01].SLE组和健康正常对照组,CD73在C4+ CDhi25T细胞的表达水平[(29.05±12.53)%、(43.35±10.09)%]高于CD4+ CD25+T细胞[(17.48±6.92)%、(29.98±10.39)%,P＜0.001];FOXP3蛋白在CD4+ CD73+ T细胞[(65.36±14.40)%、(63.80±14.05)%]、CD4+ CDhi25 T细胞的表达水平[(67.30±13.04)%、(56.30±9.21)%]明显高于CD4+ CD25+ T细胞[(45.70±12.74)%、(43.98±5.17)%,P＜0.001],在CD4+ CD73-T细胞几乎不表达,而在CD4+ CD73+ T细胞、CD4+ CDhi25 T细胞中的表达差异无统计学意义(P值均大于0.05).CD73在CD4+ CD25+ T细胞的表达水平与SLE疾病活动指数、ESR、C反应蛋白、抗补体C1q、抗核小体抗体均无相关性(P＞0.05).结论 CD73可作为调节性T细胞新的表面标记,其在调节性T细胞中的异常表达可能参与SLE的发病机制.     

CD4+CD25+调节性T细胞与支气管哮喘

支气管哮喘是一种常见的慢性呼吸道疾病,其免疫发病机制尚不十分清楚。CD4 CD25 调节性T细胞是一种特殊的调节性T细胞,参与自身免疫调节,维持自身免疫耐受。本文就CD4 CD25 调节性T细胞的特性及与支气管哮喘的发病机制、治疗、预后的研究进展做一综述。     

CD4+ CD25+调节性T细胞在免疫性血小板减少性紫癜中的调节作用

目的检测免疫性血小板减少性紫癜(ITP)患者治疗前后CD4 CD2 5调节性T细胞(Treg)的比例以及变化规律,探讨Treg在ITP发病机制中的作用。方法收集42例ITP患者治疗前、后外周血标本,分离血单个核细胞,采用流式细胞术检测ITP患者治疗前后Treg的比例以及变化。结果ITP患者治疗前Treg比例明显低于正常对照组(P<0.01),治疗后Treg比例显著升高,明显高于治疗前,但仍低于正常对照组(P<0.01);治疗有效组ITP患者Treg比例显著高于治疗无效组(P<0.01),治疗显效组显著高于良效和进步组(P<0.01),良效和进步组与治疗无效组比较差别无显著性。(P>0.05)。结论ITP患者外周血Treg比例降低,提示Treg可能参与了ITP的发病机制。     

CD4~+CD25~+调节性T细胞在自身免疫性肝炎发病机制中的作用

自身免疫性肝炎( autoimmune hepatitis,AIH)是一种免疫介导的、慢性肝脏炎症性疾病,以高y球蛋白血症、自身抗体阳性、肝组织学界面炎和免疫抑制治疗有效为特征[1].尽管AIH的发病机制尚未完全阐明,但多项证据表明,遗传易感性、分子模拟学说及调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)缺陷参与了自身免疫性肝损伤.免疫系统本身具有区分自己与非己的功能,并可建立及维持自身免疫耐受,以抑制自身抗原的免疫反应,进而预防自身免疫[2].CD4+ CD25+ Treg细胞在维持机体内环境稳定和维持自身免疫耐受方面起重要作用[3].而自身免疫性疾病的发生正是这种免疫耐受被打破,机体不能维持内环境稳定的结果.近年来的研究表明,Treg细胞功能缺陷可能是AIH发病的基础之一[4].本文就CD4+ CD25+ Treg细胞在AIH发病机制中的作用综述如下.     

初发过敏性紫癜患儿外周血CD4+CD28-和CD8+CD28-T细胞水平变化及意义

目的 观察初发过敏性紫癜(HSP)患儿外周血T淋巴细胞亚群(CD4+ CD28-T细胞和CD8+ CD28-T细胞)的表达变化,并探讨其临床意义.方法 采用流式细胞技术(FCM)检测89例初发HSP患儿(HSP组)和30例健康儿童(对照组)外周血T淋巴细胞免疫表型.结果 HSP组CD4+ CD28+、CD8+ CD28+、CD3+ CD4+T淋巴细胞表达水平及CD4+/CD8+比率较对照组显著降低(P均＜0.05);HSP组CD3+和CD3+ CD8+T淋巴细胞表达水平与对照组相比无显著性差异(P＞0.05);HSP组CD4+ CD28-T细胞和CD8+ CD28-T细胞较对照组明显增高(P均＜0.05),但在皮肤型、关节型、腹型、混合型和紫癜性肾炎五种临床类型间无明显差别(P均＞0.05).结论 HSP患儿存在T淋巴细胞亚群的紊乱,CD4+ CD28-T细胞及CD8+ CD22-T细胞的异常增高可能参与了其发病过程,但与HSP临床类型无关.     

替比夫定对慢性乙型肝炎患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞动态变化的影响及其临床意义

目的 探讨替比夫定抗病毒治疗过程中慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞(Tregs)比例的变化及其临床意义.方法 选取给予替比夫定抗病毒治疗的CHB患者36例,在治疗前及治疗后3、6、9个月时,分别以流式细胞仪检测外周血Tregs比例(以CD4+CD25<'high>T细胞作为Tregs),荧光定量PCR检测血清HBV DNA水平,酶联免疫吸附法检测HBV标志物,全自动生化分析仪检测ALT水平.结果 CHB患者外周血Tregs比例明显高于对照组(P<0.01).替比夫定抗病毒治疗过程中,CHB患者外周血Tregs比例逐步下降,治疗6、9个月时基本恢复正常水平;HBV DNA水平降至检测水平以下的CHB患者(30例)在Tregs比例明显下降的CHB患者中所占比例(7/7,100.0%)高于Tregs比例无明显下降的CHB患者(23/29,79.3%),但两者差异无统计学意义(P>0.05).治疗3、6、9个月时,HBeAg阴转率分别为11.1%、19.4%、25.0%,其中7例(19.4%)发生HBeAg血清学转换者在治疗3、6个月时Tregs比例均已降至正常人水平.结论 替比夫定抗病毒治疗过程中,能降低CHB患者外周血Tregs比例,治疗早期Tregs比例下降的患者HBeAg血清学转换率更高.     

自体纯化CD+34细胞移植治疗系统性红斑狼疮的免疫重建研究

目的 探讨自体外周血来源的纯化CD+34细胞移植前后系统性红斑狼疮(SLE)患者免疫学指标的变化,并分析其与SLE发病机制及预后的关系.方法 用流式细胞术、酶联免疫吸附等方法动态监测18例SLE患者移植前及移植后1、3、6、12个月时淋巴细胞亚群、补体C3、补体C4、补体CH50免疫球蛋白等免疫学指标的变化.结果 移植后早期各T细胞亚群均明显减低,除CD45RO+CD+4细胞外,其余各T细胞亚群均于移植后1-3个月开始逐渐回升;补体C3、补体C4、补体CH50于移植后1个月开始显著回升;移植后1年内无复发病例;2例患者移植1年后复发,与持续缓解患者相比,其移植前后各阶段的补体C4水平、移植后3个月及1年的补体CH50水平、移植后6个月的CD45RA+CD+8细胞百分比均明显低于持续缓解患者,移植后1个月的CD45RO+CD+4细胞百分比明显高于持续缓解患者.结论 自体外周血来源的纯化CD+24细胞移植是治疗SLE的有效方法之一,移植前后免疫学指标的变化对分析SLE的发病机制具有重要意义,并可作为判断SLE疗效的预测指标之一.     

CD4+CD25+T细胞延长同种异体胰岛移植物存活

探讨CD4+ CD25+调节性T细胞作为细胞疫苗抑制小鼠同种异体胰岛移植物排斥反应的作用,采用免疫磁珠分离技术分选CD4+ CD25+调节性T细胞联合BALB/cByJ小鼠同种异体胰岛移植.结果 显示,CD4+ CD25+调节性T细胞可明显延长同种异体移植物的存活时间.     

Oligoclonal expansions of CD4+ and CD8+ T-cells in the target organ of patients with biliary atresia

BACKGROUND & AIMS: Biliary atresia is an inflammatory, fibrosclerosing neonatal cholangiopathy, characterized by a periductal infiltrate composed of CD4(+) and CD8(+) T cells. The pathogenesis of this disease has been proposed to involve a virus-induced, subsequent autoreactive T cell-mediated bile duct injury. Antigen-specific T-cell immunity involves clonal expansion of T cells expressing similar T-cell receptor (TCR) variable regions of the beta-chain (Vbeta). We hypothesized that the T cells in biliary atresia tissue expressed related TCRs, suggesting that the expansion was in direct response to antigenic stimulation. METHODS: The TCR Vbeta repertoire of T cells from the liver, extrahepatic bile duct remnants, and peripheral blood of biliary atresia and other cholestatic disease controls were characterized by fluorescent-activated cell sorter analysis, and TCR junctional region nucleotide sequencing was performed on expanded TCR Vbeta regions to confirm oligoclonality. RESULTS: FACS analysis revealed Vbeta subset expansions of CD4(+) and CD8(+) T cells from the liver or bile duct remnant in all patients with biliary atresia and only 1 control. The CD4(+) TCR expansions were limited to Vbeta3, -5, -9, and -12 T-cell subsets and the CD8(+) TCR Vbeta expansions were predominantly Vbeta20. Each Vbeta subset expansion was composed of oligoclonal populations of T cells. CONCLUSIONS: Biliary atresia is associated with oligoclonal expansions of CD4(+) and CD8(+) T cells within liver and extrahepatic bile duct remnant tissues, indicating the presence of activated T cells reacting to specific antigenic stimulation. Future studies entail identifying the specific antigen(s) responsible for T-cell activation and bile duct injury.     

外周血CD4~+CD25~+FOXP3~+调节性T细胞与炎症性肠病疾病活动度的关系

背景:炎症性肠病(IBD)的发病机制尚未完全阐明。调节性T细胞是一组具有免疫抑制作用的T细胞亚群,研究显示其改变与IBD的发病密切相关。目的:观察IBD患者外周血CD4~+CD25~+FOXP3~+调节性T细胞与疾病活动度的关系。方法:纳入克罗恩病(CD)和溃疡性结肠炎(UC)患者各31例,15例健康体检者作为正常对照。分别采用简化CD活动指数(CDAI)和临床活动度指数(CAI)评估CD和UC患者的疾病活动度,以流式细胞术检测外周血CD4~+CD25~+FOXP3~+调节性T细胞比例,同时检测ESR和血清CRP水平。结果:CD和UC患者外周血CD4~+CD25~+FOXP3~+调节性T细胞比例显著低于正常对照组(P0.05),并分别与简化CDAI评分和CAI评分呈负相关(P0.05),与ESR和血清CRP水平之间则无明显相关性。活动期CD和UC患者的ESR和血清CRP水平明显高于缓解期,但差异无统计学意义。ESR和CRP与疾病活动度评分之间亦无明显相关性。结论:CD4~+CD25~+FOXP3~+调节性T细胞在IBD的发生、发展中起重要作用,外周血调节性T细胞数量减少可能是IBD复发的重要因素。     

CD3+CD56+自然杀伤T细胞在系统性红斑狼疮中的检测及意义

目的 检测系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血中自然杀伤T细胞(NKT)的表达,探讨其与SLE疾病活动的关系.方法 入选确诊的SLE患者30例及健康对照30名,采用流式细胞仪检测外周血CD3+D56+NKT细胞的表达,分析NKT细胞的表达与SLE疾病活动评分和免疫学指标的相关性,采用两样本均数的t检验和Pearson相关分析进行统计学处理.结果与健康对照(4.16±0.22)%相比,SLE患者外周血中CD3+CD56+比例(2.53±0.33)%显著降低,NKT值与血清IgG水平、抗双链DNA抗体定量及SLE疾病活动指数(SLEDAI)评分呈负相关(r值=-0.595,-0.408,-0.637;P均<0.05).结论 SLE患者外周血中NKT细胞表达下降,其下降与SLE的疾病活动存在相关性.     

CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞在慢性乙型肝炎患者中的作用

目的 探讨CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞与乙型肝炎慢性化和病毒清除之间的关系.方法 收集慢性活动性乙型肝炎(CAH)患者19例、HBV携带者(AsC)21例、HBV感染恢复者12例和健康对照者15例.通过流式细胞术分析外周血CD4+CD25+Foxp3+T细胞的表型和频率,磁珠分选(MACS)CD4+CD25+T细胞,实时荧光定量PCR方法 分析Foxp3 mRNA基因在CD4+CD25+T细胞的表达水平.统计学处理采用单因素方差分析或非参数检验.结果CAH或AsC组外周血CD4+CD25+Foxp3+T细胞频率以及CD4+CD25+T细胞中Foxp3 mRNA的表达水平显著高于健康对照组或HBV感染恢复者(F=6.8,F=3.72,均P<0.05).免疫组织化学染色发现,CAH患者肝组织Foxp3'T细胞浸润累积较对照组明显增高,但AsC较CAH减少.HBeAg阳性患者(包括CAH和AsC)CD4'CD25'T细胞频率显著高于HBeAg阴性患者(t=2.3,P<0.05),抗-HBe阴性患者显著高于抗-HBe阳性患者(t=2.4,P<0.05).CD4+CD25+Foxp3+T细胞频率与慢性乙型肝炎患者血清中HBV病毒载量存在正相关(r=0.56,P<0.01).结论 慢性乙型肝炎患者CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞异常与乙型肝炎慢性化和病毒清除有关.     

CD4+CD25+FoxP3+调节性T细胞与结核病的关系

目的探讨结核病患者中CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋调节性T细胞存在状态、功能相关蛋白FoxP3表达水平及其与发病的关系。方法纳入对象包括45例活动性结核患者（包括25例肺结核和20例结核性淋巴结炎）、20例健康对照、20例康复的结核及6例颈淋巴结反应性增生患者。流式细胞术检测外周血中CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋调节性T细胞及其FoxP3蛋白的表达强度；荧光定量RT-PCR检测FoxP3 mRNA表达；免疫组化检测淋巴组织中FoxP3蛋白表达。结果活动性结核患者外周血中天然调节性T细胞的比例为2．91％±0．23％，显著高于健康对照（1．22％±0．18％）和康复的结核患者（1．50％±0．17％，P〈0．01），FoxP3阳性细胞在CD4^＋CD25^＋细胞中的比例高于健康对照，结核患者外周血单个核细胞中FoxP3 mRNA水平显著高于健康对照（P〈0．05）。免疫组化显示，结核性淋巴结炎组织中FoxP3的表达显著高于反应性增生的淋巴结组织（P〈0．01）。结论结核患者调节性T细胞显著增高，提示天然调节性T细胞可能参与结核病的发生。     

Effects of baicalin in CD4 + CD29 + T cell subsets of ulcerative colitis patients

AIM: To evaluate the role of baicalin in ulcerative colitis (UC) with regard to the CD4⁺CD29⁺ T helper cell, its surface markers and serum inflammatory cytokines.METHODS: Flow cytometry was used to detect the percentage of CD4⁺CD29⁺ cells in patients with UC. Real time polymerase chain reaction was used to detect expression of GATA-3, forkhead box P3, T-box expressed in T cells (T-bet), and retinoic acid-related orphan nuclear hormone receptor C (RORC). Western blotting was used to analyze expression of nuclear factor-κB (NF-κB) p65, phosphorylation of NF-κB (p-NF-κB) p65, STAT4, p-STAT4, STAT6 and p-STAT6. The concentrations of interferon-γ (IFN-γ), interleukin (IL)-4, IL-5, IL-6, IL-10 and TGF-β in serum were determined by ELISA assay.RESULTS: The percentages of CD4⁺CD29⁺ T cells were lower in treatment with 40 and 20 μmol/L baicalin than in the treatment of no baicalin. Treatment with 40 or 20 μmol/L baicalin significantly upregulated expression of IL-4, TGF-β1 and IL-10, increased p-STAT6/STAT6 ratio, but downregulated expression of IFN-γ, IL-5, IL-6, RORC, Foxp3 and T-bet, and decreased ratios of T-bet/GATA-3, p-STAT4/STAT4 and p-NF-κB/NF-κB compared to the treatment of no baicalin.CONCLUSION: The results indicate that baicalin regulates immune balance and relieves the ulcerative colitis-induced inflammation reaction by promoting proliferation of CD4⁺CD29⁺ cells and modulating immunosuppressive pathways.