单纯疱疹病毒Ⅰ型的潜伏感染及其预防和治疗

单纯疱疹病毒Ⅰ型的潜伏感染及其预防和治疗中国医科大学第一临床学院眼科闫明综述夏德昭审阅中国医科大学第一附属学院眼科张士瑞中国医科大学第三临床学院药剂科周灏单纯疱疹病毒Ⅰ型（ＨｅｒｐｅｓＳｉｍｐｌｅｘＶｉｒｕｓⅠ，ＨＳＶ－Ⅰ）是一种普遍存在于人群中的Ｄ...     

用原位杂交法检测单纯疱疹病毒Ⅰ型在潜伏感染时的少量潜伏相关转录本表达

目的探讨单纯疱疹病毒Ⅰ型在三叉神经节内潜伏感染时的基因表达。方法以 ＢＡＬＢ／ｃ小鼠制备单纯疮疹性角膜炎,种毒后３６天取三叉神经节和角膜,用免疫组化法检测病毒的抗原表达。制备ｃＲＮＡ探针,用原位杂交法检测 ｍ－ＬＡＴ的表达。结果种毒后３６天,免疫组化结果为阴性,原位杂交结果为阳性。结论 ＨＳＶ－１在三叉神经节内潜伏感染时基因的转录并未静止,有ｍ－ＬＡＴ基因的表达。     

单纯疱疹病毒Ⅰ型潜伏感染的研究——兔三叉神经节致敏T淋巴细胞检测研究

报告应用抗兔致敏T淋巴细胞的单克隆抗体和ABC免疫组织化学技术对22只实验性单纯疱疹病毒性角膜炎的家兔三叉神经节致敏T淋巴细胞检测的结果，首次揭示在角膜原发感染HSV-I过程中三叉神经节内致敏T淋巴细胞的出现。致敏T淋巴细胞在角膜接种后第13天出现。第85天消失，结果表明：T淋巴细胞在TG内HSV-I潜伏感染的建立过程中起重要作用。本研究对指导临床治疗提供了理论依据。     

单纯疱疹病毒Ⅰ型潜伏感染的研究：兔角膜HSV—1抗原的检测

通过使用HSV-1 Mckrae株在角膜上建立HSK感染的动物模型,应用辣根过氧化物酶免疫组织化学染色技术检测HSV-1抗原在角膜组织内存在的时间,结果发现,在角膜病变消失后5、10、20、30、45天的角膜基质组织内均有HSV-1抗原存在,但在60、80天的切片上抗原阴性。表明HSV-1原发感染消失后抗原在角膜基质内存在45天后转为阴性。说明角膜基质细胞是对HSV-1感染的最敏感细胞。     

单纯疱疹病毒1功能性基因在角膜内潜伏感染的实验研究

目的 研究角膜中是否有单纯疱疹病毒１型功能性基因的潜伏。方法 在新西兰白兔角膜上制作典型的单纯疱疹病毒１型引发的角膜炎模型,然后将进入稳定期的病变角膜移植到健康兔眼上,术后２周取下植片。每下植片标本均分为三部分,一部分角膜片先行ＨＳＶ－１抗原检测,另一部分采用多聚酶链反应技术检测ＨＳＶ－１潜伏相关转录、胸苷激酶和ＤＮＡ聚合酶基因,第三部分经器官培养３周后,再与兔原代肾细胞一起培养１周,再检测培养后     

单纯疱疹病毒Ⅰ型在三叉神经节潜伏复发机制的研究进展

单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)感染引起的单纯疱疹病毒性角膜炎(HSK)是全球性的致盲性眼病。病毒在眼表发生原发感染后,转运并终生潜伏在三叉神经节内,反复复发引起角膜病变。在对HSV潜伏机制方面的研究过程中,人们逐渐认识到病毒自身和宿主反应两方面共同调控了病毒的潜伏过程。近年来,嗜神经病毒的侵袭、免疫、潜伏复发等各方面的分子机制研究取得大量研究成果,为HSK的防治提供了新思路。本文将主要对HSV-1角膜初发感染后在三叉神经节内潜伏分子机制方面的研究进展进行介绍,并对目前HSK的基础研究和临床治疗存在的问题进行探讨。     

用原位杂交法检测单纯疱疹病毒Ⅰ型在潜伏感染时的少量潜伏相关 …

目的 探讨单纯疱疹病毒Ⅰ型在三叉神经节内潜伏感染时的基因表达。方法 以ＢＡＬＢ／ｃ小鼠制备单纯疱疹性角膜炎,种毒后３６天取三叉神经节和角膜,用免疫组化法检测病毒的抗原表达。制备ｃＲＮＡ探针,用原位杂交法检测ｍ－ＬＡＴ的表达。结果 种毒后３６天,免疫组化结果为阴性,原位杂交结果为阳性。结论 ＨＳＶ－１在三叉神经节内潜伏感染时基因的转录并未静止,有ｍ－ＬＡＴ基因的表达。     

单纯疱疹病毒I型潜伏感染的分子生物学研究

单纯疱疹病毒Ｉ型（ＨＳＶ－１）在角膜发生原发感染后可在三叉神经节（ＴＧ）及角膜组织内发生潜伏感染。分子生物学研究发现潜伏期ＴＧ及角膜组织中都存在ＨＳＶ－１的ＤＮＡ片段及特异性ＲＮＡ的转录，它们与ＨＳＶ－１的潜伏和复发有着密切的关系。但ＨＳＶ－１在ＴＧ与角膜内的潜伏机制有所不同，对这一问题的进一步研究将有助于对ＨＳＶ－１潜伏和复发机理的彻底阐明。     

单纯疱疹病毒角膜潜伏感染的研究

利用多聚酶链反应等分子生物学方法，对１４例单纯疱疹病毒性角膜炎（其中１０例为静止期单纯疱疹病毒性角膜炎），１０例非单纯疱疹病毒性角膜病变及２例正常角膜组织中单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核苷激酶基因（ＴＫ）部分序列进行扩增，发现在４例活跃期单纯疱疹病毒性角膜炎均显示出阳性扩增条带，而１０例静止期单纯疱疹病毒性角膜炎中有８例显示出阳性扩增条带（占８０％），非单纯疱疹病毒性角膜病变及正常角膜组织中均未检出单纯疱疹病毒ＴＫ基因序列。表明角膜可能是单纯疱疹病毒在三叉神经节外形成潜伏感染的一个部位。     

单纯疱疹病毒Ⅰ型眼部潜伏感染的实验研究

纯系新西兰大白兔经角膜接种ＨＳＶ－ｌｓｔｏｋｅｋ株，成功建立单疱病毒性角膜炎模型。自愈后４５天，以原病变角膜为供体，健康新西兰白兔为受体，行穿通性角膜移植术（ＰＫＰ）同时，取患侧１０份及健侧１０份三叉神经节，应用多聚酶链反应（ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）检测ＨＳＶ－１ＤＮＡ。术后５０天，取术侧角膜植片１０只及术侧三叉神经节１０份作相同检测。结果表明，患侧三叉神经节１０份中８份ＨＳＶ－１呈阳性，而健侧１０份中３份阳性；角膜植片１０只有７只阳性，术侧三叉神经节未检测到ＨＳＶ－１ＤＮＡ。由此提示，单纯疱疹病毒Ｉ型（ＨＳＶ－１）既可在同侧三叉神经节形成潜伏感染，又可能在对侧三叉神经节形成潜伏，而且角膜极可能为ＨＳＶ－１的另一潜伏部位     

聚合酶链反应检测角膜内皮炎房水中单纯疱疹病毒Ⅰ型DNA及带状疱疹病毒DNA

目的 评价聚合酶链反应技术（PCR）对角膜内皮炎的诊断价值，并以此解释病因，指导临床治疗。方法对临床诊断为角膜内皮炎的患者12例（12眼）及临床诊断为年龄相关性白内障的患者15例（15眼）分别用PCR方法进行房水中单纯疱疹病毒Ⅰ型（HSV-Ⅰ）DNA及带状疱疹病毒（VZV）DNA的检测，结果采用分类变量资料两样本率比较的四格表确切概率比较。结果共扩增角膜内皮炎患者12例（12眼），HSV-Ⅰ阳性者5例（5眼），阳性率为41．67％，共扩增对照组15例（15眼），HSV-Ⅰ阳性者0例，阳性率为0％，二者差异有显著性。结论PCR技术检测角膜内皮炎患者房水中的HSV-Ⅰ，可在分子水平上建立一种快速准确的诊断方法，为临床治疗提供可靠的依据。     

实验性单纯疱疹病毒Ⅰ型感染兔眼部扫描电镜观察研究

应用ＤＭＳＯ（Ｄｉｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｘｉｄｅ二甲基亚砜）冷冻割断制样扫描电镜技术首次动态观察了不同感染阶段（ｐｏｓｔＩｎｆｅｃｔｉｏｎ，ＰＩ）实验性单纯疱疹病毒性角膜炎（ＨＳＫ）兔的角膜、三叉神经节（ＴＧ）泪腺等组织的病变情况。初步报告并分析了各组织病变的扫描图像结果，并对冷冻割断法观察扫描电镜的原理及优缺点予以讨论，认为该技术应用于眼部单疱病毒感染的研究图像清晰、直观、简便可行，是一种有实用价值的方法。     

正常角膜上皮细胞单纯疱疹I型病毒潜伏的研究

目的 检测近视眼患者角膜上皮细胞单纯疱疹Ⅰ型病毒(HSV-Ⅰ)，探讨其在正常角膜潜伏的可能性。方法取行准分子激光屈光性角膜切削术(PRK)的近视眼角膜上皮细胞138份(138眼)，每份均匀分为三部分，两份分别行HSV-Ⅰ的原位聚合酶链反应(ISPCR)检测和间接免疫荧光法(IFA)检测，阳性者取其相对应的第3份角膜上皮进行病毒分离培养和电镜观察。结果 138份近视眼角膜上皮中，ISPCR阳性者8眼(5．8％)，IFA阳性者4眼(2．9％)，两种检测均阳性者3眼(2．2％)，取此9眼的第3份角膜上皮进行病毒分离培养，电镜扫描未发现病毒颗粒。结论正常角膜上皮细胞内存有HSV．I功能基因，提示可能有HSV—I的潜伏。     

正常角膜上皮细胞单纯疱疹病毒I型的检测

单纯疱疹病毒（herpes simplex virus,HSV)在眼部感染主要为HSV-Ⅰ型，其最主要的生物学科特性是能够形成潜伏感染，目前已公认HSV-Ⅰ可以潜伏在静止期单纯疱疹病毒性角膜炎（herpes simplex keratitis,HSK）角膜组织中。针对正常角膜内是否有HSV-Ⅰ的存在，近几的国内外学者采用聚合酶链反应（polymerase chain reaction,PCR）检测到正常角膜内存有HSV-Ⅰ DNA。     

单纯疱疹病毒角膜感染后的播散

应用细胞培养技术,结合光镜及电镜检查,对小鼠单眼角膜接种HSV-1后病毒在双侧角膜、球后壁、视神经、三叉神经节及脑干的分布进行了动态观察并详细记录。光镜观察炎症逐渐扩展至眼球深层及神经组织,电镜证实细胞中病毒样颗粒。提出HSV-1除通过神经轴浆运输外,还可能通过眼组织及血行播散,解释了某些临床现象,并对控制单疱病毒性眼病的感染播散及防止复发提出了初步建议。     

实验性单纯疱疹病毒I型感染兔眼部扫描电镜观察研究

应用ＤＭＳＯ冷冻割断制样扫描电镜技术首次动态观察了不同感染阶段实验性单纯疱疹病毒性角膜炎（ＨＳＫ）兔的角膜、三叉神经节（ＴＧ）泪腺等组织的病变情况。初步报告并分析了各组织病变的扫描图像结果，并对冷冻割断法观察扫描电镜的原理及优缺点予以讨论，认为该技术应用于眼部单疱病毒感染的研究图像清晰、直观、简便可行，是一种有实用价值的方法。