连翘酯苷A通过抑制PI3K/Akt通路并激活Nrf2/HO-1通路抑制LPS诱导的炎症及氧化应激

目的 探讨连翘酯苷A(forsythiaside A,FSA)对LPS诱导的RAW 264.7巨噬细胞炎症和氧化应激的影响.方法 建立LPS诱导RAW 264.7巨噬细胞模型,给予不同质量浓度连翘酯苷A,以观察其对炎症介质(NO和PGE2)生成和促炎细胞因子(TNF-α和IL-1β)表达的影响,并探讨其可能机制.结果 ...     

连翘苷对肥胖症大鼠脂代谢紊乱和氧化应激的影响及机制研究

目的 探究连翘苷对肥胖症大鼠模型脂代谢紊乱和氧化应激的影响。 方法 采用高脂饲料喂养 建立肥胖症大鼠模型 (将大鼠随机分为 6 组: 对照组、 模型组、 连翘苷 5 mg / kg 组、 连翘苷 10 mg / kg 组、 连翘苷 20 mg / kg 组和二甲双胍组); 检测大鼠体重; 卷尺测量肛鼻长计算 Lee’s 指数; 血糖仪检测血糖水 平; 油红 O 染色检测脂质蓄积程度; 全自动生化分析仪检测 TC、 TG、 LDL-C 和 HDL-C 水平; 试剂盒检测 ALT、 AST、 ALP 水平和 SOD、 MDA、 GSH-Px 含量。 Western 印迹检测 p-Nrf2、 Nrf2、 HO-1 蛋白表达水平。 结果 与对照组相比较, 模型组 Lee’s 指数、 体重增重和血糖水平升高, TC、 TG 和 LDL-C 水平升高, HDL-C 水平降低, ALT、 AST 和 ALP 水平升高, SOD、 GSH-Px 含量降低, MDA 含量升高, p-Nrf2 / Nrf2、 HO-1 蛋白表达水平降低, 差异具有统计学意义 (P< 0. 05)。 与模型组相比较, 连翘苷 10、 20 mg / kg 组和 二甲双胍组 Lee’s 指数、 体重增重和血糖水平降低, 脂质蓄积程度明显改善, TC、 TG 和 LDL-C 水平降低, HDL-C 水平升高, ALT、 AST 和 ALP 水平降低, SOD、 GSH-Px 含量升高, MDA 含量降低, p-Nrf2 / Nrf2、 HO-1 蛋白表达水平升高, 差异具有统计学意义 (P< 0. 05)。 结论 连翘苷可改善肥胖症大鼠模型氧化应激 及脂代谢紊乱, 这可能是通过活化 Nrf2 / HO-1 信号通路实现的。     

连翘酯苷A对脂多糖诱发的小鼠急性肺损伤的保护作用

目的研究中药单体连翘酯苷A对脂多糖(LPS)诱发小鼠急性肺损伤的保护作用及可能机制。方法采用腹腔注射LPS(10 mg/kg体质量)建立内LPS诱发急性肺损伤小鼠模型;实验分正常对照组,急性肺损伤模型组,抗体组,连翘酯苷A高、中、低剂量组;其中抗体组在造模前12 h前腹腔注射抗小鼠Toll样受体4/髓样分化蛋白2(TLR4/MD2)复合物抗体(50μg/20 g体质量),连翘酯苷A干预组在造模前7 d腹腔注射连翘酯苷A1次/d,剂量分别为(80、20、5)mg/kg体质量;各组小鼠在造模4 h后留取血和肺组织,动态浊度法检测血浆内毒素的含量,HE染色法观察肺组织病理的改变,RT-PCR和Western blot法测定肺组织TLR4的表达,免疫组化测定肺组织MyD88和NF-κB的表达,ELISA检测血清中TNF-α的含量。结果与正常组相比,模型组血浆中内毒素含量显著升高,肺泡间隔明显增厚,充血,水肿及大量的中性粒细胞浸润;与模型组相比,连翘酯苷A用药各组血浆内毒素含量明显下降(P0.01),肺组织病理损伤不同程度的减轻,TLR4 mRNA和蛋白的表达明显下调(P0.01),MyD88和NF-κB蛋白的表达也显著降低(P0.01),血清中TNF-α的含量降低,连翘酯苷A干预各组呈剂量依赖关系。结论连翘酯苷A对LPS诱发的急性肺损伤小鼠起保护作用,其机制可能与其抑制LPS-TLR4-MyD88-NF-κB信号通路有关。     

连翘酯苷A对溃疡性结肠炎模型大鼠免疫功能的影响

目的:研究连翘酯苷A对溃疡性结肠炎大鼠免疫功能的影响,并探讨其相关作用机制。方法:将健康SD大鼠随机分为5组:对照组(不做任何处理,正常喂养)、模型组(建立溃疡性结肠炎大鼠模型)及连翘酯苷A低、中、高剂量组(分别给予模型大鼠5 mg/kg、20 mg/kg和80 mg/kg连翘酯苷A灌胃)。比色法检测大鼠结肠组织中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性;ELISA法检测血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素2(IL-2)和IL-4含量;还测定脾脏指数和胸腺指数,外周血单个核细胞(PBMC)中CD3⁺、CD4⁺和CD8⁺T淋巴细胞百分比,血清IgA和IgG水平,以及血清补体C3和C4水平。结果:模型组大鼠结肠组织出现明显炎症和溃疡,提示造模成功;与模型组比较,连翘酯苷A各剂量组大鼠结肠炎症和溃疡明显减轻,其中高剂量组效果最好。与对照组比较,模型组大鼠脾脏指数和胸腺指数降低(P<0. 05),结肠组织中MDA含量增多(P<0. 05),SOD活性降低(P<0. 05),PBMC中CD3<...     

山栀苷对6-羟基多巴胺损伤的SH-SY5Y细胞的保护作用及其机制

目的：观察山栀苷对6-羟基多巴胺（6-OHDA）诱导的SH-SY5Y细胞氧化损伤的作用,并探讨其作用的分子机制。方法：以6-OHDA诱导的SH-SY5Y细胞为帕金森病体外细胞模型,分别以5、50、100和200μmol/L山栀苷作用于受损细胞,另设空白组及50μmol/L栀子苷阳性对照组。CCK-8法检测细胞活力;倒置显微镜下观察细胞形态学改变;流式细胞术检测细胞内活性氧（ROS）的荧光强度;分子对接技术评价山栀苷、栀子苷与Kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)的结合情况;Western blot检测Keap1、核因子E2相关因子2(Nrf2)和血红素加氧酶1(HO-1)蛋白表达水平;RT-qPCR检测HO-1的mRNA水平。结果：（1）与空白组比较,模型组细胞活力降低,细胞数量减少,形态改变明显,ROS水平显著升高,Nrf2和HO-1蛋白表达均显著下降,HO-1的mRNA水平显著降低（P<0.05）;(2)与模型组比较,山栀苷预处理2 h可提高6-OHDA损伤SH-SY5Y细胞的活力,其中100μmol/L山栀苷组的细胞活力最高（P<0.05）,还可显著降低ROS水平...     

积雪草苷对肾缺血再灌注损伤模型大鼠的保护作用

背景:预防或减少肾缺血再灌注损伤可提高肾移植手术移植物的存活率,因此需要寻找更为安全、有效、廉价的科学药物来预防或治疗肾缺血再灌注损伤。目的:探讨积雪草苷对肾缺血再灌注损伤模型大鼠的保护作用及相关机制。方法:将40只SD大鼠随机分为4组,分别为假手术组、模型组、积雪草苷组及积雪草苷+鸦胆子苦醇组,每组10只,后3组夹闭肾蒂45 min建立大鼠肾缺血再灌注损伤模型。积雪草苷组、积雪草苷+鸦胆子苦醇组预先给予大鼠积雪草苷混悬液灌胃4周,积雪草苷+鸦胆子苦醇组于造模前5 d连续腹腔注射核因子E2相关因子2特异性抑制剂鸦胆子苦醇。检测各组大鼠血清中肌酐和尿素氮水平,酶联免疫吸附实验法检测尿液中肾损伤分子1的表达,测定肾组织中超氧化物歧化酶和丙二醛表达水平,苏木精-伊红染色观察肝组织病理改变,免疫组化检测肾组织内核因子E2相关因子2蛋白的表达,蛋白质印迹法检测肾组织细胞内核因子E2相关因子2和血红素加氧酶1蛋白的表达。结果与结论:(1)与模型组比较,积雪草苷组血清肌酐和尿素氮水平明显降低(P <0.05),尿液中肾损伤分子1表达明显降低(P <0.05),肾组织中超氧化物歧化酶表达明...     

连翘苷对感染性休克小鼠急性肺损伤的作用与机制

目的 探讨连翘苷通过腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,m TOR)/p70核糖体S6蛋白激酶(p70 S6 kinase,p70S6K)信号通路介导的自噬对感染性休克小鼠急性肺损伤(Acute lung injury,ALI)的影响。方法 随机选择12只小鼠作为对照组,其余小鼠通过腹腔注射20 mg·kg^-1脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)构建感染性休克小鼠模型,将感染性休克小鼠随机平分为模型组、低、中、高剂量实验组(5 mg·kg^-1、10 mg·kg^-1、20 mg·kg^-1连翘苷)、高剂量+抑制剂组(20 mg·kg^-1连翘苷+20 mg·kg^-1AMPK抑制剂compound C),每组均12只小鼠。称量肺干重及湿重,计算W/D比值;ELISA法检测...     

姜黄素通过激活Nrf2/Nox4通路调控压力负荷诱导的心力衰竭

目的 探讨姜黄素(CUR)对小鼠压力负荷性心力衰竭(HF)的保护作用及可能机制.方法 30只健康雄性C57BL/6小鼠随机分成假手术组(Sham)、心力衰竭组(HF)和姜黄素治疗组(HF+CUR).通过主动脉弓缩窄(TAC)建立小鼠压力负荷性心力衰竭模型.实验第4周,收集各组小鼠心肌组织,称取心脏重量,计算心脏重量指数...     

芒果苷对心肌梗死后慢性心衰大鼠的保护作用及对Nrf2/HO-1信号通路的影响

目的 探讨芒果苷对心肌梗死后慢性心衰大鼠炎症反应和氧化应激的影响及对Nrf-2/HO-1信号通路的影响。方法 50只大鼠随机分为假手术组（sham)、心肌梗死后慢性心衰大鼠模型组(MI)、芒果苷低剂量组（MFL）、芒果苷中剂量组（MFM）及芒果苷高剂量组（MFH）,每组10只。采用结扎大鼠冠状动脉导致急性心肌梗死制备慢性心衰大鼠模型,利用超声检测各组大鼠心功能;HE染色检测心肌组织病理学改变;ELISA检测血清中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β（IL-1β）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平;免疫荧光检测心肌组织ROS水平;检测大鼠心肌组织中超过氧化物歧化酶（SOD）活性及丙二醛（MDA）含量;Western blot检测Nrf-2/HO-1信号通路相关蛋白Nrf-2及HO-1表达情况。结果 芒果苷中、高剂量组大鼠心功能明显改善;心肌组织结构改善;IL-6、IL-1β及TNF-α水平降低;ROS水平降低,SOD活性明显升高,而MDA含量显著降低;同时,Nrf-2及HO-1蛋白表达进一步增加（P<0.05）。结论 芒果苷能够降低心肌梗死后慢性心衰大鼠炎症反应及氧化应激,可能与激活Nrf-2/HO-1信号通路有关。     

金纳多对小鼠急性实验性结肠炎的保护作用及可能机制

目的观察金纳多对小鼠急性实验性结肠炎的保护机制并对比分析其与柳氮磺胺吡啶(SASP)的疗效。方法用3%DSS建立小鼠急性实验性结肠炎动物模型。小鼠随机分为4组:正常组、造模组、金纳多治疗组、柳氮磺胺吡啶(SASP)治疗组。记录各组小鼠一般情况(饮食、便血、体重)、DAI评分、肠管长度和肠组织学损伤评分;通过免疫组化、Real-time PCR和Western blot检测各组小鼠肠组织中炎症因子(gp130,STAT3, p-STAT3, ROR-γt,IL-6, IL-17, IL-23)的表达。结果金纳多可改善小鼠一般情况(饮食、便血、体重),与造模组比较,可有效降低小鼠DAI评分、组织学损伤评分、炎症因子(gp130, STAT3, p-STAT3, ROR-γt,IL-6, IL-17, IL-23)的表达水平(P0.01)。与SASP治疗组比较,金纳多治疗组小鼠DAI评分、组织学损伤评分、炎症因子(gp130, STAT3, p-STAT3, ROR-γt,IL-6, IL-17, IL-23)的表达均高于SASP治疗组(P0.05)。结论金纳多对小鼠急性实验性结肠炎的保护作用与抑制IL-6/STAT3通路和IL-23/IL-17轴相关,但疗效弱于柳氮磺胺吡啶。     

纳米硒对实验性糖尿病小鼠心肌的保护作用及其可能的机制

目的： 观察纳米硒对实验性糖尿病小鼠心肌的保护作用。方法: 选取60只健康雄性昆明种小鼠，随机抽取10只小鼠作为正常对照组，其余50只小鼠禁食24 h后，左下腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin，STZ)50 mg/kgBW连续5 d，7 d后尾静脉取血测血糖，随机选择血糖值>16.65 mmol/L的40只小鼠分为4组，分别是阳性对照组、低剂量(25 μg/kg)纳米硒组、中剂量(50 μg/kg)纳米硒组、高剂量(100 μg/kg)纳米硒组。各组小鼠分别每天以0.2 mL溶液灌胃补充生理盐水及相应剂量的纳米硒。每周称体重1次，各组剂量根据体重做相应调整。8周后摘除眼球放血处死小鼠，迅速取出心脏，取左心室部分心肌，制成10%心肌匀浆，测定SOD、GSH-Px活力及MDA含量；剩下心肌采用原位缺口末端标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡，细胞免疫组织化学检测Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果: 与正常对照组比较，阳性对照组心肌SOD、GSH-Px活性降低，MDA水平升高，细胞凋亡率明显增加, Bcl-2表达下降,Bax蛋白表达增强；与阳性对照组比较，低、中剂量纳米硒组心肌SOD、GSH-Px活性升高，MDA水平降低，细胞凋亡率下降, Bcl-2蛋白表达增强,Bax蛋白表达下降；而高剂量纳米硒组心肌SOD、GSH-Px活性较中剂量钠米硒组有明显的下降，相应地MDA明显上升，细胞凋亡率明显增加, Bcl-2蛋白表达下降,Bax蛋白表达增强,与阳性对照组比较SOD、GSH-Px活性、MDA含量及心肌细胞凋亡率无明显差异。结论: 给糖尿病小鼠补充一定剂量的纳米硒可以保护心肌，其机制可能与抗氧化、调节血糖及增强Bcl-2表达有关。     

奥美沙坦酯对慢性心力衰竭小鼠肾脏损伤的保护作用

目的: 探讨奥美沙坦酯对慢性心力衰竭小鼠肾脏损伤的影响。方法: 健康C57小鼠分为假手术组(sham组)、慢性心力衰竭组(CHF组)和奥美沙坦酯治疗组(OLM+CHF组)。以冠状动脉左前降支结扎法建立慢性心力衰竭小鼠模型,其中奥美沙坦酯治疗组以10 mg/kg剂量每天胃饲。12周时观察各组小鼠心率、血压、心功能状况、血肌酐、血尿素氮、血浆和肾脏血管紧张素Ⅱ水平;real-time PCR法检测肾脏肾素、血管紧张素1型受体(AT1R)和血管紧张素原(AGT)的表达情况,PAS染色观察肾组织结构变化。结果: 与shan组相比,CHF组和OLM+CHF组左室舒张末期内径(LVDd)和左室收缩末期内径(LVDs)显著增加(P＜0.05),短轴缩短率(FS)和射血分数(EF)显著降低(P＜0.05)。与sham组相比,CHF组收缩压、血肌酐和血尿素氮含量显著增高,OLM+CHF组以上指标较CHF组均显著降低(P＜0.05)。与sham组相比,CHF组血浆和肾脏血管紧张素Ⅱ水平增高,肾素、AT1R和AGT表达增高(P＜0.05),OLM+CHF组肾脏血管紧张素Ⅱ水平、肾素、AT1R和AGT表达较CHF组均显著降低(P＜0.05)。CHF组PAS染色可见肾小球系膜区扩张,肾小管间质PAS阳性染色物明显增多。OLM+CHF组肾小球系膜区和肾小管间质PAS染色阳性物质与CHF组相比明显减少。结论: 慢性心力衰竭可使肾内肾素血管紧张素系统激活并导致肾脏损伤,奥美沙坦酯通过抑制血管紧张素Ⅱ起到肾脏保护作用。     

肝细胞生长因子对急性失代偿性心力衰竭模型小鼠的保护

背景：肝细胞生长因子是一种心肌营养因子,具有很强的抑制心肌细胞凋亡与心室重构,促血管内皮细胞有丝分裂作用。 目的：观察肝细胞生长因子对急性失代偿性心力衰竭模型小鼠的保护作用。 方法：将50只昆明小鼠随机分为5组：正常对照组、慢性心力衰竭组、急性失代偿性心力衰竭组、慢性心力衰竭治疗组、急性失代偿性心力衰竭治疗组。采用尾静脉注射阿霉素建立慢性心力衰竭小鼠模型,第7周尾静脉注射细菌脂多糖制作急性失代偿性心力衰竭模型,随后慢性心力衰竭治疗组、急性失代偿性心力衰竭治疗组同时给予尾静脉注射肝细胞生长因子干预。 结果与结论：与慢性心力衰竭组比较,慢性心力衰竭治疗组心室壁厚度、左室射血分数值明显增加,白细胞介素6减少,脑钠肽下降,Bax蛋白表达减少,Bcl-2蛋白表达增加,心肌细胞凋亡明显减少(P < 0.01或0.05)。与急性失代偿性心力衰竭组比较,急性失代偿性心力衰竭治疗组心室壁厚度、左室射血分数值明显增加,脑钠肽表达下调,白细胞介素6明显下降,Bcl-2蛋白表达增加,Bax蛋白表达减少(P < 0.01或0.05)。说明肝细胞生长因子通过抗炎性因子作用,抗心肌细胞凋亡作用明显改善急性失代偿性心力衰竭小鼠的心脏功能。     

Protective effect of oxymatrine on chronic rat heart failure

Oxymatrine is one of the alkaloids extracted from the Chinese herb Sophora japonica (Sophora flavescens Ait.) with anti-inflammatory, immune reaction inhibiting, antiviral, and hepatocyte and antihepatic fibrosis protective activities. However, the effect of oxymatrine on heart failure is not yet known. In this study, the effect of oxymatrine on heart failure was investigated using a Sprague-Dawley rat model of chronic heart failure. Morphological findings showed that in the group treated with 50 and 100 mg/kg of oxymatrine; intermyofibrillar lysis disappeared, myofilaments were orderly, closely and evenly arranged; and mitochondria contained tightly packed cristae compared with the heart failure group. We investigated the cytosolic Ca²⁺ transients and sarcoplasmic reticulum (SR) Ca²⁺ content, and assessed the expression of ryanodine receptor (RyR2), SR-Ca²⁺ ATPase (SERCA2a), and L-type Ca²⁺ channel (dihydropyridine receptor, DHPR). We found that the cytosolic Ca²⁺ transients were markedly increased in amplitude in the medium- (ΔF/F ₀ = 26.22 ± 2.01) and high-dose groups (ΔF/F ₀ = 29.49 ± 1.17) compared to the heart failure group (ΔF/F ₀ = 12.12 ± 1.35, P < 0.01), with changes paralleled by a significant increase in the SR Ca²⁺ content (medium-dose group: ΔF/F ₀ = 32.20 ± 1.67, high-dose group: ΔF/F ₀ = 32.57 ± 1.29, HF: ΔF/F ₀ = 17.26 ± 1.05, P < 0.01). Moreover, we demonstrated that the expression of SERCA2a and cardiac DHPR was significantly increased in the medium- and high-dose group compared with the heart failure rats. These findings suggest that oxymatrine could improve heart failure by improving the cardiac function and that this amelioration is associated with upregulation of SERCA2a and DHPR.     

Myofilament dysfunction as an emerging mechanism of volume overload heart failure

Two main hemodynamic overload mechanisms [i.e., volume and pressure overload (VO and PO, respectively] result in heart failure (HF), and these two mechanisms have divergent pathologic alterations and different pathophysiological mechanisms. Extensive evidence from animal models and human studies of PO demonstrate a clear association with alterations in Ca²⁺ homeostasis. By contrast, emerging evidence from animal models and patients with regurgitant valve disease and dilated cardiomyopathy point toward a more prominent role of myofilament dysfunction. With respect to VO HF, key features of excitation–contraction coupling defects, myofilament dysfunction, and extracellular matrix composition will be discussed.     

川穹嗪对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用及可能机制

目的 观察川穹嗪对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用及其可能的信号机制.方法 将36只SD大鼠随机分为对照组(control)、糖尿病肾病模型组(DN)和川穹嗪治疗组(TMP),每组12只.于造模成功后第8周,生化分析仪检测各组大鼠血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、总蛋白(TP)、白蛋白丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨...     

促红细胞生成素对压力超负荷小鼠心肌保护作用的相关分子机制

目的探讨促红细胞生成素(EPO)对压力超负荷小鼠心肌保护作用的分子机制。方法采用主动脉弓缩窄术(TAC)的方法建立小鼠模型,小鼠随机分为假手术组(Sham)、模型组(TAC-PBS)和EPO2000U/Kg治疗组(TAC-EPO2000)。术后8周,测定各组小鼠心肌毛细血管密度及生存率,Western blot方法检测各组小鼠心肌组织p Akt/Akt、p-STAT3/STAT3、p-e NOS/e NOS、p-p38/p38、p-ERK/ERK-1、p-JNK/JNK的表达。结果 EPO治疗能显著提高TAC小鼠生存率(P0.05)。与TAC-PBS组比较,TAC-EPO2000心肌组织p-STAT3、p Akt和p-e NOS的表达水平显著增多(P0.05),p-p38的表达水平显著减少(P0.05),p-ERK/ERK-1,p-JNK/JNK则无明显差异(P0.05)。各组小鼠心肌毛细血管密度没有明显差异。结论 EPO对压力超负荷小鼠心肌保护作用可能与调控p-STAT3、p Akt、p-e NOS和p-p38的表达相关。     

Heme oxygenase-1 overexpression exacerbates heart failure with aging and pressure overload but is protective against isoproterenol-induced cardiomyopathy in mice

IntroductionHeme oxygenase-1 (HO-1) is a cytoprotective enzyme induced by stress. Heart failure is a condition of chronic stress-induced remodeling and is often accompanied by comorbidities such as age and hypertension. HO-1 is known to be protective in the setting of acute myocardial infarction. The role of HO-1 in heart failure is not known, particularly in the setting of pressure overload.MethodsMice with alpha-myosin heavy chain restricted expression of HO-1 were aged for 1 year. In addition, mice underwent transverse aortic constriction (TAC) or were infused with isoproterenol (ISO) to induce heart failure.ResultsHO-1 transgenic mice developed spontaneous heart failure after 1 year compared to their wild-type littermates and showed accelerated cardiac dysfunction 2 weeks following TAC. Wild-type mice undergoing pressure overload demonstrated extensive interstitial fibrosis that was prevented by HO-1 overexpression, yet HO-1 transgenic mice had reduced capillary density, contractile reserve, and elevated end-diastolic pressure. However, HO-1 transgenic mice had significantly attenuated ISO-induced cardiac dysfunction, interstitial fibrosis, and hypertrophy compared to control. Isolated cardiomyocytes from HO-1 transgenic mice treated with ISO did not show evidence of hypercontracture/necrosis and had reduced NADH oxidase activity.ConclusionsHO-1 is an effective mechanism for reducing acute myocardial stress such as excess beta-adrenergic activity. However, in our age and pressure overload models, HO-1 showed detrimental rather than therapeutic effects in the development of heart failure.