线粒体DNA 3243、3316点突变与中国云南2型糖尿病的关系(摘要)

目的:研究中国云南2型糖尿病人群中线粒体tR-NALeu(UUR)基因nt 3243A/G突变和ND-1基因nt3316G/A突变的发生频率及其与2型糖尿病的相关性.寻求准确、快速、简易的临床糖尿病基因诊断技术.对象及方法:随机选择225例中国云南2型糖尿病患者和195例无糖尿病家族史的健康对照者作为研究对象.通过聚合酶链反应及限制性片断长度多态性分析(PCR-RFLP)检测t RNALeu(UUR)基因3243A/G突变和ND-1基因3316G/A突变,并经DNA直接测序确证.结果:225例2型糖尿病患者及195例对照者中无1人携带线粒体3243A/G突变;225例2型糖尿病患者中检出线粒体3…     

线粒体DNA 3243、3316、3394位点突变与精神分裂症相关分析

目的分析线粒体tRNALeu(UUR)基因3243位点及ND1基因3316、3394位点突变对精神分裂症(SZ)发病的影响。方法采用PCR扩增、限制性内切酶消化、琼脂糖凝胶电泳分型检测、DNA测序等方法,对随机抽取的无亲缘关系的250例患者(SZ组)和292例对照组的外周血mtDNA进行3243、3316和3394位点的突变检测。结果在SZ组中发现8例3316G/A突变,对照组中3例,两组相比差异无统计学意义(P=0.138)。在SZ组中发现15例3394T/C突变,对照组中有4例,两组相比差异有统计学意义(P=0.007)。在精神分裂症患者组和对照组中均未发现3243A/G突变。结论 mtDNA3394T/C突变可能与SZ发生有一定关系,mtDNA 3243A/G、3316G/A突变可能与SZ发生无关。     

线粒体NDUFB6基因单核苷酸多态与2型糖尿病关系的研究

目的:通过对线粒体基因NDUFB6[NADH dehydrogenase (ubiquinone) 1 beta subcomplex]进行单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism, SNP)的检测,对高频率SNP进行基因分型,研究NDUFB6基因与2型糖尿病的相关性?方法:使用PCR+测序方法,以15个2型糖尿病患者和9个正常人为样本,对NDUFB6基因的启动子?外显子以及临近的内含子进行测序以确定该基因的SNP;对高频率的SNP,仍使用PCR+测序方法分别在192个2型糖尿病患者与正常人中进行基因分型?结果:总共发现NDUFB6基因的6个SNP,其中3个SNP出现频率较高?NDUFB6基因启动子的1个SNP(-1211C > T)在2型糖尿病人群与正常人群有显著差异(P < 0.05)?结论:NDUFB6基因启动子的-1211C > T多态性可能与2型糖尿病的发病有关?     

线粒体DNA ND4基因12026（A→G）点突变与2型糖尿病相关性研究

目的 研究中国云南2型糖尿病人群线粒体ND4基因ntl2026A→G点突变的发生频率及其与2型糖尿病的相关性.寻求准确、快速、简易的临床糖尿病基因诊断方法.方法 随机选取350例中国云南2型糖尿病患者和225例无糖尿病家族史的健康对照者作为研究对象.通过聚合酶链式反应及限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)检测线粒体12026A→G点突变.结果 经DNA直接测序确证.结果 350例2型糖尿病患者中12026A→G点突变者11例(3.14%),225例对照者中携带该突变者6例(2.67%),突变发生率在两组间差异尤统计学意义(x2=0.0059,P=0.8064).结论 线粒体ND4基因12026A→G突变可能仪为人群中线粒体基因组的正常多态,不是中国(特别是云南)人群中2型糖尿病的常见致病因.     

线粒体DNA tRNALeu(UUR)基因A3243G点突变糖尿病病人的监测

①目的 调查青岛地区糖尿病人群中线粒体DNA tRNALeu(UUR)基因np3243A→G点突变糖尿病流行情况，评价所用方法检测该点突变的灵敏度。②方法 制定调查人选条件，选择可疑病例。由外周血白细胞提取基因组DNA。基因检测采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR—RFLP)技术。③结果 糖尿病病人中该点突变检出率为5‰，在可疑病人中为14‰，在高危人群中为200‰。通过增加电泳上样量可以检测到7％的突变比例。④结论 该点突变在糖尿病人群中有一定流行。高危人群检出率高，提示对线粒体基因突变糖尿病的高危人群进行基因诊断非常必要。PCR—RFLP结合大的电泳上样量可以提高检测灵敏度。     

线粒体DNA ND1基因G3316A突变与2型糖尿病相关性研究

目的 研究浙江台州地区汉族人群线粒体DNA ND1基因中G3316A突变的发生率与2型糖尿病的相关性.方法 应用聚合酶链反应技术对无血缘关系的270例2型糖尿病患者和185例健康对照者的外周血DNA进行检测.结果 发现10例T2DM患者存在G3316A突变(3.70%),对照组中有1例突变(0.54%),G3316A在两组间比较有显著性差异(P＜0.05).结论 线粒体DNA ND1 G3316A突变可能与浙江台州地区汉族人群2型糖尿病的发生与发展有关.     

云南2型糖尿病350例患者线粒体DNA 12SrRNA基因C1310T突变的检测

目的研究中国云南2型糖尿病人群中线粒体12SrRNA基因C1310T突变的发生频率及其与2型糖尿病的相关性.方法随机选取350例中国云南2型糖尿病患者和225例无糖尿病家族史的健康对照者作为研究对象,通过聚合酶链反应及限制性片段长度多态性分析（PCR-RFLP）检测C1310T突变,并经DNA直接测序确证.结果350例2型糖尿病患者及225例对照者中无1人携带C1310T突变.结论线粒体12SrRNA基因C1310T突变在中国云南2型糖尿病人群中发生频率低,不是该地区人群中2型糖尿病的常见致病因.     

云南地区2型糖尿病患者线粒体tRNALeu（UUR） 3243 A/G突变的筛查

目的探讨线粒体tRNALeu(UUR)基因3243位点A/G突变在云南地区2型糖尿病(T2DM)患者中的发生率.方法采用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)、DNA测序技术,对235例T2DM患者和128例糖耐量正常的健康对照者进行检测.结果在235例T2DM患者及128例对照者中未检出线粒体tRNALeu(UUR)3243 A/G突变.结论线粒体tRNALeu(UUR)基因3243位点A/G突变在云南地区T2DM人群中并不常见,可能不是该地区T2DM的常见遗传易感因素.     

浙江汉族人群线粒体DNA ND1基因G3316A突变与2型糖尿病

目的：研究与日本人2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus,T2DM）相关的线粒体DNA（mitochondria DNA,mtDNA）ND1基因G3316A突变在浙江汉族T2DM人群中的发生率及其临床意义。方法：采用PCR产物直接测序法对浙江籍汉族人群中无血缘关系的315名T2DM患者及158名正常对照的外周血mtDNA进行检测,并用DNASTAR和Antheprot 5.0软件分析突变位点。结果：在T2DM患者中检测到6例（占1.90%）G3316A突变,对照组中发现3例（占1.90%）突变,突变发生率在两组间差异无显著性（P＆gt;0.05）。携带G3316A位点突变的T2DM组与无该突变的T2DM组之间的临床特点（发病年龄、体重指数和血糖水平等）比较差异亦无显著性。蛋白二级结构中α-螺旋、β-折叠、β-转角和不规则卷曲的构成比没有发生改变。结论：线粒体DNA ND1基因G3316A突变可能与浙江汉族人群T2DM的发生无关,仅为人群中的基因多态性。     

线粒体DNA3316、3394等4个突变位点与2型糖尿病的关系研究

目的:探讨DNA tRNA Leu(UUR)基因及ND-1基因3316 G/A、3394 T/C等4个突变位点与2型糖尿病的关系。方法:对236例海南地区2型糖尿病患者和252例健康对照者进行空腹血糖测定并采用聚合酶链式反应—限制性核酸内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)的分析方法进行mtDNA的3243、3316、3394、和3593共4个位点进行突变筛选,并采用DNA测序方法确证。结果:实验组空腹血糖(9.37±3.01)mmol/L与健康对照组(4.96±0.76)mmol/L差异有统计学意义(P<0.05);实验组检出3316(G→A)突变8例,3394(T→C)突变3例;健康对照组未发现上述突变;突变检测结果与测序一致。两组间3316(G→A)突变率差异有统计学意义(P<0.05)。结论:线粒体DNAtRNALeu(UUR)基因及ND-1基因3316、3394位点的基因突变,尤其是3316位点(G→A)突变可能与某些核基因或环境因素协同促进了2型糖尿病的发生。     

线粒体基因ND1/T3394C突变与糖尿病

【目的】调查线粒体NADH脱氢酶亚单位 1(ND1)基因的T3394C位点突变与中国人糖尿病的发病情况。【方法】随机收集 338例无血缘关系的糖尿病患者及 2 6 2例正常对照组 ,用聚合酶链反应扩增、限制性内切酶HaeⅢ消化进行突变筛查 ,DNA序列分析确认。【结果】糖尿病患者中T3394C突变者共 8例 (2 37%) ,正常对照组中只有 1例 (0 38%,P <0 0 1)。糖尿病突变患者中 4例有糖尿病家族史 ,4例病人由于胰岛素分泌功能下降和 /或出现并发症 ,需用胰岛素治疗。【结论】ND1/T3394C突变在糖尿病患者中的发生率明显高于正常对组 ,提示这个位点突变可能是导致线粒体糖尿病的易感基因之一。     

线粒体DNA tRNA^leu（UUR）和DN1双重突变——糖尿病家系报道

目的：探讨线粒体ＤＮＡ突变在糖尿病发病中的作用。方法：采用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ、亚克隆及ＤＮＡ序列分析等技术，对一个母系遗传糖尿病家系成员的线粒体ＤＮＡ ｔＲＮＡ＾ｌｅｕ（ＵＵＲ）及其临近区域进行了突变分析。结果：发现ｍｔＤＮＡ ｔＲＮＡ＾ｌｅｕ（ＵＵＲ）ｎｔ ３２４３ Ａ→Ｇ和ＮＤ １ ｎｔ ３３６５ Ｔ→Ａ双重突变。结论：结合该家系糖尿病患者具有发病年龄早（〈３０岁），对胰岛素依赖，伴耳聋等较严重     

线粒体DNA与2型糖尿病关系的研究进展

2型糖尿病(T2D)是最常见的糖尿病类型，其通常以胰岛素抵抗为特征，由两个主要因素共同引起：胰腺β细胞的胰岛素分泌减少和机体产生胰岛素抵抗。在过去几十年的研究中，越来越多的证据表明线粒体DNA(MtDNA)在T2D的发生中具有重要作用。在这篇综述中，我们重点介绍了MtDNA拷贝数、MtDNA异质性和MtDNA甲基化在T2D发生和发展中的各种作用。     

线粒体DNA ND1基因3394 T→C突变与2型糖尿病

线粒体基因（mitochondrial DNA，mtDNA）是目前发现的除核基因以外惟一存在于人类细胞质中的DNA分子，具有自我复制、转录、和编码功能。mtDNA缺陷可导致胰岛素分泌障碍，从而参与糖尿病的发生。有关糖尿病与mtDNA基因突变的研究国内外均有报道，但结果不一。我们采用PCR-RFLP、DNA测序和结构预测的分析方法，对武汉地区95例2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus，T2DM）患者和168例健康对照mtDNA的ND1基因（np3307-4263）的3394（T-C）突变位点进行筛选检测。     

遗传性共济失调线粒体DNA11778、8344点突变的研究

目的：探索线粒体DNA点突变与遗传性共济失调的关系。方法;采用聚合酶链反应（PcR）扩增临床确诊为遗传性共济失调的26例患者和35例健康对照组外周血白细胞的线粒体DNA,并对PCR产物进行单链构象多态性（SSCP）分析。结果：所有对象均未检测到点突变。结论：遗传性共济失调的发生、发展可能与该区域点突变无关。     

线粒体DNA3160-3755区域基因突变与2型糖尿病的关系

目的研究线粒体DNA3160-3755区域基因在延边地区2型糖尿病（T2DM）患者中的突变情况,探讨该区域线粒体基因突变与2型糖尿病的关系。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（polymorphismchainreaction-restrictionfragmentlengthpolymorphism,PCR-RFLP）技术和直接测序法对延边地区人群108例正常健康体检者、328例T2DM患者（其中2例合并耳聋）,进行线粒体DNA3160-3755区域基因突变筛查。结果线粒体DNA3316G-A在糖尿病组和正常对照组中的突变率分别为3．7％和3．8％。两组间差异无统计学意义（P〉0．05）;3394T→C在糖尿病组和正常对照组中的突变率分别为7．3％和1．9％,两组间差异有统计学意义（P〈0．05）;在糖尿病组及正常对照组中均未检测到线粒体DNA3243A→G、3593T→C和3714A→G突变。结论线粒体DNA3316G→A突变与延边地区T2DM的发生无关;线粒体DNA3,394T→C突变与延边地区T2DM的发生有关;线粒体DNA3423A→G,3593T→C,3714A→G突变在延边地区T2DM中的发生率为0,提示上述位点基因突变率极低。     

锰中毒性帕金森综合征与线粒体基因部分点突变的关系

目的：研究线粒体基因的点突变和锰中毒性帕金森综合征之间的关系，并了解其是否与锰中毒性帕金森综合征发病有关。方法：采用聚合酶链反应（PCR）、单链构象多态性分析（SSCP），测序方法对临床诊断为锰中毒性帕金森综合征的28例患者和37例在相同环境下接触锰未发病的对照组的线粒体基因的点突变1709、3397、G3196A、T4216C、A4336G、G5460A、G9055A、A10398G，、G13708A所在的片段进行分析。结果：在28例锰中毒性帕金森综合征患者中发现4例患者存在CA253G点突变，2例存在A10398G、CIlM00T点突变，在37例锰接触对照组中发现15例存在A10398G、C10400T点突变，两组之间的C4253G、A10398G、C10400T的突变率有统计学意义。所有研究对象均未检测到1709、3397、G3196A、T4216C、A4336G、G5460A、G9055A、G13708A突变。结论：线粒体基因CA253G点突变可能是锰中毒性帕金森综合征的一个致病突变；线粒体基因A10398G、C10400T可能是锰中毒性帕金森综合征的一个保护性突变，也可能是一个保护性联合突变。而线粒体基因的点突变1709、3397、G3196A、T4216C、A4336G、G5460A、G9055A、G13708A可能与锰中毒性帕金森综合征无相关。     

胰岛素启动子因子1基因P239Q突变与中国汉族人2型糖尿病易感性的关系

【目的】了解胰岛素启动子因子 1基因P2 39Q突变在中国汉族人中的分布情况 ,以探讨其在 2型糖尿病的发生发展中的作用。【方法】用PCR RFLP对 2 33例 2型糖尿病患者及 89例非糖尿病健康志愿者进行该点突变的筛查 ,对检出阳性者进行家系调查。【结果】病人组中仅发现 1例突变基因携带者 ,对照组均为阴性 ,家系研究显示该点突变不与糖尿病共分离。【结论】该点突变在中国汉族人 (包括 2型糖尿病患者 )中相当少见。该突变不与糖尿病共分离 ,且在非糖尿病者中亦可被检出 ,推测其可能作为一种修饰基因 ,与其它位点的突变共同作用 ,促进糖尿病发生。     

线粒体脑肌病患者骨骼肌mtDNA点突变与发病类型的关系

目的：探讨线粒体脑肌病患者骼肌mtDNA在3243及8344位点的点突变与发病类型的关系,方法：提取5例患者骨骼肌中的总DNA,对2对寡核苷酸为引物行PCR扩增,分别应用BglI和Apal酶酶切后,琼脂糖电泳判定,结果：2例患者nt3243位点出出A→G点突变,座中样发病型（MELAS）和不整红边纤维型9MERRF）各1例,2例MERRF患者nt8344位点出现A→G点突变,其中1例同时存在着3243位点突变,结论：nt3243及nt8344位点突变分别与MELAS和MERRF的发病有关,1例MERRF中层得同时在上述2个位点的突变,这可能与线粒体脑肌病临床表现的多样化有关。     

胰岛素启动子因子1基因P239Q突变与中国汉族人2型糖尿病易感性的关系

目的：了解胰岛素启动子因子1基因P239Q突变在中国汉族人中的分布情况，以探讨其在2型糖尿病的发生发展中的作用。方法：用PCR－RFLP对233例2型糖尿病患及89例非糖尿病健康志愿进行该点突变的筛查，对检出阳性进行家系调查。结果：病人组中仅发现1例突变基因携带，对照组均为阴性，家系研究显示该点突变不与糖尿病共分离。结论：该点突变在中国汉族人（包括2型糖尿病患）中相当少见。该突变不与糖尿病共分离，且在非糖尿病中亦可被检出，推测其可能作为一种修饰基因，与其它位点的突变共同作用，促进糖尿病发生。