多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶基因家族低密度表达谱芯片建立

目的初步创建多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶基因家族低密度基因芯片,并对人两种肿瘤细胞中的N-乙酰氨基半乳糖转移酶进行表达谱分析.方法主要为PCR和分子杂交技术.结果制成N-乙酰氨基半乳糖转移酶基因家族低密度表达谱基因芯片,通过此芯片采用化学发光法能够检测到人肿瘤细胞中的N-乙酰氨基半乳糖转移酶基因家族不同程度的阳性信号.结论在不同肿瘤细胞中,N-乙酰氨基半乳糖转移酶基因家族表达谱有差异,但它们之间具体的联系还需进一步的研究.     

关于N-乙酰氨基半乳糖转移酶基因家族cDNA扩增的初步研究

目的通过实验方法扩增N-乙酰氨基半乳糖转移酶基因家族cDNA.方法主要通过PCR技术,用各种N-乙酰氨基半乳糖转移酶基因家族cDNA的特异性引物进行扩增并结合电泳技术,用不同的限制性内切酶进行酶切鉴定.结果通过电泳图谱和酶切图谱初步证实了这一家族的不同成员均已得到有效的扩增.结论成功扩增了N-乙酰氨基半乳糖转移酶基因家族cDNA,并为其文库的建立打下良好的基础.     

不同白血病细胞N-乙酰氨基半乳糖转移酶Ⅰ-ⅦmRNA的表达

目的从mRNA水平观察不同白血病细胞中ppGalNAcT1-T7的表达情况.方法采用RT-PCR技术,检测ppGalNAcT1-T7在NB4和K562细胞株中mRNA水平的表达.结果 K562细胞中ppGalNAcT2、T4、T5、57和NB4细胞中ppGalNAcT1、T2、T3、T4、T7有不同程度表达.结论不同白血病细胞中ppGaINAcT1-T7的表达情况不一样,两者之间的相关性有待进一步的研究.     

多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(Polypeptide:N-Acetylgalactosaminyltransferases,pp-GalNAc-T2, E.C.2.4.1.41)的mRNA表达谱研究

多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶2是O-糖链合成第一步的糖基转移酶,而O-糖基化与血管内皮细胞的功能密切相关.随着近年来人类基因组计划的迅速发展,人们对糖基转移酶的功能也开始有了新的认识.本文采用RT-PCR法观察了六种不同组织中PP-GalNAC-T2的表达水平,发现PP-GalNAc-T2在胃肠道粘膜等呈高表达,在脑组织中也有一定的表达,提示它在不同组织中的分布与组织功能存在相关性,值得进一步研究.     

多肽：N-乙酰氨基半乳糖转移酶-2与共刺激分子B7-H3相互作用的结构信息学初步探讨

目的 研究多肽：N-乙酰氨基半乳糖转移酶-2（ppGalNAc-T2）与共刺激分子B7-H3的相互关系.方法 通过同源模拟,得到共刺激分子B7-H3两种不同剪接体（2IgB7-H3,4IgB7-H3）的分子结构,寻找PDB数据库中的ppGalNAc-T2的蛋白质晶体结构,利用软件GRAMM（http：//vakser.bioinformatics.ku.edu/main/resources_gramm.php）,与同源模拟得到的两种不同剪接体的B7-H3分子结构相结合,寻找两者之间是否存在直接结合的可能.结果 成功地模拟了共刺激分子B7-H3两种剪接体的分子结构,发现ppGalNA-T2与共刺激分子B7-H3有相互结合的可能性.结论 结构生物信息学的研究发现ppGalNAc-T2分子与B7-H3具有潜在相互作用位点,ppGalNAc-T2可能参与B7-H3蛋白质的O-糖链合成反应,并且很有可能是通过直接接触来催化控制B7-H3分子的O-糖链合成.     

多肽：N—乙酰氨基半乳糖转移酶2（Polypeptide：N—Acetylgalactosaminyltransterases，pp—GalNAc—T2,E.C.2.4.1.41）的mRNA表达谱研究

多肽：N—乙酰氨基半乳糖转移酶2是O-糖链合成第一步的糖基转移酶，而O糖基化与血管内皮细胞的功能密切相关。随着近年来人类基因组计划的迅速发展，人们对糖基转移酶的功能也开始有了新的认识。本文采用RT—PCR法观察了六种不同组织中PP—GalNAC—T2的表达水平，发现PP—GalNAc—T2在胃肠道粘膜等呈高表达，在脑组织中也有——定的表达，提示它在不同组织中的分布与组织功能存在相关性，值得进一步研究。     

不同白血病细胞N-乙酰氨基半乳糖转移酶Ⅰ一ⅦmRNA的表达

目的 从mRNA水平观察不同白血病细胞中ppGalNAcT1-T7的表达情况。方法 采用RT-PCR技术，检测ppGalN-AcT1-T7在NB4和K562细胞株中mRNA水平的表达。结果 K562细胞中ppGalNAcT2、T4、T5、T7和NB4细胞中ppGalNAcT1、T2、T3、T4、T7有不同程度表达。结论不同白血病细胞中ppGaINAcT1-T7的表达情况不一样，两者之间的相关性有待进一步的研究。     

RNAi沉默GALNT7基因对宫颈癌细胞恶性行为的影响

目的探讨多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶7（polypeptide N-acetylgalactosaminyltransferase 7．GALNT7）基因对宫颈癌细胞生长、侵袭及迁移能力的影响。方法利用RNA干扰技术沉默GALNT7（siR—GALNT7）,以非特异性序列（pSilencer2．1）转染细胞作为阴性对照,转染宫颈癌细胞Heh和C33A细胞,采用MTT实验、集落形成实验、Transwell侵袭实验以及细胞划痕实验来检测干扰GAL-NT7基因后宫颈癌细胞生长、侵袭以及转移能力的变化。结果Western Blot检测结果显示,转染siR—GALNT7质粒的实验组中两种宫颈癌细胞中GALNT7的蛋白表达水平明显降低,与转染siR—Ctrl的对照组比较,差异均有统计学意义（P均〈0．05）;siR—GALNT7使HeLa和C33A细胞生长活性分别下降了19％和22％,与对照组比较,差异均有统计学意义（P均〈0．05）;siR—GALNT7使HeLa和C33A细胞的集落形成能力分别下降了56％和52％,与对照组比较,差异均有统计学意义（P均〈0．05）;siR—GALNT7使HeLa和C33A细胞侵袭能力分别下降了48％和54％,与对照组比较差异均有统计学意义（P均〈0．05）;siR—GALNT7使HeLa细胞迁移能力下降了约30％,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论RNA干扰在体外明显降低了宫颈癌细胞中GALNT7基因的表达,同时抑制了宫颈癌细胞的生长侵袭以及迁移能力．GALNT7基因有可能成为宫颈癌基因治疗的重要靶点。     

肿瘤病人血清N-乙酰氨基半乳糖苷酶检测的意义

参考Ｙａｍ ａｍ ｏｔｏ 的Ｎ－乙酰－α－Ｄ－氨基半乳糖苷酶（ＮＡＧａｌ）检测方法, 检测了肿瘤病人在手术前后血清ＮＡＧａｌ的水平,并与正常人对照。结果发现术前增高, 与正常人比较：Ｐ＜ ０．００５ 有显著性差异; 手术后： ０．０５＜ Ｐ＜ ０．１, 酶水平呈下降趋势。而诊断肾小管损伤的Ｎ－乙酰氨基葡萄糖苷酶（ＮＡＧｌｕ） 水平无显著差异（ Ｐ＞ ０．５）。因此ＮＡＧａｌ是肿瘤病人放疗、化疗、手术治疗效果以及预后判断的一个指标。     

江苏省HIV-1流行株env和pol基因亚型及其系统分析

目的:了解江苏省HIV-1流行株env和pol基因亚型及其系统.方法:收集42份血清抗-HIV阳性者的血浆标本并提取RNA,逆转录为模版DNA后采用巢式 PCR法扩增env及 pol基因,对扩增产物进行核苷酸序列测定,比对确定基因亚型,分析不同途径感染者的基因亚型,构建系统进化树.结果:42份标本中,扩增出env及pol基因片段27份(64%);共发现5种 HIV-1亚型,其中 CRF01-AE亚型 19份、C亚型 2份、B亚型3份、CRF08-BC 2份、G亚型1份.经静脉药瘾感染者基因型多为CRF01-AE亚型;经性接触感染者HIV-1基因亚型包括检出的全部亚型,经性接触及吸毒感染者基因亚型均为CRF01-AE亚型.两基因构建系统进化树高度一致,主要有CRF-01AE、B-07、G、C和CRF-08BC 5种HIV亚型在流行,而以CRF-01AE为主要流行株.结论:江苏省 HIV-1基因亚型至少有5种,其中 CRF01-AE为主要亚型.     

Hepatitis B virus DNA in the fingernails and hair of children with acute hepatitis B

Hepatitis B virus (HBV) DNA is detectable in the nails and hair of patients with chronic HBV infection. However, it remains unclear whether HBV DNA can be detectable in the nails and hair of patients with acute HBV infection. We encountered two cases of children with acute HBV infection. HBV DNA in the nails and hair from the two children was evaluated by real-time PCR. To clarify the characteristics of HBV DNA, full-length HBV genome sequencing and phylogenetic tree analysis were performed. The levels of serum HBV DNA in children of cases 1 and 2 at day 0 were 7.6 Log IU/mL and 7.4 Log IU/mL, respectively. Nail HBV DNA was detected in both children (case 1: 4.6 Log IU/mL at day 0, case 2: 5.5 Log IU/mL at day 14). Moreover, hair HBV DNA was detectable in case 2 (4.0 Log IU/mL at day 14). Serum HBV DNA became undetectable within approximately 3–4 months after the first hospital visit. After the resolution of HBV viremia, nail and hair HBV DNA became undetectable. The sequence analysis of serum, nail and hair HBV DNA showed the same HBV genotype in each case (case1: genotype C, case 2: genotype A). In case 1, 3 nucleotides were different in the full-genome HBV sequence between the serum and nails. In case 2, the full-genome HBV sequences were identical among the serum, nails and hair. In conclusion, HBV DNA was detectable in nails and hair of children with acute HBV infection.     

浙江省啮齿动物携带心病毒的遗传特征研究

目的 了解我国浙江省的啮齿动物携带心病毒情况,并分析其遗传特征。方法 用反转录-聚合酶链反应选啮齿动物粪便标本中的心病毒,扩增其全基因组;利用Lasergene软件分别对多聚蛋白、P1蛋白、2C+3CD蛋白序列与GenBank下载的序列进行同源性分析;分析其基因组与多聚蛋白的特征;利用PhyML软件构建系统发生树。结果 浙江省啮齿动物携带心病毒。毒株Ruian-Rn93-1、Longquan-Aa3-1、Ruian-Rn93-3的多聚蛋白、P1以及2C+3CD蛋白与心病毒B的同源性分别为71.9%~85.4%、65.2%~89.8%与78.3%~95.4%,属于心病毒B;毒株Wencheng-Rn416的多聚蛋白、P1以及2C+3CD蛋白与Boone心病毒的同源性分别为92.5%、85.3%与96.9%,属于心病毒C。系统发生分析也表明毒株Ruian-Rn93-1、Longquan-Aa3-1、Ruian-Rn93-3与心病毒B的亲缘关系最近,Wencheng-Rn416与Boone心病毒的亲缘关系最近。系统发育分析发现啮齿动物在心病毒的起源与进化过程中起着重要的作用,并且可能发生跨种间传播而感染人。结论 我国浙江省啮齿动物携带心病毒,并可能跨种间传播到人。     

健康中老年人血尿酸与血脂关系的研究

目的 :探讨中老年健康体检人群中血尿酸与血脂各成份之间的关系。方法 :分别测定肾功能与血脂各成份等生化指标 ,用统计学方法分析它们之间的关系。结果 :血尿酸与总胆固醇 (TC)、甘油三酯 (TG)、载脂蛋白B(apoB)之间存在显著的正相关 ,而与高密度脂蛋白胆固醇 (HDL C)、载脂蛋白A1(apoA1)存在显著的负相关 ;高低血尿酸两组间的TC ,TG ,HDL C ,apoA1,apoB之间存在显著性差异 ,两组的血脂异常率分别为 33.5 %和 6 5 .1% ,存在显著性差异 ;高低TC两组间的血尿酸均值分别为 0 .392和 0 .35 6mmol/L ,血尿酸异常率分别为 36 .1%和 2 4 .3% ;高低TG两组的血尿酸均值分别为 0 .4 1和 0 .34mmol/L ,血尿酸异常率分别为 4 5 .8%和 16 .1% ,均存在显著性差异。结论 :在中老年人群中 ,血尿酸和血脂之间存在一定的关联 ,血尿酸和疾病之间的关系有待于进一步研究。