Ryanodine对离体大鼠心脏缺血─再灌注损伤的影响

目的：了解经典的钙通道阻断剂维拉帕米和调节内钙释放的药物Ｒｙａｎｏｄｉｎｅ对心肌细胞内钙超载的影响。方法：通过离体大鼠心脏缺血－再灌注方法。结果：发现维拉帕米对钙超载无阻断作用，而高浓度 Ｒｙａｎｏｄｉｎｅ能比较好地阻断钙超载。结论： Ｒｙａｎｏｄｉｎｅ具有心肌保护作用。     

维拉帕米对海洛因诱发的乳鼠心肌细胞钙活动异常的作用

【目的】 研究海洛因对乳鼠心肌细胞钙活动的影响以及维拉帕米对海洛因作用下的乳鼠心肌细胞钙活动的影响作用.【方法】 使用体外培养5 d的SD乳鼠心肌细胞,标记细胞内游离钙,应用激光共聚焦显微镜下检测细胞内荧光强度变化可指示细胞内游离Ca²⁺浓度([Ca²⁺]i)变化;并应用碘化丙啶进行活性细胞检测.【结果】 0.01 mol/L海洛因可增加培养心肌细胞平均细胞内钙浓度和钙瞬变的幅度,对自发性收缩节律无明显影响;20 μmol/L维拉帕米可明显抑制海洛因诱导的钙超载,并可降低收缩节律,减少细胞死亡.【结论】 海洛因可导致心肌细胞钙超载和钙活动异常,导致细胞死亡,维拉帕米可抑制细胞内钙活动,保护心肌细胞.     

葡甲胺环腺苷酸强心作用实验观察

目的 :探讨葡甲胺环腺苷酸的强心作用。方法 :取兔 16只 ,2 0 %乌拉坦麻醉 ,随机分两组 :Ⅰ组静脉注射葡甲胺环腺苷酸 10mg/kg ;Ⅱ组静脉注射葡甲胺环腺苷酸 10mg/kg加维拉帕米 1mg/kg。左颈总动脉插管检测左心室内压评价心功能。结果 :葡甲胺环腺苷酸能增加心脏的收缩和舒张功能 (P <0 .0 1) ,其效应可被维拉帕米阻断。结论 :葡甲胺环腺苷酸的强心作用确切 ,维拉帕米可阻断其作用     

钌红、维拉帕米对去甲肾上腺素诱导的心肌c-fos、c-myc表达的影响

目的了解经典的钙通道阻断剂维拉帕米和肌浆网Ca2 释放抑制剂钌红对去甲肾上腺素(NE)诱导的心肌c-fos、c-myc基因表达的影响.方法通过离体心脏灌流,采用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)方法,测定左心室c-fos、c-myc表达水平.结果钌红明显降低NE诱导的c-fos、c-myc表达,维拉帕米部分阻断NE诱导的c-fos表达,但对c-myc基因表达无明显影响.结论 NE诱导的心肌c-fos、c-myc基因表达有赖于细胞内钙([Ca2 ];)的增高.     

无复流的预防与处理

维拉帕米是钙离子拮抗剂中最常应用的治疗无复流的药物.可通过以下几种可能机制解除微循环功能障碍:①扩张远端缺血微动脉及较粗的小动脉;②减少白细胞与毛细血管及后微静脉的黏附;③减轻细胞内钙超载.Taniyama等进行的临床试验结果表明在急性前壁心肌梗死患者冠脉内给予维拉帕米可减轻微血管损害,改善血管功能,增加室壁运动积分.目前临床上应用的剂量在50～1000μg之间,而5mμg以乎是最常用的剂量而且对改善微血管血流有效,但伴有出现一过性房室传导阻滞的风险.     

周期性张应变对椎间盘纤维环细胞内游离钙离子浓度的影响

目的探讨周期性张应变对培养的大鼠椎间盘纤维环细胞内Ca2 浓度([Ca2 ])的影响及其可能机制.方法采用激光扫描共聚焦显微镜和Fluo-3/AM荧光探针标记技术,测定周期性张应变对纤维环细胞内[Ca2 ]的影响,并分析了EGTA、维拉帕米和氯化钆预处理对此作用的影响.结果应变为10%、频率为1 Hz的周期性张应变1 min使细胞内[Ca2 ]增加1.13倍;EGTA可以阻断此作用;而维拉帕米和氯化钆仅可部分阻断.结论周期性张应变使纤维环细胞内[Ca2 ]升高,细胞外钙内流起主要作用,且有不同的钙离子通道参与.     

维拉帕米阻断TGF-β1诱导的α1(Ⅰ)胶原基因启动子的激活

目的：探讨维拉帕米对α1(Ⅰ）胶原基因启动子活性的影响。方法：将人α1(Ⅰ）胶原基因启动子重组体pCOLH1.5、pCOLH2.5转染至大鼠肾小球纱膜细胞，分别经不同浓度的转化生长因子β1(TGF-β1）和纺拉帕米处理后，ELISA法测定细胞CAT表达水平。结果：TGF－β1作用后，pCOLH1.5和pCOLH2.5的CAT活性明显增加，分别为对照组的1.498和1.551倍；维拉帕米对两上重组体的CAT表达均有抑制作用，与单纯TGF－β1组比较，维拉帕米加TGF－β1组pCOLH2.5的CAT活性明显降低（维拉帕米低浓度组P＜0.05，高浓度组P＜0.01）。结论：维拉帕米不仅直接抑制启动子的活性，而且还部分阻断TGF－β1诱导的α1(Ⅰ）胶原基因启动子激活。     

维拉帕米的临床新用途

维拉帕米 (Verapom il)系钙通道阻滞剂 ,属苯脘胺类药物 ,临床广泛用于治疗高血压和心律失常。近年来 ,发现其药理效应并不局限于心血管系统 ,其在保护肝、肾功能等诸多方面具有广泛作用。现简要综述如下。1　对肝缺血再灌注损伤的防护作用　　维拉帕米对肝缺血再灌注损伤的防护作用可能有 :抑制缺血再灌注时钙内流 ,防止钙超载 ;维持缺血再灌注肝组织超氧化物歧化酶水平 ,提高组织抗氧化能力 ,抑制氧自由基产生 ,抑制 TXA2 合成 ,维持 T/ K平衡 ,从而改善肝缺血再灌注早期微循环障碍 ,增加肝脏微循环灌注量 [1 ] 。Nauta等 [2 ]在大鼠局…     

Cariporide和维拉帕米防止家兔快速心房起搏所致电重构

目的 探讨家兔快速心房起搏所致的心房肌电重构的机制及钠氢离子交换体抑制剂Cariporide和L型钙通道阻断剂维拉帕米的防治效果。方法 36只家兔随机分为3组:快速心房起搏对照组(对照组)、快速心房起搏 Ca-riporide组(Cariporide组)、快速心房起搏 维拉帕米组(维拉帕米组),每组12只。经颈内静脉将电极置入右心房,以600次/min行快速心房起搏,测定基础状态、给药后0.5 h和起搏后0.5、1、2、4、6、8 h的心房有效不应期(AERP200、AERP150和AERP130),取起搏8 h的兔右心耳组织,观察超微结构。结果 快速心房起搏后对照组的AERP缩短,AERP的频率适应不良,同基础状态比较差异有显著性意义(P<0.01),心房肌细胞损伤的超微结构变化明显。Cariporide组和维拉帕米组上述改变得以逆转和减轻。结论 心房肌细胞内钙水平的增高在快速起搏导致的心房肌电重构中起作用,钠氢离子交换体活化是引起钙超载的原因之一。     

三七总皂苷对缺氧再给氧血管内皮细胞损伤保护效果研究

目的探讨发生缺氧再给氧损伤（H/R）对人脐静脉内皮细胞株（ECV304）的功能影响并探讨三七总皂苷抗血管内皮细胞H/R损伤的作用效果和作用机制。方法体外培养的ECV304,将之分为7个研究组,分别为代号A-G的对照组、H/R组、PDTC组、维拉帕米组、不同浓度（0.781mg/L,1.563mg/L,3.125mg/L）的三七总皂苷组;培养1h后通过观察细胞内Ca2＋浓度,一氧化氮（NO）和前列环素（PGI2）的含量,超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和还原型谷胱甘肽（GSH）含量,细胞间黏附分子ICAM-1的表达、核因子kB（NF-kB）的活性等,来确定H/R对ECV304的离子转运功能、细胞分泌功能、氧自由基清除功能、黏附功能及细胞活力的影响,并通过三七总皂苷组与PDTC组、维拉帕米组进行比较,观察三七总皂苷抗血管内皮细胞H/R损伤的作用效果和作用机制。结果 H/R可激活ECV304,使细胞氧自由基清除功能明显降低,NF-κB及ICAM-1的表达明显升高,细胞肌浆网Ca2＋-ATP酶活性、一氧化氮（NO）及前列环素（PGI2）含量、细胞活力明显降低,[Ca2＋]i明显升高;tPNS能有效改善细胞氧自由基清除功能,降低NF-kB、ICAM-1活性,改善肌浆网Ca2＋-ATP酶活性,减轻细胞内钙超载,减轻H/R损伤,且高浓度tPNS效果优于维拉帕米、PDTC。结论三七总皂苷能有效降低NF-κB活性及ICAM-1表达,减轻细胞内钙超载,减轻血管内皮细胞缺氧再给氧损伤;高浓度三七总皂苷与钙拮抗剂维拉帕米、抗氧化剂吡咯烷二硫氨基甲酸脂相比作用较强,效果更好。     

芬太尼和维拉帕米对离体大鼠心肌缺血再灌注心律失常的协同保护作用

目的采用离体大鼠心肌缺血再灌注心律失常模型,观察芬太尼和维拉帕米对缺血再灌注心律失常的影响.方法将60只SD大鼠随机分为6组(每组10只)对照组(C组),10μg/L维拉帕米组(V组),10μg/L及30μg/L芬太尼组(F1及f2组),10μg/L芬太尼+10μg/L维拉帕米组(F1+V组),30μg/L芬太尼+10μg/L维拉帕米组(F2+V组).离体心脏平衡20min后,C组继续灌注K-H液10min,阻断冠脉左前降支10mir,,复灌5min,记录冠脉流量(CF)及心电图.其余5组除平衡后换用含不同药物及浓度的K-H液外,余同C组.太尼或维拉帕米后均能不同程度地减少心律失常的时间,延长窦性节律时间(P＜0.05,P＜0.01);芬太尼和维拉帕米合用后,减慢心率(P＜0.01),增加CF(P＜0.05);其减少心律失常的作用更为显著(P＜0.01),并未见室颤.结论本实验提示芬太尼和维拉帕米对离体大鼠心肌缺血再灌注心律失常有协同保护作用.     

蜂毒素对豚鼠心肌细胞内游离钙浓度的影响

目的测定蜂毒素引起的豚鼠心肌细胞内游离钙浓度变化。方法分离成年豚鼠心肌细胞，以Ｆｕｒａ－２／ＡＭ为荧光试剂，测定蜂毒素引起的心肌细胞内钙浓度变化。结果蜂毒素３．５×１０－１３ｍｏｌ／Ｌ，使心肌细胞内钙浓度增加，维拉帕米（１０－６ｍｏｌ／Ｌ作用５ｍｉｎ），未明显拮抗蜂毒素引起的细胞内钙增加。结论蜂毒素可促进细胞内钙浓度增加，可能与维拉帕米所阻断的钙通道无关。     

3′-大豆苷元磺酸钠对家兔胸主动脉条收缩的影响

目的研究3′-大豆苷元磺酸钠(DSS)对家兔胸主动脉条的作用及与Ca2 的关系。方法采用常规动脉条收缩实验方法。结果DSS可使NE、KCl和CaCl2引起的家兔胸主动脉条量-效收缩曲线右移,最大效应降低,与维拉帕米(Ver)相似,是通过钙拮抗来实现的。而DSS与Ver拮抗Ca2 的方式基本相似。可选择性地阻断电压依赖性(VDC)Ca2 通道,而对受体控制性(ROC)Ca2 通道无影响。结论DSS具有选择性阻断VDCCa2 通道。     

乳腺癌MCF-7肿瘤细胞SP亚群初步分析

目的鉴定乳腺癌干细胞系MCF-7中是否包含肿瘤干细胞相关的SP(side population)亚群.方法制备MCF-7细胞悬液,经Hoechst33342和PI染色(其中一组同时加入拮抗剂维拉帕米作为对照),流式细胞仪分析SP亚群.另取贴壁生长的MCF-7细胞,用Hoechst33342和羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)原位染色,荧光显微镜下观察细胞染色情况.结果SP亚群占MCF-7细胞的4%,维拉帕米阻断后减少为0.5%.荧光显微镜下见Hoechst33342阳性细胞约占95%.结论人乳腺癌细胞系MCF-7中存在SP亚群,即提示乳腺癌干细胞的存在;维拉帕米可抑制染料外排而减少SP细胞的比例.     

3'-大豆苷元磺酸钠对家兔胸主动脉条收缩的影响

目的 研究3'-大豆苷元磺酸钠(DSS)对家兔胸主动脉条的作用及与Ca2+的关系.方法 采用常规动脉条收缩实验方法.结果 DSS可使NE、KCl和CaCl2引起的家兔胸主动脉条量-效收缩曲线右移,最大效应降低,与维拉帕米(Ver)相似,是通过钙拮抗来实现的.而DSS与Ver拮抗Ca2+的方式基本相似.可选择性地阻断电压依赖性(VDC)Ca2+通道,而对受体控制性(ROC)Ca2+通道无影响.结论 DSS具有选择性阻断VDC Ca2+通道.     

乳腺癌MCF-7肿瘤细胞SP亚群初步分析

目的鉴定乳腺癌干细胞系MCF-7中是否包含肿瘤干细胞相关的SP(side popu lation)亚群。方法制备MCF-7细胞悬液,经Hoechst33342和PI染色(其中一组同时加入拮抗剂维拉帕米作为对照),流式细胞仪分析SP亚群。另取贴壁生长的MCF-7细胞,用Hoechst33342和羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)原位染色,荧光显微镜下观察细胞染色情况。结果SP亚群占MCF-7细胞的4%,维拉帕米阻断后减少为0.5%。荧光显微镜下见Hoechst33342阳性细胞约占95%。结论人乳腺癌细胞系MCF-7中存在SP亚群,即提示乳腺癌干细胞的存在;维拉帕米可抑制染料外排而减少SP细胞的比例。     

肠缺血-再灌注期细胞凋亡及维拉帕米的影响

目的：观察肠缺血-再灌注期肠道细胞凋亡及黄嘌呤氧化酶(XO)活性变化及钙通道阻滞剂维拉帕米对肠缺血再灌注细胞凋亡的影响，探讨钙超载、氧自由基与细胞凋亡三者之间的关系。方法：通过肠系膜上动脉夹闭和开放复制肠缺血-再灌注模型，分别于缺血30min、60min后3h或72h再灌注或给维拉帕米后缺血-再灌注，行HE及TVNEL染色，观察组织学变化和细胞凋亡；比色法做小肠组织XO活性测定。设假手术组(不夹闭血管)为对照。结果：(1)肠缺血-再灌注后各时间点均可观察到细胞凋亡现象，尤以缺血60min再灌注3h组最为明显；(2)小肠组织XO的活性在缺血30min再灌注3h组与假手术组比较升高，具有统计学意义，在该组中细胞凋亡与组织学改变与对照组比较没有统计学意义；(3)在缺血30min再灌注3h组，维拉帕米治疗组与实验组比较，XO活性下降，具有统计学意义；在缺血60min再灌注3h组，维拉帕米治疗组与实验组比较，细胞凋亡百分数与组织学评分均有下降，具有统计学意义；(4)在各组缺血后再灌注72h，未发现有迟发性肠坏死发生。结论：肠缺血-再灌注后小肠组织可发生细胞凋亡，其在小肠缺血-再灌注损伤的发生中发挥着重要的作用；钙通道阻滞剂维拉帕米对肠缺血-再灌注引起的小肠组织损伤具有保护作用。     

普罗帕酮与维拉帕米转复阵发性室上性心动过速疗效对比研究

目的对比普罗帕酮和维拉帕米对阵发性室上性心动过速（PSVT）的治疗效果及各自的副反应。方法对我院急诊接诊的48例阵发性室上速随机分成普罗帕酮治疗组和维拉帕米治疗组,普罗帕酮组给予普罗帕酮70～140mg静注,维拉帕米组给予维拉帕米5～10mg静注。结果普罗帕酮和维拉帕米对阵发性室上性的治疗效果比较差异无统计学意义（P〉0．05）,副作用维拉帕米较普罗帕酮高。结论PSVT应首选普罗帕酮,维拉帕米可作为一线药物,但须注意其副作用。     

维拉帕米对创伤后大鼠痛觉过敏的影响

目的 观察维拉帕米对创伤后痛觉过敏的影响。方法 Ｗｅｓｔａｒ大鼠４８只，以截肢作为创伤模型。大鼠创伤后分别腹腔注射不同剂量的维拉帕米、芬太尼、芬太尼＋维拉帕米以及生理盐水，于创伤后１５、３０、６０、１２０ｍｉｎ观察创伤部位周围皮肤痛阈变化情况。结果 １０ｍｇ／ｋｇ维拉帕米即可抑制创伤部位周围皮肤的痛阈下降，其中芬太尼＋维拉帕米作用最强，结论 维拉帕米可抑制痛常见过敏，具有一定的镇痛作用并加强芬太尼     

槲皮素对缺血再灌注大鼠心肌损伤的保护作用

采用大鼠心肌缺血再灌注模型 ,观察槲皮素对缺血再灌注心肌损伤的保护作用。实验大鼠分为假手术组、缺血再灌注组、槲皮素组和维拉帕米组。观察槲皮素对各组大鼠血清肌酸磷酸激酶 (CPK)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH Px)以及ATP酶的影响 ,并通过光镜及电镜观察病理学改变。结果表明 :槲皮素可显著降低CPK活性 ,升高GSH Px和ATP酶活性。提示 :槲皮素对缺血再灌注心肌具有保护作用 ,病理结果进一步证实了这一点。推测其机制可能与抗脂质过氧化反应及增强心肌的能量代谢、减轻钙超载有关