荷胃癌小鼠自杀基因治疗后宿主免疫功能观察

目的 研究自杀基因疗法是否能诱导肿瘤宿主产免疫应条。方法 将小鼠胃癌细胞株（ＭＦＣ）接种于小鼠背部制作肿瘤模型,以单线疱疹病毒苷激酶基因（ＨＳＶ－ｔｋ）和大肠杆菌胞嘧啶脱氧基酶基因（ＣＤ）注射于瘤体内,并于瘤体周围注射ｍＩＬ－２和ｍＧＭ－ＣＳＦ ＤＮＡ及向腹腔内注射前药９－丙氧乌苷（ＧＶＣ）和５－Ｆｃ。治疗第５周取肿瘤消退小鼠的脾细胞测自然杀伤细胞（ＮＫ）和ＬＡＫ活性;第１２周取ＰＢＬ和脾细胞测Ｎ     

IFN-γ基因修饰对G422胶质母细胞瘤细胞致瘤性及荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的：观察鼠干扰素－γ（mIFN－γ)基因修饰的小鼠G422胶质母细胞瘤细胞的致瘤性及免疫功能变化。方法：通过重组腺病毒以mIFN－γ基因转染G422胶质母细胞瘤细胞,观察肿瘤的生长和荷瘤小鼠的存活期,采用4h^51Cr释放法检测荷瘤小鼠脾细胞诱导的NK、LAK、CTL的杀伤活性,对治疗后的肿瘤进行常规病理分析。结果：mIFN－γ基因修饰的G422小鼠胶质母细胞瘤体内致瘤生长明显抑制（P＜0．01）,对荷瘤小鼠生存时间长于对照组（P＜0．01）。mIFN－γ组小鼠脾细胞的LAK、CTL杀伤活性显增强,肿瘤组织有灶性坏死,炎细胞浸润。结论：mIFN－γ基因对胶质细胞瘤有一定治疗作用,其机制可能是增强了宿主的局部和全身抗肿瘤免疫反应。     

瘤体注射IL-2重组腺病毒基因治疗小鼠胶质母细胞瘤及其免疫机制的初步探讨

目的：观察瘤体直接注射IL－2重组腺病毒对G422皮下荷瘤的治疗作用,对体内基因转染效率及治疗的免疫机制进行初步分析。方法：将LacZ,IL-2重组腺病毒直接注射到皮下接种的G422胶质母细胞瘤瘤体,X－gal染色检测基因转染的效率,观察肿瘤的大小和荷瘤小鼠的存活期,采用4h^51Cr释放法检测荷瘤小鼠脾细胞诱导的NK、LAK、CTL的杀伤活性,对治疗后的肿瘤进行常规病理分析。结果：采用瘤体注射腺病毒具有较高的体内基因转染效率,瘤体注射IL－2重组腺病毒对皮下建立的胶质母细胞瘤有一定的治疗作用,肿瘤的生长受抑制,荷瘤小鼠的存活期显延长,但没有长期存活小鼠。IL－2基因治疗组小鼠脾细胞的LAK、CTL杀伤活性显增强,肿瘤局部出现更多的坏死和炎性浸润细胞。结论：采用瘤体直接注射IL－2重组腺病毒对胶质母细胞瘤皮下荷瘤有治疗,其机制可能是增强了宿主的局部和全身抗肿瘤免疫反应。     

妇科肿瘤患者CD_3AK细胞和LAK细胞杀瘤活性比较

为比较CD3AK细胞和LAK细胞的杀瘤特性，观察了妇科肿瘤患者CD3AK细胞和LAK细胞对卵巢癌细胞系（3AO）的杀伤活性。结果表明：良性肿瘤组LAK细胞杀瘤活性高峰在培养第1、2周，显著高于同期培养的CD3AK细胞（P＜0．05，P＜0．01），第3周则较低，而CD3AK细胞的杀瘤活性高峰在培养第3、4周，显著高于LAK细胞（P＜0．05）；恶性肿瘤组，LAK细胞杀瘤高峰在培养第1周，显著高于同期培养的CD3AK细胞（P＜0．05），而CD3AK细胞杀瘤高峰在培养第2、3周，显著高于同期培养的LAK细胞（P＜0．05）。提示：妇科恶性肿瘤组LAK细胞和CD3AK细胞杀瘤活性高峰均较妇科良性肿瘤早1周左右；CD3AK细胞杀瘤活性高峰较LAK细胞延迟1～2周。说明CD3AK和LAK细胞的杀瘤活性在不同培养阶段表现不同，LAK细胞宜短期培养，CD3AK细胞宜长期培养。     

成纤维细胞介导的IL-4基因疗法对小鼠浆细胞瘤的治疗效果

为观察白细胞介素4（IL－4）基因疗法对晚期浆细胞瘤的治疗作用，用成纤维细胞介导的IL－4基因疗法治疗小鼠J558L浆细胞瘤，并对其免疫学机理进行了初步探讨。对经治疗小鼠存活期的观察表明，该疗法对早期荷瘤小鼠（荷瘤3d以内）无明显治疗效果；而对晚期荷瘤小鼠（荷瘤10d以上）则具有较明显的治疗效果；与常规瘤苗联合应用时其疗效更加明显。对经治疗的荷瘤小鼠体内抗肿瘤免疫功能的检测表明，晚期荷瘤小鼠经IL－4基因治疗后第12天，脾细胞NK活性及经诱导后的LAK活性变化不明显，而经诱导的CTL杀伤活性明显提高；当与常规瘤苗联合…     

逆转录病毒载体介导的CD基因对小鼠胃癌的原位杀伤作用

目的 :探讨自杀基因的旁观者效应及引发的抗肿瘤免疫对胃癌的治疗作用。方法 :将含有 CD基因的重组逆转录病毒载体p CD2在 PA317细胞中进行包装后 ,收获病毒上清 ;将此上清直接注射接种于 6 15小鼠皮下并已成瘤的 MFC小鼠前胃癌的肿瘤部位 ,再腹腔给予前药 5 - FC进行治疗。治疗结束后 ,检测 NK、L AK细胞活性以判断机体免疫活性。结果 :在前药治疗阶段中 ,转 CD基因肿瘤较未转基因肿瘤的生长明显受抑 ,且有部分肿瘤消失 (P<0 .0 1,n=10 )。在成瘤对照组中 ,NK、L AK活性受到抑制 ,低于正常对照组 ,而 CD/5 - FC组的 NK、L AK…     

低剂量辐射增强环磷酰胺对移植肿瘤生长的抑制作用

目的：探讨低剂量辐射（LDR）与环磷酰胺（CP）伍用对肿瘤生长的影响。方法：采用C57BL／6J，小鼠右后肢腓肠肌内接种Lewis肺癌细胞做为肿瘤动物模型。在肿瘤直径达7mm时，给予75mGyX射线全身照射和100mg／kgCP腹腔注射化疗，用游标卡尺隔日测量肿瘤直径，建立肿瘤生长曲线，同时检测了不同治疗措施后小鼠脾脏自然杀伤细胞（NK）、淋巴因子激活的杀伤细胞（LAK）、特异性细胞毒性T细胞（CTL）的杀伤活性。结果：同单纯CP化疗组相比，LDR与CP伍用组的肿瘤直径在治疗后不同时间均明显缩小（P＜0．05～0．01），肿瘤生长速率明显降低；LDR和CP伍用组小鼠的NK、LAK、特异性CTL杀伤活性较单纯CP化疗组明显提高（P＜0．05～0．01）。结论：LDR可通过减轻CP所致的免疫抑制副作用提高机体免疫系统的功能并增强CP的抑瘤作用。     

肿瘤坏死因子对淋巴激活素活化的杀伤细胞抗肿瘤活性的影响

用B_(16)W_(10)黑色素瘤作靶瘤,C_(57)BL/6小鼠为荷瘤动物,小鼠脾细胞经白细胞间介质-2培养3d为效应细胞即LAK细胞,观察了肿瘤坏死因子对LAK细胞抗肿瘤活性的影响。体外实验结果表明:单独肿瘤坏死因子(500U/ml)或低剂量白细胞间介质-2(10U/ml)均不影响LAK细胞的杀瘤活性;肿瘤坏死因子能增强亚适剂量白细胞间介质-2(100U/ml)诱导的LAK细胞活性。而不增强最适剂量白细胞间介质-2(1000U/ml)诱导的LAK细胞活性。体内实验结果表明:对局部肿瘤,瘤内同时注射肿瘤坏死因子和白细胞间介质-2和LAK细胞时,6只荷瘤鼠4只瘤块消失。其中2只存活期超过60d。对全身肺转移癌、肿瘤坏死因子、白细胞间介质-2和LAK细胞联合静脉注射亦显抗瘤作用增强,该组小鼠肺表面瘤结节数和肺结节发生率减少。     

树突状细胞联合重组腺病毒Ad-Mig基因治疗小鼠淋巴瘤的实验研究

目的 观察树突状细胞(DC)和腺病毒介导的小鼠Mig基因对小鼠淋巴瘤的抗肿瘤效果.方法 利用EG7细胞皮下注射C57BL/6小鼠建立小鼠淋巴瘤模型,单独或联合应用DC和携带Mig基因的重组腺病毒(Ad-Mig)直接进行瘤内注射治疗,观察小鼠皮下肿瘤生长情况.采用HE染色观察肿瘤组织的变化.用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测CTL和NK的杀伤活性.结果 DC能显著抑制荷瘤小鼠皮下肿瘤的生长.使肿瘤组织中炎细胞数量增多而肿瘤细胞数量明显减少,能显著增强荷瘤小鼠脾细胞NK和CTL杀伤活性.与单独应用DC相比,DC与Ad-Mig联合应用可明显提高抗肿瘤效果.结论 DC对小鼠淋巴瘤有显著治疗效果.且与Ad-Mig基因联合应用能进一步提高抗肿瘤效果.     

人参皂甙Rg3对肺癌荷瘤小鼠免疫功能影响的研究

目的探讨人参皂甙Rg3对肺癌荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法将48只C57BL/6肺癌荷瘤小鼠随机分为4组:人参皂甙Rg3高剂量组(15 mg/kg)、人参皂甙Rg3低剂量组(5 mg/kg)、顺铂(DDP)组(DDP0.5 mg/kg)和生理盐水组,检测各组给药后荷瘤小鼠的脾自然杀伤细胞(NK)、淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)、细胞毒性T细胞(CTL)活性及血清肿瘤坏死因子(TNF)水平。以正常小鼠12只作为对照组。结果 Rg3低剂量组、Rg3高剂量组、DDP组生存素阳性率明显低于生理盐水组(P<0.05);Rg3低剂量组、Rg3高剂量组瘤体质量小于生理盐水组(P<0.05),但大于DDP组(P<0.01);生理盐水组NK、LAK和CTL活性及血清TNF水平均较正常对照组显著下降(P<0.05);DDP组NK、LAK和CTL活性及血清TNF水平较生理盐水组低(P<0.05);Rg3低剂量组和Rg3高剂量组NK、LAK和CTL活性及血清TNF水平较生理盐水组、DDP组明显提高(P<0.05),但仍低于正常小鼠组(P<0.05);Rg3低剂量组NK、LAK和CTL活性及血清TNF水平与Rg3高剂量组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论人参皂甙Rg3可明显诱导提高荷瘤小鼠特异性抗肿瘤免疫反应。     

人淋巴因子激活的杀伤细胞对肝癌细胞株凋谢作用的观察

用重组白细胞介素2从健康人未稍血中诱导出 LAK 细胞,此 LAK 细胞与 H_(7402)细胞共同培养后,用细胞涂片,盖片培养及透射电镜观察,可见 LAK 细胞能主动接近 H_(7402)细胞,两者以胞质突互相交错结合,然后 H_(7402)细胞则以典型谢方式死亡。这表明在引起靶细胞的死亡方式方面,LAK细胞与 NK 细胞和 CTL 细胞相同。结果还提示,细胞凋谢是细胞内的自动过程。     

肿瘤基因治疗的研究进展

基因治疗是指将外源正常基因通过基因转移技术导入靶细胞,纠正或补偿因基因缺陷和异常引起的疾病,以达到治疗目的的一种生物治疗方法。本文从自杀基因、基因沉默、抑癌基因、免疫基因、抑制血管生成基因等几方面综述了近几年肿瘤基因治疗的研究和发展现状。自杀基因治疗系统包括HSV-tkGCV系统、H19 RNA、hTERT等,HSV-tkGCV系统是自杀基因治疗系统研究最多的一种,TK基因是药敏基因,肿瘤细胞转染该基因后,对前体药物丙氧鸟苷(GCV)或无环鸟苷(ACV)变得敏感而能被杀死。RNA干扰是基因沉默治疗的主要方式,通过沉默肿瘤相关基因IDO2、DUSP6、IGF1R、ORAOV1等基因可以明显抑制肿瘤生长。抑癌基因激活或过表达可以抑制肿瘤生长,p53和PTEN是两个最有意义的抑癌基因,重组腺病毒p53和PTEN可以显著抑制肿瘤生长。免疫基因治疗是将细胞因子或共刺激分子基因导入肿瘤细胞或体细胞内,通过激发或调动机体免疫功能来控制或杀伤肿瘤细胞,常用的免疫效应细胞有TIL、CTL、LAK、NK等,可供选择的目的基因有肿瘤坏死因子、白介素、集落刺激因子、干扰素、趋化因子等。抑制血管生成基因可以通过抑制肿瘤新生血管的生成,来阻止肿瘤生长和侵袭,VEGF-Trap、PEDF、ES通过腺病毒导入肿瘤可以显著抑制肿瘤生长。目前肿瘤基因治疗在特异性、安全性和靶向性方面依然存在亟需解决的问题。      

CIK细胞与LAK细胞对H-22腹水瘤的抑瘤作用

目的 观察ＣＩＫ细胞及ＬＡＫ细胞对Ｈ－２２荷瘤鼠的抗肿瘤作用。方法 建立Ｈ－２２荷瘤鼠肿瘤动物模型,静脉输入ＣＩＫ细胞３周做抗肿瘤治疗,同时设ＬＡＫ对照;用同位素法检测,经治疗后荷瘤鼠Ｔ细胞增殖及ＮＫ细胞毒活性。结果 ＣＩＫ细胞对Ｈ－２２荷瘤鼠的抗肿瘤作用显著强于ＬＡＫ的细胞（抑瘤率分别是５４％ＶＳ２７％）,并且ＣＩＫ疗法的抗作用可能与荷瘤鼠Ｔ细胞增活性增高有关。结论 ＣＩＫ细胞对Ｈ－２２荷瘤鼠的     

Activation of systemic immune effectors and induction of cytokine production by direct intratumoral injection of IL-2 DNA liposome

ourpreviousstudiesreportedaprotocolwhichreliedonthedirecttransmissionoflL-2geneintoB16F1Otumorsinvivotogeneticallymodifythetumorsastheygrewinsitu.WhenIL-2DNAliposomewasdirectlyinjectedintothetumormassintratumorallyinthemurinemodels,adra-maticinhibitionoftumorgrowthwasobserved-Thesurvivaltimeofthetumor-bearingmicewereprolongedsignificantly.Byanalyzingthefunctionofthetumorcellsand'tumorinfiltratinglympho-cytes(TIL),G418-resistanttumorcellscouldbeseparatedfromthetumormassandhighlevelofIL-2c…     

拟黑多刺蚁醇提取物对荷瘤鼠免疫功能的影响

目的：研究拟黑多刺蚁(PVR)醇提取物对荷瘤鼠免疫功能的影响,从免疫学角度探讨其抑瘤机理。方法：随机将小鼠分为对照组,PVR醇提液高、中、低实验组。各组小鼠腋下接种S₁₈₀小鼠腹水肉瘤细胞,建立肿瘤动物模型。对照组用蒸馏水灌胃,实验组分别以0.5、1.0和1.5 g•kg^-1 PVR醇提液灌胃,连续10 d,以肿瘤重量、抑瘤率,脾脏指数,白细胞介素2（IL-2）,NK和LAK细胞活性及T、B淋巴细胞增殖为评价指标。结果：PVR明显抑制荷瘤鼠肿瘤细胞的生长,促进脾细胞增殖反应和IL-2分泌,增强LAK和NK细胞的活性。结论：PVR体内抑瘤作用与其增强机体抗肿瘤免疫功能有关。     

冷暴露对小鼠体内NK细胞和LAK细胞活性的影响

目的　探讨寒冷因素对自然杀伤细胞 (NK细胞 )和淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK细胞 )活性的影响。方法　采用冷暴露方法处理小鼠 ,用乳酸脱氢酶 (LDH)释放法检测NK、LAK细胞的杀伤活性 ,并对结果进行分析。结果　短时间的急性冷暴露 ,NK及LAK细胞的活性呈一过性降低 ,以后又逐渐恢复并呈增强趋势。但是 ,在较长时间的冷暴露下 ,小鼠NK、LAK细胞的活性又显著降低 ,与对照组比较有显著差异 (p <0 .0 1)。结论　NK和LAK细胞的活性随冷暴露的时间而呈波动性变化 ,最终使机体的免疫功能降低。     

低剂量辐射对荷瘤小鼠免疫功能的刺激作用

目的：探讨低剂量电离辐射对荷瘤机体免疫功能的影响。方法：采用 Ｃ５７ Ｂ Ｌ／６ Ｊ小鼠右后肢腓肠肌内接种 ｌｅｗ ｉｓ 肺癌细胞做为实验动物模型,在肿瘤接种后 １０ ｄ,给予 ７５ ｍ Ｇｙ Ｘ 射线全身照射,于照射后 １８ ｈ 测定荷瘤小鼠胸腺、脾脏某些免疫学参数的变化,包括胸腺细胞自发增殖力、脾细胞数,脾细胞对 Ｃｏｎ Ａ、 Ｌ Ｐ Ｓ反应性,脾细胞白细胞介素（ Ｉ Ｌ ２）分泌量,脾脏自然杀伤细胞（ Ｎ Ｋ）、淋巴因子激活的杀伤细胞（ Ｌ Ａ Ｋ）、特异性细胞毒性 Ｔ 淋巴细胞（ Ｃ Ｔ Ｌ）杀伤活性。结果：与荷瘤假照射组相比,７５ ｍ Ｇｙ Ｘ 射线照射组小鼠的上述免疫学参数明显提高（ Ｐ＜ ００５～０１）。结论：低剂量电离辐射可明显增强荷瘤机体的免疫功能,可能具有肿瘤治疗的潜在临床意义。