抑癌基因PTEN的表达对大肠癌细胞转移侵袭能力的影响

目的探讨抑癌基因PTEN的表达大肠癌细胞转移侵袭能力的影响.方法1.利用western blot法检测不同转移潜能的大肠癌细胞系内PTEN蛋白的表达水平,说明PTEN蛋白的表达对大肠癌细胞转移潜能的影响,2.用脂质体作载体,将PTEN基因转染大肠癌细胞株LOVO后,采用计数细胞悬液加到粘附底物后20 min和120 min的细胞贴壁数用以测定细胞粘附能力,采用Costar的浸润小室检测PTEN基因转染前后细胞的浸润能力.结果1.转移潜能高的LOVO细胞PTEN的表达量显著低于转移潜能较低的HT-29,LS-174T,2.未转染细胞(LOVO)、转染pcDNA3.0-PTEN的细胞(LOVO/pcD-NA3.0-PTEN)在特异性粘附底物(Laminin)上20 min时贴壁率分别为18.6%±1.4%和13.9%±0.48%(P＜0.05),120min时贴壁率分别为71.2%±2.5%和56.0%±1.6%(P＜0.05),3.采用Costar的浸润小室对LOVO、LOVO/pcDNA3.0-PTEN细胞的浸润能力分析结果显示细胞悬液静置培养6 h后,对照细胞LOVO浸润穿透多聚碳膜的细胞数为11.7±1.74个,LOVO/pcDNA3.0-PTEN细胞穿透多聚碳膜的细胞数为7.5±1.58个(P＜0.05).结论在肿瘤细胞内抑癌基因PTEN的表达与大肠癌的转移侵袭行为密切相关.     

PTEN蛋白在大肠癌癌变过程中的表达及其意义

目的:研究PTEN蛋白在大肠癌癌变过程中的表达及其意义.方法:蛋白免疫印迹法检测107例大肠病变组织标本PTEN的表达情况,应用单因素方差分析及等级相关的秩和检验分析PTEN在大肠病变组织中的表达情况及其与临床病理特征间的关系.结果:PTEN蛋白在大肠癌癌变过程中,即在大肠正常组织、大肠增生性息肉、大肠腺瘤、大肠癌中表达阳性率呈递减趋势,差异有统计学意义(P＜0.05).大肠癌中PTEN蛋白与患者的肿瘤分化程度无关(P＞0.05).但是与临床分期相关(P＜0.05).结论:PTEN蛋白在大肠癌癌变过程中表达阳性率呈递减趋势,PTEN蛋白的低表达与大肠癌的发生和浸润转移相关.     

PTEN基因在大肠癌组织中的表达及与病理生物学特征的关系

目的:探讨抑癌基因PTEN在大肠癌组织中的表达水平及与其生物学行为的关系.方法:应用免疫组织化学SP法检测60例大肠癌组织,60例癌旁正常黏膜组织中的PTEN蛋白表达情况.结果:大肠癌组织中PTEN 阳性率为53.3% (32/60),显著低于正常大肠黏膜组织中的阳性率100%(60/60).在各组织学类型中,高分化腺癌PTEN 蛋白阳性表达率最高73.3% (22/30)显著高于低分化腺癌27.3%(6/22).PFEN蛋白的表达与淋巴结转移有关(P<0.05).结论:PTEN基因的异常改变与大肠癌的发生发展密切相关,可能是大肠癌进一步恶化的标志之一,可作为大肠癌生物学行为的参考指标,为大肠癌的基因治疗提供参考依据.     

肝癌组织中PTEN基因蛋白表达的研究

目的 探讨肝癌组织中抑癌基因PTEN蛋白的表达情况及其临床病理意义。方法 应用免疫组织化学S－P法检测41例肝细胞癌、5例胆管细胞癌及其相应的癌旁组织中PTEN蛋白的表达情况，同时结合患者的临床病理资料进行分析。结果 46例癌旁组织PTEN全部阳性表达，癌组织中PTEN阳性表达率为36．9％，阴性表达率为63．1％。PTEN蛋白在肝癌组织中的阳性表达与患者性别、年龄及组织类型无明显相关性，但与组织分化程度明显相关。结论 肝癌组织中PTEN蛋白阴性表达率较高，说明PTEN基因失活在肝癌的发生发展中起着重要作用，PTEN阳性表达有一定的预后意义。     

术前动脉灌注化疗对大肠癌微血管密度的影响

目的　分析评价术前动脉灌注化疗对大肠癌生物学行为的影响 ,并探讨术前动脉灌注化疗对肿瘤细胞影响的作用机制。方法　 2 8例 (同意入组研究 )大肠癌患者随机分成术前动脉灌注化疗组 (12例 )和对照组 (16例 )。术前动脉灌注化疗采用动脉造影技术 ,经肿瘤营养动脉给予 5 Fu10 0 0mg ,表阿霉素 6 0mg ,丝裂霉素 10mg。全部患者均接受手术治疗 ,切除标本分别行常规病理检查及免疫组织化学染色 (Ⅷ因子相关抗原染色 )测定大肠癌组织微血管密度 (MVD)。微血管密度计数采用Weidner方法分别计数癌中心、癌黏膜表面及癌旁组织的微血管数。结果　术前动脉灌注化疗组大肠癌组织中心、癌黏膜表面及癌旁组织的MVD分别为 40 .46± 7.0 6、5 2 .2 7± 18.40和 49.92± 8.15 ;对照组大肠癌组织中心、癌黏膜表面及癌旁组织的MVD分别为 46 .0 9± 12 .2 1、73.44± 2 2 .0 6和5 1.94± 12 .6 4。两组之间癌黏膜表面的MVD值差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,癌旁组织及癌中心组织MVD差异无统计学意义。结论　术前动脉灌注化疗可以降低大肠癌组织黏膜表面的微血管密度。     

复发转移大肠癌患者血清PTEN、COX2蛋白表达的研究

目的 分析血清PTEN、COX2蛋白表达与大肠癌复发转移的相关性,为临床治疗提供参考.方法选择160例复发转移大肠癌患者作为复发转移组,100例同期健康体检者作为对照组,120例初发大肠癌患者作为初发大肠癌组,120例复发未转移大肠癌患者作为复发未转移组.比较分析各组患者的血清PTEN、CD105、VEGF、COX2、PI3K、AKT蛋白表达水平,以及基质金属蛋白酶MMP1、MMP3、MMP9及其抑制剂TIMP1、TIMP2、TIMP7水平.结果复发转移组患者的血清PTEN蛋白表达水平低于对照组、初发大肠癌组及复发未转移组(P﹤0.05),而CD105、VEGF、COX2、PI3K、AKT、基质金属蛋白酶及其抑制剂水平高于对照组、初发大肠癌组及复发未转移组(P﹤0.05).血清PTEN水平与复发转移大肠癌患者的预后呈正相关(r=0.9076,P﹤0.05),血清COX2水平与复发转移大肠癌患者的预后呈负相关(r=-0.9022,P﹤0.05).结论大肠癌复发转移与血清PTEN水平降低及COX2水平升高有关,血清PTEN和COX2有望成为判断大肠癌复发转移及预后的重要生物学指标.     

PTEN和p16基因蛋白在胆管癌和胆囊癌中表达的研究

目的探讨PTEN和p16抑癌基因在胆管癌和胆囊癌组织中的阳性表达及意义。方法用S-P免疫组化法测定PTEN、p16基因蛋白在63例胆管癌及胆囊癌石蜡标本的阳性表达率。结果胆管癌PTEN和p16阳性表达为42.4%和36.3%,低于胆囊癌的43.3%和46.6%(P>0.05);胆囊癌组低分化组p16表达明显低于高、中分化组(P<0.05);PTEN表达与分化程度差异无显著性(P>0.05),结论p16和PTEN基因在胆道恶性肿瘤组织中呈低表达,表明胆道恶性肿瘤的发生及发展有多基因变异或缺失。     

大肠癌辅助化疗进展

辅助化疗是大肠癌综合治疗一个密不可分的部分。本文对辅助化疗的适应证,以５－ＦＵ为基础药物的化疗方案和疗效,给药途径等方面进行了全面的综述,为辅助化疗前景提供临床指导。     

大肠癌术后早期腹腔化疗疗效分析

８０例大肠癌术后采用腹化疗加静脉化疗与６０例单用静脉化疗结果相比，腹腔化疗加静脉化疗组的５年复发率（４８．９２％）明显低于静脉化疗组（５７．０７％），５年生存率（５２．３０％）明显高于静脉化疗组（４４．２７％）提示术后早期腹腔化疗加静脉估于纯静脉化疗的疗效。     

大肠癌的药物敏感基因疗法

药物敏感基因疗法是近年来兴起的颇有开发应用价值的1种肿瘤治疗手段。所谓肿瘤的药物敏感基因治疗是指经某种途径将该基因导入肿瘤细胞后,其在肿瘤细胞内特异表达,使肿瘤细胞分泌的酶在细胞内将无毒性的药物前体转变成毒性产物,抑制肿瘤细胞的ＤＮＡ合成,从而导致肿瘤细胞死亡     

NGX6基因联用5-Fu对人结肠癌细胞凋亡的影响

目的:探讨候选抑瘤基因NGX6联用5-Fu对结肠癌细胞凋亡的影响.方法:以稳定转染并表达NGX6基因的HT-29细胞与5-Fu联用作为实验组.以PDTC与5-Fu联用的HT-29细胞作为对照组.通过EMSA检测各组结肠癌HT-29细胞核转录因子-κB(NF-κB)的激活情况,利用MTT比色法检测各组细胞增殖的情况.吖啶橙(AO)/溴化乙啶(EB)双染法显微镜观测以及PI/Annexin-V双染流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况.结果:稳定转染并表达NGX6基因的HT-29细胞以及应用了PDTC的HT-29细胞NF-κB的激活均明显受到抑制;与5-Fu作用的HT-29细胞组比较,5-Fu联合PDTC作用于HT-29细胞后,HT-29细胞增殖受到明显抑制,5-Fu诱导HT-29细胞凋亡作用增强;与5-Fu联合PDTC作用于HT-29细胞的对照组比较,在诱导细胞凋亡以及抑制细胞增殖方面,稳定转染并表达NGX6基因的HT-29细胞与5-Fu联用组和对照组所取得一致的效果,NGX6基因增强5-Fu对HT-29细胞增殖抑制的能力及诱导HT-29细胞凋亡的能力.结论:NGX6基因抑制了肿瘤细胞NF-κB的激活,具有增强5-Fu诱导结肠癌细胞凋亡的能力,其机制可能是抑制肿瘤细胞NF-κB的激活,NGX6基因对肿瘤的治疗及预后起积极作用.     

应用自制组织芯片研究抑癌基因PTEN 在口腔鳞癌中的表达

 目的 从蛋白水平探讨口腔鳞癌组织中肿瘤抑制基因PTEN的表达及临床病理意义。方法 应用SP免疫组化染色法和组织芯片技术，检测10例正常口腔粘膜、10例口腔上皮单纯增生、15例口腔粘膜白斑及72例OSCC（其中高分化30例、中分化26例、低分化16例）组织中PTEN蛋白的表达，同时分析PTEN的表达与患者临床病理资料的关系。结果 PTEN基因在口腔鳞癌、口腔粘膜白斑、口腔上皮单纯增生和正常口腔粘膜组织中的阳性率分别为72．2％（52／72）、93．3％（14／15）、100％（10／10）和100％（10／10），口腔鳞癌组与其他各组间有显著性差异（P〈0．05）；PTEN的阳性表达率在不同性别、年龄和TNM分期等临床病理参数间无显著性差异（P〉0．05），但与淋巴结转移、组织分化程度等临床病理参数间有显著性差异（P〈0．05）。结论 PTEN基因表达的下调在OSCC的发生、发展中起着重要作用，其表达的异常可作为判断预后的参考指标之一。     

转PTEN 基因对人结肠癌细胞的抑制作用

  目的 探讨PTEN基因转染对结肠癌LoVo细胞的抑制作用. 方法 将人野生型及突变型PTEN cDNA通过脂质体导入结肠癌细胞LoVo中,并用RT-PCR、Western blot、流式细胞术检测细胞的PTEN mRNA和蛋白质表达.用流式细胞仪、DNA梯形带和MTT法分析5-Fu对转染前后LoVo细胞抑制周期和诱导凋亡的能力. 结果 转染野生型PTEN基因可明显增强结肠癌LoVo细胞的PTEN表达,5-Fu对转染后的LoVo细胞抑制细胞周期和诱导凋亡的作用明显增强.突变型在结肠癌细胞LoVo中有表达但无明显抑制作用. 结论 转染的PTEN基因可显著上调结肠癌LoVo细胞的PTEN表达,促进细胞凋亡,联合应用PTEN基因转染和5-Fu可获得协同的细胞毒作用.     

抑癌基因 PTEN在宫颈腺癌组织的表达

目的：探讨抑癌基因PTEN（phosphatase and tension homolog deleted on chromosome ten)在宫颈腺癌组织的表达。方法：采用S－P免疫组织化学研究36例FIGOⅠ-Ⅱa期浸润性宫颈腺癌组织中抑癌基因PTEN的表达。结果：宫颈腺癌组织细胞核PTEN表达显著低于癌旁宫颈腺上皮组织（P＜0．01）,97．2％（35／36）的宫颈腺癌细胞核呈低表达（H≤1,26／36）或缺失（H＝0,9／36）,而仅36％（9／25）的癌旁宫颈腺上皮呈低表达（P＜0．01）;宫颈腺癌组织细胞浆PTEN表达水平略高于宫颈腺上皮组织（P＜0．05）,宫颈腺癌组织细胞浆低表达（5．6％,2／36）低于癌旁宫颈腺上皮（24．0％,6／25）（P＜0．05）。结论：PTEN在宫颈腺癌的发生中起一定的作用,其抑癌作用环节可在细胞核水平。     

那可丁对人结肠癌5-Fu耐药细胞株HT-29/5-Fu、LoVo/5-Fu及SW480/5-Fu耐药性的影响

目的 探讨那可丁（Nos）对人结肠癌5-氟尿嘧啶（5-Fu）耐药株耐药性的影响及其机制。方法 构建人结肠癌耐药株HT-29/5-Fu、LoVo/5-Fu及SW480/5-Fu，MTT法筛选出Nos对各组细胞的半数抑制浓度（IC50），观察细胞形态变化，利用流式细胞仪检测细胞周期及凋亡水平；RT-qPCR及Western blot检测细胞P38表达和激活水平，以及耐药相关蛋白的表达。结果 成功构建耐药细胞株HT-29/5-Fu、LoVo/5-Fu和SW480/5-Fu。与对照组比较，Nos干预后的结肠癌耐药细胞株HT-29/5-Fu、LoVo/5-Fu及SW480/5-Fu细胞周期明显阻滞在G₀/G₁期（P<0.01），凋亡率升高，而P38表达及磷酸化受到显著抑制（P<0.01），与耐药相关的多药耐药相关蛋白、肺耐药相关蛋白及P-glycoprotein表达显著降低（P<0.01）。结论 Nos对耐5-Fu的人结肠癌细胞具有一定的毒性作用，降低了耐药细胞耐药性，作用机制可能与抑制P38的表达和磷酸化有关。     

大蒜素与细胞周期特异性化疗药联合应用抗肿瘤的实验研究

目的: 探讨大蒜素对人胃癌细胞株BGC-823、SGC7901生长的影响及其与细胞周期特异性化疗药联合应用抗肿瘤作用。 方法: MTT法测定细胞增殖抑制率并测定药物半数抑制率(IC50);流式细胞仪检测细胞周期的改变,大蒜素与NVB、5-FU、MMC、PDD四种化疗药联合应用,观察细胞毒活性的改变。 结果: 大蒜素对BGC-823和SGC-7901两种细胞的生长均有明显的抑制作用,72hIC50分别为:30μg/ml和20μg/ml。以72hIC50浓度大蒜素分别作用于两种胃癌细胞株24h、48h后,流式细胞仪检测与对照组比G0/G1期细胞减少,G2/M期细胞明显增加,提示两种胃癌细胞株经大蒜素处理后,细胞周期阻滞于G2/M期。大蒜素与四种化疗药联合应用,结果发现作用于BGC-823细胞,NVB72h的IC50值由原来单独应用时的9.0μg/ml降至2.25μg/ml。作用于SGC-7901细胞,NVB72h的IC50值由原来单独应用时的43.0μg/ml降至12.5μg/ml,显示大蒜素与作用于G2/M期的细胞周期特异性化疗药NVB联合应用时可增强其对肿瘤细胞的杀伤作用。 结论: 大蒜素可使BGC-823和SGC-7901两种细胞的增殖受到抑制,细胞周期被阻滞在G2/M期。大蒜素与G2/M期特异性化疗药联合应用,可能具有协同抗肿瘤作用。     

靶向抑制CXCR7基因表达对结肠癌生长的影响

目的探讨靶向抑制CXCR7基因表达对人结肠癌荷瘤裸鼠瘤体生长的影响。方法建立人结肠癌荷瘤鼠模型。将人结肠癌荷瘤裸鼠随机分为3组,治疗组：瘤体内注射LV-CXCR7shRNA 50μl;阴性对照组：瘤体内注射LV-shRNA negative control 50μl;空白对照组：瘤体内注射PBS 50μl。24天后测量瘤体的体积;处死动物,剥离瘤体,测量其重量。采用Westrn Blotting方法测定瘤体组织中CXCR7蛋白表达水平。结果治疗组瘤体体积显著缩小（P〈0.05）、重量显著减轻（P〈0.05）。治疗组瘤体组织中CXCR7蛋白表达水平显著降低（P〈0.05）。结论靶向抑制CXCR7基因的表达能显著抑制人结肠癌荷瘤裸鼠的瘤体生长,CXCR7是人结肠癌治疗潜在的分子靶标。     

抑癌基因PTEN在乳腺癌组织中的表达

目的 探讨10号染色体有缺失且与tensin同源的磷酸酯酶基因（PTEN）在乳腺癌组织中的表达及其意义。方法 采用免疫组织化学S－P法，检测71例乳腺癌组织中PTEN蛋白的表达水平。结果 正常乳腺组织中PTEN呈高表达；有腋淋巴结转移的乳腺癌组织中PTEN高表达率为37．8％，明显低于无腋淋巴结转移者（P＜0．05）；ER阳性者PTEN高表达率明显低于ER阴性者（P＜0．05）；出现远处转移的乳腺癌组织其PTEN高表达率也显著降低（P＜0．01）。PTEN表达水平与患者年龄、肿瘤大小、组织学分级及临床分期无关，但随组织学分级和临床分期的增高，PTEN高表达率呈下降趋势。结论 PTEN表达异常与乳腺癌发生发展密切相关，PTEN低表达的乳腺癌恶性程度高、转移潜能大。     

功能性Fas 配体在大肠癌细胞的表达及其调控

 目的　研究功能性 Fas配体在大肠癌细胞的表达及其调控。方法　分别采用反转录 -聚合酶链反应和氚释放细胞活性测定技术检测了大肠癌细胞株中 Fas配体 m RNA表达和 Fas依赖的细胞毒活性及其调控。结果　在检测的六株大肠癌细胞中 ,全部表达 Fas配体 m RNA。部分大肠癌细胞具有 Fas依赖的细胞毒活性。其中 DLD- 1细胞活性具有量效关系 ,并且乙酸肉豆寇佛波醇 (PMA)和离子霉素 (ionomycine)刺激能显著增强 DLD- 1的细胞毒活性。结论　至少部分大肠癌细胞表达功能性 Fas配体 ,并可能以此反击机体免疫系统 ,逃避免疫监督。     

晚期结肠癌组织中ERCC1和BRCA1的表达与奥沙利铂方案化疗疗效及预后的关系

目的 探讨晚期结肠癌组织中切除修复交叉互补基因1(excision repair cross-complementinggene l,ERCCl)和乳腺癌易感基因l(breast cancer susceptibility gene l,BRCAl)的表达情况及其与临床病理特征、奥沙利铂方案化疗疗效及预后之间的关系。方法 采用免疫组织化学方法检测晚期结肠癌组织中ERCCl和BRCAl蛋白的表达状况。结果 晚期结肠癌组织中ERCCl和BRCA1蛋白表达阳性率分别为41.2%和47.4%。ERCCl和BRCA1蛋白的表达与患者的年龄、性别、肿瘤分化程度和肿瘤部位均无关（P>0.05）,结肠癌组织中ERCC1蛋白表达与BRCA1蛋白表达呈正相关（r=0.211,P=0.038）。ERCCl和BRCA1蛋白表达阴性患者奥沙利铂方案化疗有效率高于表达阳性患者（P＜0.05）。ERCCl蛋白表达阴性患者化疗后,中位生存期(median survival time,MST)高于表达阳性患者(P=0.014);BRCAl蛋白表达阴性患者化疗后MST高于表达阳性患者,但差异无统计学意义(P=0.201)。Cox回归模型分析结果显示ERCC1蛋白的表达状态和肿瘤分化程度是影响结肠癌预后的独立因素。结论 晚期结肠癌中ERCCl和BRCAl蛋白的表达存在相关性,ERCCl和BRCAl的表达对奥沙利铂方案化疗疗效具有预测价值,并且ERCC1的表达状态可作为预后判断依据,而BRCA1在晚期肠癌预后判断中的价值则有待进一步研究。