肿瘤免疫基因治疗的应用研究进展

随着生物技术的发展,对恶性肿瘤进行免疫基因治疗已成为研究热点.免疫基因治疗是一种新的肿瘤治疗模式,部分已经进入临床应用阶段,并取得了明显的治疗效果.本文综述了近年来在肿瘤免疫基因治疗研究及临床应用领域所取得的进展.     

DNA疫苗—跨入21世纪的新型疫苗

简述了ＤＮＡ疫苗的发展和研究进展。ＤＮＡ疫苗全方位地调动了机体的免疫系统，可诱导广泛的体液和细胞介导的免疫应答，其应用前景引入注目。     

肠道病毒71型疫苗研究进展

肠道病毒71型（enterovirus 71,EV71）是引起儿童手足口病的主要病原体之一,其感染可在少数患者中引起严重的神经系统综合征甚至导致死亡。自20世纪90年代后期在东南亚地区暴发以来,EV71感染已成为严重威胁全球,尤其是亚太地区儿童健康的公共卫生问题之一。尽管目前临床上尚无针对EV71的安全有效的疫苗,但多个灭活疫苗已进入或完成临床研究,减毒活疫苗、亚单位疫苗、病毒样颗粒疫苗等新型疫苗也显示出良好的发展前景,该文综述了EV71疫苗的最新研究进展。     

鼠疫耶尔森菌活疫苗株的比较基因组学研究

目的揭示不同来源的鼠疫活疫苗株在基因组组成上的差异。方法以芯片比较基因组杂交为主要研究手段,结合PCR验证,对19株鼠疫活疫苗株进行比较基因组分析。结果鼠疫活疫苗株基因组中缺失了大量基因,但也有某些大片段基因的拷贝增多。结论不同来源的疫苗株在基因组组成上存在差异,构成了不同疫苗株的表型与使用效果具有差异性的遗传基础。     

炭疽芽孢杆菌致病机制与疫苗研制策略研究进展

炭疽杆菌致病过程包括芽孢发芽、菌体繁殖和毒素分泌等多个环节。荚膜和毒素是公认的致病因子。毒素B亚单位（PA）可阻断ET、LT的致病作用，已用作疫苗，但繁殖体生长过程中产生的出血、蛋白溶解分子也是毒力分子。相应的抑制剂有治疗作用。现有炭疽粗制PA苗、芽孢苗安全有效，但仍存在不足。根据炭疽致病机制的研究进展，理想炭疽疫苗应同时靶向芽孢、荚膜和毒素及其他毒力因子等多个环节。     

抗血管生成肿瘤疫苗研究进展

研究发现,肿瘤的生长和转移依赖于血管的生成,如果抑制肿瘤新生血管的形成就可以有效抑制肿瘤细胞的生长和转移.越来越多的证据表明,以血管相关抗原为靶点的疫苗可以引发机体产生特异性细胞或体液免疫反应,抑制血管的形成,从而起到阻止肿瘤细胞生长和转移的作用.目前,针对肿瘤血管生成的疫苗治疗已成为肿瘤研究的热点及肿瘤治疗的新策略.本文就目前所进行的抗肿瘤血管生成的疫苗研究情况作一综述.     

结核分枝杆菌Ag85A DNA疫苗的免疫原性和治疗作用

目的 研究结核分枝杆菌Ag85A DNA 疫苗的免疫原性和治疗作用.方法 40只BALB/c小鼠随机分为4组,分别用生理盐水、pVAX1载体、微卡菌苗、Ag85A DNA 疫苗免疫,每2周肌内注射1次,共3次.研究 Ag85A DNA 疫苗的免疫原性.用结核分枝杆菌H37Rv通过尾静脉注射40只BALB/c小鼠,分别用生理盐水、pVAX1载体、利福平、Ag 85A DNA 疫苗治疗.治疗结束后2周杀鼠,观察肺和脾病理改变,称取重量、做菌落计数,用ELISPOT方法检测小鼠分泌γ干扰素(IFN-γ)的T淋巴细胞斑点数.结果 与其他组比较,Ag 85A DNA疫苗能诱导产生大量Ag85A特异的分泌IFN-γ 的T淋巴细胞(S=11.832,P=0.0080).肺组织病理显示:生理盐水组肺组织病变严重、广泛;载体组比生理盐水组病变略轻,但病变仍较重、广泛;Ag 85A DNA 疫苗组肺组织病变减轻、局限,3/5区域肺泡结构完整,清晰;利福平组肺组织无病变.与生理盐水组比较,Ag85A DNA 疫苗组和利福平组肺脏菌落数分别减少0.73 log和2.11 log;肝脏菌落数分别减少0.88 log和2.11 log(P<0.01).结论 Ag85A DNA 疫苗对小鼠结核病具有较好的治疗效果.     

逆向疫苗学及其研究进展

基于基因组的疫苗研发途径被称为逆向疫苗学，它不仅省时、经济，而且可为传统方法难于或根本无法开展的疫苗研究提供新的解决方法。逆向疫苗学的研究过程始于硅片，用计算机预测疫苗的所有抗原。不依赖于抗原是否丰富，也不需要微生物是否能够体外培养。本文介绍逆向疫苗学的概况。特别是近年来在研制某些病原茵新疫苗方面的进展。     

Methods enhancement for improved recovery of human DNA from forensic blood samples on different fabrics using the DNA IQ System

DNA typing of biological samples can be a challenging task due to the presence of small amounts of DNA and/or a high content of PCR inhibitors. Our aim is to develop a protocol to recover DNA suitable for DNA typing from blood-stained fabrics based on the DNA IQ System. Blood stains on different fabrics were buried in different types of soil and left for 1–7 days. The samples were then recovered and DNA was extracted with a modified DNA IQ System protocol, involving a modification in the preparation of the Wash Buffer. The samples extracted with the modified protocol showed a higher amount of recovered DNA compared with the recommended protocol. The removal of isopropanol from the Wash Buffer composition contributes to a higher amount of recovered DNA.     

Evaluating the efficacy of DNA differential extraction methods for sexual assault evidence

Analysis of sexual assault evidence, often a mixture of spermatozoa and victim epithelial cells, represents a significant portion of a forensic DNA laboratory’s case load. Successful genotyping of sperm DNA from these mixed cell samples, particularly with low amounts of sperm, depends on maximizing sperm DNA recovery and minimizing non-sperm DNA carryover. For evaluating the efficacy of the differential extraction, we present a method which uses a Separation Potential Ratio (SPRED) to consider both sperm DNA recovery and non-sperm DNA removal as variables for determining separation efficiency. In addition, we describe how the ratio of male-to-female DNA in the sperm fraction may be estimated by using the SPRED of the differential extraction method in conjunction with the estimated ratio of male-to-female DNA initially present on the mixed swab. This approach may be useful for evaluating or modifying differential extraction methods, as we demonstrate by comparing experimental results obtained from the traditional differential extraction and the Erase Sperm Isolation Kit (PTC^©) procedures.     

大肠杆菌菌蜕作为核酸疫苗载体的实验方法研究

目的制备大肠杆菌DH5α菌蜕,并用其装载核酸片段以及质粒DNA,体外转染抗原递呈细胞,探讨其作为DNA疫苗载体的可能性。方法将构建有φX174噬菌体裂解蛋白的温控型表达质粒pHH43转化入大肠杆菌DH5α中,诱导细菌裂解制备大肠杆菌DH5α菌蜕,利用制备的DH5α菌蜕装载核酸片段,并摸索出较好的装载方法用于质粒DNA的装载,然后转染巨噬细胞RAW264.7,观察转染效果。结果成功制备了大肠杆菌DH5α菌蜕,细菌的裂解效率可达97.8%,对核酸片段和质粒DNA的装载效率分别达94.89%和91.98%,装载红色荧光蛋白质粒pDSred-N1的DH5α菌蜕转染巨噬细胞RAW264.7,红色荧光蛋白的表达效率可达50%。结论大肠杆菌DH5α菌蜕可以用于装载核酸疫苗并将其靶向性地导入到抗原递呈细胞中,可获得较高的表达效率,初步验证了大肠杆菌DH5α菌蜕作为核酸疫苗载体的可行性。