合并脑损伤大鼠骨折愈合过程中转化生长因子β1血清含量及在骨折位点的表达

目的:观察合并脑损伤的骨折愈合过程转化生长因子β1的血清含量变化及骨折位点转化生长因子β1的表达。方法:实验于2003-10/2005-02在河北医科大学生化实验室完成。选择清洁级成年雄性SD大鼠84只,随机数字表法分为4组:正常对照组6只,脑损伤组6只,骨折组36只,脑损伤 骨折组36只。脑损伤组按Gruner改良法制作中度脑损伤模型(将400g砝码于100cm高处通过导向管坠落,撞击置于人字缝与失状缝之间的圆锥上,致中度脑损伤)。骨折组充分显露一侧胫骨后,在胫骨结节下1cm处横断胫骨,以直径1mm的克氏针作髓内固定。正常对照组不作任何处理。正常对照组于实验开始后第3天,其他3组分别于术后3d,1,2,3,4,5周采用ABC-ELISA法测定血清中转化生长因子β1含量。脑损伤组与骨折组分别于术后3d,1,2,3,4,5周取骨折标本进行免疫组织化学染色及图像分析,观察转化生长因子β1在骨折位点局部的表达。结果:纳入动物84只,均进入结果分析。①脑损伤组术后第3天血清转化生长因子β1含量高于正常对照组,为正常对照组的4倍[分别为(17.80±11.75),(4.42±2.10)μg/L,P<0.01],2周以后降至正常。骨折组术后1周血清转化生长因子β1含量高于正常对照组[分别为(11.70±4.56),(4.42±2.10)μg/L,P<0.05],第5周降至正常。脑损伤 骨折组术后第3天血清转化生长因子β1含量明显高于正常对照组,为正常对照组的7倍,术后第1周时达到8倍,术后第3天及第1周时脑损伤 骨折组血清转化生长因子β1含量高于骨折组,差异均有显著性意义[分别为(29.30±20.96),(5.93±3.34)μg/L,P<0.05;(31.73±21.57),(11.70±4.56)μg/L,P<0.01],术后2周两组比较差异无显著性意义(P>0.05)。②在图像分析中,术后3d,1,2,3,4周脑损伤 骨折组骨折位点转化生长因子β1染色的吸光度始终高于骨折组,且差异有显著性意义(分别为0.206±0.055,0.135±0.029;0.271±0.043,0.181±0.035;0.234±0.059,0.188±0.036;0.209±0.057,0.166±0.033;0.187±0.037,0.169±0.031,P<0.05)。术后第5周两组比较差异无显著性意义。结论:血浆和骨折位点中转化生长因子β1的表达在合并脑损伤骨折时增高,可能是合并脑损伤时骨折愈合加速的体液因子之一。     

大鼠股骨骨折合并脑损伤骨折愈合过程中胰岛素样生长因子Ⅰ在血清和骨痂中的表达

目的:观察胰岛素样生长因子Ⅰ在大鼠血清和骨痂中的表达,及其对骨折合并脑损伤骨折愈合的作用。方法:实验于2005-01/09在华北煤炭医学院附属医院骨科实验室完成。12周雄性Sprague-Dawley大鼠64只,随机数字法分成4组,正常对照组、脑损伤组、单纯骨折组、骨折合并脑损伤组。建立大鼠脑损伤和股骨骨折模型。分别于2周和3周取材,每个时间点每组8只,拍骨折股骨X射线片,采用酶联免疫吸附法测血清中胰岛素样生长因子Ⅰ的浓度,取骨折端上下5mm组织作组织形态学染色(苏木精-伊红染色)和SP法免疫组织化学染色,观测骨折愈合情况和胰岛素样生长因子Ⅰ的表达。结果:①血清中胰岛素样生长因子Ⅰ浓度:同一时间点单纯脑损伤组和骨折合并脑损伤组均高于正常对照组和单纯骨折组,单纯脑损伤组和骨折合并脑损伤组相似,正常对照组和单纯骨折组相似d脑损伤组和骨折合并脑损伤组2周时高于3周时,正常对照组在2周和3周时比较差异无统计学意义,单纯骨折组在2周和3周时比较差异无统计学意义[2周正常对照组、脑损伤组、单纯骨折组、骨折合并脑损伤组、3周正常对照组、脑损伤组、单纯骨折组、骨折合并脑损伤组分别为(414.74±81.32),(579.98±73.30),(397.37±70.68),(569.95±65.13),(350.07±41.10),(433.37±53.78),(328.13±49.27),(454.26±93.26)μg/L]。②免疫组织化学分析骨折端组织平均阳性细胞百分数:骨折合并脑损伤组均高于单纯骨折组,单纯骨折组2周与3周时比较差异无统计学意义,骨折合并脑损伤组2周与3周时比较差异无统计学意义[2周单纯骨折组、骨折合并脑损伤组、3周单纯骨折组、骨折合并脑损伤组分别为(0.776±0.057),(0.853±0.044),(0.780±0.051),(0.851±0.039)]。结论:脑损伤对骨折愈合有促进作用,胰岛素样生长因子Ⅰ可能是脑损伤促进骨折愈合的原因。     

猪苓提取物对大鼠尿草酸钙结石形成的抑制作用

目的:观察猪苓不同溶剂的提取物对大鼠尿草酸钙结石形成的抑制作用。方法:实验于2005-04-10/05-24在重庆医科大学药理实验室进行。①分组:取Wistar雄性健康大鼠64只,单纯随机分为对照组、模型组、正丁醇浸膏0.5,1.0g组、乙酸乙酯浸膏0.5,1.0g组和水浸膏0.5,1.0g组8组,每组8只。②造模;除对照组以外,其他7组大鼠每天灌胃10g/L乙二醇和20g/L氯化铵2mL诱导大鼠肾草酸钙结石模型。③给药:正丁醇浸膏0.5,1.0g组每天灌胃猪苓正丁醇浸膏0.5,1.0g;乙酸乙酯浸膏0.5,1.0g组每天灌胃猪苓乙酸乙酯浸膏0.5,1.0g;水浸膏0.5,1.0g组每天灌胃猪苓水浸膏0.5,1.0g;其他2组灌胃等剂量生理盐水。均饲养5周。④检测指标:实验结束前1d收集24h尿,测定尿草酸盐结石、Ca2 和Mg2 含量;然后处死大鼠,取血测定血清肌酐和尿素氮水平;取肾观察肾组织病理变化,并检测肾组织Ca2 ,Mg2 含量。结果:64只大鼠进入结果分析。①对照组血清尿素氮和肌酐水平明显低于其他组(P<0.05,0.01);乙酸乙酯浸膏1.0g组血清尿素氮水平低于模型组[(8.12±1.32),(10.84±0.78)mmol/L,P<0.01];正丁醇浸膏0.5g组,乙酸乙酯浸膏0.5,1.0g组血肌酐水平低于模型组[(99.18±16.46),(97.58±15.16),(87.03±15.82),(112.11±10.16)μmol/L,P<0.05,0.01]。②对照组24h尿草酸盐结石和Ca2 分泌量明显低于其他各组(P<0.01);正丁醇浸膏1.0g组和乙酸乙酯浸膏0.5,1.0g组24h尿Ca2 分泌量低于模型组[(53.06±11.21),(44.08±10.34),(39.84±13.01),(64.42±15.32)μmol/24h,P<0.05,0.01],乙酸乙酯浸膏0.5,1.0g组低于正丁醇浸膏和水浸膏组(P<0.01)。③肾Ca2 含量:对照组明显低于其他各组(P<0.01);正丁醇浸膏1.0g组和乙酸乙酯浸膏0.5,1.0g组低于模型组[(8.52±2.41),(8.13±2.18),(6.21±0.73),(12.01±0.87)μmol/g,P<0.05,0.01],乙酸乙酯浸膏0.5,1.0g组低于正丁醇浸膏和水浸膏组(P<0.01)。④乙酸乙酯浸膏组肾草酸钙结晶明显少于模型组,肾组织病理变化也轻于模型组。结论:猪苓乙酸乙酯浸膏能抑制实验性高草酸尿症大鼠尿草酸钙晶体的形成,明显降低血清尿素氮和肌酐的浓度,对肾功能具有明显的保护作用。     

利骨素防治去卵巢大鼠骨矿盐丢失机制的研究

目的:通过测定大鼠骨矿盐含量和血清相关激素及白细胞介素6水平,探讨利骨素对去卵巢大鼠骨矿盐代谢的影响及其机制。方法:实验于2003-04/2004-03在广东医学院生理教研室完成。实验材料:普通级4个月龄雌性SD大鼠18只。利骨素由筛选海洋生物中某些贝类的壳和鱼类的骨骼进行组合,配制成粉剂,含Ca6.66mg;Mg0.039mg;Zn8.54μg;P7.32μg;S0.025mg;Co0.078μg;Mn0.61μg。实验分组:用抽签法随机分成3组,即假去卵巢组、去卵巢组、去卵巢 利骨素组,每组6只。实验方法:去卵巢组和去卵巢 利骨素组大鼠切除双侧卵巢。假去卵巢组大鼠手术过程同去卵巢组,但不切除卵巢。去卵巢 利骨素组大鼠于术后第2天开始给予利骨素混悬液按3.0mL/kg体质量灌胃,1次/d,持续11周。实验评估:各组实验动物在第11周末,麻醉状态下动脉放血处死,观察骨干重、骨干重/体质量、骨灰重、骨灰重/体质量、骨灰重/骨干重变化。动脉血血清样本-20℃保存待测,放免法同批测定卵泡刺激素、黄体生成素、雌二醇、孕酮、促甲状腺激素、甲状腺素、降钙素、皮质醇、生长素和白细胞介素6。结果:18只大鼠实验数据均进入结果分析。①大鼠骨干重、骨干重/体质量、骨灰重、骨灰重/体质量、骨灰重/骨干重变化:去卵巢大鼠各指标均低于假去卵巢组[(504±24),(575±41)mg;(1.55±0.61),(1.82±0.19)g/kg;(293.31±14.00),(381.17±23.00)mg;(0.90±0.04),(1.21±0.14)g/kg;(58.6±0.8)%,(66.3±1.5)%,P<0.05];去卵巢 利骨素组各指标均较去卵巢组高[(613±64),(504±24)mg;(1.89±0.19),(1.55±0.61)g/kg;(405.56±47.00),(293.31±14.00)mg;(1.25±0.13),(0.90±0.04)g/kg;(66.1±0.9)%,(58.6±0.8)%,P<0.05]。②血清相关激素水平:与假去卵巢组比较,去卵巢大鼠血清雌二醇、孕酮、促甲状腺激素、甲状腺素、降钙素、皮质醇、生长素水平低[(2.98±0.72),(23.93±4.48)ng/L;(11.22±1.16),(21.85±2.62)μg/L;(4.10±0.53),(20.07±2.32)mU/L;(5.65±0.77),(13.60±1.74)μg/L;(49.92±6.33),(74.27±6.42)ng/L;(1.70±0.17),(3.81±0.61)μg/L;(2.50±0.51),(6.53±0.73)μg/L,P<0.05],卵泡刺激素、黄体生成素、白细胞介素6水平高[(6.24±1.04),(2.71±0.37)U/L;(14.06±1.22),(3.00±0.24)U/L;(448.33±29.03),(361.50±33.45)ng/L,P<0.05];与去卵巢组比较,去卵巢 利骨素组血清孕酮、生长素、皮质醇、促甲状腺激素、甲状腺素水平高[(14.47±1.40),(11.22±1.16)μg/L;(4.16±0.76),(2.50±0.51)μg/L;(4.95±0.74),(1.70±0.17)μg/L;(13.85±1.99),(4.10±0.53)mU/L;(9.14±1.76),(5.65±0.77)μg/L,P<0.05];血清黄体生成素水平低[(11.19±1.26),(14.06±1.22)U/L,P<0.05]。结论:利骨素可对抗去卵巢所致的骨矿盐丢失,改变去卵巢大鼠体内相关激素水平是对抗去卵巢大鼠骨矿盐丢失的重要机制。     

外周γ-氨基丁酸b受体对慢性应激过程中大鼠血浆儿茶酚胺及皮质醇含量的影响

目的:分析外周γ-氨基丁酸b受体对慢性应激大鼠血浆儿茶酚胺和皮质醇含量变化的作用。方法:实验于2003-07/2004-07在白求恩军医学院军事病理实验室,实验选用雄性健康大鼠100只。随机分为对照组(n=10),应激1,6和15d组,应激组又分为单纯应激组,注射2羟-萨氯酚组和注射氯苯氨丁酸组,每组10只。对照组单独饲养,避免外界干扰;应激组大鼠采用足底电击结合噪声的方法制备应激动物模型,以足底电击建立非条件反射,噪音建立条件反射。同时,注射2羟-萨氯酚组和注射氯苯氨丁酸组分别经腹腔注射γ-氨基丁酸b受体拮抗剂2羟-萨氯酚(100μg/kg)和γ-氨基丁酸b受体激动剂氯苯氨丁酸(4mg/kg)。对照组和应激组均于最后一次应激完成后第2天早8∶00时取血样,采用高效液相-电化学法检测大鼠血浆儿茶酚胺含量,酶联免疫法检测慢性应激过程中血浆皮质醇含量的变化。结果:实验大鼠100只,全部进入结果分析,无脱失值。①在慢性应激1,6,15d过程中单纯应激组大鼠血浆儿茶酚胺含量变化为去甲肾上腺素呈升高趋势[(0.53±0.03),(0.55±0.03),(0.58±0.05)μg/L];肾上腺素呈先升高而后下降趋势[(0.70±0.27),(0.75±0.05),(0.47±0.04)μg/L]。注射2羟-萨氯酚组血浆儿茶酚胺含量变化为去甲肾上腺素呈升高趋势[(0.11±0.02),(0.42±0.10),(0.83±0.02)μg/L];肾上腺素呈先升高后下降趋势[(0.43±0.10),(0.51±0.11),(0.21±0.21)μg/L]。注射氯苯氨丁酸组大鼠血浆儿茶酚胺含量变化为去甲肾上腺素呈升高趋势[(0.11±0.02),(0.20±0.01),(0.47±0.05)μg/L];肾上腺素呈下降趋势[(0.69±0.01),(0.50±0.07),(0.35±0.06)μg/L]。②在慢性应激过程中单纯应激组大鼠血浆皮质醇呈升高趋势[(73±1.5),(83±2.8),(85±5.7)μg/L];注射氯苯氨丁酸组大鼠血浆皮质醇呈明显升高趋势[(22.6±5.8),(76.7±5.7),(88.3±1.4)μg/L],注射2羟-萨氯酚组血浆皮质醇呈明显降低趋势[(85.2±5.4),(75.3±5.6),(65.8±2.6)μg/L]。结论:刺激外周γ-氨基丁酸b受体具有降低慢性应激大鼠血浆儿茶酚胺作用,抑制外周γ-氨基丁酸b受体具有降低慢性应激大鼠血浆皮质醇作用。     

甘草苷对慢性应激抑郁模型大鼠的抗抑郁作用

目的:观察甘草苷对慢性抑郁模型大鼠的疗效,探讨其抗抑郁样作用的可能机制。方法:实验于2005-06/07在北京大学医学部完成。72只成年雄性SD大鼠,根据其体质量采用区组随机化的方法将大鼠分为6组,每组12只:正常对照组、模型组(应激 灌胃双蒸水)、氟西汀组(应激 灌胃氟西汀),以及甘草苷10mg/kg、20mg/kg、40mg/kg组(应激 灌胃甘草苷)。采用慢性应激加孤养造模,应激持续5周,从第3周起进行药物干预。盐酸氟西汀原料药由常州四药公司提供。甘草苷由北大药学院生药学生物技术研究室提供。采用糖水消耗实验和强迫游泳实验观察大鼠行为学改变。实验结束后断头取血,分离血浆和红细胞,用试剂盒测定红细胞超氧化物歧化酶活性和血浆丙二醛浓度。结果:实验中,1只大鼠脚趾受伤,2只造模时意外溺亡,共69只大鼠进入结果分析。①慢性应激大鼠糖水消耗量较正常对照组明显降低[(8.3±0.9),(14.4±0.8)g,P<0.01];治疗后糖水消耗量增加,差异均具有显著性[甘草苷10、20、40mg/kg组分别为(11.4±1.2),(14.1±1.0),(14.0±0.8)g,氟西汀组为(13.0±1.9)g,P<0.05或0.01]。②与对照组相比,模型组大鼠不动时间显著延长[(37±9),(96±10)s,P<0.01];与模型组相比,给药各组大鼠的不动时间均显著缩短[甘草苷10、20、40mg/kg组分别为(66±10),(26±8),(41±11)s,氟西汀组为(63±8)s,P<0.05或0.01]。③模型组红细胞超氧化物歧化酶活性低于正常对照组[(35.4±6.8),(44.5±4.6)μkat/g,P<0.01];甘草苷各组后超氧化物歧化酶活性均高于模型组[20、40mg/kg组分别为(42.2±3.8)μkat/g,P<0.05;(45.3±7.9)μkat/g,P<0.01];氟西汀组超氧化物歧化酶活性与模型组相比差异无显著性。④模型组血浆丙二醛浓度高于正常对照组[(3.4±0.6),(1.9±0.4)μmol/L,P<0.01];甘草苷治疗组血浆丙二醛浓度降低[20、40mg/kg组分别为(2.2±0.9)μmol/L,P<0.05;(1.9±0.7)μmol/L,P<0.01]。结论:甘草苷可以改善抑郁模型中快感缺乏的症状,并能对抗绝望行为,支持甘草苷具有抗抑郁样作用的假设。甘草苷抗抑郁样作用可能通过提高机体超氧化物歧化酶活性,清除自由基,阻止脂质的过氧化,减少丙二醛的生成实现的。     

运动结合补充葛根素干预糖尿病大鼠一氧化氮及一氧化氮合酶的变化

目的:分析有氧运动结合补充葛根素对链脲佐菌素所致糖尿病大鼠血清及肝脏中的一氧化氮含量和一氧化氮合酶活性的影响。方法:实验于2005-08/2006-01在江西师范大学体育学院完成。①选取8周龄雄性Sprague-Dawley大鼠60只,随机数字表法分为5组:正常对照组、模型对照组、运动组、葛根素组、运动 葛根素组,12只/组。②除正常对照组外,其余各组均喂以高脂饲料,腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病模型。血糖值≥14.7mmol/L且尿糖为～者确定为造模成功。正常对照组仅以普通饲料喂养,腹腔注射等体积0.1mmol/L的枸椽酸盐缓冲液。③造模后,运动组进行跑台训练,跑台坡度为0°,每天以10～15m/s的速度运动30min,共训练8周。葛根素组每天按500mg/kg体质量给予葛根素灌胃,共8周。运动 葛根素组跑台训练的同时给予葛根素灌胃。正常对照组、模型对照组不进行任何干预。各组均以普通饲料喂养。④分别于造模后第3天、造模后第8周末对各组大鼠尾静脉取血测定空腹血糖。造模后第8周末,各组大鼠乙醚麻醉,心脏取血,离心取上层无溶血血清,硝酸还原酶法测定一氧化氮含量。取新鲜肝脏组织1g,用40mmol/L的磷酸钾缓冲液制成匀浆,离心取上清检测一氧化氮合酶活性。结果:共54只大鼠进入结果分析。①空腹血糖检测结果:造模后第3天～第8周末,各模型组空腹血糖值均明显高于正常对照组(P<0.01)。与模型对照组比较,造模后第3天葛根素组、运动组、运动 葛根素组空腹血糖值无明显变化[(18.3±4.7),(18.6±3.0),(18.9±4.6),(19.1±2.9)mmol/L,P>0.05],第8周末均不同程度下降,尤以运动 葛根素组明显[(22.3±4.2),(9.4±2.0)mmol/L,P<0.01]。②造模后各组大鼠血清中一氧化氮含量及一氧化氮合酶活性的比较:与模型对照组比较,运动组、葛根素组一氧化氮含量及一氧化氮合酶活性均明显降低(P<0.01或0.05),运动 葛根素组降低的幅度尤为显著[(58.58±8.97),(30.80±14.80)μmol/L;(2.0±0.23),(0.92±0.13)μkat/L;P均<0.01]。③造模后各组大鼠肝脏组织中一氧化氮含量及一氧化氮合酶活性的比较:与模型对照组比较,运动组、葛根素组、运动 葛根素组一氧化氮合酶活性略有下降,但差异无显著性意义[(0.26±0.02),(0.23±0.03),(0.21±0.01),(0.19±0.03)μkat/L,P>0.05];运动组、葛根素组一氧化氮含量均明显降低[(4.21±0.83),(2.86±0.64),(3.39±0.86)μmol/L,P<0.05],运动 葛根素组降低至(1.75±0.31)μmol/L,差异尤为显著(P<0.01)。结论:有氧运动结合补充葛根素,能够有效降低糖尿病大鼠血清及脏肝中一氧化氮含量及一氧化氮合酶的活性。     

双环醇联合异甘草酸镁治疗药物诱导自身免疫性肝炎效果观察

目的探讨双环醇联合异甘草酸镁治疗药物诱导自身免疫性肝炎的临床效果。方法药物诱导自身免疫性肝炎患者78例,根据治疗方法分为观察1组,观察2组和对照组各26例。对照组给予保肝等支持治疗;观察1组在对照组治疗基础上给予双环醇口服;观察2组在观察1组治疗基础上给予异甘草酸镁静脉滴注;3组疗程均为4周。比较3组治疗前、治疗2、4周时谷丙转氨酶(glutamate pyruvate transaminase,GPT)、谷草转氨酶(glutamicroxal(o)acetic transaminase,GOT)、球蛋白、碱性磷酸酶、总胆红素、透明质酸、Ⅲ型前胶原、层黏连蛋白、Ⅳ型胶原水平变化。结果治疗4周时观察1组、观察2组和对照组GPT[(95±43),(48±27),(163±65)u/L]、GOT[(82±34),(46±22),(92±56)u/L]、球蛋白[(34±19),(27±12),(42±27)g/L]、碱性磷酸酶[(123±42),(86±43),(176±48)u/L]、总胆红素[(36.6±25.4),(27.1±18.4),(63.2±28.7)μmol/L]、透明质酸[(175.4±68.5),(96.5±58.2),(186.2±96.6)μg/L]、Ⅲ型前胶原(143.4±52.6),(115.3±47.6),(167.6±89.5)μg/L]、层黏连蛋白[(128.3±68.1),(97.5±42.6),(134.6±72.5)μg/L]、Ⅳ型胶原[(103.3±46.7),(86.5±34.8),(133.5±47.2)μg/L]水平均低于治疗前[GPT(246±78),(262±81),(264±85)u/L;GOT(169±72),(173±67),(186±65)u/L;球蛋白(72±34),(76±37),(75±42)g/L;碱性磷酸酶(262±81),(259±92),(254±76)u/L;总胆红素(72.4±39.3),(74.5±40.1),(78.5±36.2)μmol/L;透明质酸(248.2±105.3),(256.3±107.4),(253.7±112.1)μg/L;Ⅲ型前胶原(239.6±84.7),(242.5±91.4),(236.4±86.7)μg/L、层黏连蛋白(193.6±79.4),(186.2±81.7),(187.5±85.2)μg/L;Ⅳ型胶原(197.3±78.1),(210.5±57.6),(205.4±67.2)μg/L](P0.05);且观察2组治疗4周后各指标水平低于观察1组和对照组,观察1组低于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论药物诱导自身免疫性肝炎患者应用双环醇联合异甘草酸镁治疗可明显改善肝功能和肝纤维化指标。     

益舒软肝丸逆转肝硬化的机制

目的:探讨益舒软肝丸对肝硬化模型的逆转及其作用机制。方法:实验于2004-10/2006-03在三峡大学医学院天然药物实验室完成。①选取雄性Wistar大鼠48只,随机数字表法分为正常对照组8只、模型对照组12只、益舒软肝丸0.4g/kg组10只、益舒软肝丸0.8g/kg组9只、益舒软肝丸1.6g/kg组9只。益舒软肝丸由蛴螬、虻虫、冬虫夏草、水蛭、鳖甲、桃仁等中药组成,宜昌县人民医院药剂科制备,实验中用双蒸水配成混悬液。②除正常对照组外,其余各组均采用CCL4复合因素法建立肝硬化模型。造模后,益舒软肝丸0.4,0.8,1.6g/kg组分别给予对应剂量的益舒软肝丸混悬液灌胃,1次/d,连续灌胃12周;并持续背部皮下注射CCL40.3mL/100g,1次/周,共12周。正常对照组、模型对照组同时间点灌服生理盐水1mL/只。③第12周末禁食12h后,大鼠麻醉后开胸,心脏采血,分离血清,-20℃保存。取左中叶相同部位制作病理石蜡切片,苏木精-伊红染色观察组织形态学变化,苦味酸酸性品红染色观察纤维增生程度,免疫组织化学检测转化生长因子β1和基质金属蛋白酶抑制因子1阳性表达总面积。余下肝脏置于塑料薄膜袋,迅速封口置于-80℃冰箱,制备肝组织匀浆,检测羟脯胺酸、丙二醛含量及超氧化物歧化酶水平。结果:正常对照组8只大鼠无死亡。造模后,模型对照组死亡4只,益舒软肝丸0.4,0.8,1.6g/kg组各死亡3,2,2只。①肝功能检测结果:与模型对照组比较,益舒软肝丸0.4,0.8,1.6g/kg组均可明显降低血清丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶水平[(3.66±1.00),(2.72±0.39),(2.98±0.84),(2.82±0.23)nkat/L;(11.00±2.18),(7.80±1.32),(9.56±3.09),(9.92±2.48)nkat/L;P<0.01或0.05],提高胆碱酯酶水平[(16.65±1.88),(16.94±3.37),(18.13±2.68),(20.31±4.11)nkat/L;P<0.05],白蛋白/球蛋白水平无明显变化(P>0.05)。②肝纤维化相关指标检测结果:与模型对照组比较,益舒软肝丸0.4,0.8,1.6g/kg组均可明显降低透明质酸、层粘连蛋白、PⅢNP胶原水平[(132.67±40.31),(99.67±30.79),(96.63±36.04),(92.30±27.95)μg/L;(72.40±13.36),(60.87±12.30),(56.87±17.41),(59.63±6.29)μg/L;(41.34±6.40),(35.87±5.84),(31.57±11.13),(39.01±8.23)μg/L;P均<0.05]。③肝组织生化指标检测结果:与模型对照组比较,益舒软肝丸0.4,0.8,1.6g/kg组均可明显降低羟脯胺酸、丙二醛含量[(205.4±22.98),(162.25±17.37),(161.62±34.32),(152.09±24.60)pg/L;(16.56±3.87),(12.21±3.80),(11.87±3.14),(11.85±1.34)μg/L;P<0.01或0.05],超氧化物歧化酶水平无明显变化(P>0.05)。④肝组织形态学观察结果:正常对照组肝小叶结构清晰完整,未见纤维组织异常增生。模型对照组肝小叶结构破坏,肝细胞索排列紊乱,纤维组织大量异常增生,形成假小叶。益舒软肝丸各剂量组肝小叶结构基本完整,有少量胶原纤维增生,未见假小叶结构。⑤肝组织免疫组化半定量分析结果:与模型对照组比较,益舒软肝丸0.4,0.8,1.6g/kg组转化生长因子β1和基质金属蛋白酶抑制因子1阳性总面积均有不同程度减少[(6.33±1.16),(6.28±0.88),(5.11±0.92),(5.83±0.96)μm2;(624.82±237.11),(282.48±139.28),(80.75±28.28),(246.29±155.65)μm2;P<0.01或0.05]。结论:益舒软肝丸具有明显的抗肝硬化作用,其作用机制可能与以下因素有关:①改善肝功能。②降低丙二醛水平,减轻肝细胞损伤,逆转肝硬化病理形态结构。③下调肝硬化组织转化生长因子β1和基质金属蛋白酶抑制因子1的表达,抑制细胞外基质的合成和胶原增生、沉积。     

果糖二磷酸镁对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的:观察1,6二磷酸果糖和镁离子的合成药果糖二磷酸镁对心肌缺血再灌注损伤过程中血清中肌酸激酶,乳酸脱氢酶,Mg2 浓度,心肌组织内超氧化物歧化酶,丙二醛浓度的影响,并与单用1,6二磷酸果糖或硫酸镁相比较。方法:实验于2004-10/2005-05在锦州医学院药理学实验室进行,取50只雄性SD大鼠随机分为5组,每组10只:①模型组:采用左冠状动脉下穿线,拉紧丝线引起心肌缺血,放松丝线给予再灌注的方法建立心肌缺血再灌注损伤动物模型,结扎冠脉左室前降支30min时经大鼠尾静脉注入生理盐水1mL,10min给药完毕,再灌注40min。②果糖二磷酸镁组:造模及给药时间和方法同模型组,注入药物为1mL果糖二磷酸镁(100mg/kg)。③1,6二磷酸果糖组:同前造模给药,药物为1mL1,6二磷酸果糖(106mg/kg)。④硫酸镁组:同前造模给药,药物为硫酸镁(30mg/kg)。⑤假手术组:完成模型全部操作,只穿线不结扎。各组大鼠在再灌注40min后,均经颈动脉取血采用比色法测定肌酸激酶,乳酸脱氢酶活力及Mg2 浓度;于实验结束后立即取左室游离心肌组织0.5g,采用羟胺法测定超氧化物歧化酶活力,采用硫代巴比妥钠比色法测定丙二醛含量。结果:50只大鼠进入结果分析。①血清中肌酸激酶活力:果糖二磷酸镁组、1,6二磷酸果糖组和硫酸镁组均低于模型组[(84.40±19.15),(86.90±5.68),(90.86±9.13),(105.43±3.95)μkat/L,P<0.05]。②血清乳酸脱氢酶活力:果糖二磷酸镁组、1,6二磷酸果糖组和硫酸镁组均低于模型组[(47.57±19.58),(50.94±3.86),(50.45±5.37),(68.59±11.74)μkat/L,P<0.01]。③血清中Mg2 浓度:果糖二磷酸镁组和硫酸镁组均高于模型组[(0.92±0.06),(0.91±0.04),(0.75±0.03)mmol/L,P<0.01]。④心肌组织超氧化物歧化酶活力:果糖二磷酸镁组和1,6二磷酸果糖组均高于模型组[(1.52±0.41),(1.44±0.39),(1.15±0.28)μkat/g,P<0.05]。⑤心肌组织内丙二醛含量:果糖二磷酸镁组和1,6二磷酸果糖组显著低于模型组[(17.08±23.12),(21.60±5.58),(50.13±18.21)nmol/g,P<0.01]。结论:果糖二磷酸镁对缺血再灌注心肌损伤具有保护作用,很可能是通过1,6二磷酸果糖和硫酸镁协同作用而产生,其效果优于单用1,6二磷酸果糖或硫酸镁。其保护作用机制与增加血清中Mg2 浓度和组织内超氧化物歧化酶含量,减少血清中肌酸激酶,乳酸脱氢酶活力和组织内丙二醛含量及抗脂质过氧化有关。