利用PCR方法直接从7H12B培养基中鉴定结核分支杆菌的探讨

以ＰＣＲ方法直接从７Ｈ１２Ｂ液体培养基中鉴别结核分支杆菌和非结核分支杆菌，与ＮＡＰ抑制试验对比，具有准确、快速，可应用于临床。     

利用PCR方法直接从7H12B培养基中鉴定结核分支杆菌的探讨

以ＰＣＲ方法直接从７Ｈ１２Ｂ液体培养基中鉴别结核分支杆菌和非结核分支杆菌，与ＮＡＰ抑制试验对比，具有准确、快速，可应用于临床。     

对硝基苯甲酸（PNB）替代BACTEC460NAP进行分支杆菌分群的初步研究

用ＰＮＢ替代ＢＡＣＴＥＣ系统中ＮＡＰ药物，将ＰＮＢ加入７Ｈ１２Ｂ培基内，鉴定结核菌与非结核分支杆菌两大菌群。实验１０株标准菌株和１１５株临床菌株；结果：人、牛型标准菌株在ＰＮＢ１２Ｂ１０μｇ／ｍｌ生长抑制。８株非结核标准菌株抑菌浓度ＰＮＢ〉５００μｇ／ｍｌ。以ＰＮＢ１００μｇ／ｍｌ１２Ｂ为界限，１１５株临床菌株ＰＮＢ与ＮＡＰ方法平行对照实验，鉴定结果：结核菌群符合率９７．８％，非结核菌群符合率９５     

气相色谱鉴定分支杆菌对比实验

采用毛细管柱色相色谱（ＧＣ）检测分支杆菌细胞脂肪酸（ＦＡ）的方法，通过制备２６种参考菌株ＧＣ图谱（原冻干菌株及其移种改良罗氏培养基生长３￣４周菌株）对临床分离的５４株非结核分支杆菌以ＧＣ法与传统生物学鉴定法进行对比，两者符合率达９４％；观察了结核分支杆菌和牛分支杆菌临床分离株ＧＣ图谱变化与耐药性的关系。认为ＧＣ法鉴定临床分离分支杆菌目前采取同时观察细菌生长速度、产色情况以及在对硝基苯甲酸（ＰＮＢ）     

利用7H12B液体培养基快速鉴别人型和牛型结核分支杆菌

应用含ＴＣＨ１μｇ／ｍｌ的７Ｈ１２Ｂ培养基检测人型和牛型参比株各１株，１３种常见非结核分支杆菌参比株各１株，临床标本检出的１５６株结核分支杆菌，１２株非结核分支杆菌。结果与含ＴＣＨ５μｇ／ｍｌ的罗琼氏培养基鉴定结果完全一致，且所需时间明显缩短，仅需２～４天。     

利用7H12B液体培养基快速鉴别人型和牛型结核分支杆菌

应用含ＴＣＨ１μｇ／ｍｌ的７Ｈ１２Ｂ培养基检测人型和牛型参比株各１株，１３种常见非结核分支杆菌参比杆各１株，临床示本检出的１５６株结核分支杆菌，１２株非结核分支杆菌。结果与含ＴＣＨ５μｇｍｌ罗－琼氏培养基鉴定结果完全一致，且所需时间明显综合，仅需２－４天。     

分支杆菌分子菌种鉴定方法的研究进展

由于全球范围内肺结核及非结核分支杆菌病的发病呈逐年上升趋势,准确而快速的菌种鉴定技术对结核病的诊断和鉴别诊断及有效化疗都有极其重要的意义。目前国内外采用传统的分支杆菌菌种鉴定方法需依据细菌生长速度、色素产生及多种生化试验等结果综合分析才能获得结果;而ＢＡＣＴＥＣＴＢ460、ＴＢ960培养基系统虽快速(2～6ｄ),但只能初步鉴定结核分支杆菌复合群和非结核分支杆菌,不能将细菌鉴定至种。近年来建立的色谱方法虽能达到部分菌种鉴定的目的,但需特殊仪器,临床尚未普遍开展。目前国内外研究者都致力于使分支杆菌菌种鉴定从细胞表型水平进入分子基因水平。现对分支杆菌分子菌种鉴定方法的研究进展综述如下。     

分支杆菌鉴定方法的比较研究

比较了微菌落法、多重聚合酶链反应 (ＰＣＲ)法和传统法用于分支杆菌临床分离物菌种鉴定的效果 ,现报告如下。材料与方法 :试验菌株 :(1)标准菌株 :结核分支杆菌Ｈ37ＲＶ、牛分支杆菌、鸟分支杆菌、胞内分支杆菌、堪萨斯分支杆菌、瘰疬分支杆菌、偶然分支杆菌和耻垢分支杆菌标准株 ,均购自北京结核病胸部肿瘤研究所。 (2 )临床分离株 :来自我院结核病住院患者的痰、胸液和脑脊液。传统分型鉴定试验 :(1)培养鉴定试验 :按常规制备对硝基苯甲酸 (ＰＮＢ)和噻吩 2 羧酸肼 (ＴＣＨ)培养基 ,取试验菌株菌悬液 (10 -2 /ｍｌ) 0 1ｍｌ接种 ,37℃…     

中科院上海植物生理研究所研制成功分支杆菌干燥培养基

分支杆菌干燥培养基是一种新型固体全合成琼脂培养基,主要用于临床肺结核、淋巴结结核、泌尿道结核、骨关节结核、胸膜结核等疾病的微生物学诊断,是一种能替代进口MIDDLEBROOK7H系列培养基的新产品,经全国及上海等10余家大医院反复验证上万例标本对比,总体性能指标     

鉴别人型及牛型结核分支杆菌的方法比较

本文对４４７株结核分支杆菌，用ＴＣＨ鉴别培养基、硝酸还原和烟酸试验３种方法进行人型及牛型结核分支杆菌的鉴别比较，３种方法的鉴别结果有明显统计学差异，（Ｐ＜０．０５～０．０１）。提示应用一种方法进行鉴别的准确性不可靠。因此，鉴别时，可使用ＴＣＨ鉴别培养基和烟酸试验两种方法，当结果不一致时应补作硝酸还原试验。这样可提高鉴别的可靠性。     

分支杆菌快速分离培养技术研究进展

近１０余年来,分支杆菌感染尤其是结核病的发生率在发达国家呈上升趋势,且仍然是发展中国家严重的公共卫生问题。分支杆菌诊断技术的发展远远不能满足临床实验室的需要。传统培养技术如Ｌｏｗｅｎｓｔｅｉｎ－Ｊｅｎｓｏｎ（Ｌ－Ｊ）和Ｍｉｄ－ｄｌｅｂｒｏｏｋ琼脂固体培养基虽可直接获取培养结果,但其敏感性不高且耗时较长。分子生物学方法用于临床诊断分支杆菌仍在探索和研究中。近２０年发展起来的半自动放射性ＢＡＣＴＥＣ４６０快速检测结核分支杆菌系统可在短时间内分离培养出分支杆菌,但其操作复杂费时,价格较为昂贵,且存在放…     

新疆人群非结核分支杆菌感染调查

新疆人群非结核分支杆菌感染调查徐静文新疆维吾尔自治区结核病防治研究所８３０００１本自治区在非结核分支杆菌感染率与非结核分支杆菌占各型分支杆菌比例关系方面存在自己的特点，特予报道并与其它省市比较。方法按１９９０年全国结核病＂流调＂有关ＰＰＤ－Ｂ及菌种鉴...     

90株非结核分支杆菌耐药情况的分析

目的 观察分析我院１９８６￣１９９７年非结核分支杆菌的耐药情况。方法 对９０株非结核分支杆菌用传统的方法进行菌种鉴定及药敏试验。结果 非结核分支杆菌对ＰＡＳ呈高度的耐药性，对ＳＭ、ＩＮＨ、ＲＦＰ、ＥＢＭ等耐药性也较高，对ＫＭ、ＴＨ较敏感。堪萨斯分支杆菌对抗结核药物较敏感，鸟，胞内、次要、土地、偶然等分支杆菌对抗经物耐药的较多。另外，非结核分支杆菌除对ＰＡＳ的低浓度与高浓度的耐药率较一致外，对其它六     

抗结核药物诱导结核分支杆菌形成L型及其特性的观察

目的 观察常用抗结核药物对结核分支杆菌L型的诱导作用以及结核分支菌L型在非高渗透压培养基内的某些特性及其抗菌药物敏感性,探讨结核分支菌L型形成的机制及其在结核病的发生、诊断及治疗上的意义。方法 将结核分支杆菌接种于含有利福平、异烟肼、乙胺丁醇的非高渗透压培养基内,逐日在显微镜下观察结构分支杆菌L型的形成情况。L型形成后将培养物过滤,获得结核分支杆菌L型纯培养物并对其形态、培养、抗菌药物敏感性、结核分支杆菌特异性基因等进行观察。结果 结核分支杆菌在常规药敏试验浓度的利福平、异烟肼、乙胺丁醇的作用下均可形成L型。结核分支杆菌L型对这些抗结核药物不再敏感,但对链霉素、红霉素、氧氟沙星、诺氟沙星等抗菌药物均敏感。结核分支杆菌L型在非高渗透压培养基内呈圆球或不规则形态的细胞,单个、成双或链状排列,沉于培养基底部生长,不粘附瓶壁,不运动,抗酸染色阴性,革兰染色阴性或阳性,保留了结核分支杆菌特异性PCR引物基因序列。结论 利福平、异烟肼、乙胺丁醇虽然能够杀灭结核分支杆菌细菌型,但也能够诱导其形成L型而造成这些抗结核药物对结核治疗无效。非高渗培养基传代培养的结核分支杆菌L型保留了与其亲代细菌型一致的PCR引物基因序列,以致可用结核分支杆菌特异性PCR鉴定。根据结核分支杆菌L型的药物敏感性特点,建议在使用抗结核药物治疗中须注意其L型的形成和联合使用结核分支杆菌L型敏感的抗菌药物进行治疗。     

鸟分支杆菌pncB基因的克隆

在分支杆菌菌型鉴定中,常用尼克酸试验鉴定结核分支杆菌与牛分支杆菌及其它非结核分支杆菌[1]。结核分支杆菌能分泌大量的尼克酸至培养基中,而其它分支杆菌则不能[2]。据报道,这是由于结核分支杆菌具有很强的尼克酸二核苷酸(ＮＡＤ)糖水解酶及脱酰胺酶的作用,能将ＮＡＤ迅速分解为尼克酸(ＮＡ),但由于它的尼克酸磷酸核糖转移酶很弱,不能将尼克酸重新合成ＮＡＤ参加循环,而将尼克酸释放到培养基中。为了更深入地了解尼克酸磷酸核糖转移酶的作用,我们筛选了非结核分支杆菌中的鸟分支杆菌噬菌体基因文库,克隆到了编码尼克酸磷酸核糖转移酶的基…     

PCR—SSCP方法用于痰标本中结核分支杆菌rpoB基因突变检测

本文用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法直接检测痰标本中结核分支杆菌ｒｐｏ基在变，评价此方法用于结核分支杆菌利福平耐性试验的意义，以期建立一种直接检测分支杆菌耐利福平的快速方法。本文用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法分析了３０例结核病人和２０例非结核性肺部疾病病人痰标本。３０份肺结核病人的痰用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测痰中结核分支杆菌ｒｐｏＢ基因突变：２１份痰ＰＣＲ扩增阳性，其中１３份ＳＳＣＰ图谱与参考株Ｈ３７ＲｖＳＳＣＰ图谱有     

肺结核和非结核分支杆菌肺病的结明、PPD试验比较

目的探讨结明与PPD试验在肺结核和非结核分支杆菌肺病诊断及鉴别诊断中的意义。方法比较肺结核和非结核分支杆菌肺病病例的结明试验与PPD试验。结果两组病例PPD试验硬结直径差异无显著性(P>0.05),二者阳性率差异也无显著性(P>0.05)。结论结明试验与PPD试验阳性对诊断肺结核和非结核分支杆菌肺病均有意义,但对鉴别诊断无帮助,鉴别二者有赖于细菌的培养及菌型鉴定,或者是分子生物学技术。     

关于延长非结核分支杆菌菌种鉴定生化反应试剂保存时间的探讨

近年来,非结核分支杆菌引起感染的报道甚多,然而非结核分支杆菌肺病在临床症状及Ｘ线表现与结核分支杆菌极其相似,难以区别,只有通过实验室诊断进行鉴别。另外,由于非结核分支杆菌菌种的不同,临床上治疗方案也各有不同^[1],因此需要及早对其菌种作出鉴定,但配制一批鉴定非结核分支杆菌菌种鉴定的生化反应试剂比较麻烦,而且试剂的保存时间较短,每次都要浪费很多剩余试剂。由于以上原因,一般我们都将初步确定为非结核分支杆菌的菌种保存起来,积累到一定数量,再进行鉴定,使非结核分支杆菌菌种鉴定结果的报告时间较长,延误病人治疗。     

游泳池肉芽肿皮损中分离出海分支杆菌的报告

目的 报告一例从游泳池肉芽肿患者皮肤组织标本中分离出一株海分支杆菌。方法 标本的分离培养采用碱处理后接种酸Ｌ－Ｊ培基，置２８℃和３７℃两种条件下培养；药物敏感性测定采用绝对浓度法；菌各鉴定采用形态学观察、鉴别培基（ＰＮＢ、ＴＣＨ、５％ＮａＣｌ、葡萄糖琼脂、麦康盖琼脂）的鉴别及细胞生物化学反应的方法进行鉴定。结果 该菌株在２８℃中的生长明显优于３７℃培养；并对ＩＮＨ、ＳＭ耐药，对ＲＦＰ、ＥＭ敏感；经     

抗结核药物对非结核分枝杆菌菌种鉴定的试验

报告２２种非结核分枝杆菌典型株对１２种抗结核药物的敏感性试验结果,２２种非结核分枝杆菌在食ＴＨ１３２１,ＴＢ１,ＰＡＳ,ＩＮＨ培养其呈现不同程度耐药性,胞内分枝杆菌等１３种非结核分枝杆菌在含ＳＭ,ＥＭＢ,ＲＦＰ培养基呈现不同程度耐药性,鸟分枝杆菌等６种非结核分支杆菌在含ＮＦＬＸ,ＯＦＬＸ,ＣＦＬＸ培养基呈现不同程度耐药性,海分枝杆菌等３种非结核分枝杆菌在含ＣＰＭ培养其呈现不同程度耐药性,龟分枝杆菌