麝香保心丸对心力衰竭大鼠肾脏α_1及β肾上腺素受体各亚型表达的影响

目的：探讨麝香保心丸对心力衰竭大鼠肾脏α1-肾上腺素受体（α1-adrenergic receptorα1-AR）和β-肾上腺素受体（β-adrenergic receptorβ-AR）各亚型表达水平的影响。方法：选择雄性Wistar大鼠80只,随机分为正常对照组（10只）、假手术组（10只）,其余60只制作心肌梗死后心力衰竭模型,模型成功35只并将其随机分为心力衰竭组（9只）、阳性药物对照组（8只）、麝香保心丸低剂量组（9只）和麝香保心丸高剂量组（9只）。取大鼠肾脏皮质,采用Western Blot分别测定各组大鼠α1-AR和β-AR各亚型蛋白表达水平。结果：假手术组与正常对照组α1A-AR和β1-AR表达水平比较,差异无统计学意义（P〉0.05）;与假手术组比较,心力衰竭组大鼠α1A-AR、β1-AR表达水平明显下调,差异有统计学意义（P〈0.05）;与心力衰竭组比较,阳性药物对照组、低剂量组、高剂量组大鼠α1A-AR、β1-AR表达水平明显上调,差异有统计学意义（P〈0.05）;与低剂量组比较,阳性药物对照组、高剂量组大鼠α1A-AR表达上调更为显著（P〈0.05）。各组大鼠α1B-AR、α1D-AR和β2-AR表达水平比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：麝香保心丸缓解了心力衰竭大鼠肾脏α1-AR和β-AR各亚型表达水平的下调,对恢复肾脏功能、改善心力衰竭起到了有益的作用。同时,与小剂量麝香保心丸相比,高剂量疗效更为显著。     

倍他乐克对非心脏手术患者围术期外周血淋巴细胞β-AR基因表达的影响

目的评价倍他乐克对非心脏手术患者围术期外周血淋巴细胞（PBL）中13肾上腺素受体（β—AR）基因表达的影响方法34例择期非心脏手术的有明确冠心病或高危因素患者，随机分为2组，A组为对照组（P=18），B组为倍他乐克组（P=16），从术前2小时一直到术后30天，口服或静注倍他乐克。采集术前一日、术后15天、术后30天的外周血淋巴细胞；应用荧光实时定量PCR检测淋巴细胞中β1-AR与β2-AR的mRNA表达水平；分析倍他乐克不同时间对淋巴细胞中β1-AR和β2-AR的mRNA表达的影响。结果A组PBL中β1-ARmRNA在术后15天，术后30天较术前均明显增加（7．04±3．37vs2．66±2．36P〈0．01；8．94±4．75vs2．66±2．36P〈0．01）；而A组的β2-ARmRNA及B组的β1-ARmRNA、β2-ARmRNA在手术前后没有显著变化（P〉0．05）结论围术期倍他乐克的应用稳定了非心脏手术患者围术期外周血淋巴细胞中β-ARmRNA的表达     

大黄素对肝纤维化大鼠血小板衍生生长因子B、转化生长因子β1表达的影响

目的观察不同剂量大黄素对肝纤维化大鼠血小板衍生生长因子B（PDCF-B）、转化生长因子β1（TGF-β1）表达的影响,以初步探讨其可能的抗肝纤维化的作用机制。方法 50只SD大鼠随机均分为5组,每组各10只。4组大鼠皮下注射40%四氯化碳制备肝纤维化模型,且其中3组大鼠同时分别以小、中和大剂量大黄素（20、40、80 mg/kg体重）进行干预。正常对照组大鼠不进行任何处理。采用免疫组化染色法检测各组肝组织PDGF-B、TGF-β1的表达,计算阳性细胞的积分光密度（IOD）值并进行比较。结果免疫组化染色结果显示,正常对照组大鼠肝组织PDGF-B、TGF-β1表达很少,IOD值分别为4.24±1.36、8.36±2.31,肝纤维组大鼠PDGF-B、TGF-β1表达明显增加,IOD值分别为81.25±6.45、64.98±3.98,均高于正常对照组大鼠,且差异均有统计学意义（t=4.97、13.94,P〈0.01）,阳性染色主要分布于肝组织汇管区及小叶间纤维组织中;小、中、大剂量大黄素治疗组大鼠PDGF-B、TGF-β1表达逐渐降低（PDGF-B：60.51±3 96、42.15±2.85、17.46±2.60;TGF-β1：44.70±3.24、26.45±2.60、9.51±1.99）,均低于肝纤维化组大鼠,且差异均有统计学意义（PDGF-B：t=4.46,P〈0.05;t=7.18,P〈0.01;t=5.33,P〈0.01;TGF-β1：t=5.26,P〈0.05;t=4.24,P〈0.01;t=6.10,P〈0.01）。结论大黄素可能通过抑制PDCF-B、TGF-β1的表达发挥抗肝纤维化的作用。     

肝纤维化过程中去甲肾上腺素各受体亚型表达的动态变化

目的 研究肝纤维化过程中去甲肾上腺素各受体亚型表达的动态变化.方法 胆总管结扎法建立大鼠肝纤维化模型,HE,Masson染色观察肝脏病理形态学变化;免疫组织化学法检测肝星状细胞活化指标α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况;Western blot和实时荧光定量PCR检测α-肾上腺素受体(AR)、β1-AR、β2-AR蛋白和mRNA的表达水平.对数据进行单因素方差分析,LSD检验及相关分析.结果 HE及Masson三色染色显示:随着造模时间延长肝纤维化程度逐渐加重.α-SMA免疫组织化学染色显示:随着肝纤维化的发展,大鼠肝组织中α-SMA阳性细胞明显增多,造模1、2、3,4周时分别为10.58%±1.75%,24.14%±2.02%、29.74%±2.59%,34.28%±2.01%,而假手术组为4.12%±1.51%,P＜0.01.Western blot检测结果显示,造模1～4周大鼠肝组织α-AR、β1-AR,β2-AR蛋白表达量均明显升高(P＜0.05).实时荧光定量PCR结果证实,随着肝纤维化的发展,α-AR、β1-AR、β2-AR mRNA表达水平均逐渐上升(P＜0.01).α-SMA与α-AR、β1-AR、β2-AR蛋白表达水平的相关分析显示,α-SMA与α-AR、β1-AR及β2-AR呈正相关,r值分别为0.564,0.753和0.606.结论 胆总管结扎法成功建立胆汁淤积性大鼠肝纤维化模型,在肝纤维化形成过程中肝星状细胞表达α-SMA增加.随着肝纤维化的进展,α-AR、β1-AR、β2-AR蛋白及mRNA水平明显增加,且与α-SMA呈正相关.     

去甲肾上腺素各受体亚型在非酒精性脂肪肝大鼠肝组织的表达

目的:研究去甲肾上腺素各受体亚型在非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠肝组织的表达情况.方法:应用高脂饮食建立大鼠NAFLD模型HE染色观察肝脏病理形态学变化,Western blot和Real-time Q-PCR检测α-AR、β_1-AR、β_2-AR蛋白和m RNA的表达.结果:HE染色显示:大鼠NAFLD模型成功建立,随着造模时间延长肝脏脂肪变程度逐渐加重.Western blot检测结果显示,造模2-12 wk大鼠肝组织α-肾上腺素能受体(α-adrenergic receptor,α-AR)、β_1-AR、β_2-AR蛋白表达量均明显升高(P0.05).Real-time Q-PCR结果证实,随着NAFLD病的发展,α-AR、β_1-AR、β_2-AR mR NA表达均逐渐上调(P0.01).结论:高脂饮食法成功建立大鼠NAFLD模型,随着肝病进展,α-AR、β_1-AR、β_2-AR蛋白及m RNA含量明显增加.     

老年心力衰竭大鼠心脏和肺β_3肾上腺素能受体的实验研究

目的探讨老年心力衰竭(心衰)模型大鼠心脏及肺β3肾上腺素能受体(β3-AR)变化及相互关系。方法选择雄性老年Wistar大鼠48只,应用主动脉结扎术制备心衰模型。大鼠随机分为假手术组和心衰组,每组24只,每组术后5、7、9、11周每个时间点各6只。测定2组大鼠血流动力学、病理、心肌及肺组织β3-AR mRNA表达。结果与假手术组比较,心衰组术后9、11周心率、左心室收缩末压、左心室压力最大上升速率显著降低,左心室压力最大下降速率显著增高,5、7、9、11周左心室舒张末压显著增高,差异有统计学意义(P0.01)。心衰组术后7周出现肺水肿,术后9周出现心肌核坏死。心衰组术后5、7、9、11周每个时间点肺组织β3-AR mRNA表达较2周前均明显减低(P0.05)。心衰组术后9、11周心肌组织β3-AR mRNA表达较假手术组明显升高(1.21±0.26 vs 0.98±0.22,1.26±0.23 vs 1.05±0.24,P0.01)。结论心衰时,肺组织β3-AR mRNA表达下降,心肌组织表达升高,且肺的变化先于心肌组织。     

人工发酵虫草菌丝体干粉对糖尿病大鼠肾脏组织色素上皮衍生因子和基质金属蛋白酶-2表达的影响

目的 观察人工发酵虫草菌丝体干粉对糖尿病大鼠肾组织中色素上皮衍生因子（PEDF）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和转化生长因子-β1（TGF-β1）表达的影响.方法 依照随机区组设计将45只体质量为180～220 g的8周龄雄性SD大鼠随机分为3组：正常对照组（A组,n=15）、糖尿病对照组（B组,n=15）、人工发酵虫草菌丝体干粉干预组（C组,n=15）.B组和C组大鼠腹腔注射55 μg/g链脲佐菌素制作糖尿病动物模型.造模成功后第3天,C组给予4 μg·g-1·d-1人工发酵虫草菌丝体干粉定时灌胃,A组、B组以等体积生理盐水灌胃.实验12周末,观察比较3组肾脏指数（KI）、血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、24 h尿量、24 h尿白蛋白排泄量（UAE）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）.免疫组化方法分析比较3组PEDF、MMP-2和TGF-β1在肾组织中的表达,实时定量-聚合酶链反应（RT-PCR）分析比较3组PEDF mRNA的表达情况.两组间比较采用t检验,多组间比较采用方差分析.结果 B、C组大鼠KI、BUN、SCr、UAE、TC、TG均高于A组（均P〈0.01）,C组均较B组降低（均P〈0.01）.免疫组化显示,B组和C组肾脏PEDF（1.53±0.12、2.60±0.15）、MMP-2（1.8±0.5、3.3±0.4）表达均低于A组（3.96±0.14、4.3±0.6）（均P〈0.01）,TGF-β1（4.60±0.15、2.60±0.09）表达均高于A组（1.57±0.09）（均P〈0.01）,而C组PEDF、MMP-2表达高于B组（P〈0.01）,TGF-β1表达低于B组（P〈0.01）.RT-PCR分析显示B、C组肾脏组织中PEDF mRNA表达量为0.3±0.1和0.8±0.2,显著低于A组（1.2±0.3）（均P〈0.01）,而C组高于B组（P〈0.01）.结论 肾脏组织中PEDF、MMP-2和TGF-β1表达的改变可能参与了糖尿病肾病的发生.人工发酵虫草菌丝体干粉可改善肾功能、调节血脂,还可通过调节PEDF、MMP-2及TGF-β1在肾脏的表达发挥肾脏保护作用.     

ErbB2受体在糖尿病心肌病大鼠中表达和磷酸化的改变

目的探讨糖尿病心肌病大鼠心肌中ErbB2受体表达和磷酸化的改变。方法选取8周龄雄性SD大鼠36只。按电脑随机数法分为：4周糖尿病组、4周对照组、12周糖尿病组、12周对照组。腹腔注射链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）诱导糖尿病模型。分别在诱导糖尿病后第4、12周测定大鼠心脏质量,计算心脏质量/体质量,采用心脏超声评估大鼠心功能;采用Masson染色方法观察大鼠心肌间质纤维化程度并计算心肌胶原容积分数（collagen volume fraction,CVF）;采用实时聚合酶链反应（PCR）方法检测大鼠心肌组织ErbB2受体mRNA的表达水平;采用蛋白免疫印记法（Western-blot）检测大鼠心肌组织ErbB2受体蛋白磷酸化水平。结果与同期对照组相比,第4,12周糖尿病组心脏质量/体质量均明显增高,差异有统计学意义[（3.41±0.12）mg/g vs.（2.32±0.22）mg/g,P〈0.01;（3.72±0.38）mg/g vs.（2.39±0.0.26）mg/g,P〈0.01]。第4,12周糖尿病组心肌CVF均明显高于同期对照组,差异有统计学意义[4.48%±0.21%vs.2.79%±0.36%,P〈0.01;15.29%±0.67%vs.3.01%±0.13%,P〈0.01]。4周糖尿病组的左心室收缩末内径、左心室射血分数、心肌组织ErbB2受体mRNA表达和蛋白磷酸化水平与4周对照组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。12周糖尿病组左心室收缩末内径大于12周对照组,差异有统计学意义[（3.570±0.232）mm vs.（3.060±0.376）mm,P〈0.05]。12周糖尿病组左心室射血分数小于12周对照组,差异有统计学意义[72.5%±3.81%vs.82.6%±2.97%,P〈0.01]。与12周对照组比较,12周糖尿病组心肌组织ErbB2受体mRNA表达显著减少,差异有统计学意义（0.73±0.22vs.1.05±0.33,P〈0.01],ErbB2受体蛋白磷酸化水平也显著减少（0.87±0.01vs.0.95±0.02,P〈0.01）。结论糖尿病大鼠心肌组织中ErbB2受体mRNA表达和蛋白磷酸化水平的下调参与了糖尿病心肌病的发展。     

益气温阳活血方对慢性心力衰竭心室重塑大鼠β3-肾上腺素能受体、血清Ⅰ型前胶原羧基端肽和Ⅲ型前胶原氨基端肽的影响

目的探讨益气温阳活血方对慢性心力衰竭心室重塑大鼠β3-肾上腺素能受体(β3-AR)、血清Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)和Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNP)的影响。方法通过异丙肾上腺素(ISO)诱导慢性心力衰竭动物模型。计算左、右心室心肌的心脏指数(LVMI、RVMI),应用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清PⅠCP和PⅢNP含量,以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法以及Western印迹法检测β3-AR mRNA及蛋白质表达水平。结果与正常组比较,模型组LVMI〔(2.987±0.318 vs 2.350±0.468)mg/g〕、血清PⅠCP〔(16.357±3.650 vs 12.843±3.124)pg/ml〕、PⅢNP〔(64.984±17.477 vs 21.245±5.354)pg/ml〕含量及β3-AR mRNA(0.888±0.064 vs 0.743±0.086)与蛋白质(4.413±0.729vs 2.312±0.394)的表达水平明显升高(均P0.05);益气温阳活血方能够明显降低慢性心力衰竭大鼠LVMI,减少PⅠCP和PⅢNP含量,抑制β3-AR mRNA与蛋白质表达水平的升高,与正常组比较〔(2.557±0.379 vs 2.350±0.468)mg/g〕、血清PⅠCP〔(13.111±2.758 vs 12.843±3.124)pg/ml〕和PⅢNP〔(25.967±9.659 vs 21.245±5.354)pg/ml〕含量及β3-AR mRNA(0.781±0.067 vs 0.743±0.086)与蛋白质(2.484±0.642 vs 2.312±0.394),均无显著性差异(P0.05)。结论益气温阳活血方可能通过抑制β3-AR的表达减少PⅠCP和PⅢNP含量逆转心室重塑,改善心脏功能。     

老年大鼠脑内多巴胺转运体的表达

目的观察老年大鼠脑内多巴胺转运体（DAT）的表达变化。方法健康雄性Wistar大鼠3月龄、12月龄和24月龄组各20只;应用免疫组织化学和免疫印迹技术观察大鼠脑内多巴胺转运体在衰老过程中的表达。结果大鼠黑质、尾壳核多巴胺转运体免疫反应强度在24月龄组明显低于3月龄（P〈0.01）及12月龄组（P〈0.05）;24月龄组大鼠黑质、尾壳核DAT与β-actin免疫印迹条带相对吸光度的比值低于3月龄和12月龄组（P〈0.05,P〈0.01）。结论大鼠脑内多巴胺转运体的表达随衰老而减少。     

心肌梗塞后心力衰竭大鼠心脏β3肾上腺素受体的表达及卡维地洛的影响

目的：研究急性心肌梗塞后心力衰竭大鼠心肌中陆肾上腺素受体（β3-AR）表达的变化以及卡维地洛的干预作用。方法：SD大鼠行冠状动脉左前降支结扎术，4周后存活大鼠被随机分为心力衰竭（HF）对照组、美托洛尔（MET）组、卡维地洛（CAR）组3组，另有10只大鼠行假手术（Sham组）。MET组给予美托洛尔6mg／kg·d，CAR组给予卡维地洛3mg／kg·d。Sham组、HF组给予等量生理盐水灌胃。再次饲养8周后所有存活大鼠行血流动力学检查，逆转录聚合酶链式反应（RT—PCR）法测定心肌β3-ARmRNA表达。结果：与Sham组相比，HF组心率（HR）显著增快（P〈0．01），左室收缩压（LVSP）、左室内压最大上升和下降速率（±do／dr）显著降低（P〈0.01），左室舒张末期压（LVEDP）显著升高（P〈0.01）；与HF组相比，MET组、CAR组血流动力学参数得到显著改善（P〈0.01或〈0．05），且以CAR组更为明显。与Sham组相比，HF组β3—ARmRNA表达明显增高（P〈0.01）；与HF组相比。MET组β3-ARmRNA表达无显著变化（P〉0.05），而CAR组β3-ARmR—NA表达率显著下降（P〈0.01）。结论：心力衰竭大鼠心肌中β3-ARmRNA表达增加，卡维地洛能降低β3-ARmRNA的表达，从而改善心功能。     

TWEAK对新生大鼠心肌细胞增殖力和TGF-β1水平的影响

目的 肿瘤坏死因子样凋亡弱诱导因子（TWEAK）作为一种多功能的细胞因子,在细胞生长、分化、迁移、修复中起重要作用。然而,TWEAK对新生大鼠心肌细胞增殖的影响,及其与转化生长因子-β1（TGF-β1）的关系尚不明确。方法 通过培养新生SD大鼠的原代心肌细胞,应用TWEAK（20ng/ml）干预后培养24-48小时,应用CCK-8法检测心肌细胞增殖情况,以ELISA法检测细胞上清液的TGF-β1水平,同时分析二者相关性。结果 心肌细胞培养24小时,TWEAK干预组的心肌细胞CCK-8法检测OD值显著高于对照组（0.71±0.08vs.0.42±0.08,P=0.012）;培养48小时,TWEAK组的心肌细胞增殖力仍高于对照组（1.18±0.04 vs.0.92±0.03,P〈0.01）;同时,我们发现,TWEAK干预组,细胞上清液的TGF-β1水平显著高于对照组（24小时：133.1±4.3 vs.64.8±10.5 pg/ml,P〈0.01;48小时：187.3±7.9vs.66.8±8.4,P〈0.01）。通过Pearson相关性分析,我们还发现,CCK-8检测的细胞OD值与TGF-β1水平存在正相关,提示后者可能是TWEAK促进心肌细胞增殖的因素。结论 TWEAK可以促进新生大鼠心肌细胞的增殖,该机制可能与TGF-β1表达增高有关。     

大鼠血管钙化模型炎症因子及其受体的表达

目的观察血管钙化大鼠模型血清炎症因子[C反应蛋白（C-reactive protein,CRP）、白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）和单核细胞趋化蛋白-1（monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1）]表达的变化,以及大鼠主动脉组织中与血清炎症因子相对应的受体表达的变化,以探讨炎症因子在血管钙化中的作用和意义。方法实验动物按电脑随机数字表法分为正常组和钙化组,每组8只,钙化组采用维生素D3（300 000 U/kg1次肌肉注射）和尼古丁（25 mg/kg溶于花生油中,早、晚各灌胃1次）诱导大鼠血管钙化模型,用Von Kossa染色检测血管钙化程度,用钙离子测试盒、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）试剂盒测定大鼠主动脉钙含量和ALP活性,用放射免疫法检测大鼠血清炎症因子含量,用免疫组织化学法检测血管组织炎症因子受体表达。结果Von Kossa染色可见血管钙化模型大鼠主动脉有大量黑色颗粒沉淀。钙化组血管钙含量、ALP活性明显高于正常组,差异有统计学意义[分别为（0.42±0.05）μmol/g蛋白vs.（0.23±0.02）μmol/g蛋白,P〈0.01;（170.70±14.04）U/g蛋白vs.（110.30±14.05）U/g蛋白,P〈0.01]。钙化组血清炎症因子（CRP、IL-6和MCP-1）的表达比正常组明显上调,差异有统计学意义[分别为（2.20±0.14）mg/L vs.（1.69±0.24）mg/L,P〈0.01;（182.80±4.48）ng/L vs.（153.10±4.28）ng/L,P〈0.01;（83.07±2.37）ng/L vs.（70.52±2.12）ng/L,P〈0.01]。与正常组相比,血管钙化模型大鼠主动脉组织中的炎症因子相应受体（IL-6受体和MCP-1受体）的表达亦同步上调。结论钙化大鼠血清炎症因子和主动脉相应受体表达上调,提示炎症因子参与血管钙化的发生和发展过程。     

β-肾上腺素受体介导运动训练对老年大鼠心脏缺血预处理效应的影响

目的探讨运动训练能否恢复老年大鼠心脏缺血预处理(IP)效应及β-肾上腺素受体(β-AR)的可能作用机制。方法健康雄性SD成年或老年大鼠,实验分组:成年对照组、老年对照组和老年运动组,每组20只。老年运动组大鼠每天负重5%游泳,5次/w,持续90 d。离体心脏灌流行IP和(或)缺血再灌注(I/R),使用不同β-肾上腺素受体激动剂或阻滞剂,分离单个心肌细胞,测心肌细胞收缩幅度、存活率等。结果长期运动训练使老年鼠左心室重量增加显著,左心室/体重比显著增加(P<0.05)。IP显著改善I/R损伤的成年大鼠和长期运动训练老年鼠的心功能,左心室收缩压(LVSP)、±dp/dtmax升高,左心室舒张末压(LVEDP)显著降低;提高了成年鼠和运动训练老年鼠的心肌细胞收缩幅度,但不能提高老年对照鼠心肌细胞收缩幅度;提高了成年鼠和运动训练老年鼠的心肌细胞存活率,但不能提高老年对照鼠心肌细胞存活率。IP时阻断β1-AR,IP不能恢复三组大鼠的心肌细胞收缩幅度;阻断β2-AR,IP能够恢复成年鼠,却不是老年对照鼠和运动训练老年鼠的心肌细胞收缩幅度。结论 IP可部分恢复运动训练老年大鼠的I/R损伤的心功能,其可能机制不仅涉及β1-AR的作用,β2-AR发挥着更为特别的作用。     

抗β1肾上腺素受体细胞外第二环自身抗体长期存在对大鼠心肌细胞内游离钙的影响

目的观察抗β1肾上腺素受体细胞外第二环（β1-AR—EcⅡ）自身抗体长期存在对大鼠心肌细胞胞内游离钙水平的影响。方法分别将抗β1-AR—EC。抗体阴性和阳性大鼠血清中的IgG通过鼠尾静脉注入正常大鼠体内,建立对照及被动免疫模型。用ELISA方法定期监测血清中抗β1-AR—ECⅡ抗体水平;在免疫末期用BL-410生物信号记录分析系统测定大鼠在体心功能的变化;用激光共聚焦显微镜观察大鼠心肌细胞胞内游离钙水平。结果在免疫第40周时与对照组相比,免疫组±dp／dmax下降[（311．0±20．3）kPa／s比（465．0±24．0）kPa／s,P〈0．01],-dp／dt-下降[（-285．0±21．0）kPa／s比（-395．0±23．0）kPa／s,P〈0．01];LVDP升高[（6．44±0．36）kPa比（0．50±0．16）kPa,P〈0．01];心室肌细胞胞内游离钙水平显著升高（503．30±35．22比52．88±1．12,P〈0．01）。结论抗β1-AR-ECⅡ自身抗体长期存在可使大鼠心室肌细胞胞内游离钙水平升高发生钙超载,可能引起心脏功能的改变。     

心力衰竭大鼠肾脏α_1及β肾上腺素受体各亚型表达的改变

目的探讨大鼠心力衰竭时肾脏α_1肾上腺素受体(α_1-AR)和β肾上腺素受体(β-AR)各亚型表达水平的变化。方法选择雄性Wistar大鼠35只,随机分为对照组10只、假手术组10只,其余大鼠制作心肌梗死后心力衰竭模型,成功9只为模型组。取大鼠肾脏皮质,采用Western blot法分别测定各组大鼠α_1-AR亚型(α_(1)-AR、α_(1B)-AR、α_(1D)-AR)和β-AR亚型(β_1-AR、β_2-AR)表达水平。结果与假手术组比较,模型组大鼠α_(1A)-AR、β_1-AR表达明显下调,差异有统计学意义(P<0.01);各组大鼠α_(1B)-AR、α_(1D)-AR、β_2-AR比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论心力衰竭时肾脏α_(1A)-AR和β_1-AR明显下调,可能与交感神经系统激活有关;而β_2-AR表达水平无明显变化,可能为代偿β_1-AR下调带来的不利影响,以维持肾脏有效灌注,保护肾脏功能。     

过氧亚硝基阴离子分解催化剂对衰老大鼠血管舒张功能的保护作用

目的利用过氧亚硝基阴离子（ONOO^-）分解催化剂FeTMPyP探讨衰老大鼠血管舒张功能障碍的可能机制。方法选取雄性SD大鼠,随机分为成年组（3-4月,n=8）、衰老组（18-20月,n=8）及给予FeTMPyP的衰老组（n=6）;制备离体胸主动脉环,观察血管舒张功能;采用免疫组织化学法和Westernblot法测定血管组织中可代表ONOO^-生成的标记物3-硝基酪氨酸（3-NT）的表达。结果与成年组大鼠比较,衰老组大鼠胸主动脉环对10^-9-10^-5mol／L累积浓度的内皮依赖性舒张剂乙酰胆碱（ACh）的最大舒张程度显著下降[（29．74％±8．28％）vs（69．52％±5．51％）,P〈0．001];对10^-9-10^-5mol/L累积浓度的非内皮依赖性舒张剂硝普钠（SNP）的最大舒张程度也显著下降[（92．01％±3．19％）vs（99．26％±1．33％）,P〈0．001]。与成年组大鼠比较,衰老组大鼠血管组织中3-NT蛋白表达增加（P〈0．05）。给予FeTMPyP后,衰老大鼠血管组织中3-NT蛋白表达下降（P〈0．01）;抑制ONOO^-的生成后,衰老大鼠胸主动脉环对累积浓度ACh的最大舒张程度显著升高[（65．96％±11．36％）vs（29．74％±8．28％）,P〈0．001],对累积浓度SNP的最大舒张程度也显著升高[（98．15％±2．79％）vs（92．01％±3．19％）,P〈0．001]。结论FeTMPyP改善了衰老大鼠血管舒张功能,提示ONOO^-可能在衰老大鼠血管功能障碍中起重要作用。     

酒客乐对大鼠酒精性肝纤维化疗效及机制的研究

目的：探讨中药复方酒客乐对大鼠酒精性肝纤维化的防治作用及其机制。方法：采用白酒-吡唑-橄榄油的混悬液灌胃建立酒精性肝纤维化大鼠模型。雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、造模组、治疗组及酒客乐高、低剂量预防组。实验第12周后,除治疗组外,采集标本;治疗组于实验第16周后采集标本,观察酒客乐对大鼠体重、肝功能、血清PⅢP、LN含量以及肝脏病理形态改变、肝脏表达TGF-β1水平的影响。结果：造模组大鼠体重、血清ALT、AST、PⅢP、LN、肝脏表达TGF-β1水平、肝脏病理形态改变与正常对照组比较差异有显著性意义（P〈0.01）。酒客乐高剂量预防组大鼠体重增长与正常对照组差异无显著性意义（P〉0.05）。酒客乐高、低剂量预防组、治疗组大鼠血清ALT、AST、PⅢP、LN含量明显低于造模组（P〈0.01）。酒客乐能减轻大鼠肝脏病理形态改变,抑制其肝脏TGF-β1产生,酒客乐高、低剂量预防组、治疗组大鼠TGF-β1水平含量明显低于造模组,差异有显著性意义（P〈0.01）。结论：酒客乐具有防治大鼠酒精性肝纤维化的作用,其作用机制可能为：①直接作用：抑制肝脏细胞外基质的沉积,减轻肝脏病理形态改变;②间接作用：保护肝功能,增强免疫功能,纠正肝脏代谢紊乱。     

老年大鼠心肌组织中促凋亡蛋白Omi/HtrA2的表达改变及可能意义

目的验证老年大鼠心肌细胞凋亡程度；测定老年心肌组织中内源性线粒体后凋亡调节蛋白Omi／HtrA2和XIAP的表达及其与心肌细胞凋亡的关系。方法分别选取雄性成年SD大鼠[体重（278±10）g，4-6个月]和老年SD大鼠[体重（525±8）g，22-24个月]。随机分为以下4组：正常成年组（40只）；正常老年组（40只）；老年ucf～101组（10只），腹腔注射ucf-101（1．5μmol／kg）；老年DMSO组（10只），腹腔注射DMSO（1．5μmol／kg）。采用Caspase-3活性测定法检测大鼠心肌组织中心肌细胞凋亡发生情况；用Western—blot蛋白印记法检测大鼠心肌组织中Omi／HtrA2和XIAP的表达水平。结果以成年大鼠caspase-3比活性（1．00±0．04）为1，老年大鼠的caspase-3的比活性（2．31±0．43，P〈0．01）显著增高。老年大鼠心肌组织中Omi／HtrA2表达明显增高，XIAP表达明显下降。给予特异性Omi／HtrA2的抑制剂ucf-101，可显著减少老年大鼠心肌组织caspase-3的表达。结论老年大鼠心肌组织中表达增多的Omi／HtrA2，可能导致了XIAP的降解以及随后的caspase-3活化和细胞凋亡。     

老年大鼠心肌PPARα mRNA和IL-1β mRNA表达变化及阿托伐他汀的干预作用

目的进一步探讨心脏衰老的机制及干预因素的影响。方法将30只20月龄的Wistar大鼠随机分为观察1组、观察2组和老年对照组各10只，设10只3月龄大鼠为青年组。观察1组、观察2组分别予阿托伐他汀1、10mg／（kg&#183;d）灌胃，青年组和老年对照组予等体积生理盐水灌胃，均连续4个月。采用RT—PCR方法检测各组心肌过氧化物酶体增殖物激活物受体α（PPARα）mRNA和自细胞介素（IL）-1β mRNA表达水平。结果与青年对照组比较，老年对照组PPARα mRNA表达水平显著降低（P〈0．01），IL-1β mRNA表达水平显著增高（P〈0．01）；与老年对照组比较，观察l组和观察2组PPARα mRNA表达水平显著升高（P〈0．01），IL-1βmRNA表达水平显著降低（P〈0．01），尤以观察2组为著。结论老年大鼠心肌IL-1βmRNA表达显著增高、PPARα mRNA表达显著降低，此可能在心脏衰老发生、发展过程中起重要作用；阿托伐他汀可通过激活PPARα抑制IL-1β异常表达，此可能为其对抗衰老、改善心脏功能的重要机制之一。