子宫内膜癌患者血清hsa-miR-155的表达及其临床意义

目的 探讨hsa-miR-155在子宫内膜癌患者血清中的表达及其临床意义.方法 选择2008年9月至2009年12月间解放军第一六九医院妇产科收治的44例子宫内膜癌患者,以同期12例健康志愿者作为对照,应用实时荧光定量PCR技术检测子宫内膜癌患者和健康志愿者血清hsa-miR-155的表达水平(以倍数表示),分析hsa-miR-155表达与子宫内膜癌临床病理指标间的关系.结果 相对于健康志愿者,子宫内膜癌患者血清hsa-miR-155的表达水平为(3.9±0.7)倍,两者比较,差异有统计学意义(P＜0.01).其中,高、中、低分化子宫内膜癌患者血清hsa-miR-155的表达水平分别为(3.7±0.6)、(3.9±0.6)、(3.7±0.6)倍,3者分别比较,差异均无统计学意义(P＞0.05);子宫内膜样腺癌与非子宫内膜样腺癌患者血清hsa-miR-155的表达水平分别为(3.8±0.6)、(3.9±0.6)倍,两者比较,差异无统计学意义(P＞0.05);Ⅰ～Ⅱ、Ⅲ～Ⅳ期子宫内膜癌患者血清hsa-miR-155的表达水平分别为(2.1±0.4)、(5.6±0.8)倍,两者比较,差异有统计学意义(P＜0.01);有、无盆腔淋巴结转移子宫内膜癌患者血清hsa-miR-155的表达水平分别为(5.5±0.5)、(1.9±0.2)倍,两者比较,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 hsa-miR-155与子宫内膜癌的发生、转移密切相关,有可能成为判断子宫内膜癌疗效及预后的潜在生物学指标.     

RASSF1A基因在卵巢癌组织及腹腔冲洗液中的表达及意义

目的探讨RASSF1A(RAS 相关区域家族1A) 基因转录表达与卵巢癌发生、发展的关系.方法 2003年7月至2005年2月蚌埠医学院附属医院采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR) 的方法检测42 例卵巢恶性肿瘤患者癌组织、腹腔冲洗液(或腹水)中RASSF1A mRNA 的表达水平,以及11例正常卵巢和19例卵巢良性肿瘤组织中RASSF1A mRNA的表达.结果 RASSF1A mRNA 在所有正常和卵巢良性肿瘤组织中均表达,而在卵巢恶性肿瘤组织中存在较高的表达缺失率(57.1%).RASSF1A mRNA的表达缺失率与卵巢恶性肿瘤的临床分期有关,Ⅲ～Ⅳ期卵巢恶性肿瘤组织中RASSF1A mRNA的表达缺失率显著高于Ⅰ～Ⅱ期,淋巴结转移阳性者RASSF1A mRNA 表达缺失率(73.9%) 明显高于淋巴结转移阴性者(36.8%) (P< 0.05) ;腹腔冲洗液(或腹水)细胞学阳性者,其RASSF1A mRNA的表达缺失率显著升高.结论 RASSF1A 转录表达缺失可能参与调控卵巢癌的发生、发展过程,并且提示RASSF1A表达可作为判断卵巢癌预后的一个指标.     

miR-200a在卵巢癌患者血清中的表达及临床意义

目的:通过检测上皮性卵巢癌患者血清中miR-200a的表达,分析其与临床病理特征的关系,探讨miR-200a在卵巢癌发生发展中的作用及可能的机制。方法:选取65例上皮性卵巢癌患者为研究对象,30例良性上皮性卵巢肿瘤及50例正常女性作为对照,用Real-time PCR方法检测受试者血清中miR-200a表达,ELISA法检测血清中CA125水平。分析miR-200a在不同临床病理情况下的表达差异。结果:miR-200a在上皮性卵巢癌患者血清中表达量明显高于良性卵巢肿瘤及正常女性(P<0.001),良性组与正常女性两组间miR-200a的表达无明显差异(P=0.633)。血清miR-200a表达与卵巢癌分化程度及血清CA125值呈正相关(P均<0.05),而与卵巢癌的组织病理类型、临床分期及淋巴结转移情况无明显相关性(P>0.05);miR-200a高水平组卵巢癌患者预后明显差于低水平组(P=0.021)。结论:miR-200a在上皮性卵巢癌患者血清中表达上调可能与卵巢癌的发生及不良预后密切相关。     

上皮性卵巢癌中PTEN突变分析

目的 :探讨抑癌基因PTEN与上皮性卵巢癌的发生发展之间的关系。方法 :收集上皮性卵巢癌 6 0例 (浆液性 4 7例 ,粘液性 13例 )和良性上皮性卵巢肿瘤 10例及正常卵巢组织 5例 ,提取组织DNA后用PCR SSCP方法检测PTEN基因的第 5、8外显子的突变。结果 :3例 (2例浆液性腺癌、1例粘液性腺癌 )突变 ,并经DNA测序结果证实。结论 :在上皮性卵巢癌的发生发展过程中PTEN突变可能起作用 ,但不能除外该基因有突变以外的其他异常改变参与了肿瘤的发生。     

GPNMB在上皮性卵巢癌组织中的表达及临床意义

目的探讨非转移性黑色素瘤糖蛋白B（GPNMB）在上皮性卵巢癌组织中的表达,及其与卵巢癌临床病理学特征的关系。方法采用免疫组织化学染色和逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测116例卵巢癌、42例卵巢良性肿瘤和40例正常卵巢组织中GPNMB的表达。结果免疫组织化学染色和RT-PCR结果显示卵巢癌患者GPNMB表达水平明显升高,与正常对照组、卵巢良性肿瘤组相比差异均有统计学意义（P〈0.05）。GPNMB表达水平与卵巢癌的组织学类型相关（P〈0.05）,而与年龄、病理分级、FIGO分期、大网膜转移、淋巴转移及腹水量无相关性（P〉0.05）;结论卵巢癌患者中GPNMB明显升高,并与组织学类型相关,提示可能参与了卵巢癌的发病。     

抑癌基因p53在上皮性卵巢癌中的过度表达及临床意义

用免疫组织化学方法检测１１０例上皮性卵巢癌中抑癌基因ｐ５３蛋白的过度表达，以探讨其在上皮性卵巢癌发生及演进中的作用及其临床意义。结果显示：ｐ５３蛋白过度表达在上皮性卵巢癌中为５２．７％，而在正常及良性肿瘤中为阴性。不同期别卵巢癌中，ｐ５３蛋白过度表达阳性率不同，早期癌（Ｉ￣Ⅱ）中为２７．９％，晚期癌（Ⅲ￣Ⅳ）中为７０．６％，差异非常显著（Ｐ〈０．０１）。ｐ５３蛋白过度表达在不同分化程度的卵巢癌中的     

miR-199a在卵巢癌中表达下调及其对卵巢癌生物学功能的影响

目的:检测mi R-199a在上皮性卵巢癌组织中的表达水平以及在卵巢癌中参与的功能,初步探讨mi R-199a在卵巢癌发生、发展中的作用和机制。方法:通过实时定量逆转录聚合酶链反应(q RT-PCR)检测上皮性卵巢癌20例、良性上皮性卵巢肿瘤组织15例以及正常卵巢上皮细胞IOSE和1组具有不同侵袭能力的卵巢癌细胞株中mi R-199a的表达;构建mi R-199a的逆转录病毒质粒p MSCVpuro-mi R-199a并筛选稳定过表达mi R-199a的SKOV3细胞株;分别用CCK8和Transwell小室法检测过表达mi R-199a的SKOV3细胞在增殖、侵袭及迁移方面的改变。结果:mi R-199a在卵巢癌组的表达低于良性卵巢肿瘤组(P=0.001),mi R-199a在卵巢癌细胞中的表达低于正常卵巢上皮细胞IOSE(P<0.05),且在SKOV3中表达最低(P<0.01);与转染空载质粒SKOV3细胞相比,稳定转染p MSCVpuro-mi R-199a质粒的SKOV3细胞增殖、侵袭和迁移力均降低(P<0.000 1)。结论:mi R-199a在卵巢癌组织中表达降低,并在卵巢癌细胞增殖、侵袭及迁移过程中起抑癌基因的作用。     

微小RNA-16逆转上皮性卵巢癌顺铂耐药的研究

目的:研究微小RNA-16(miR-16)在人上皮性卵巢癌顺铂耐药细胞中的表达及其与顺铂耐药的关系。方法:脂质体lipofectamine2000介导miR-16成熟体模拟物(mimics)及阴性对照片段(NC)分别转染人卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP。实时荧光定量PCR检测各组细胞中miR-16的表达;蛋白印迹法检测细胞中Bcl-2蛋白、c-myc蛋白的表达;四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞的顺铂半数抑制浓度(IC50);caspase-3活性检测试剂盒检测细胞内caspase-3酶的活性;流式细胞仪检测细胞的凋亡率。结果:(1)SKOV3/DDP细胞顺铂耐药指数(RI)为5.33;(2)SKOV3/DDP细胞中miR-16表达水平明显低于SKOV3细胞,约为后者的1/10(P=0.000),转染miR-16 mimics后SKOV3/DDP细胞中miR-16水平升高约660倍(P=0.001);(3)SKOV3/DDP细胞Bcl-2、c-myc蛋白的相对表达量较SKOV3细胞明显升高,转染miR-16 mimics后SKOV3/DDP细胞Bcl-2、c-myc蛋白的相对表达量明显降低(P<0.01);(4)SKOV3/DDP细胞转染miR-16 mim-ics后,顺铂IC50(14.19±0.06)较转染NC组(22.52±0.60)明显降低(P=0.002),且顺铂作用后caspase-3的酶活力单位也明显升高(P=0.000);(5)顺铂(20μg/ml)作用24h、48h后,SKOV3组凋亡率明显高于SKOV3/DDP组,转染miR-16 mimics的SKOV3/DDP细胞凋亡率约为转染NC细胞的1.5倍(P<0.01)。结论:miR-16可能通过靶向下调上皮性卵巢癌细胞Bcl-2蛋白,并协同调节c-myc蛋白的表达,增强卵巢癌顺铂耐药细胞对顺铂诱导凋亡的敏感性,发挥逆转耐药的作用。     

KLK11基因在卵巢癌组织中的表达状况及临床意义

目的:探讨人组织激肽释放酶11基因(KLK11基因)在卵巢癌组织中的表达状况.方法:应用免疫组织化学及逆转录PCR方法检测KLK11基因在卵巢癌组织、卵巢良性肿瘤组织及正常卵巢组织中的表达状况,研究其与肿瘤分期、组织病理学分型等相关预后因素的关系.结果:KLK11 mRNA及其蛋白hK11均在卵巢上皮细胞中表达,在卵巢癌组织中的表达均低于其在正常卵巢组织和卵巢良性肿瘤组织的表达;hK11蛋白在浆液性卵巢癌组织的表达高于其他类型的卵巢癌组织(P=0.012);早期卵巢癌(Ⅰ/Ⅱ期)组织中hK11蛋白的表达明显高于晚期卵巢癌(Ⅲ/Ⅳ期)(P=0.010);hK11蛋白在卵巢癌组织的表达水平与肿瘤的病理分级无明显关系(P=0.747);高水平的KLK11基因表达与卵巢癌临床分期等预后因素有明显相关性.结论:在卵巢癌组织中存在KLK11基因的表达下调,提示KLK11基因在卵巢癌中表达失调,可能对卵巢癌的诊断有一定价值.     

原发上皮性卵巢癌组织中多药耐药基因表达及其临床意义

目的探讨多药耐药（ＭＤＲ１）基因表达与原发性上皮性卵巢癌（ＰＥＯＣ）耐药的关系及其临床意义。方法应用半定量逆转录—聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术,对３７例ＰＥＯＣ、１０例正常卵巢上皮组织和２０例正常女性外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）新鲜标本ＭＤＲ１基因表达进行了检测;并用四氮唑蓝（ＭＴＴ）法,检测了这３７例ＰＥＯＣ患者的原代癌细胞对临床常用抗癌药物的敏感性。结果ＰＥＯＣ标本中ＭＤＲ１基因阳性表达率为３０％,而正常卵巢上皮组织和ＰＢＭＣ则无ＭＤＲ１基因表达;ＭＤＲ１基因表达与ＰＥＯＣ临床期别及组织学类型无关,而与组织学级别有关,且有随级别升高而升高的趋势;ＭＤＲ１基因阳性表达组与阴性组比较,ＤＡＣＴ、ＡＤＭ、Ｅ－ＡＤＭ、ＶＣＲ和ＶＰ１６对ＰＥＯＣ细胞抑制率差异有显著性,其余则无显著性;ＭＤＲ１基因表达与无进展生存期有关,而与总体生存期无关。结论ＭＤＲ１基因表达与ＰＥＯＣ耐药有关,是抗ＭＤＲ相关药物的主要原因;ＭＤＲ１基因表达的检测,对临床用药有指导意义,对临床疗效判断和患者预后预测有一定价值。     

let-7i在子宫内膜癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨子宫内膜癌组织中let-7i的表达及临床意义。方法:收集2011年4月—2014年12月河北医科大学第一医院40例子宫内膜癌、20例子宫内膜不典型增生及30例正常子宫内膜组织,采用多聚腺苷酸加尾实时荧光定量逆转录聚合酶链反应[poly(A)-RT-q PCR]检测let-7i在不同子宫内膜组织中的表达,并将检测结果和临床及病理资料进行统计学分析。结果:let-7i在子宫内膜癌组织中的表达低于不典型增生和正常子宫内膜组织,3组间差异有统计学意义(P0.01);不同年龄、病理类型、国际妇产科联盟(FIGO)病理分期、病理分级的子宫内膜癌患者let-7i的表达量差异无统计学意义(P0.05),在是否合并高血压、糖尿病,是否淋巴结转移及雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)是否阳性的子宫内膜癌患者中let-7i的表达量差异无统计学意义(P0.05)。结论:let-7i在子宫内膜癌组织中低表达,可能调控了子宫内膜癌的发生。     

间皮素mRNA在子宫内膜癌的表达及意义

目的:研究间皮素mRNA表达与子宫内膜癌发生、发展的关系。方法:采用半定量RT-PCR技术检测41例子宫内膜癌组织和14例正常子宫内膜组织中间皮素mR-NA的表达。结果:间皮素mRNA在子宫内膜癌和正常子宫内膜组织中的表达率分别为82.9%(34/41)与78.6%(11/14),相对含量分别为74.95±22.34、54.45±9.01。子宫内膜癌组间皮素mRNA相对含量高于正常内膜组(P=0.005)。手术病理分期Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移、深肌层浸润及低分化组的子宫内膜癌间皮素mRNA相对含量分别高于手术病理分期Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移、浅肌层浸润及高、中分化组(P分别为0.000、0.014、0.01和0.034),而与病理类型无关(P=0.219)。结论:间皮素mRNA过表达与子宫内膜癌的浸润、转移有相关性,检测其表达有助于判断子宫内膜癌的恶性程度和评估预后。     

DNA异常甲基化在卵巢癌中的研究进展

卵巢癌是死亡率最高的妇科恶性肿瘤,严重威胁着女性的生命健康,其发生与多种分子变化有关。表观遗传学改变与人类多种肿瘤有着密切的关系,而肿瘤抑制基因的DNA甲基化则是卵巢癌中常见的表观遗传学现象,与卵巢癌的发生、发展有着密切的联系。DNA甲基化属于基因表观遗传调控的重要方式之一。新的研究发现,DNA异常甲基化,尤其是基因启动子CpG岛高甲基化,使肿瘤抑制基因——乳腺癌易感基因1(BRCA1)、Ras相关区域1A基因(RASSF1A)等失活,在卵巢癌发生、发展中起重要作用。综述DNA异常甲基化在卵巢癌中的研究进展,可为卵巢癌发病机制、早期诊断、治疗及判断预后提供新的方法。     

ERCC1基因mRNA表达水平在卵巢上皮性癌组织中的意义

目的:研究切除修复交叉互补基因1(ERCCI)在卵巢上皮性癌组织中的mRNA表达水平与患者对铂类药物化疗反应及生存期的关系,并探讨ERCCl基因缺失第Ⅷ外显子变异剪接体的临床意义.方法:使用TRIZol试剂提取63例卵巢上皮性癌组织总RNA,逆转录为cDNA后,TaqMan实时荧光定量RT-PCR技术分别检测ERCC1基因及缺失第Ⅷ外显子变异剪接体的mRNA表达水平,并分析其与患者化疗反应和术后生存期的关系.结果:①ERCC1基因总mRNA和去除变异剪接体后ERCC1全长相对表达量在化疗敏感组的值均低于化疗耐药组,差异有统计学意义(P=0.013;P=0.009).②总ERCC1 mRNA和去除变异剪接体后ERCC1全长相对表达量在低水平表达组比高水平表达组的生存期更长,差异有统计学意义(P=0.012;P=0.008).结论:卵巢癌组织中ERCC1基因mRNA表达水平能够预测患者的化疗反应性与术后生存期,缺失第Ⅷ外显子变异剪接体与患者的化疗反应和术后生存期没有关系,无临床意义,是无功能的转录产物.     

SLP-2 mRNA在子宫内膜癌中的表达及其意义

目的探讨SLP-2mRNA在子宫内膜癌中的表达,及其在子宫内膜癌发生、发展中的作用。方法采用半定量RT-PCR技术检测32例子宫内膜癌组织和28例正常子宫内膜组织中SLP-2mRNA的表达情况;并用表达SLP-2基因的正义和反义质粒,分别转染子宫内膜癌细胞系HEC-1B细胞,RT-PCR技术检测转染前、后HEC-1B细胞中SLP-2mRNA的表达情况,观察转染前、后细胞的形态变化;用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞生长情况,并绘制细胞生长曲线;流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果子宫内膜癌组织中SLP-2mRNA的表达水平为1.6±0.7,正常子宫内膜组织为0.7±0.3,两者比较,差异有统计学意义(P<0.05)。表达SLP-2基因的正义和反义质粒成功转入HEC-1B细胞中,正义质粒转染后SLP-2mRNA表达水平增加约2.4倍,细胞生长变快,其中G1期减少12.5%,S期增高8.0%;反义质粒转染后SLP-2mRNA表达水平减少50%,细胞生长变慢,其中G1期增高10.5%,S期减少9.8%。结论子宫内膜癌中SLP-2mRNA的高表达与子宫内膜癌发生、发展有一定关系。     

表观遗传学与子宫内膜异位症相关性卵巢癌发生机制的研究进展

子宫内膜异位症（endometriosis,EMs）指子宫内膜组织在子宫腔外的存在,是一种慢性的、激素依赖性的妇科疾病,影响着全球数百万女性。虽然EMs在形态学上表现为良性,但其在临床行为学上却表现为增生、浸润、复发等恶性肿瘤的特点。已有充分证据表明EMs可通过多种机制增加恶性转化的风险,但目前关于EMs发生恶性转化的具体机制尚不明确。越来越多证据表明,表观遗传修饰不仅参与EMs的发生,而且在EMs恶性转化的发病机制中发挥重要作用,包括DNA甲基化和去甲基化、组蛋白修饰、微小RNA（microRNAs,miRNAs）异常表达等。综述表观遗传学与子宫内膜异位症相关性卵巢癌（endometriosis associated ovarian cancer,EAOC）发生机制的研究进展,以期寻找可能与EMs恶性转化相关的一些危险因素。     

铁死亡调控机制及其在卵巢癌中的研究进展

卵巢癌作为一种恶性程度极高的女性生殖系统肿瘤,其死亡率在妇科恶性肿瘤中高居首位。卵巢癌发病隐匿,早期缺乏特异检测手段,在中晚期阶段往往发展为复发性及多重耐药性疾病,预后较差。近年来相关研究发现,铁死亡在卵巢癌的发生、发展中起着重要作用。许多学者认为铁死亡作为一种铁依赖性的细胞死亡方式,与多种生物化学过程密切相关,可以通过剥夺癌细胞内的铁或者改变肿瘤组织铁离子代谢方式,抑制肿瘤组织增殖,将其视为卵巢癌的潜在治疗靶点。现就铁死亡的生化过程及其在卵巢癌中的研究进展进行综述,为卵巢癌的治疗提供新思路。     

外泌体miRNA在卵巢癌中的研究进展

卵巢癌(ovarian cancer,OC)致死率在女性生殖系统肿瘤中位居第一,因其早期无典型症状,大多数患者在晚期才得到诊断。此外,由于癌细胞易对化疗药物产生耐药,多数患者会出现复发,导致患者预后很差。因此寻找有效的早期诊断及治疗方法对OC的早期预测、疗效评估、预后及复发判断等具有重要意义。外泌体(exosome)是近年来研究的热点,其富含脂质、蛋白质、RNA和DNA,通过与细胞膜融合将内容物释放到细胞外环境,影响相邻或远处细胞的生物学行为。研究认为外泌体可参与肿瘤微环境中细胞间通讯,通过传递癌或抑癌信息分子,影响肿瘤的进程。微小RNA(miRNA)可被包裹在外泌体中传递至受体细胞,影响肿瘤细胞的增殖、转移、耐药等,在肿瘤进展中发挥重要作用。本文对外泌体miRNA在OC中的研究进行综述。     

SRGAP1在卵巢癌中的表达及对预后判断的意义

目的: 探讨Slit-Robo GTP 酶激活蛋白1（Slit-Robo GTPase-activating protein 1,SRGAP1）在卵巢癌中表达的临床意义。方法: 采用免疫组织化学法分析SRGAP1蛋白在卵巢良性囊肿组织、卵巢癌组织及腹膜转移组织中的表达差异,并通过蛋白质印迹（Western blotting）和实时荧光定量聚合酶链反应（quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR）技术验证。评估SRGAP1与卵巢癌患者的临床病理参数[年龄、国际妇产科联盟（The International Federation of Gynecology and Obstetrics,FIGO）分期、组织学分型、病理学分级及淋巴结转移]的关系;采用Kaplan Meier plotter分析SRGAP1 mRNA表达水平与患者预后的相关性。结果: 卵巢癌组织中SRGAP1表达高于卵巢良性囊肿组织和腹膜转移组织（P<0.05）。SRGAP1高表达和低表达患者的组织学分型和病理学分级差异有统计学意义（P<0.05）;与SRGAP1低表达患者相比,SRGAP1高表达患者的总生存期（OS）和无进展生存期（PFS）明显缩短,差异有统计学意义（P<0.001）,进展后生存期（PPS）缩短,但差异无统计学意义（P=0.054）。结论: SRGAP1在卵巢癌中表达上调,其高表达与卵巢癌的不良预后有关,可考虑作为卵巢癌预后不良的特异性标志物。