槲皮素对结直肠癌细胞SW480增殖与Bcl-2、C-myc表达的影响

目的:研究槲皮素对结直肠癌细胞SW480增殖与B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、癌基因C-myc表达的影响。方法:5、10、20、40、80、160μmol/L槲皮素处理SW480细胞后,采用MTT法检测SW480细胞增殖情况,计算细胞增殖抑制率;实时荧光定量反相聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blot法检测Bcl-2、C-myc mRNA和蛋白表达水平。结果:槲皮素对SW480细胞有明显抑制作用,能够诱导SW480细胞凋亡,且与剂量、时间呈正相关;40μmol/L槲皮素可明显抑制Bcl-2、C-myc mRNA的表达;处理48、72 h时40μmol/L槲皮素明显抑制Bcl-2、C-myc蛋白的表达(P<0.05)。结论:槲皮素能够抑制SW480细胞增殖,且呈时间-剂量依赖性,槲皮素可能通过下调Bcl-2、C-myc的表达水平而发挥抗结直肠癌作用。     

白藜芦醇对鼻咽癌细胞ATP酶抑制作用研究

目的检测30μmol/L白藜芦醇对鼻咽癌细胞ATP酶活力及蛋白表达抑制作用。方法超微量ATP酶试剂盒检测白藜芦醇对鼻咽癌细胞膜的Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶和T-ATP酶活力的变化;Western-blot检测白藜芦醇对鼻咽癌细胞ATP酶蛋白表达差异。结果 RES能显著抑制多种鼻咽癌细胞Na+-K+-ATP酶活力(P0.01)、Ca2+-Mg2+-ATP酶活力(P0.01)和T-ATP酶活力(P0.001),Western-blot检测结果显示白藜芦醇能浓度依赖性下调ATP的表达(P0.05)。结论白藜芦醇抑制鼻咽癌细胞株ATP酶活力,显著下调ATP酶蛋白表达,可能是抑制鼻咽癌细胞株增殖的分子机制之一。     

山慈菇提取物对人结直肠癌SW480细胞迁移和侵袭能力的影响及其分子机制

目的 探讨山慈菇提取物对人结直肠癌SW480细胞迁移和侵袭能力的影响及其分子机制。方法 选择人结直肠癌SW480细胞株,分为空白对照组,不同浓度山慈菇组(200 mg·L^-1、400 mg·L^-1),5-Fu组(10μmol·L^-1),分别进行划痕实验、细胞增殖抑制实验、细胞迁移与侵袭实验。同时,通过细胞转染技术沉默SW480细胞中的AEG-1基因,采用Western blotting检测AEG-1基因沉默对SW480细胞AEG-1、E-cadherin、MMP-2、MMP-9蛋白表达的影响,并观察不同浓度山慈菇组各蛋白表达的变化。结果 不同浓度山慈菇组和5-Fu组SW480细胞的划痕愈合率、细胞迁移率及侵袭率均较空白对照组明显下降,而细胞生长增殖抑制率较空白对照组明显升高(P<0.05);山慈菇提取物具有与5-Fu相似的抑制结直肠癌细胞增殖和侵袭的效果,且与SW480细胞的迁移与侵袭率呈浓度依赖性,与细胞增殖抑制率呈浓度、时间依赖性;不同浓度山慈菇组和5-Fu组SW480细胞中AEG-1、MMP-2、MMP-9蛋...     

冬凌草甲素通过下调XIAP增强吉西他滨对胰腺癌SW1990的抑制作用

【摘要】目的探讨冬凌草甲素在体外联合吉西他滨对胰腺癌细胞株SW1990抑制作用及其可能机制。方法 不同浓度的冬凌草甲素（0、10、20、40、80、160μmol/L）作用胰腺癌SW1990细胞24、48、72h后,CCK-8法检测胰腺癌细胞株SW1990细胞的增殖作用;冬凌草甲素（40μmol/L）与吉西他滨（20μmol/L）单独及联合处理细胞48h,并设立对照组, CCK-8法检测SW1990细胞的存活率;Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡情况;RTPCR检测SW1990细胞中NF-κB和XIAP基因的表达水平。结果冬凌草甲素对胰腺癌SW1990细胞的增殖抑制作用呈明显的剂量与时间依赖性;与其他各组相比,冬凌草甲素联合吉西他滨组细胞存活率明显降低（P<0.05）,凋亡率显著升高（P<0.05）;另外,联合组明显下调胰腺癌细胞中NF-κB和XIAP表达水平（P<0.05）。结论冬凌草甲素在体外能显著增强吉西他滨对胰腺癌SW1990细胞的抗瘤效果,其机制可能是通过下调NF-κB及其下游XIAP 的表达,进而诱导胰腺癌细胞的凋亡而实现.     

丹皮酚与顺铂联用对人骨肉瘤细胞MG-63增殖、凋亡及PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响

目的:研究丹皮酚与顺铂联用对人骨肉瘤细胞MG-63增殖、凋亡的影响及可能的作用机制.方法:取对数生长期MG-63细胞,分为空白对照组、顺铂组(4μmol/L)、丹皮酚组(50 mg/L)和低、中、高浓度联用组(50、100、200 mg/L丹皮酚+4μmol/L顺铂).采用CCK-8法检测经药物作用24、48、72 h...     

二甲双胍增强Ishikawa细胞对顺铂化疗敏感性的实验研究

目的观察二甲双胍体外增强顺铂对子宫内膜癌Ishikawa细胞化疗敏感性的作用,并探讨可能的作用机制。方法实验分为空白对照组、二甲双胍组(培养液中二甲双胍终浓度为10mmol/L)、顺铂组(培养液中顺铂终浓度为20μmol/L)、联合组(培养液中二甲双胍和顺铂的终浓度分别为10mmol/L和20μmol/L),各组作用24h,CCK-8法和细胞克隆形成法检测细胞增殖抑制率和存活率,金氏公式评价二药协同效果;Transwell法检测细胞侵袭力;流式细胞仪检测细胞周期分布及凋亡率;蛋白质印迹法检测葡萄糖调节蛋白(GRP)78蛋白表达水平。结果二甲双胍、顺铂均可抑制Ishikawa细胞增殖、诱导细胞凋亡、降低细胞存活率和侵袭力;二甲双胍可阻滞细胞周期于G0/G1期,顺铂单独或联用二甲双胍可阻滞细胞周期于G2/M期,并能下调GRP78蛋白表达水平(P<0.05),二药联用上述作用效果更为显著(P<0.01)。结论二甲双胍能够增强顺铂对子宫内膜癌Ishikawa细胞的化疗敏感性,这种作用部分是通过下调GRP78蛋白实现的。     

乌司他丁在肝脏缺血再灌注损伤中的作用

目的探讨乌司他丁在肝脏缺血再灌注损伤中对线粒体的作用。方法采用健康杂交狗全肝缺血再灌注模型,检测肝功能、线粒体Na+-K+-ATP酶活性及电镜观察线粒体形态的变化。结果实验组缺血15min后Na+-K+-ATP酶活性为0.128±0.012,而对照组为0.089±0.011(P<0.05);再灌注1h后实验组Na+-K+-ATP酶活性为0.121±0.011,对照组为0.092±0.025(P<0.05)。实验组线粒体结构损伤较对照组明显减轻。结论乌司他丁在肝脏缺血再灌注损伤中对线粒体有明显保护作用,其机制是稳定线粒体膜结构及增强线粒体Na+-K+-ATP酶活性。     

紫杉醇联合顺铂对甲状腺癌细胞SW579增殖、迁移和侵袭作用的影响

目的:研究紫杉醇联合顺铂对甲状腺癌细胞SW579增殖、迁移和侵袭作用的影响及其作用机制。方法:将细胞分为空白对照组、紫杉醇(3μmol/L)组、顺铂(30μmol/L)组和联合用药(紫杉醇3μmol/L+顺铂30μmol/L)组,培养48 h。采用MTT法测定相对细胞活力;流式细胞术测定细胞周期;Transwell法检测细胞迁移和侵袭能力;Western blot法检测细胞中人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因(PTEN)、蛋白激酶B(AKT)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、p27、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9的表达。结果:与空白对照组比较,各给药组细胞的相对细胞活力降低,细胞发生G1期阻滞,细胞的迁移和侵袭能力降低,细胞中PTEN、p27表达增强,AKT磷酸化及Cyclin D1、MMP-2和MMP-9表达减弱,差异均有统计学意义(P<0.05);与单用药组比较,联合用药组作用效果增强,以上指标差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:紫杉醇和顺铂联用后对甲状腺癌细胞SW579增殖、迁移和侵袭的抑制作用增强,其机制可能与上调PTEN、p27的表达,下调Cyclin D1、MMP-2、MMP-9的表达及抑制AKT磷酸化有关。     

红细胞膜Na~+-K~+-ATP酶活性红细胞膜流动性在新生儿缺氧缺血性脑病中的变化及其意义

目的了解新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)中红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性、红细胞膜流动性变化及其临床意义。方法选择新生儿科住院的中、重度HIE患儿65例,于急性期、恢复期采血测定红细胞膜Na+K+-ATP酶活性、红细胞膜流动性,并于同期行新生儿神经行为测定(NBNA)评分,对照组选择早期肺炎、咽下综合征、食管闭锁新生儿30例行相同测定,探讨HIE患儿红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性、红细胞膜流动性、NBNA的相关关系。采用SPSS13.0统计软件进行统计学分析,组间比较采用单因素方差分析,相关性分析采用直线相关分析,以P<0.05为差异具有统计学意义。结果①中、重度HIE急性期患儿的红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性、红细胞膜流动性均明显低于对照组(P<0.01),其中以重度组最低,亦显著低于同期中度组(P<0.05)。恢复期时中度组红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性、红细胞膜流动性较同组急性期明显升高(P<0.01),且基本达到对照组水平(P>0.05);②HIE组急性期红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性与NBNA评分呈正相关(r=0.507,P<0.05);HIE组恢复期红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性与NBNA评分呈正相关(r=0.268,P<0.05);③HIE组急性期红细胞膜流动性与NBNA评分呈正相关(r=0.572,P<0.05);HIE组恢复期红细胞膜流动性与NBNA评分呈正相关(r=0.57,P<0.05)。结论临床检测红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性、膜流动性有利于病情早期判断及预后估计。     

MCL-1 siRNA通过线粒体凋亡途径部分逆转耐顺铂结肠癌细胞系SW480的耐药性

目的 探讨顺铂耐药结肠癌细胞的MCL-1表达水平与顺铂耐药性的关系。方法 用MTT法检测顺铂耐药结肠癌细胞系SW480(SW480-R)对顺铂的敏感性。通过检测siRNA下调SW480-R 细胞MCL-1的表达作用观察其对细胞耐药性的影响。Western blot试验检测SW480-R 细胞Bcl-2家族蛋白及线粒体来源促凋亡因子的表达水平。Annexin V/PI染色检测SW480-R 细胞的凋亡。结果 SW480-R细胞相比于常规SW480细胞对顺铂的敏感性显著下降,western blot结果表明SW480-R细胞的MCL-1水平显著上调而其他Bcl-2蛋白家族成员(Bcl-2,Bcl-xl,BIM,BAK,BAX)表达水平变化不明显。体外转染MCL-1 siRNA能逆转SW480-R细胞的耐药性,提高顺铂对SW480-R的杀伤活性。在SW480-R细胞中,MCL-1 siRNA能促进线粒体来源的促凋亡因子(细胞色素C、凋亡诱导因子、Smac/DIABLO)在顺铂治疗下从线粒体中释放到细胞质中,进而诱导耐药肿瘤细胞发生凋亡。结论 MCL-1的高表达可能是结肠癌细胞产生顺铂耐药性的重要机制,MCL-1基因沉默能通过线粒体凋亡途径逆转耐顺铂结肠癌细胞系SW480的耐药性。     

SDF-1/CXCR4对大肠癌细胞株SW480增殖、迁移及侵袭的影响及意义

【摘要】目的探讨基质细胞衍生因子-1(SDF-1)及其特异性受体CXC趋化因子受体4（CXCR4）对大肠癌细胞SW480增殖、迁移及侵袭能力的影响及意义。方法取对数生长期大肠癌细胞SW480分为对照组(未经任何处理)、SDF-1组（加入100μg/L SDF-1）、SDF-1＋AMD3100混合组(向细胞中加入1mg/L AMD3100,孵育2h后加入100μg/LSDF-1)、AMD3100组（加入1mg/L AMD3100）。免疫组化法检测SW480细胞中CXCR4蛋白表达情况;RT-PCR法检测SW480细胞中CXCR4mRNA的表达情况,以及外源性SDF-1和AMD3100作用后CXCR4mRNA表达水平的变化;MTT增殖实验、Transwell迁移及侵袭实验分别检测SDF-1以及AMD3100对SW480细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。结果SW480细胞中CXCR4蛋白呈阳性表达（阳性率80%）。SW480细胞中有CXCR4mRNA的表达,100μg/LSDF-1促使CXCR4mRNA表达水平进一步上调,且能被1mg/L AMD3100阻断。SDF-1组细胞增殖活性(0.847±0.039）高于对照组(0.624±0.011)和SDF-1＋AMD3100混合组(0.607±0.016),AMD3100组(0.456±0.032)低于对照组和SDF-1＋AMD3100混合组(F=108.030,P＜0.05)。Transwell小室迁移及侵袭实验中SDF-1组穿膜细胞数(个：98.7±5.8、33.7±6.2)均多于对照组(21.0±2.2、6.1±2.3)、SDF-1＋AMD3100混合组(18.5±8.4、8.5±2.8)和AMD3100组(12.1±3.2、2.1±1.0),后3组间比较差异无统计学意义。结论SDF-1/CXCR4生物轴可促进大肠癌细胞SW480的增殖、迁移及侵袭。     

RNA干扰靶向抑制PI3Kp85α蛋白对大肠癌细胞增值的影响

目的:探讨RNA干扰靶向抑制PI3K p85α蛋白表达对大肠癌细胞增值的影响。方法:设计4条shRNA干扰载体及1条阴性对照载体,分别稳定转染大肠癌SW480细胞。用Western Blot筛选出一组抑制效率最高的细胞进行CCK-8细胞增值实验。结果:转染shRNA/324干扰载体的SW480细胞PI3K p85蛋白表达显著降低,抑制率约90%,选择该组细胞作为有效干扰组。CCK-8细胞增值实验显示,接种48h、72h及96h后,干扰组细胞生长速度明显低于对照组细胞(P<0.05)。结论:PI3K p85α蛋白表达缺失可降低大肠癌SW480细胞的增值速度,PI3K p85可能是大肠癌靶向治疗的新靶点。     

MK801对结肠癌细胞增殖、凋亡和迁移的影响

摘要： 目的 探究 N-甲基-D-天冬氨酸受体亚型 1（NMDAR1）在结肠癌细胞 HT29 和 SW116 中的表达, 以及 NMDAR1 拮抗剂 MK801 对 HT-29 和 SW116 细胞生长抑制、 凋亡和迁移的影响。方法 采用免疫组织化学法检测 结肠癌细胞 HT-29 和 SW116 细胞表面 NMDAR1 的表达; 应用噻唑蓝（MTT）比色法测定 62.5、 125.0、 250.0、 500.0、 1 000.0、 2 000.0 μmol/L 的 MK801 对于 HT-29 和 SW116 细胞增殖作用的影响; 应用流式细胞术检测 2 000 μmol/L 的 MK801 对 HT29 和 SW116 细胞凋亡的影响; 应用细胞划痕实验检测 50 μmol/L MK801 对于结肠癌细胞 HT-29 和 SW116 迁移能力的影响。结果 结肠癌细胞 HT-29 和 SW116 均表达 NMDAR1, 且主要表达于细胞质中; 各浓度的 MK801 对 HT-29 细胞, 以及浓度为 500.0、 1 000.0、 2 000.0 μmol/L 的 MK801 对 SW116 细胞的生长抑制作用具有时 间效应关系, 24、 48 及 72 h 各 MK801 浓度组对 HT-29 和 SW116 细胞的抑制率随浓度升高整体呈增强趋势, 但抑制 率不呈明显的剂量效应关系; MK801 具有促进 HT-29 和 SW116 细胞凋亡的作用, 且主要表现诱导细胞早期凋亡; MK801 可抑制 HT-29 和 SW116 细胞迁移。结论 NMDAR1 在结肠癌细胞胞质中表达, 且 NMDAR1 拮抗剂 MK801 具有抑制肿瘤细胞生长、 迁移, 促进其早期凋亡的作用, 有望成为新一代抗肿瘤药物。     

盐酸普鲁卡因通过DNA去甲基化作用抑制结肠癌细胞恶性进展机制研究

目的:研究盐酸普鲁卡因(procaine hydrochloride,PCA)对结肠癌HCT116、SW480细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡等功能表型的影响,探讨PCA在调节抑癌基因TBX5甲基化状态及其表达水平中发挥的作用.方法:采用不同浓度PCA(0.5,1,2,4,8 mmol·L-1)对HCT116、SW480细胞...     

微小RNA-152-3p 对结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制研究

目的探讨微小RNA(miR)-152-3p对结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭的影响及机制。方法2019年2月至2020年4月,将结肠癌SW480细胞分为miR-152-3p模拟物阴性对照(miR-NC)组、miR-152-3p模拟物(miR-152-3p)组、抑制物(anti-miRNC)组、miR-152-3p抑制物(anti-miR-152-3p)组、阴性对照(si-NC)组、沉默转移相关蛋白2(si-MTA2)组、miR-152-3p模拟物+空载体(miR-152-3p+pcDNA3.1)组、miR-152-3p模拟物+过表达MTA2(miR-152-3p+pcDNA3.1-MTA2)组,均用脂质体法转染至结直肠癌SW480细胞中,另取未转染结直肠癌SW480细胞记为Control组。采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-152-3p和MTA2 mRNA的表达水平;蛋白质印迹法测定蛋白的表达;MTT法检测细胞活性;Transwell检测细胞迁移和侵袭;双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性。结果结肠癌HCT116、SW480及LoVo细胞中miR-152-3p表达分别为0.72±0.04、0.29±0.02、0.49±0.01,人正常结肠上皮细胞NCM460中miR-152-3p表达为1.06±0.12,与正常结肠上皮细胞NCM460相比,结肠癌细胞HCT116、LoVo、SW480中MTA2 mRNA和蛋白较高,miR-152-3p较低(P<0.05);Control组、miR-NC组、miR-152-3p组、si-NC组及si-MTA2组结肠癌SW480细胞吸光度分别为0.92±0.22、0.96±0.17、0.31±0.07、0.99±0.17及0.32±0.09,细胞迁移数分别为(172.00±23.52)个、(169.00±20.66)个、(53.67±12.22)个、(155.67±16.8)个及(54.33±8.74)个,细胞侵袭数分别为(124.67±10.02)个、(122.33±9.45)个、(26.00±5.00)个、(108.33±10.02)个及(42.00±4.00)个,与miR-NC 组相比,miR-152-3p 组SW480细胞中细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、基质金属蛋白酶(MMP)-2及SW480细胞活性、迁移和侵袭数量均较低,周期素依赖激酶抑制剂p21(P21)及上皮钙黏素(E-cadherin)较高(P<0.05);与si-NC组相比,si-MTA2组SW480细胞中cyclin D1、MMP-2及SW480细胞活性、迁移和侵袭数量均较低,P21及E-cadherin较高(P<0.05)。转染miR-152-3p和MTA2野生型表达载体的结肠癌SW480细胞荧光素酶活性显著降低(P<0.05)。相比miR-152-3p+pcDNA3.1组,miR-152-3p+pcDNA3.1-MTA2组SW480细胞中P21、E-cadherin的表达较低,MTA2、cyclin D1、MMP-2蛋白的表达较高,SW480细胞活性、迁移、侵袭数量较高(P<0.05)。结论miR-152-3p可能通过下调MTA2抑制结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭。     

下调miR-346表达增强奥沙利铂对结肠癌SW620细胞杀伤作用

目的观察miR-346表达对奥沙利铂(Oxaliplatin,OHP)诱导的结肠癌细胞杀伤作用的影响,并探讨其机制。方法给予miR-346 mimic及miR-346 inhibitor转染SW620细胞,采用MTT法观察miR-346 mimic组、miR-346 inhibitor组、MOCK组(空白对照)、OHP组及OHP+miR-346 inhibitor组细胞增殖率;给予0、0.5、5、50、500μmol/L的OHP,或以上浓度OHP+miR-346mimics共同培养SW620细胞72 h,比较细胞存活率。DAPI染色法观察OHP处理的转染miR-346 inhibitor的SW620细胞核固缩及破碎比例;Western blot法检测不同干预下SW620细胞中凋亡相关蛋白表达。结果miR-346 mimic对SW620细胞增殖具有促进作用。miR-346 inhibitor对SW620细胞增殖具有抑制作用。OHP+miR-346 inhibitor对SW620细胞增殖具有抑制作用,与MOCK组及OHP组比较,在72 h和96 h时差异有统计学意义(P<0.05)。OHP(50μmol/L或500μmol/L)+miR-346 inhibitor组SW620细胞存活率低于OHP组(P<0.05)。SW620细胞给予不同干预措施培养48 h后,OHP(50μmol/L)+miR-346 inhibitor共同处理SW620细胞凋亡率高于MOCK组、miR-346 inhibitor组或OHP组(P<0.05)。OHP+miR-346 inhibitor组的SW620细胞核固缩及破碎比例高于OHP组或MOCK组(P<0.05)。与MOCK组比较,miR-346 mimics组caspase-9及Bcl-2蛋白水平升高,Apaf-1及Bax蛋白水平下降(P<0.05);OHP+miR-346 inhibitor组caspase-9及Bcl-2蛋白水平下降,Apaf-1及Bax蛋白水平升高(P<0.05);与miR-346 inhibitor或OHP组比较,OHP+miR-346 inhibitor组caspase-9及Bcl-2蛋白水平下降(P<0.05)。结论下调miR-346表达通过调控凋亡相关蛋白增强奥沙利铂对结肠癌细胞的杀伤作用。     

小白菊内酯通过下调NOX4抑制结肠癌SW480细胞增殖和侵袭

目的:探讨小白菊内酯对人结肠癌细胞SW480增殖及侵袭的影响,并探讨其抗肿瘤的可能作用机制。方法:以不同浓度(5,10,15μmol·L^-1)小白菊内酯作用于体外培养的人结肠癌SW480细胞,以环磷酰胺(30μmol·L^-1)作为阳性对照。采用CCK8法以及平板克隆法检测细胞增殖,Transwell法检测细胞迁移及侵袭;免疫印迹法(Western blotting)检测NOX4蛋白以及增殖相关蛋白[β-连环蛋白(β-catenin)、G1/S-特异性周期蛋白-D1(Cyclin D1)、侵袭相关蛋白金属基质蛋白酶2(MMP-2)、金属基质蛋白酶9(MMP-9)蛋白]表达情况。结果:随着小白菊内酯浓度的增加,对SW480细胞增殖抑制率明显升高,与空白组比较,差异有统计学意义(P<0.05);同一浓度作用下,随作用时间的延长,增殖抑制率显著升高(P<0.05),小白菊内酯10,15μmol·L^-1浓度组与阳性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);与空白对照组相比,小白菊内酯组克隆细胞形成数、侵袭、迁移细胞数、增殖相关蛋白β-catenin、Cyclin D1、侵袭迁移关蛋白MMP-2、MMP-9以及NOX4蛋白水平显著下降(P<0.05),且小白菊内酯各组间呈浓度依赖(P<0.05);与阳性对照组相比,小白菊内酯10,15μmol·L^-1浓度组以上各指标差异有统计学意义(P<0.05)。结论:小白菊内酯可能通过下调NOX4表达,抑制结肠癌细胞SW480细胞增殖、侵袭能力。     

microRNA-10b调控SW480结肠癌干细胞生物学行为的研究

目的 探讨microRNA-10b对SW480结肠癌干细胞迁移及侵袭功能影响.方法 流式细胞仪分选SW480结肠癌干细胞,通过转染技术抑制SW480结肠癌干细胞microRNA-10b表达,划痕愈合实验观察癌干细胞迁移能力变化,Transwell法观察癌干细胞侵袭能力变化.结果 抑制SW480结肠癌干细胞microRNA-10b表达,癌干细胞转染48 h后,其迁移率(45.4±3.1)％与转染前(86.8±12.4)％比较明显下降(P<0.05);转染后癌干细胞侵袭力也明显下降,转染前侵袭细胞数为(486.4±124.7)个,转染后为(297.5±48.0)个(P<0.05).结论 microRNA-10b基因可调控SW480结肠癌干细胞迁移及侵袭功能,抑制其表达可降低SW480结肠癌干细胞迁移力及侵袭力.     

慢病毒介导的PRL-3 shRNA对结肠癌细胞增殖、侵袭、凋亡的影响

目的 观察慢病毒介导的 shRNA 沉默肝再生磷酸酶-3（PRL-3）基因对结肠癌 SW480 细胞增殖、侵袭、凋亡的影响。方法 实验分组为空白对照组、阴性对照组、转染组。将携带 PRL-3 shRNA 的慢病毒载体转染结肠癌SW480 细胞,建立稳定沉默 PRL-3 的细胞株,real-time PCR 检测转染后 PRL-3 mRNA 的相对表达水平。采用 MTT法、平板克隆形成实验检测转染后细胞增殖能力;采用 Transwell 侵袭实验、侵袭小室法检测转染后细胞迁移及侵袭能力;采用流式细胞术检测转染后细胞凋亡率变化。结果 稳定沉默 PRL-3 的细胞株构建成功,转染组 PRL-3mRNA 的相对表达水平低于空白对照组、阴性对照组（P＜0.05）,空白对照组、阴性对照组比较差异无统计学意义。PRL-3 shRNA 转染 SW480 细胞 72 h 后,转染组与空白对照组、阴性对照组比较,细胞增殖能力受到抑制,转染 120 h时最明显（P＜0.05）。转染组克隆形成能力较空白对照组、阴性对照组下降（P＜0.05）。转染组与空白对照组、阴性对照组比较,细胞迁移、侵袭能力下降,凋亡率增加（P＜0.05）。结论 结肠癌 SW480 细胞转染 PRL-3 shRNA 可减少 PRL-3 的表达,有效抑制 SW480 细胞增殖,促进其凋亡,PRL-3 可能成为治疗结肠癌的靶基因。