RP-HPLC法测定黄连解毒汤中黄芩苷的含量

目的采用高效液相色谱法测定黄连解毒汤中黄芩苷含量。方法Hypersil C18柱(4.6mm×200mm,5μm),流动相乙腈-水-四氢呋喃(20∶78∶2.7),磷酸调pH=4,内标物为对硝基苯甲酸,检测波长274nm。结果平均回收率96.6%,RSD为1.4%(n=9),黄连解毒汤中黄芩苷含量为1.636g·L-1。结论本法可以作为黄连解毒汤的质量控制方法。     

磷酸川芎嗪鼻用pH敏感型原位凝胶对急性脑缺血模型大鼠脑中氨基酸含量的影响

目的 建立大鼠脑中5种氨基酸浓度的高效液相-荧光检测器测定法(HPLC-FD),研究磷酸川芎嗪(TMPP)鼻用pH敏感型原位凝胶对急性脑缺血模型大鼠脑部纹状体区氨基酸含量的影响。方法 微透析液用Agilent 1100液相系统荧光检测器检测,ZORBAX SB-Aq C_l8色谱柱,激发波长357 nm,发射波长455 nm;流动相为甲醇和50 mmoL·L^-1乙酸钠缓冲液(pH=6.5),梯度洗脱,流速为1 mL·min^-1。12只♂大鼠随机分成模型对照组和给药组,每组6只,用微透析采样方法采集大鼠脑部纹状体区微透析液后,HPLC-FD 测定微透析液中5种氨基酸的浓度。结果 鼻腔给予TMPP鼻用pH敏感型原位凝胶(10 mg·kg^-1)后,给药组大鼠体内的Glu和Asp与对照组相比显著下降,而Tau和GABA的量却有所增加。结论 TMPP能明显降低模型大鼠脑内兴奋性氨基酸的含量,增加脑内抑制性氨基酸的含量,对急性脑缺血模型大鼠起到保护作用。     

康脑液对脑缺血再灌注损伤大鼠血清及脑组织中氨基酸含量的影响

目的:观察康脑液对SD大鼠脑缺血再灌注损伤后血清及脑组织中氨基酸水平的影响,并探讨其对脑缺血再灌注保护作用的可能机制。方法:采用线栓法复制大鼠大脑中动脉栓塞模型(MCAO),将36只SD大鼠随机分为假手术组,模型组,康脑液低、中、高剂量组,依达拉奉组,每组6只。脑缺血2h再灌注24h后断头取血、取脑,应用高效液相色谱法测定各组大鼠血清及脑组织中天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)和γ-氨基丁酸(GABA)水平。结果:与假手术组相比,模型组大鼠血清及脑组织中Asp、Glu、Gly、GABA水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,康脑液能够降低脑缺血再灌注损伤大鼠血清及脑组织Asp、Glu水平,升高Gly、GABA水平,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:康脑液能够减轻大鼠脑缺血再灌注损伤,机制可能与其影响血液及脑组织内兴奋性氨基酸及抑制性氨基酸代谢平衡有关。     

高效液相色谱法测定黄连解毒汤中盐酸小檗碱的含量

目的　采用高效液相色谱法测定黄连解毒汤中盐酸小檗碱含量。方法　采用 Hypersil C18(4.6 mm× 2 0 0mm ,5μm)色谱柱 ,流动相为乙腈 -水 -三乙胺 (2 6∶ 74∶ 0 .2 )磷酸调 p H4 ,内标物为补骨脂素 ,检测波长 340nm。结果　盐酸小檗碱在 3.5 4～ 17.6 8mg· L-1范围内线性关系良好 ,平均回收率 94 .8% ,RSD 2 .0 % (n =9)。结论　本法简便、可靠 ,适合测定黄连解毒汤中盐酸小檗碱的含量     

两种方法制备黄连解毒汤中小檗碱含量的比较

目的：探讨高温煎煮对黄连解毒汤中小檗碱含量的影响。方法：建立黄连解毒汤汤剂中小檗碱的高效液相色谱法(HPLC)含量测定法，比较GNG中药抽出机煎煮法与常压直火煎煮法制备的黄连解毒汤汤剂中小檗碱含量的差异。结果：GNG中药抽出机制备的黄连解毒汤汤剂中小檗碱含量明显小于常压直火煎煮法，两者有显著差异。结论：含小檗碱成分的中药不适合采用GNG中药抽出机煎煮制备。     

胞磷胆碱注射液对大鼠脑缺血组织氨基酸神经递质的影响

目的:观察大鼠脑出血周边组织谷氨酸、γ氨基丁酸含量的变化;胞磷胆碱注射液对缺血周边组织谷氨酸、γ氨基丁酸含量的影响。方法:选择大鼠100只,体重250～300g。随机分组,假手术组4只,脑缺血组48只,胞磷胆碱注射液治疗组48只。在实验前后(4h,6h,12h,24h,72h,7d),各时间点选择8只大鼠,处死后测定谷氨酸(Glu)和γ氨基丁酸(GABA)含量。结果:胞磷胆碱注射液对脑缺血大鼠具有保护作用,能使氨基酸神经递质保持动态平衡。结论:胞磷胆碱注射液对大鼠脑缺血部位治疗有益。     

蛇床子素对脑缺血/再灌注大鼠海马LTP及氨基酸含量的影响

目的研究蛇床子素对脑缺血/再灌注大鼠海马齿状回突触传递活动及海马内氨基酸含量的影响。方法 SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、蛇床子素组(25.0、12.5 mg.kg-1)和尼莫地平组(1.0 mg.kg-1),腔内线栓法制作右侧大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,缺血后2 h再灌。采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法记录大鼠脑梗死体积、Morris水迷宫法观察大鼠空间学习记忆能力、电生理学方法记录中枢突触传递长时程增强(long-term potentiation,LTP)现象、高效液相色谱法记录大鼠海马内氨基酸含量的变化。结果蛇床子素(25.0、12.5 mg.kg-1,ip)可减少大鼠脑梗死体积,剂量依赖性地缩短大鼠寻找站台的时间,增强大鼠海马齿状回高频刺激(high frequency stimulation,HFS)诱导的LTP,降低再灌后72 h内海马内谷氨酸含量,蛇床子素(25.0 mg.kg-1)对于γ-氨基丁酸产生先降低后升高的调节作用,与尼莫地平组作用结果一致。结论蛇床子素改善学习记忆障碍、增强脑缺血/再灌注大鼠海马齿状回HFS诱导的LTP的作用,与调节海马内谷氨酸、γ-氨基丁酸水平有关。     

黄连解毒汤对小鼠急性脑缺血、缺氧的影响

目的研究黄连解毒汤对小鼠急性脑缺血缺氧的影响。方法采用了双侧颈总动脉结扎致脑缺氧、NaNO2 致缺氧、KCN致缺氧、常压密闭耐缺氧等实验方法。结果黄连解毒汤灌胃给药 2 0、4 0、8 0g(生药 ,下同 ) kg能明显延长双侧颈总动脉结扎小鼠存活时间 ;4 0、8 0g kg能够明显延长NaNO2 致缺氧小鼠存活时间 ;2 0、4 0、8 0 g kg对KCN所致缺氧小鼠出现翻正反射的潜伏期无明显影响 ,但能明显缩短小鼠翻正反射消失时间。黄连解毒汤不能影响常压密闭状态下小鼠耗氧速度 ,但 4 0、8 0 g kg可以通过提高小鼠对氧的利用能力使小鼠存活时间延长。结论黄连解毒汤具有一定的抗小鼠脑缺血缺氧作用     

黄连解毒汤对大鼠结肠炎组织损伤的影响

目的研究黄连解毒汤对实验大鼠结肠炎组织损伤的保护作用及其机制。方法用Wirst大鼠建立结肠炎动物模型,灌服用药2周后,取结肠组织评价大鼠结肠黏膜损伤指数(CMDI),检测结肠髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—PX)活性及丙二醛(MDA)的含量。结果不同剂量黄连解毒汤(10、30、50ml／kg体重)灌胃用药后均能不同程度降低模型大鼠结肠黏膜损伤指数(CMDI)和MPO活性、减少MDA含量,提高SOD、GSH—PX活性,且与用药剂量呈一定量效关系。结论黄连解毒汤通过抗脂质过氧化,对大鼠结肠炎结肠损伤进行修复,减轻结肠损伤,抑制结肠炎大鼠炎症反应。     

黄连解毒汤对体内外损伤的神经保护作用

目的观察黄连解毒汤(HJDT)对体外糖氧剥夺(OGD)和谷氨酸诱导的PC12细胞损伤及体内小鼠全脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法体外建立OGD和谷氨酸诱导的PC12细胞损伤模型,分别给予不同浓度的HJDT作用一定时间,以MTT和LDH法观察HJDT对细胞损伤的保护作用。体内采用双侧颈总动脉阻断30 min建立C57BL/6小鼠全脑缺血模型,术前7 d开始灌服HJDT(1,2,4和8 g.kg-1)至术后3 d,采用新奇事物探究实验检测小鼠学习记忆能力,采用Nissl染色检测神经元存活的情况。结果 OGD 4 h复灌2 h后,HJDT(4.0×10-5,4.0×10-4,4.0×10-3g.L-1)可显著增加PC12细胞活性,(4.0×10-6,4.0×10-5,4.0×10-4g.L-1)减少LDH释放(P<0.01);谷氨酸处理24 h后,HJDT(4.0×10-4,4.0×10-3g.L-1)能显著增加PC12细胞活性,减少LDH释放(P<0.05)。小鼠全脑缺血后,HJDT 4 g.kg-1能显著提高小鼠对新奇物体的分辨比,HJDT(2,4 g.kg-1)可显著提高小鼠海马CA1区的神经元密度。结论 HJDT对体内外损伤具有神经保护作用。     

叶酸对局灶性脑缺血大鼠血浆同型半胱氨酸的影响

目的:探讨叶酸对局灶性脑缺血大鼠血浆同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)含量的影响,为研究维生素防治脑梗死提供理论依据.方法:SD雄性大鼠32只,随机分为4组,假手术(SO)组、缺血(IM)组、缺血+叶酸低剂量[IM+LFA,4 mg/(kg·d)]组、缺血+叶酸高剂量[IM+HFA,12mg/(kg·d)]组.叶酸灌胃28 d后制备大脑中动脉闭塞(MCAO)模型.分别于叶酸灌胃前后和缺血后用化学免疫发光法测定血清中叶酸含量,用高效液相色谱(HPLC)法测定大鼠血浆Hcy浓度.结果:叶酸灌胃前,各组大鼠各项指标的差异均无统计学意义(P0.05);叶酸灌胃后及缺血后,IM+LFA组、IM+HFA组血清叶酸水平高于SO组和IM组(P<0.01);叶酸灌胃后,IM+LFA组、IM+HFA组血浆Hey水平低于叶酸灌胃前和SO、IM组(P<0.01);造模后,IM+LFA组、IM+HFA组血浆Hcy水平低于灌胃前和SO组、IM组(P<0.01),IM+HFA组低于IM+LFA组(P<0.01).结论:补充叶酸可以提高局灶性脑缺血大鼠体内血清叶酸含量,降低血浆同型半胱氨酸水平,从而起到保护作用.     

茱杞偏瘫颗粒对脑缺血模型大鼠的保护作用

目的:研究茱杞偏瘫颗粒对脑缺血模型大鼠的保护作用。方法:采用线栓法复制大鼠脑缺血模型。60只大鼠随机均分为假手术(等容纯净水)组、模型(等容纯净水)组、尼莫地平(阳性对照,0.009 g/kg)组与茱杞偏瘫颗粒高、中、低剂量(10.8、5.4、2.7g/kg)组,复制模型前7 d ig给药,每天1次,连续10 d。对大鼠行为学进行测定,测定大鼠脑梗死比例,采用显微图像分析系统观察大鼠脑组织病理形态。结果:与假手术组比较,模型组大鼠神经活动评分升高,横木行走实验评分升高,前肢握力减弱,脑梗死比例升高,差异有统计学意义(P<0.01);脑神经细胞大片消失,坏死区边缘可见神经细胞变性,缺血周围区锥体细胞明显减少,胞体变小,尼氏小体消失,核固缩深染。与模型组比较,茱杞偏瘫颗粒高剂量组大鼠6 h神经活动评分降低,茱杞偏瘫颗粒中剂量组大鼠6、24、48 h内神经活动评分降低,茱杞偏瘫颗粒高、中、低剂量组大鼠横木行走实验评分降低、前肢握力增加,茱杞偏瘫颗粒高、中剂量组大鼠脑梗死比例降低,差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05);茱杞偏瘫颗粒高、中、低剂量组大鼠坏死脑神经细胞减少,锥体细胞形态结构趋于正常,水肿较轻,细胞核较规则。结论:茱杞偏瘫颗粒对脑缺血模型大鼠具有一定的保护作用,可改善其神经活动、横木行走及前肢握力,降低脑梗死比例。     

二十五味珍珠丸对实验性脑缺血大鼠脑毛细血管通透性及脑含水量的影响

目的:研究二十五味珍珠丸对大鼠脑缺血所致脑水肿的影响。方法:建立以颈总动脉结扎致大鼠不完全性脑缺血模型,通过伊文氏蓝法和重量法观察二十五味珍珠丸对脑毛细血管通透性、脑指数、脑含水量的影响。结果:二十五味珍珠丸预防给药可明显降低模型大鼠脑毛细血管通透性、脑含水量和脑指数,减轻脑水肿(P<0.05)。结论:二十五味珍珠丸对实验性大鼠脑缺血所致脑水肿有一定的预防作用。     

黄连解毒汤的抗血栓作用研究

黄连解毒汤提取物 4 5 0、90 0、1 80 0mg/kg ,连续灌胃 3d,末次给药 1h后能显著延长小鼠体外凝血时间。家兔灌胃黄连解毒汤 1 5 0、30 0、6 0 0mg/kg,连续给药 3d,末次给药 1h后能明显延长血浆凝血酶原时间、白陶土活化部分凝血活酶时间及凝血酶时间 ,并能显著抑制ADP引起的血小板聚集。实验结果表明 ,黄连解毒汤具有明显的抗血栓形成作用。     

大鼠脑缺血时脑组织NO含量的变化

目的:探讨大鼠脑缺血时脑组织中NO的变化.方法:制备局灶性脑缺血模型,在脑缺血后3个时点观察脑组织梗死面积、大鼠的神经行为学变化评分,并观察缺血脑组织超微病理结构变化,对缺血区脑组织NO含量进行测定和分析.结果:假手术组相应时间点神经功能损害评分显著低于缺血组和治疗组(P＜0.05),缺血组和治疗组NO含量显著高于假手术组相应时间点(P＜0.05),治疗组与缺血组相应时间点NO含量比较明显降低(P＜0.05).光镜显示假手术组脑组织结构未见明显病理改变,脑缺血组神经细胞缺血坏死,细胞水肿明显,胶质细胞弥散增生,炎性细胞浸润.结论:NO参与了脑缺血损伤,β-七叶皂甙钠可以降低缺血脑组织中NO的含量,减小梗死体积,减轻大鼠神经功能损害和脑组织水肿,对局灶性脑缺血损伤可能具有一定的保护作用.     

咖啡酸对全脑缺血再灌注模型大鼠脑损伤的保护作用研究

目的:探讨咖啡酸对全脑缺血再灌注模型大鼠脑损伤的保护作用及其机制。方法:将大鼠随机分为假手术组(生理盐水)、模型组(生理盐水)和咖啡酸低、中、高剂量组(咖啡酸溶液,10、30、50mg·kg-1),每组7只,分别腹腔注射相应药物后建立全脑缺血再灌注模型,以寻台潜伏期为指标,用Morris水迷宫检测大鼠空间学习记忆能力,其后,采用苏木精-伊红染色法观察各组大鼠海马组织病理学变化和固定视野内神经元细胞计数,并考察海马组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量及核转录因子NF-κBp65阳性细胞的表达。结果:与模型组比较,咖啡酸低、中、高剂量组大鼠5d内的寻台潜伏期明显缩短(P<0.05或P<0.01),海马CA1区神经元损伤程度降低、神经元细胞数目明显增加(P<0.05或P<0.01),海马组织中SOD活性明显增加、MDA含量和NF-κBp65阳性细胞表达明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论:咖啡酸可能通过降低NF-κBp65阳性细胞表达,抑制中枢神经系统炎症反应和氧化应激来实现对全脑缺血再灌注模型大鼠脑损伤的保护作用。     

黄连解毒汤抗感染作用的研究进展

黄连解毒汤是清热解毒的经典古方,现代药理学及医学方解研究,黄连解毒汤中各味药中部分有效成分如小檗碱、黄芩苷、黄芩素等均具有一定的抗感染作用,尤其是在抑制体外细菌、真菌以及病毒性感染的效果尤为突出。综述黄连解毒汤抗细菌感染、抗真菌感染、抗病毒感染和临床上治疗感染性疾病的文献资料,对其研究进展作一分析。     

牛蒡苷元对脑缺血再灌注大鼠的保护作用

目的 研究牛蒡苷元对脑缺血再灌注大鼠的保护作用机制。方法 将90只SD大鼠随机分为6组,空白对照组、假手术组、模型组和25,50,100 mg·kg^-1牛蒡苷元组,每组15只,根据组别分别进行相应的给药干预。采用改良线栓法建立大鼠脑缺血再灌注模型,造模结束后,对大鼠的生存情况及神经功能缺损评分进行评价;脑缺血再灌注24 h后,随机每组抽取2只大鼠对其大脑组织进行病理检测,其余大鼠处死后沿缺血灶剥离缺血半暗带脑组织,ELISA法检测各组缺血半暗带脑组织中的超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、乳酸脱氢酶（LDH）、白介素1β（IL-1β）、白介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）的含量。结果 与模型组相比,给予50,100 mg·kg^-1牛蒡苷元干预后,大鼠生存情况较好,神经功能缺损评分明显降低（P<0.01）,病理切片显示2组梗死灶周围炎性细胞数量显著减少,缺血半暗带脑组织中SOD含量显著升高（P<0.01）,MDA、LDH、IL-1β、IL-6以及TNF-α含量明显降低（P<0.01）;给予25 mg·kg^-1牛蒡苷元后,大鼠梗死灶周围炎性细胞数量、LDH、IL-1β、IL-6以及TNF-α含量与模型组比较差异无统计学意义,SOD含量明显升高（P<0.05）,MDA含量明显降低（P<0.05）。结论 牛蒡苷元能从抗氧化与抗炎方面发挥对脑缺血再灌注大鼠的保护作用。