应用McAb—AST和AST—ELISA检测斯氏肺吸虫病人血清循环抗原

据报道,应用单克隆抗体—抗原斑点试验(McAb—AST)和抗原斑点酶联免疫吸附试验(AST—ELISA)直接法检测斯氏肺吸虫病人血清循环抗原,得到较好的效果。为了解其在亚临床型病人中的诊断价值,我们对23例病人进行了检测。     

应用单克隆抗体-抗原斑点试验检测斯氏狸殖吸虫循环抗原

刘纪伯等报道应用单克隆抗体-抗原斑点试验(McAb-AST)检测斯氏狸殖吸虫病人血清循环抗原。为了解其在亚临床型感染病人中的诊断价值,我们于1987年3月,在重庆南桐矿区对26例病人进行了检测。 材料和方法 一、硝化纤维滤膜 Whatman牌号。 二、单克隆抗体(McAb)四川省医学科学院     

不同血型成人胰腺用于ICA检测的比较研究

目的应用免疫组化法(ABC法)检测ICA,比较研究A型、B型、AB型与O型4种不同血型成人胰腺抗原底物对ICA检测的特异性和敏感性的影响。方法取24例1型糖尿病病人的ICA阳性不同JDF单位的血清标本和23例正常人ICA阴性血清标本,以A型、B型、AB型与O型4种不同血型成人胰腺的冰冻切片为抗原底物,应用ABC免疫组化法检测ICA。结果以O型血成人胰腺为对照,应用3例A型和B型血胰腺和2例AB型血胰腺为抗原底物进行ICA检测,24例ICA阳性血清和23例ICA阴性血清检测结果的特异性和敏感性基本一致,未见假阳性或假阴性结果。结论本文研究结果证明A型、B型或AB型血成人胰腺与O型血成人胰腺一样,可用于ICA免疫组化(ABC法)检测,不同血型人胰腺作为抗原底物不影响ICA免疫组化法检测的特异性和敏感性。     

细粒棘球蚴重组抗原B 8-kDa亚单位1对囊型包虫病的血清学诊断价值

目的通过基因工程技术获得细粒棘球蚴抗原B8-kDa亚单位1重组蛋白(rEgAgB8/1),探讨其对囊型包虫病(CE)的血清学诊断价值。方法将构建的rEgAgB8/1原核表达质粒(pET32b-rEgAgB8/1)转化至E.coli BL-21(DE3)中,用IPTG诱导表达,经亲和层析纯化获得高纯度rEgAgB8/1,以rEgAgB8/1为抗原,应用ELISA和Immuno blotting方法对31例手术确诊的囊型包虫病病人血清进行了回顾性检测与分析。结果ELISA和Immuno blotting方法检测CE病人血清阳性率均为90.3%(28/31),3例血清学检测阴性的CE病人均为初次诊断为CE及单纯性肝脏单发感染的病人;血清抗体水平随着病人棘球蚴囊数目增加而有所增加,棘球蚴囊的数目与血清抗体水平的比较用单因素方差分析有显著性差异(F=5.06,P=0.0142),1个囊与2个囊/3个囊组间血清抗体水平有显著差异,2个囊与3个囊组间差异无统计学意义。结论rEgAgB8/1重组蛋白抗原对囊型包虫病有较高的血清学诊断价值,多囊型包虫病人血清抗体水平高于单囊型包虫病人。     

登革重组抗原与登革IgG抗体反应的敏感性和特异性分析

目的对登革重组包膜蛋白(E蛋白)抗原与登革病毒IgG抗体反应的敏感性和特异性进行评估和分析。方法将登革1-4型重组E蛋白抗原包被ELISA反应板,用间接法ELISA检测登革病人及其它血清样本登革病毒IgG抗体。结果重组抗原能检测出登革病人体内IgG抗体水平和变化情况,对2004年中山登革热疫情病人恢复期血清IgG抗体检出率达100%,无一漏检;在曾流行过登革热的疫区,能检出登革病毒IgG抗体阳性血清;重组抗原与乙脑病人血清没有交叉反应;评估结果显示“登革病毒IgG抗体检测试剂”的灵敏度为95·93%,特异度为96·86%。结论登革1-4型重组E蛋白抗原对登革病毒IgG抗体具较高的敏感性和特异性,可作为“登革病毒IgG抗体酶联免疫诊断试剂盒”开发的原材料。     

重组抗原检测戊型肝炎病毒IgM抗体及其意义

用戊型肝炎病毒(HEV)重组抗原建立酶联免疫吸附试验(ELISA)，检测肝炎患者和健康供血人群血清中抗戊型肝炎病毒IgM类抗体(抗-HEV IgM)，并评价其检测意义。在与合成肽抗原比较检测的77份急性戊型肝炎患者血清中，有54份(70.1%)由重组抗原捡测抗-HEV IgM阳性。其阳性率明显高于台成酞抗原(21/77,27．3％)。15例戊型肝炎患者双份血清用重组抗原ELISA检铡，急性期血清有11份抗-HEV IgM阳性，恢复期血清仅1份阳性。抗-HEV IgG阳性的健康供血者(8人)和甲、乙、丙型肝炎患者(11例)无1例IgM抗体阳性。结果表明，抗-HEV IgM可以作为戊型肝炎病毒新近感染的标志。HEV重组抗原检铡抗-HEV IgM敏感性高，特异性强，有助于戊型肝炎病毒感染的早期诊断。     

应用酶消化法使囊虫循环抗原游离的研究

检测囊虫病循环抗原(CA)时,预先用胰酶或木瓜酶消化可以使血清免疫复合物(1C)中的CA完全游离。用3.5％聚乙二醇(PEG)沉淀血清中的1G,再以胰酶消化,在抗体过量时CA的得率可达100％。应用ELISA双抗体夹心法检测自抗体过量型至抗原过量型的系列1C模拟血清,仅抗原过量时呈阳性;囊虫病人血清阳性率为43.1％(25/58),用胰酶消化后检测,由阴性变为阳性者占22.58％(7/31)。建议用PEG分离浓缩血清中的1C,再以胰酶或木瓜酶消化,以提高血清CA阳性率。     

猪囊虫体表抗原用于 ELISA 诊断囊虫病的研究

应用猪囊尾蚴体表抗原对66例临床确诊的囊虫病人用 ELISA 进行检测,同时以囊液粗抗原作比较观察。阳性率分别为95.5%和68.2%,两者差异非常显著(P<0.005)。两种抗原对同批血清的反应强度也呈现明显差异(P<0.05)。用囊虫体表抗原和囊液粗抗原同时检测50名健康人血清,假阳性率分别为2%与12%;两种抗原与10例包虫病人血清分别有8例和4例出现交叉反应。     

应用单克隆抗体ELISA检测包虫病人循环免疫复合物的研究

应用抗包虫单克隆抗体F1建立了检测包虫病人循环免疫复合物和解离抗原的ELISA法。102例包虫病人中CIC阳性率为50％(51/102),其中手术前检出率为62.62％(33/53),手术后检出率为36.73％(18/49)。二者差异显著(P<0.005)。用PEG沉淀的免疫复合物经尿素解离后检测包虫抗原的阳性率为58.82％(60/102)。CIC与解离抗原二者累积阳性率达到86.27％(88/102)。表明在包虫病人中CIC的存在是普遍的。F1单克隆抗体ELISA法在检测包虫病人CIC和解离抗原上有极高的敏感性,因而证明F1单克隆抗体所识别的抗原表位是形成CIC的主要抗原成分。在IgG型CIC阳性的血清中解离抗原的检出率仅为48.1％(23/51)。可能是由于IgG抗体的高度亲和力,由其形成的CIC解离效率低。在IgG-CIC阴性血清中,检出解离抗原的阳性率高达72.5％(37/51),证明了在相当部分包虫病人血清中可能存在着IgE和IgM型CIC。解离抗原阳性率高表明这类CIC容易解离。在17例特异性IgG抗体阴性的包虫病人中CIC阳性者10例(58.82％),解离抗原阳性者9例(52.94％),二者累积阳性率为76.47％(13/17)。说明CIC与解离抗原的检测在IgG抗体阴性的包虫病人诊断上有实际意义。     

单克隆抗体检测囊虫病人循环抗原及其在疗效考核中的应用

用单克隆抗体致敏绵羊红细胞作反向间接血凝试验，检测７７例囊虫病人血清循环抗原，阳性率为６４．９％；３０例正常人血清的假阳性率为０；２２例华支睾吸虫病人、２４例包虫病人和１７例弓形虫病人的交叉反应率分别为４．６％、４．２％和１１．８％。结果表明，该法较为敏感、特异，且稳定可靠、简单易行，尤适于在基层医疗单位推广应用。检测经治疗１～１０个疗程囊虫病人血清中循环抗原和抗体，发现随着疗程的增加循环抗原的消失明显快于抗体，且大部分患者的循环抗原和其临床症状、体征同时消失。表明循环抗原的检测对囊虫病的诊断和疗效考核有一定的实用价值。     

免疫印渍技术诊断两种类型卫氏并殖吸虫病的初步研究

应用免疫印渍法观察比较了两种类型卫氏并殖吸虫成虫抗原多肽与卫氏并殖吸虫病人(感染3n)、华支睾吸虫病人、日本血吸虫病人和健康人血清反应的结果。3n 肺吸虫病人血清识别3n 成虫抗原中分子量为38、27、23、22、17.5和17kD 的多肽;2n 成虫多肽检测3n 病人血清,仅22kD 多肽为两型所共有。53、34和20kD 多肽为2n 型所独具。表明本法以3n(或2n)成虫蛋白为抗原,可以区别诊断两类型卫氏并殖吸虫感染。华支睾吸虫病人血清和日本血吸虫病人血清分别识别出17和16kD 多肽及22kD 多肽,提示卫氏并殖吸虫与另两种吸虫间有共同抗原成分。     

单克隆抗体检测囊虫病人循环抗原及其在疗效考核中的应用

用单克隆抗体致敏绵羊红细胞作反向间接血凝试验，检测７７例囊虫病人血清循环抗原，阳性率为６４．９％；３０例正常人血清的假阳性率为０；２２例华支睾吸虫病人、２４例包虫病人和１７例弓形虫病人的交叉反应率分别为４．６％、４．２％和１１．８％。结果表明，该法较为敏感、特异，且稳定可靠、简单易行，尤适于在基层医疗单位推广应用。检测经治疗１￣１０个疗程囊虫病人血清中循环抗原和抗体，发现随着疗程的增加循环抗原的消     

两种抗原检测弓形虫病IgM的效果

目的观察弓形虫P30重组抗原及可溶性抗原检测弓形虫病IgM的效果。方法建立斑点免疫金渗滤法（DIGFA）。采用2种抗原分别包被在两条硝酸纤维素膜（NC）上,与待检血清中的相应IgM抗体结合,通过金标记兔抗人IgM直接显色,以检测弓形虫病IgM。2种抗原的DIGFA分别检测弓形虫IgM抗体阳性、类风湿、支原体肺炎、血吸虫病人和正常人血清。结果两种抗原建立的DIGFA检测试剂共检测5种血清样本166份,其中弓形虫感染IgM抗体阳性病人血清38份,弓形虫P30DIGFA敏感性为92.1%（35/38）,可溶性抗原DIGFA敏感性为81.6%（31/38）,差异无统计学意义（P〉0.05）。正常人群对照血清63份,检测全部阴性,特异性为100%。检测类风湿病人血清30份、血吸虫病人血清25份及支原体肺炎病人血清10份,仅类风湿病人血清出现阳性交叉反应,其中弓形虫P30DIGFA阳性2例,可溶性抗原DIGFA阳性3例。结论弓形虫P30重组抗原检测弓形虫病人血清IgM的DIGFA试剂可用于临床早期或急性期弓形虫病的诊断。     

细粒棘球蚴原头节18 kU纯化抗原ELISA的建立及其对两型包虫病鉴别诊断的意义

目的用细粒棘球蚴原头节18ku纯化抗原建立ELISA诊断方法,用于两型包虫病的鉴别诊断.方法用18ku纯化抗原ELISA方法对44例泡型包虫病(AE)、70例囊型包虫病(CE)、29例囊虫病和30例健康人血清中特异性抗体进行检测,同时用羊包囊液抗原(Bu)常规ELISA法检测上述血清做比较.结果18ku纯化抗原检测不同血清的阳性率为AE90.91%、CE11.43%、囊虫病和健康人血清均为阴性;Bu抗原分别为AE97.73%、CE88.57%、囊虫病51.72%和健康人10.0%.18ku-ELISA对AE血清诊断敏感性为90.91%、特异性93.80%、阳性预示值为83.33%、阴性预示值96.80%.结论两型包虫病患者体内18ku抗体水平存在明显差异,纯化抗原18ku-ELISA可用于两型包虫病的鉴别诊断,较免疫印渍法简便快速.     

慢性非甲非乙型肝炎病人抗HCV的类型与病毒复制和临床的关系

感染HCV(丙型肝炎病毒)病人的血清内可检出对病毒结构抗原和非结构抗原的抗体。本文旨在研究慢性非甲非乙型肝炎病人血清抗HCV的类型及其与病毒复制、流行病学特点和肝病临床的关系。 1989年9月至1991年2月期间意大利Padova大学医院共收治慢性非甲非乙型肝炎172例,对这些病人作了:(1)用第一代ELISA法检测抗HCV(非结构抗原C100-3);(2)用第二代ELISA法检测抗HCV(结     

348例HIV/AIDS病人血清隐球菌抗原筛查的结果分析

目的分析在艾滋病病毒(HIV)感染者/艾滋病(AIDS)病人(简称HIV/AIDS病人)中,应用血清隐球菌抗原筛查隐球菌感染的结果,为开展相关研究提供依据。方法对2012年10月至2013年7月,在贵阳市第五人民医院住院的348例HIV/AIDS病人进行血清隐球菌抗原检查,同时检查病人的CD+4T淋巴细胞(简称CD4细胞)计数;对血清隐球菌抗原阳性病人进行血培养、脑脊液(CSF)隐球菌抗原检查、墨汁染色及培养。结果 348例病人中,男256例,女92例,年龄19~77岁,平均(40.50±13.05)岁。血清隐球菌抗原阳性34例,阳性率9.77%(34/348),CD4细胞计数为0~1097个/mm3,中位数56个/mm3。CD4细胞计数≤50个/mm3组146例,50个/mm3组202例。CD4细胞计数≤50个/mm3和50个/mm3组病人阳性例数分别为24例和10例,阳性率为16.44%(24/146)和4.95%(10/202),两组间差异有统计学意义(u=3.56,P0.01)。血清隐球菌抗原阳性病人血培养阳性3例,CSF隐球菌抗原阳性27例,墨汁染色阳性22例,CSF培养阳性15例;34例病人中最后确认隐球菌感染33例。所有诊断隐球菌感染的病人血清隐球菌抗原均为阳性。结论 HIV/AIDS病人血清隐球菌抗原阳性率高,血清隐球菌抗原筛查有助于及时诊断隐球菌病,特别是CD4细胞计数≤50个/mm3的病人,推荐普遍检查。     

新疆地区各型病毒性肝炎中的HGV感染及临床初步观察

为了解新疆各型病毒性肝炎病人感染庚型肝炎病毒情况,我们用合成多肽抗原制备的试剂检测了78例各型病毒性肝炎患者血清和5例ALT升高的产妇及其所生新生儿血清抗HGV,并对HGV感染者的部分临床表现初步观察,检测结果表明,在34例非甲～戊型肝炎中检出抗HGV阳性12例(37.5％),17例乙型肝炎中检出5例(29.4％),29例丙型肝炎中检出11例(37.9％),2例ALT升高产妇及其所生新生儿抗HGV阳性。     

结核分枝杆菌特异性38kD多肽抗原提纯及其血清学诊断价值的研究

目的提纯结核分枝杆菌特异38kD多肽抗原,建立基于38kD多肽抗原(P38)的斑点金免疫渗滤法(DIGFA)检测结核病人血清标本,评价38kD多肽用于结核病血清学诊断抗原的实际价值。方法采用超声破碎、SDS-PAGE、切胶浸泡回收法提取结核分枝杆菌H37Rv株的38kD多肽抗原。建立以38kD多肽为包被抗原的DIGFA(P38-DIGFA),并检测147例临床确诊的活动性肺结核病人血清标本。同时建立以结核分枝杆菌脂阿拉伯甘露糖(LAM)为包被抗原的DIGFA(LAM-DIGFA)作为对照。结果结核分枝杆菌H37Rv株38kD多肽抗原提取物经SDS-PAGE后仅显示为单一的条带,并可与临床确诊的肺结核病人阳性血清标本呈阳性免疫印迹反应。P38-DIGFA和LAM-DIGFA检测肺结核病人血清标本的总阳性率分别为84.4%(124/147)和76.2%(112/147),其中59份痰涂片及培养均阳性的肺结核病人血清标本P38-DIGFA和LAM-DIGFA阳性率分别为88.1%(52/59)和84.7%(50/59),88份痰涂片及培养均阴性的肺结核病人血清标本P38-DIGFA和LAM-DIGFA阳性率分别为81.8%(72/88)和70.5%(62/88),60例气管炎病人血清标本阳性率分别为13.3%(8/60)和6.7%(4/60),120例健康人血清标本阳性率分别为5.8%(7/120)和5.0%(6/120)。各P38-DIGFA和LAM-DIGFA检测阳性率之间均无显著性差异。结论结核分枝杆菌38kD多肽作为抗原用于结核病血清学检测时,其敏感性和特异性与LAM相似,可应用于研发结核病血清学诊断试剂盒。     

肺结核病人血清IgG抗体临床价值的研究

本文应用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定42例肺结核病人血清IgG抗体,报道如下。检测方法采用双盲法检测,H_(37)Ra菌株超声提取菌体蛋白做抗原。用ELISA法测定血清IgG抗     

斑点免疫金渗滤法检测弓形虫感染效果

目的建立一种简捷、准确的弓形虫感染检测方法。方法将弓形虫P30抗原包被在硝酸纤维素膜上,与待检血清中的相应抗体结合,通过金标记Protein-A蛋白直接显色。结果用该试剂检测5种血清样本共221份,其中弓形虫感染病人血清58份,敏感性为96.55%(56/58)。正常人群对照血清68份,检测结果全部为阴性,特异性为100%。检测25份类风湿病人血清、18份血吸虫病人血清及22份肺炎支原体病人血清,仅有1例类风湿病人血清出现阳性交叉反应。结论用弓形虫P30为抗原,以金标记Protein-A蛋白为探针显色系统的斑点免疫金渗滤法,对检测弓形虫病人血清抗体具有较高的敏感性和特异性,且操作简单、快速。