内皮型一氧化氮合酶基因多态性与心血管疾病关系

一氧化氮(nitric oxide,NO)是生物体内重要的信使分子和效应分子,在心血管系统里,NO具有扩张血管、调节血压、抑制血小板聚集、自细胞黏附和抑制血管平滑肌细胞增殖等多种生物学作用.NO由内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)催化左旋精氨酸(L-精氨酸,L-argininine,L-Arg)和分子氧生成,eNOS是其生物合成的关键酶.eNOS基因突变可能影响eNOS蛋白的功能和活性,对NO的生成有重要影响[1-3].本研究对eNOS基因多态性与心血管疾病研究进展综述如下.     

内皮型一氧化氮合酶基因多态性与神经管畸形的关系

目的:探讨内皮型一氧化氮合酶基因第4内含子27bp长度的可变数目串联重复序列(VNTR)4a/bVNTR基因多态性和第7外显子单核苷酸多态性G894T与神经管畸形的关系。方法:提取2008年1月～2009年9月间生育神经管畸形儿的30名妇女和同期生育正常儿的60名健康妇女基因组DNA,用PCR-RFLP方法测定G894T和4a/bVNTR的多态性。结果:①eNOS基因G894T位点在本次研究中有3种基因型,即野生型GG、纯合突变型TT和杂合突变型GT。其基因型频率(GG、GT、TT)在病例组中的构成分别为46.67%、40.00%、13.33%,在对照组中的构成分别为73.33%、21.67%、5.00%,两组间的差异有统计学意义(χ2=6.413,P0.05);其等位基因G的频率在病例组和对照组中的构成分别为66.7%和84.2%,T等位基因的频率分别为33.3%和15.8%,差异有统计学意义(χ2=7.218,P0.01);②eNOS基因4a/bVNTR位点在本次研究中有两种基因型,即bb型和ab型。其基因型频率(bb、ab)在病例组中的构成分别为63.33%和36.67%,在对照组中的分布频率分别为80.00%和20.00%,在两组中的差异无统计学意义(P0.05);其等位基因b的频率在病例组和对照组中的构成分别为81.7%和90.0%,a等位基因在病例组和对照组中的分布频率分别为18.3%和10.0%,差异无统计学意义(P0.05);结论:母亲eNOS基因894位点G→T突变是出生神经管畸形儿的独立遗传学因素,而第4内含子27bpVNTR基因突变不足以构成导致神经管畸形发生的独立遗传学因素。     

内皮型一氧化氮合酶基因多态性与冠心病关系

目的探讨内皮型一氧化氮合酶（eNOS）基因内含子4可变串联重复序列（VNTR）多态性与早发冠心病的关系。方法以医院为基础的病例对照研究，选择新诊断的冠心病患者为研究对象。男性≤55岁及女性≤65岁患冠心病为早发冠心病，以188例早发冠心病患者为病例组，315例迟发冠心病患者为对照组。应用聚合酶链反应（PCR）技术检测eNOS基因内含子4VNTR多态性。结果eNOS基因内含子4VNTRc／c、c／b、b／b、b／a、a／a基因型频率，早发冠心病组分别为0．53％，0．00％。81．38％，16．49％，1．60％；迟发冠心病组分别是0．00％。0．32％，77．46％，20．32％，1．90％。c／c＋c／b＋b／b与b／a＋a／a基因型在2组之间分布差异无统计学意义（P=0．268，OR=1．294，95％CI=0．8202．043）。c、b、a等位基因频率。早发冠心病组分别是0．53％。89．63％，9．84％；迟发冠心病组分别是0．16％。87．78％。12．06％。c＋b与a的等位基因频率在2组间分布差异无统计学意义（P=0．280，OR=1.257,95％CI=0．8301．904）。在n=0．05显著性水平上，用多元逐步非条件Logistic回归分析调整性别、吸烟、饮酒、收缩压、体质指数、腰臀比、甘油三酯和总胆固醇后，eNOS基因内含子4VNTR多态性与早发冠心病也无显著相关（P=0．427。OR=0．819，95％CI=0．500-1．341）。结论eNOS基因内含子4VNTR多态性可能不是早发冠心病发病的危险因素。     

胃癌易感性与诱导型一氧化氮合酶基因多态性关系的研究

目的 探讨中国人诱导型一氧化氮合酶（iNOS）基因多态性与胃癌易感性的关系。方法 以社区为基础的病例对照研究。病例经胃镜及病理确诊，有效分析样本包括肠型胃癌93例，胃贲门癌50例，对照246人。结果i NOS基因第16外显子存在C→T多态性（产生Tsp509I内切酶的识别位点），使编码的氨基酸由丝氨酸（Ser）改变为亮氨酸（Leu），对照人群T等位基因频率为13.21%，单独存在C→T多态性与肠型胃癌、胃贲门癌易感性增加无统计学关联，但与吸烟因素同时存在，对肠型胃癌、胃贲门癌产生明显的2型超相乘交互作用；与缺乏CagA抗体同时存在，对胃贲门癌产生明显的相加交互作用。结论 iNOS基因C→T多态性可能是胃癌的易感基因，特别与吸烟、缺乏幽门螺杆菌CagA抗体的肠型胃癌、胃贲门癌发生密切相关。     

ACE基因多态性与缺血性脑卒中易感性关系

目的 探讨ACE基因多态性与缺血性脑卒中的相关性。方法 采用回顾性病例-对照研究的方式,选取166例脑卒中患者与120名正常健康人群,采用聚合酶链反应（PCR）与直接测序法对其ACE基因进行基因分型。结果 PCR分型结果显示,病例组中ACE基因I/D分型中,D/D型、I/D型与I/I型频率分别为71.1%、24.7%与4.2%;而对照组D/D型、I/D型与I/I型频率分别为50.8%、41.7%与7.5%,2组差异有统计学意义;D/D型基因携带者患缺血性脑卒中的风险是I/D型与I/I型基因携带者的2.38倍（95%CI=1.463～3.872）和2.79倍（95%CI=1.914～4.167）。结论 携带D/D型基因的人群患缺血性脑卒中风险明显高于携带I等位基因的人群。     

重庆市部分高血压患者一氧化氮合酶基因G894T多态性与相关危险因素的研究

目的 了解重庆市部分高血压病患者内皮一氧化氮合酶(eNOS)基因G894T多态性和高血压相关危险因素的关系。方法 高血压患者226例,设对照组。取血标本提取DNA,用聚合酶链反应(PCR)方法扩增目的基因,用限制性内切酶(Ban Ⅱ)酶切PCR产物用于基因分型,同时按照流行病学方法制作规范的调查表,调查内容包括体重指数、膳食、精神心理、疾病家族史等方面情况。结果 eNOS各基因型(GG、GT或TT)在高血压组与对照组中的分布差异无显著性(P>0.05),但在高血压相关的危险因素中(钠盐摄入、性格、打鼾等)分布有差别,T等位基因携带者高血压相关危险因素较多。logistic回归分析显示894T等位基因与高血压发病无关联。结论 eNOS基因G894T多态性在重庆市高血压发病中不起直接重要作用,但可能通过影响相关危险因素参与高血压发病机制。     

CLOCK基因多态性与汉族人群缺血性脑卒中易感性关系研究

目的 探讨CLOCK基因多态性与北方汉族人群缺血性脑卒中易感性的关系.方法 采用荧光定量PCR的TaqMan探针方法检测357例缺血性脑卒中首发病例及345名健康对照的CLOCK基因(rs11133391)多态性,用logistic回归分析计算各基因型与缺血性脑卒中的相关性.结果 CLOCK基因rs11133391多态性中病例组和对照组中基因型分布差异有统计学意义(x2=6.50,P=O.04).两组T等位基因频率分别为39.36％和33.91％,差异有统计学意义(x2=4.48,P=0.03);以CC基因型为参照,病例组携带CT基因型是对照组发生缺血性脑卒中危险的1.50倍,95％可信区间为1.09 ～2.08;多因素Logistic回归分析发现rs11133391多态性C＞T突变仍为缺血性脑卒中的危险因素(OR=1.51,P=0.00).结论 rs11133391基因多态性与汉族人群缺血性脑卒中的易感性相关,T等位基因可能是其发生的遗传易感标记.这一结论有待于进一步通过不同种族人群的关联研究以及功能学研究的证实.     

东乡族居民内皮型一氧化氮合酶基因G894T多态性和食盐量与原发性高血压的关系

目的探讨内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因G894T多态性和食盐量与东乡族居民原发性高血压(EH)的关系。方法于2007年6月—2008年3月在甘肃省东乡自治县开展调查,选取年龄在40～70岁之间、未服用过降压药物的东乡族居民为研究对象,其中高血压患者349例(EH组),正常血压者214例(NT组)。应用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态分析法(PCR-RLFP)对eNOS第7外显子894位碱基进行基因多态性分型;测定血浆胆固醇、甘油三酯、空腹血糖水平和体质指数,并调查其半年内食盐摄入量的平均水平;基因型频率、等位基因频率和组间计数资料间比较采用χ2检验;应用秩和检验结合趋势性检验分析G→T变异和食盐量与高血压分级的相关性。结果 EH组的平均食盐量高于NT组(P=0.003),EH组GT+TT基因型和T等位基因频率均高于NT组(分别为P=0.036,P=0.008)。在EH组中,T等位基因的变异对高血压的分级有一定影响(P=0.039),食盐量与高血压的分级呈正相关(rs=0.261,P=0.000)。结论 eNOS基因第7外显子G894T多态性的T等位基因影响东乡族EH的患病情况,并与EH的分级存在某种关联;同时EH的患病情况和分级也受高盐饮食的影响。     

内皮型一氧化氮合酶基因G894T突变与冠心病危险因素的关系

内皮型一氧化氮合酶 (eNOS)基因G894T突变与冠心病患病风险有关[1 5 ]。我们应用聚合酶链反应 限制性片段长度多态性 (PCR RFLP)分析 ,检测了一组浙江地区冠心病患者eNOS基因G894T突变 ,并调查冠心病经典危险因素 ,旨在探讨eNOS基因G 894T突变和冠心病危险因素的关系。1.对象与方法 :( 1)研究对象 :冠心病患者 10 6例 ,选自 2 0 0 0年 4月至2 0 0 1年 1月浙江大学医学院附属第二医院心内科病房。病例符合 1979年WHO关于缺血性心脏病的命名和诊断标准。本组冠心病患者年龄为 ( 65± 10 )岁 ( 3 9～ 86岁 ) ;男 74例 ,女3 2例 ;其…     

磷酸二酯酶4D基因多态性与缺血性脑卒中的关系

目的 探讨磷酸二酯酶（PDE）4D基因多态性与缺血性脑卒中的关系。方法选取121例缺血性脑卒中患者（病例组）和130例健康对照者（对照组），应用等位基因特异性聚合酶链反应（ASPCR）技术筛查PDE4D基因的单碱基多态性（SNP）45和SNP41，应用聚合酶链反应（PCR）结合聚丙烯酰胺凝胶电泳技术检测微卫星标记AC008818-1。对资料编码后输入SAS6．12统计软件进行分析。结果病例组中发现1例SNP45和SNP41的双杂合状态，病例组和对照组SNP45、SNP41、AC008818-1多态性比较差异均无统计学意义。结论PDE4D基因SNP45、SNP41和AC008818-1多态性与缺血性脑卒中无关。     

内皮型一氧化氮合成酶基因多态性与早产儿脑病的相关性研究

目的 研究AGT M235T、ACE I/D、eNOS G894T和eNOS T-786C单核苷酸多态性和早产儿脑病发生的关系,为全面评估患儿病情提供参考。方法 选取2014年6月-2017年9月于新乡市中心医院新生儿重症监护室就诊的胎龄<34周的早产儿为研究对象,进行头颅超声和核磁共振影像学检查和基因多态性测定,回顾性分析其临床资料,研究AGT M235T、ACE I/D、eNOS G894T和eNOS T-786C基因多态性和早产儿脑病发生的关系。结果 eNOS T-786C的C等位基因的表达是中重度早产儿脑病的独立危险因素(OR＝3.206,95%CI:1.850~7.652)。结论 早产儿脑病存在基因易感性,检测eNOS基因多态性有助于评估早产儿预后。     

热休克蛋白70-1基因多态性与缺血性脑卒中易感性的前期研究

目的探讨热休克蛋白70-1(HSP70-1)基因多态性与缺血性脑卒中的关系。方法采用1∶1配比病例-对照研究设计,选择深圳市两家综合性医院的116例缺血性脑卒中患者为病例组,同时选择年龄、性别匹配116例健康者作为对照组。采用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)方法检测HSP70-1多态性,同时按照流行病学方法设计调查表进行问卷调查。结果HSP70-1基因型及等位基因频率在两组中的分布差异有统计学意义(P<0.05),病例组b2等位基因频率(36.64%)明显高于对照组(21.99%)(P<0.001);条件logistic回归分析显示,HSP70、高血压和吸烟是缺血性脑卒中发病的独立危险因素,OR值分别为5.41、2.79和8.17,饮茶则为缺血性脑卒中的保护性因素OR值为0.18。结论HSP70-1突变基因型与缺血性脑卒中易感性有关。     

ALOX5AP基因多态性与缺血性脑卒中关系

目的探讨5-脂氧合酶激活蛋白基因(ALOX5AP)多态性与缺血性脑卒中(IS)及其亚型关联性。方法采用表型不一致同胞对研究设计,分析5个ALOX5AP基因单核苷酸多态性(SNP)位点(rs10507391、rs9551963、rs12429692、rs4293222、rs4360791)与IS及其亚型的关联关系。用广义估计方程(GEE)进行多因素分析,以家系为基础的关联检验(FBAT)进行关联分析。结果对240个IS患病家系所组成的446对表型不一致同胞对进行GEE分析,发现糖尿病、高血压及舒张压、甘油三酯和高密度脂蛋白胆固醇水平与IS的发病风险存在相关(P<0.05);FBAT分析发现rs9551963A及rs4360791A等位基因在显性遗传模型下与IS(Z=-2.50、-2.52,P<0.05)、大动脉型脑卒中(Z=-2.16、-2.27,P<0.05)以及糖尿病(Z=-2.33、-2.51,P<0.05)存在关联,在加性模型下与小动脉闭塞型脑卒中(Z=-2.38、2.08,P<0.05)及高血脂(Z=-2.63、2.73,P<0.05)存在关联,在显性模型下,rs12429692A等位基因与小动脉闭塞型脑卒中存在显著关联(Z=2.27,P=0.02),rs4360791A等位基因与高血压存在显著关联(Z=2.19,P=0.03)。结论ALOX5AP基因多态性与缺血性脑卒中存在关联关系。     

乙醇对小鼠胚胎内皮型一氧化氮合酶表达影响

目的 探讨乙醇对胚胎中枢神经系统内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因和蛋白表达的影响.方法 应用器官发生期小鼠全胚胎培养模型,8.5d小鼠胚胎以1.0,2.0,4.0和8.0mg/ml乙醇体外染毒48h后,对胚胎中枢神经系统发育进行评分,并以半定量RT-PCR和蛋白印迹(westernblot)方法检测胚胎中脑组织内皮型一氧化氮合酶基因和蛋白表达.结果 随乙醇染毒剂量增加,胚胎头长逐渐减小,中枢神经系统的前脑、中脑和后脑发育评分均逐渐降低,畸形主要表现为神经管闭合不全.乙醇抑制胚胎中脑组织内皮型一氧化氮合酶基因和蛋白表达.结论 乙醇对中枢神经系统的致畸作用可能与诱导胚胎组织内皮型一氧化氮合酶过量表达、造成组织NO含量过多,进而对发育中的胚胎组织造成氧化损伤有关.     

脂蛋白脂酶D8S282等位基因与缺血性脑卒中关系

目的探讨脂蛋白脂酶基因D8S282多态性与缺血性脑卒中关系。方法采用1:1配比病例对照研究设计,选择广东省深圳市2家综合性医院经核磁共振或者CT确诊的缺血性脑卒中病例361例,同时选择年龄、性别匹配的对照361名健康者作为对照组;采用Beckman遗传分析仪检测其变异,多因素Logistic回归估计其危险度及95%CI。结果在病例组和对照组脂蛋白脂酶基因的D8S282位点19个GT重复等位基因在对照组中46名,占6.37%,高于病例组23例,占3.19%,差异有统计学意义(P=0.005);进一步调整混杂危险因素,19个GT重复仍然是缺血性脑卒中的保护因素,OR=0.538。结论脂蛋白脂酶D8S282等位基因与缺血性脑卒中的发病相关。     

北京市朝阳区居民传染病漏报调查分析

为进一步了解和掌握北京市朝阳区居民传染病报告的现状,推算出比较接近实际的发病水平,于2008年开展了居民传染病漏报调查.