磷对慢性肾衰鼠甲状旁腺增生的独立作用和膦甲酸钠干预的研究

目的:探讨磷对甲状旁腺(PTG)增生的独立作用;利用磷钠转运体(NPCs)的抑制剂膦甲酸钠(PFA)探讨PTG细胞感受胞外磷的可能作用机制。方法:配制高磷(含磷1.2％,钙1.6％)、低磷(含磷0.2％,钙0.5％)大鼠饲料。6组大鼠:①低磷假手术组(NLP);②低磷慢性肾衰组(ULP);③高磷假手术组(NHP);④高磷慢性肾衰组(UHP);⑤UHP+PFA组,每日腹腔注射PFA150 mg/kg体重;⑥UHP+生理盐水(NaCl)组,每日腹腔注射与PFA等体积的生理盐水。共喂饲14天。第2、7、14天分别检测血磷、离子钙(iCa)、肌酐(Cr)、血清全段甲状旁腺激素(iPTH),并在第14天测血1,25-(OH)2D3;免疫组化检测PTG核增殖抗原(PCNA)。结果:各组1,25-(OH)2D3、iCa均差异无显著性(P>0.05)。UHP组血磷、iPTH明显高于ULP组(P<0.05)。UHP+PFA组iPTH明显低于UHP+NaCl组(P<0.05),第14天明显低于UHP组(P<0.05),3组间血磷无统计学差别。UHP组PCNA表达量0.33±0.07明显大于ULP组0,22±0.06(P<0.05),UHP+PFA组PCNA 0.28 4±0.06低于UHP组(P<0.05),UHP+NaCl组PCNA 0.32+0.07与UHP组差异无显著性。结论:不依赖于血iCa、1,25-(OH)2D3变化,高血磷促进、低血磷抑制大鼠PTG增生和PTH分泌。磷可能通过NPCs作用于PTG细胞,PFA有治疗前景。     

密骨胶囊对去卵巢骨质疏松大鼠体内25(OH)D3和1,25(OH)2D3含量及肾脏VDR mRNA表达的影响

目的 研究密骨胶囊对去卵巢骨质疏松大鼠体内两个骨代谢指标25-羟基维生素D3[25(OH)D3]和1,25-二羟基维生素D3[1,25(OH)2D3]含量及肾脏VDR mRNA表达的影响.方法 72只8月龄健康雌性SD大鼠随机分为6组,即假手术组,模型组,对照药物活性维生素D3组以及密骨胶囊小、中、大剂量组,每组12只,治疗3个月后全部处死,用双能X线骨密度仪及生物力学技术评估模型的骨密度(BMD)及骨质量,采用ELISA法检测血清和肝、肾组织中25(OH)D3和1,25(OH)2D3含量,用FQ-PCR法检测肾脏组织中VDR mRNA的表达情况.结果 ①模型组大鼠股骨头及粗隆部的BMD及骨生物力学指标(最大载荷和最大压应变)均明显下降(P＜0.05或P＜0 01);②使用密骨胶囊大、中剂量组与模型组比较,血清和肝脏、肾脏组织中25(OH)D3和1,25(OH)2D3的含量明显升高(P＜0.05或P＜0.01),与活性维生素D3组比较差异无统计学意义;③模型组大鼠肾脏VDR mRNA的表达低于密骨胶囊治疗组部分大鼠及假手术组(P＜0.05或P＜0.01).结论 密骨胶囊能促进体内VDR mRNA的表达,提高体内25(OH)D3和1,25(OH)2D3含量,从而激活骨代谢,增强骨质骨量.提示适当补充密骨胶囊可有效的防治绝经后骨质疏松.     

罗钙全在慢性肾衰非透析患者中的应用效果观察

目的 :观察 1 2 5 (OH) 2 D3 治疗合并继发性甲状旁腺功能亢进 (Secondaryhyperarathyroidism ,SHPT)的慢性肾功能衰竭(Chronicrenalfailure ,CRF)非透析患者的临床疗效及安全性。方法 :4 3例合并SHPT的CRF非透析患者随机分为两组 ,对照组以碳酸钙 1gTid口服 +限磷饮食 ,治疗组在对照组治疗方案基础上加 1 2 5 (OH) 2 D3 0 2 5 μgQd ,共观察 3个月 ,治疗前后均观察临床症状 ,测全段甲状旁腺素 (iPTH)、碱性磷酸酶 (AKP)、血钙 (Ca)、血磷 (P)、血肌酐 (Cr)、血尿素氮 (BuN) ,同时观察 1 2 5(OH) 2 D3 的副作用。结果 :治疗 3个月后治疗组血钙明显升高 (P <0 0 5 ) ,血磷、AKP、iPTH明显下降 (P <0 0 5 ) ,对照组上述指标无显著变化 ,治疗组总有效率显著大于对照组 (P <0 0 5 ) ,且仅少数出现较严重高钙、高磷血症。结论 :1 2 5 (OH) 2 D3 治疗合并SHPT的CRF非透析患者疗效显著 ,无严重副作用 ,使用安全 ,值得推广     

高磷饮食对5/6肾切除大鼠继发性甲状旁腺功能亢进及肾脏纤维化的影响及金雀异黄素干预作用

目的 观察高磷饮食对5/6肾切除大鼠继发性甲状旁腺功能亢进、肾脏纤维化的影响及金雀异黄素的干预作用.方法 8～10周龄雄性Sprague-Dawley大鼠24只,体重200～250 g,随机分为4组,每组6只:假手术正常磷饮食(Sham+NP组),5/6肾切除正常磷饮食组(STNx+NP组),5/6肾切除高磷饮食组(STNx+HP组),5/6肾切除高磷饮食+金雀异黄素灌胃组(STNx+HP+Gen组).高磷饮食配方:磷1.2%,钙1.6%,维生索D1 U/kg.正常磷饮食配方:磷0.6%,钙0.6%,维生素D1 U/kg.5/6肾脏切除分两步进行.造模术后第4、8、12、16周,检测血清肌酐(SCr)、磷、钙、1,25(OH)2D3、全段甲状旁腺激素(iPTH)水平.特定饮食结束时,处死大鼠,取肾脏组织,石蜡切片行苏木精-伊红(H-E)染色,进行病理积分.结果 Sham+NP组各项指标在实验过程中均无明显变化(P值均>0.05).STNx+NP组,STNx+HP组、STNx+HP+Gen组SCr、磷、iPTH的水平均随着特定饮食喂养时间的延长逐渐升高.16周时与4周时的差异均有统计学意义(P值均<0.01).16周时,STNx+HP组、STNx+HP+Gen组的SCr,磷、iPTH与STNx+NP组的差异均有统计学意义(P值均<0.01).而4组不同时间钙、1,25(OH)2D3的水平均无明显改变(P值均>0.05).Sham+NP组、STNx+NP组,STNx+HP组和STNx+HP+Gen组的肾小球硬化指数分别为0、1.01±0.02,1.83±0.03、1.51±0.03,STNx+HP组和STNx+HP+Gen组显著高于STNx+NP组(P值均<0.01),STNx+HP组显著高于STNx+HP+Gen组(P<0.01).结论 高磷饮食可促进5/6肾大部切除大鼠甲状旁腺功能亢进的发生,并加剧其肾功能恶化,金雀异黄素可部分减轻其肾脏毒性作用,改善甲状旁腺功能亢进.     

1,25（OH）2D3对血管紧张素Ⅱ诱导的肾小管上皮细胞转化的抑制作用

目的探讨1,25(OH)2D3对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的肾小管上皮细胞转化起始过程的抑制作用,为临床肾间质纤维化的防治提供理论依据。方法分离SD大鼠肾小管上皮细胞,将其分为对照组、AngⅡ诱导组(AngⅡ终浓度10-8mol/L)以及AngⅡ(10-8mol/L)+1,25(OH)2D3干预组[1,25(OH)2D3终浓度分别为10-6mol/L、10-7mol/L、10-8mol/L],培养48 h后收集各组细胞。利用酶联免疫吸附实验检测ColⅠ和FN;Real-time RT-PCR检测肾小管上皮细胞TGF-β1mRNA表达;Western Blot检测肾小管上皮细胞TGF-β1蛋白表达。结果实验48 h后,AngⅡ组TGF-β1mRNA表达、蛋白表达及培养上清中ColⅠ和FN浓度均较对照组显著增高,AngⅡ+10-6mol/L1,25(OH)2D3组TGF-β1mRNA表达、蛋白表达较对照组明显增高,但细胞培养上清中ColⅠ和FN浓度仅略有增高,差异无显著性,随着1,25(OH)2D3浓度的降低(10-7mol/L,10-8mol/L),TGF-β1mRNA表达、蛋白表达,细胞培养上清中ColⅠ和FN浓度也随之显著增高(P<0.05)。结论 1,25(OH)2VD3可以部分抑制AngⅡ诱导的肾小管上皮细胞EMT,其机制可能是通过抑制肾小管上皮细胞TGF-β1基因与蛋白表达、减少肾小管上皮细胞ColⅠ和FN分泌实现的。     

甲状旁腺素和不同钙磷饮食对活性维生素D合成的影响

目的:研究甲状旁腺素(PTH)和不同钙磷饮食对活性维生素D合成的影响?方法:使用正常?高钙低磷或低钙低磷饮食喂养2月龄野生型(WT)和PTH基因敲除纯合子(PTH-/-)小鼠4周,测定血清钙?磷?PTH和1,25-二羟基维生素D3[1,25(OH)2D3]水平,并利用RT-PCR方法检测肾1α-羟化酶[1α(OH)ase]基因表达水平?结果:正常饮食PTH-/-小鼠表现为低钙血症?高磷血症,肾1α(OH)ase基因表达上调,而血清1,25(OH)2D3水平则降低?与正常饮食相同基因型小鼠相比,高钙低磷饮食WT和PTH-/-小鼠血清PTH和1,25(OH)2D3水平降低,肾1α(OH)ase基因表达下调?高钙低磷饮食矫正了PTH-/-小鼠的低钙和高磷血症,肾1α(OH)ase基因表达仍高于WT小鼠,而血清1,25(OH)2D3水平与WT小鼠无差异?与正常饮食相同基因型小鼠相比,低钙低磷饮食WT和PTH-/-小鼠血清PTH和1,25(OH)2D3水平明显升高,肾1α(OH)ase基因表达明显上调?低钙低磷饮食PTH-/-小鼠血清钙严重降低,血清磷仍然较高,肾1α(OH)ase基因表达和血清1,25(OH)2D3水平均较WT小鼠为低?结论:钙磷饮食能够通过PTH依赖性和PTH非依赖性的方式调节活性维生素D的合成?     

胃泌素对大鼠小肠上皮1,25（OH）2D3膜相关快速反应类固醇结合蛋白的影响

目的探讨胃泌素对大鼠小肠上皮1,25(OH)2D3膜相关快速反应类固醇结合蛋白(1,25D3-MARRS结合蛋白)表达的影响。方法应用免疫组织化学、RT-PCR和免疫印迹法,检测胃泌素、奥美拉唑处理后的SD大鼠小肠中1,25D3-MARRS结合蛋白的表达情况与对照组的差异,并测大鼠血清中钙、磷离子的浓度变化。结果大鼠小肠上皮细胞中1,25D3-MARRS结合蛋白分布于胞核、胞浆和胞膜。胃泌素、奥美拉唑均引起大鼠小肠组织1,25D3-MARRS结合蛋白的mRNA和蛋白两个水平表达增高(P<0.05),但其作为一个促小肠钙磷吸收的蛋白,无明显增高血清钙磷浓度的作用(P>0.05)。结论 1,25D3-MARRS结合蛋白作为一个广泛分布的多功能蛋白,受胃泌素的调节,在消化道相关疾病具有很高的研究价值及临床应用前景。     

1,25-二羟维生素D3对胃癌细胞增殖和TNF-α表达的影响

目的研究1,25-二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]对胃癌SGC-7901细胞增殖和细胞周期的影响,以及对细胞因子TNF-αmRNA及蛋白表达的影响。方法用不同浓度1,25(OH)2D3处理胃癌SGC-7901细胞,采用MTT法检测细胞增殖情况;流式细胞仪检测细胞生长周期;RT-PCR和Western blotting分别检测TNF-α在mRNA和蛋白水平的表达情况。结果 1,25(OH)2D3对胃癌SGC-7901细胞增殖有抑制作用(P<0.05),并呈时间剂量依赖性。经1,25(OH)2D3处理72 h后细胞周期出现向G0/G1期移行的动力学改变(F=9.81,P<0.05)。TNF-αmRNA及蛋白的表达水平均呈剂量依赖性减少(P<0.05)。结论 1,25(OH)2D3可抑制胃癌细胞增殖,且与其抑制TNF-α的表达可能有相关性。     

补肾中药复方和尼尔雌醇对卵巢摘除大鼠骨丢失及血1,25(OH)2D水平的影响

 目的 以卵巢摘除法建立大鼠雌激素缺乏型骨质疏松模型,研究补肾中药复方和尼尔雌醇对卵巢摘除大鼠骨丢失和维生素D代谢的影响,探讨血清1,25(OH)2D水平与骨量丢失的相关性。方法 手术摘除雌性大鼠双侧卵巢,以子宫重、子宫重/体重、子宫内膜厚度和血E2判断卵巢摘除是否完整;以骨干重、灰重、骨密度等骨量指标和骨组织形态计量、骨代谢生化标志物等鉴定骨质疏松模型建立。将实验大鼠随机分为假手术组(SHAM)、卵巢摘除组(OVX)、卵巢摘除尼尔雌醇干预组(OVX＋CEE3)和卵巢摘除补肾中药干预组(OVX＋TCM),每组10只。手术后35天开始灌服药物,给药13周后处死,检测上述指标和血25(OH)D、1,25(OH)2D、Ca、P等指标,观察尼尔雌醇和补肾中药对切卵大鼠骨量和骨结构的改善作用。结果 OVX大鼠双侧卵巢摘除完整,雌激素缺乏诱发骨质疏松指标明显;OVX组血清钙较SHAM组明显降低(P<0.01),给予尼尔雌醇干预后血清钙明显恢复(P<0.01),而补肾中药组血清钙仍在低水平。各组血25(OH)D 水平并无明显改变,而OVX组血清1,25(OH)2D水平明显升高,较SHAM组［(38.45±10.99)nmol/L］增加64.1％(P<0.01);OVX+CEE3组血清1,25(OH)2D水平明显回落,较OVX组降低60.8％(P<0.01);OVX+TCM组血清1,25(OH)2D仍处于OVX组水平,明显高于SHAM组(P<0.01)。结论 与尼尔雌醇比较,补肾中药复方改善卵巢摘除大鼠骨量和骨结构的作用不明显,可能与其未有效改善血清低钙和代偿性高1,25(OH)2D水平有关。     

血液透析患者FGF23水平与钙磷代谢的相关性分析

目的探讨血液透析患者成纤维细胞生长因子23(fibroblast growth factor 23,FGF23)水平与钙磷代谢的相关性。方法选取90例维持性血液透析患者及60例健康体检者作为研究对象,根据甲状旁腺激素(parathyroid hormone,PTH)水平,将维持性血液透析患者分为A组(PTH<300pg/mL)、B组(PTH 300~500pg/mL)、C组(PTH>500pg/mL),检测和比较各组血清FGF23、1,25-二羟活性维生素D3[1,25-(OH)2D3]、PTH、血钙、血磷、碱性磷酸酶、白蛋白等指标浓度。结果与健康体检者相比,血液透析患者logFGF23水平明显升高,log1,25-(OH)2D3水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);与A组相比,C组logFGF23水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);logFGF23水平与logPTH、血磷、logALP呈正相关性,与log1,25-(OH)2D3呈负相关性。结论血液透析患者血清FGF23水平明显升高,与PTH、血磷、ALP呈正相关,与1,25-(OH)2D3呈负相关。     

糖尿病肾病Vit D缺乏与颈动脉内中膜厚度及冠脉钙化相关关系研究

目的了解糖尿病肾病(DN)患者血清维生素D不足与缺乏的发生情况,探讨其与颈动脉内中膜厚度(IMT)、冠脉钙化之间的相关关系。方法采用放射免疫分析法检测151例DN患者空腹血清25-羟胆骨化醇〔25(OH)D3〕、1,25-二羟胆骨化醇〔1,25(OH)2D3〕、全段甲状旁腺激素(iPTH)浓度,根据25(OH)D3水平将DN患者分为维生素D缺乏组(Vit-D-D)、不足组(Vit-D-I)及正常组(Vit-D-N),比较各组间矿物质代谢、脂代谢、颈动脉内中膜厚度(IMT)、冠脉钙化等指标的差异。多元线性回归分析法分析IMT与25(OH)D3、1,25(OH)2D3、iPTH、脂代谢指标的相关性;logistic回归分析法分析冠脉钙化与25(OH)D3、1,25(OH)2D3、iPTH、脂代谢指标的相关性。结果 DN患者血清25(OH)D3水平为(28±18.1)ng/mL,四分位数间距16.92～35.45ng/mL,Vit-D-I组71例,占47.01%,Vit-D-D组28例,占18.54%。血清1,25(OH)2D3水平为(28.93±33.13)pg/mL,四分位数间距10.36～31.08pg/mL,Vit-D-I者117例,占77.5%。与Vit-D-N组相比,Vit-D-D组的体质量指数(BMI)、24h尿蛋白、胆固醇(CHO)和低密度脂蛋白(LDL)增高,差异有统计学意义(P<0.05)。多元线性回归分析,IMT与年龄、性别、血磷正相关,logistic回归分析,冠脉钙化与血清1,25(OH)2D3负相关。结论 DN患者中维生素D不足和缺乏发生率高,维生素D缺乏者具有较高的尿蛋白、CHO和LDL,冠脉钙化与血清1,25(OH)2D3呈负相关关系。     

1,25（OH）2D3对脂多糖诱导的小鼠蛋白尿的影响

目的观察1,25(OH)2D3对脂多糖诱导的小鼠蛋白尿和uPAR表达的影响。方法 24只C57BL/6雄性小鼠随机分为正常对照组(Sham组)、脂多糖(LPS)处理组(LPS组)、LPS与1,25(OH)2D3共同处理组[LPS+1,25(OH)2D3)组]。LPS组及LPS+1,25(OH)2D3组腹腔注射LPS 300μg(第1天200μg,第2天100μg),Sham组给予等量生理盐水腹腔注射,LPS+1,25(OH)2D3组提前2 d给予1,25(OH)2D32.5μg/(kg·d)灌胃,Sham组及LPS组每天给予等量橄榄油灌胃。第3天留取尿液后处死小鼠。结果 (1)Sham组、LPS组、LPS+1,25(OH)2D3组的尿蛋白分别为(72.0±35.6)、(732.9±233.2)、(412.3±82.7)μg/mg,LPS组尿蛋白比Sham组明显升高(P=0.000);LPS+1,25(OH)2D3组与LPS组相比,尿蛋白明显减少(P=0.001)。(2)LPS组足细胞uPAR蛋白及PLAUR mRNA的表达均高于Sham组和LPS+1,25(OH)2D3组(P<0.05)。结论 1,25(OH)2D3可能通过抑制uPAR的表达,减少蛋白尿。     

细胞凋亡在维生素K2抑制高磷诱导的大鼠血管平滑肌细胞钙化中的作用

目的探讨维生素K2对高磷诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)钙化的影响及细胞凋亡在其中所起的作用。方法选取8~10周龄健康雄性SD大鼠6只,分别体外分离培养大鼠胸主动脉VSMCs,采用免疫细胞化学方法鉴定。将VSMCs采用随机数字表法分为正常对照组、高磷组、维生素K2组1(10μmol/L)、维生素K2组2(25μmol/L)及维生素K2组3(50μmol/L)。检测VSMCs钙含量、Axl mRNA和Bcl-2 mRNA表达、细胞凋亡率。结果5组大鼠VSMCs钙含量比较,差异有统计学意义(P<0.05)。高磷组、维生素K2组1、维生素K2组2、维生素K2组3均高于正常对照组(P<0.05);维生素K2组1、维生素K2组2、维生素K2组3均低于高磷组(P<0.05);维生素K2组2、维生素K2组3均低于维生素K2组1(P<0.05);维生素K2组3低于维生素K2组2(P<0.05)。5组大鼠VSMCs中Axl mRNA表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。高磷组、维生素K2组1 Axl mRNA表达水平低于正常对照组,维生素K2组3 Axl mRNA表达水平高于正常对照组,维生素K2组2、维生素K2组3 Axl mRNA表达水平高于高磷组(P<0.05)。5组大鼠VSMCs中Bcl-2 mRNA表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。5组大鼠细胞凋亡率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。高磷组、维生素K2组1细胞凋亡率高于正常对照组,维生素K2组1、维生素K2组2、维生素K2组3细胞凋亡率低于高磷组(P<0.05)。结论维生素K2能够抑制高磷诱导的大鼠VSMCs钙化,其机制可能是通过上调生长停滞特异基因6(Gas6)/Axl的表达而抑制了VSMCs的凋亡。     

1,25二羟基维生素D_3对大鼠脾CD4~+CD25~+调节性T细胞及Foxp3基因表达的影响

目的:探究1,25二羟基维生素D3[1,25(OH)2D3]对大鼠脾CD4 CD25 调节性T细胞(Treg)及其特异性转录因子Foxp3基因表达的影响.方法:近交系雄性Lewis大鼠,随机分成对照组和3个剂量的VitD3组: 0.125 μg组,0.25 μg组和1 μg组,每组30只;灌胃给药,3次/周,共2周后对照组给予赋形剂;各组随机抽取20只大鼠,于第15 d腹腔注射脂多糖(LPS)(10 mg/kg),随机选择其中10只于6 h后切取脾,其余10只观察注射LPS后96 h大鼠的病死率,同时留取未注射LPS大鼠的脾;流式细胞仪检测脾CD4 CD25 Treg数量变化,RT-PCR检测脾Foxp3 mRNA表达.结果:1,25(OH)2D3明显上调大鼠脾CD4 CD25 Treg的数量及特异性转录因子Foxp3 mRNA的表达;1,25(OH)2D3能保护大鼠抵抗LPS的攻击.结论:1,25(OH)2D3对大鼠脾CD4 CD25 调节性T细胞及特异性转录因子Foxp3 mRNA的表达有显著影响.1,25(OH)2D3保护大鼠抵抗LPS攻击可能与其促进CD4 CD25 Treg的发育和功能有关.     

碳酸镧在维持性血液透析患者高磷血症中的应用研究

目的探讨碳酸镧对伴有高磷血症的维持性血液透析（maintenance hemodialysis,MHD）患者磷酸盐代谢、微炎症、血脂及营养状态的影响。方法 80例伴有高磷血症的MHD患者随机分为碳酸镧组和碳酸钙组各40例,治疗12周。比较两组患者治疗前后磷酸盐代谢、微炎症、血脂及营养状态相关指标变化。结果在第12周末碳酸镧组皮肤瘙痒评分、血钙、磷、钙磷乘积、成纤维细胞生长因子23（fibroblast growth factor 23,FGF23）较基线显著下降（P<0.05）,1,25二羟基维生素D[1,25-Dihydroxy vitamin D,1,25（OH）₂D]较基线显著升高,并与碳酸钙组相比有显著变化（P<0.05）;碳酸钙组第12周末血钙及钙磷乘积与基线相比显著升高（P<0.05）,而血磷、FGF23、1,25（OH）₂D无显著变化。结论碳酸镧能显著降低血磷、FGF23,使1,25（OH）₂D升高,而全段甲状旁腺激素（intact.parathyroid hormone,iPTH）、血清25羟维生素D[25-hydroxyvitamin D,25（OH）D]、血脂、微炎症及营养状态未受影响。     

1,25-二羟维生素D3对胃癌细胞增殖和TNF-α表达的影响

摘要：目的研究1,25-二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]对胃癌SGC-7901 细胞增殖和细胞周期的影响,以及对细胞因子TNF-α
mRNA及蛋白表达的影响。方法用不同浓度1,25(OH)2D3处理胃癌SGC-7901细胞,采用MTT法检测细胞增殖情况;流式细胞
仪检测细胞生长周期;RT-PCR和Western blotting分别检测TNF-α在mRNA和蛋白水平的表达情况。结果1,25(OH)2D3对胃癌
SGC-7901细胞增殖有抑制作用（P<0.05）,并呈时间剂量依赖性。经1,25(OH)2D3处理72 h后细胞周期出现向G0/G1期移行的动
力学改变（F=9.81,P<0.05）。TNF-α mRNA及蛋白的表达水平均呈剂量依赖性减少（P<0.05）。结论1,25(OH)2D3可抑制胃癌
细胞增殖,且与其抑制TNF-α的表达可能有相关性。
     

血清1,25-二羟维生素D3水平与慢性肾病患儿并发症及肾功能的关系

目的:探讨血清1,25-二羟维生素D3(1,25-(OH)2D3)水平与慢性肾病患儿并发症及肾功能的关系. 方法:随机抽选120例慢性肾病患儿为研究对象,其并发症包括肾性骨病、继发性甲状旁腺功能亢进(SHPT)、心血管疾病(CVD),分别36例、54例、30例. 同时选择同期门诊体检健康儿童120例(对照组). ELISA法检测1,25-(OH)2D3水平,同时监测肾功能指标以及血磷、钙等水平. 结果:观察组患儿1,25-(OH)2D3表达水平和血钙水平降低,与对照组比较差异明显(P<0.05),血磷水平升高不明显;BUN、SCr、24小时尿蛋白均较对照组异常;1,25-(OH)2D3与血钙呈正相关(r=0.446,P<0.05),与肾功能指标呈负相关(r=0.466、0.563、0.662,P<0.05). 结论:1,25-(OH)2D3一定程度上反应CKD患儿肾功能损伤情况,3种并发症中均可出现1,25-(OH)2D3水平降低现象.     

1,25-二羟维生素D3对人系膜细胞增殖作用的影响

目的 通过观察1,25-二羟维生素D3〔1,25（OH）2D3〕对Ki-67抗原表达的影响,探讨其对人系膜细胞增殖的抑制作用。方法 体外培养人肾小球系膜细胞,随机分为正常对照组、表皮生长因子（EGF）组、1,25（OH）2D3组及EGF联合1,25（OH）2D3组,培养48 h后,应用免疫荧光技术和荧光定量PCR（RT-PCR）检测Ki-67抗原及其mRNA的表达。结果 正常对照组、EGF组、1,25（OH）2D3组和EGF联合1,25（OH）2D3组细胞荧光强度分别为（35.958±2.563）、（49.872±2.745）、（22.415±2.277）和（36.567±2.270）,4组比较差异有统计学意义（F=123.429,P＜0.05）。其中,EGF组荧光强度高于正常对照组,1,25（OH）2D3组荧光强度低于正常对照组（P＜0.05）;1,25（OH）2D3组和EGF联合1,25（OH）2D3组荧光强度低于EGF组（P＜0.05）。以正常对照组为基准,EGF组、1,25（OH）2D3组和EGF联合1,25（OH）2D3组Ki-67 mRNA相对表达量分别为（2.479±0.150）、（0.584±0.031）和（1.176±0.017）,4组比较差异有统计学意义（F=51.107,P＜0.05）。其中,EGF组Ki-67 mRNA相对表达量高于正常对照组,1,25（OH）2D3组Ki-67 mRNA相对表达量低于正常对照组（P＜0.05）;1,25（OH）2D3组和EGF联合1,25（OH）2D3组Ki-67 mRNA相对表达量低于EGF组（P＜0.05）。结论 1,25（OH）2D3可抑制人肾小球系膜细胞的增殖,并降低EGF对人肾小球系膜细胞增殖的促进作用。     

1,25(OH)2D3对体外培养大鼠成骨细胞RANKL/OPG mRNA表达的影响

目的：观察1,25（OH）2D3对体外培养的大鼠成骨细胞RANKL／OPG mRNA表达的影响,探讨其促进骨吸收的作用机制。方法：体外分离培养大鼠成骨细胞,分别观察不同浓度1,25（OH）2D3及用1,25（OH）2D,处理不同时间对RANKL／OPG mRNA表达的影响,RANKL／OPG mRNA表达采用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法测定。结果：1,25（OH）2D3呈时间和剂量依赖性地刺激大鼠成骨细胞RANKL mRNA的表达,而抑制OPG mRNA的表达,使RANKL／OPG值增高。结论：1,25（OH）2D3通过调节成骨细胞RANKL／OPG的基因表达,从而发挥促进破骨细胞介导的骨吸收作用。     

高磷饮食+5/6肾切除制备慢性肾衰竭继发甲状旁腺功能亢进大鼠模型

目的:构建慢性肾衰竭继发甲状旁腺功能亢进大鼠模型,为研究肾性甲旁亢的发病机制及治疗奠定基础.方法:36只8～10周龄健康雄性SD大鼠,体质量200～250 g,随机分为6组(n=6):5/6肾切除高磷饲料组(STNx HP);5/6肾切除低磷饲料组(STNx LP);5/6肾切除正常磷饲料组(STNx NP);假手术高磷饲料组(Sham HP);假手术低磷饲料组(Sham LP);假手术正常磷饲料组(Sham NP).肾切除组大鼠分两步进行肾脏切除,术前1周及2次手术后7、14、21、28 d在大鼠眼内眦静脉取血,分别检测大鼠血清中血磷(P)、全段甲状旁腺素(iPTH)水平.术后4周取大鼠残余肾脏及甲状腺与甲状旁腺的复合体,进行病理组织学检查.结果:STNx NP组、STNx LP组和STNx HP组术后存活大鼠数分别为5只、4只和4只;假手术各组大鼠未见死亡.肾切除组术后各时段血清iPTH水平均高于术前和各自假手术组(P＜0.05);STNx HP组血清iPTH水平明显高于STNx NP组和STNx LP组(P＜0.05).STNx HP组术后各时段血清P水平高于术前和Sham HP组(P＜0.05);而STNx NP组、STNx LP组与各自假手术组无显著差异,且均低于STNx HP组(P＜0.05).STNx HP组大鼠术后28 d组织病理学观察可见肾小球纤维化及硬化;甲状旁腺组织观察可见腺体增大,腺体中主要见主细胞及甲状旁腺嗜酸性细胞.结论:高磷饮食合并5/6肾切除可建立大鼠慢性肾功能衰竭继发甲状旁腺功能亢进模型,具有动物成本低,操作方法简便,实验周期短,动物死亡率低等优点.