核酸疫苗在寄生虫疾病防治中的应用

核酸疫苗(Nucleic acid vaccines)是指将编码某种抗原蛋白的外源基因(DNA或RNA)直接转移到动物体内，通过宿主表达系统合成抗原蛋白，诱导宿主对该抗原蛋白产生免疫应答，以达到预防和治疗疾病的目的。核酸疫苗包括DNA疫苗和RNA疫苗，目前研究较多的是DNA疫苗。由于核酸疫苗具有减毒和灭活疫苗不可比拟的优越性，正备受关注。     

核酸疫苗的研究进展(综述)

核酸疫苗又称ＤＮＡ疫苗或基因疫苗，是最近几年从基因治疗研究领域发展起来的一种全新疫苗，其组分为编码蛋白质抗原的双链环状重组表达质粒，它的出现被誉为第三次疫苗革命，通过肌肉注射等途径接种动物后，外源基因能在宿主细胞内表达相应抗原，通过抗原提呈细胞的加工、提呈、诱导免疫应答。 ｌ核酸疫苗的发现：Ｗｏｌｆｆ等（１９９０）将分别编码β－半乳糖苷酶、虫荧光素酶、氯霉素乙酰转移酶的 ＲＮＡ和 ＤＮＡ的表达载体注入小鼠骨骼肌后，这些基因都能在肌细胞内表达相应蛋白［１］。Ｗｉｌｌｉａｍｓ（１９９１）报道用基因枪将…     

非人灵长类动物模型在核酸疫苗研究中的应用及前景

非人灵长类是人类的近属动物，在核酸疫苗临床前试验中是理想的动物模型。核酸疫苗(Nucleic Acid Vaccines)也称为DNA疫苗或基因疫苗，是近年来快速发展的有很大前景的新一代疫苗，它是把带有编码抗原蛋白基因的真核表达载体直接注入机体，表达蛋白，从而诱发细胞和体液免疫，     

乙型肝炎DNA疫苗研究进展

DNA疫苗也有基因疫苗、核酸疫苗、DNA免疫、基因免疫等各种名称和相关概念.有人将DNA疫苗称为第三代疫苗.第一代疫苗以Jenner用牛痘预防天花为代表,人类从此开始摆脱许多疾病的困扰.第二代疫苗是运用基因重组技术,以特定的基因表达产生的抗原作为疫苗,重组乙型肝炎疫苗就是典型例子.DNA疫苗则是将编码目的抗原的基因与载体重组以后,经不同途径将基因直接转入机体细胞内,利用宿主细胞内的表达加工机构合成抗原,从而激发体液免疫和细胞免疫.近年来,DNA疫苗在打破HBV慢性感染的免疫耐受方面取得了一定的进展,对乙型肝炎及HBV无症状携带状态的临床治疗提供了值得探索的新途径.     

乙型肝炎核酸免疫的研究进展

核酸免疫（ｎｕｃｌｅｉｃ ａｃｉｄ ｉｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎ）是指将编码抗原蛋白基因序列的表达载体，用物理方法直接导入动物体内，以诱导特异性的免疫应答。核酸免疫已用于多种病毒的实验研究，包括流感病毒、艾滋病病毒、淋巴细胞脉络丛脑炎病毒、狂犬病毒、乙型肝炎病毒等。乙型肝炎是世界范围内严重危害人类健康的一种传染病，对其感染及发病的控制有赖于获得安全有效并且价廉的新疫苗。核酸疫苗的使用为解决此问题带来可     

影响核酸疫苗应用研究的若干问题

核酸疫苗又称基因疫苗或DNA疫苗，这种核酸既是载体又能在真核细胞中表达抗原，刺激机体产生特异而有效的免疫应答，尤其是能诱导产生具细     

SARS冠状病毒S蛋白多价核酸疫苗的构建和免疫学原性

目的构建以SARS冠状病毒（severe acutere spiratory syndrome coronavlrus,SARs．c0V）S蛋白3个保守片段基因的组合为抗原基因DNA疫苗,采用肌肉注射的方法接种小鼠后观察机体产生免疫应答的情况。方法将人工合成的S蛋白3个保守片段基因组合（称为Sa）克隆至真核表达载体pcDNA3、1（-）,随之将重组质粒进行小鼠肌肉免疫,定期检测血清中抗SARS—CoV的病毒特异性抗体水平,流式细胞仪观察其淋巴细胞表型变化,PCR法检测质粒分布,免疫组化检测抗原表达。结果疫苗注射后15d就能在血清中检测出病毒特异性抗体,并且疫苗能在机体中持续表达抗原引发机体持续的免疫应答,直到注射后45d免疫应答都不见减弱;以CTLT淋巴细胞为主的CD8＋T淋巴细胞的百分比含量增加极显著,引起强大的体液免疫和细胞免疫;而空载体质粒对照组未检测出明显的特异性免疫应答。结论以S蛋白3个保守片段基因组合为抗原基因的DNA疫苗通过肌注能诱导小鼠针对SARS病毒强大的免疫应答。     

基因免疫

基因免疫窦骏南京铁道医学院微生物学教研室（南京２１０００９）１基因免疫概念及命名基因免疫（ｇｅｎｅｔｉｃｉｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎ）是指将含有编码抗原蛋白目的基因的质粒载体直接注入体内，通过宿主细胞的转译系统表达目的抗原，并诱导机体产生免疫应答的一项新...     

菌影系统作为疫苗载体的研究进展

菌影是完整的革兰阴性细菌的空菌体,不含核酸、核糖体等细胞内容物,但保持了活菌所具有的天然形态及所有结构,具有良好天然佐剂特性,可诱导免疫系统的固有免疫和适应性免疫应答;菌影又是外源性蛋白抗原或DNA的高效递送的载体。菌影可通过口腔、眼、鼻腔或支气管等进行黏膜免疫,这是疫苗最理想的免疫方式。本文综述菌影作为蛋白亚单位疫苗和DNA疫苗的载体的特性及其在人类疫苗和动物疫苗应用领域的研究进展。     

基因疫苗在肿瘤免疫治疗中的研究进展

肿瘤的治疗目前仍是世界性的难题,随着免疫学和分子生物学的发展,肿瘤疫苗的发展经历了肿瘤细胞疫苗、重组蛋白疫苗和基因疫苗三个阶段。肿瘤基因疫苗也称DNA疫苗,是目前研究的热点,主要包括与肿瘤相关抗原（TAAs）有关的全长、表位、独特型（Id）和融合DNA疫苗,能够自主复制的RNA疫苗,与树突细胞（DCs）相关的肿瘤基因疫苗等。近年来,肿瘤基因疫苗在动物基础研究和临床前研究,     

囊虫病的核酸免疫研究进展

囊虫病是一种常见的人兽共患寄生虫病,对人类健康危害极大.目前,尚无可用于人体的有效疫苗.以往的疫苗多为粗抗原疫苗,免疫效果不理想.核酸免疫技术的开展为囊虫病疫苗研制提供了一条新思路.核酸免疫(nuclear acid immunization)又称基因免疫(genetic immunization),是将含有编码目的抗原的质粒直接注入体内,通过宿主细胞的转译系统表达目的抗原,并诱导机体产生免疫应答的一种新技术.目前WHO已将此法正式命名为核酸免疫法(nuclear acidvaccination).     

丙型肝炎病毒NS3蛋白真核表达载体的构建及其基因免疫研究

基因免疫是指将编码特异抗原的目的基因重组表达载体直接接种到宿主组织内,在体内表达基因产物,进而激发宿主产生特异性免疫反应。自１９９０年首次报道发现基因免疫以来,这一新的免疫技术已经在基础免疫学研究和疫苗研制等许多领域得到广泛应用。对许多疾病（如流感）...     

犬传染性肝炎核酸疫苗的构建及免疫效果评价

目的获得犬传染性肝炎保护性抗原Loop重组蛋白及pVAX1-CpG-Loop重组质粒，并评价其诱导特异性免疫应答的水平。方法PCR扩增犬腺病毒Ⅰ型抗原表位Loop基因，构建至原核表达载体pET28a（＋）和真核表达载体pVAX1-CpG（＋）中；pET28a-Loop重组质粒转化BL21（DE3），表达蛋白经SDS-PAGE、免疫印迹分析、亲和层析纯化抗原蛋白，采用肌内注射、电转导方法，prime-boost免疫策略，pVAX1-CpG-Loop重组质粒股四头肌注射免疫小鼠，抗原蛋白加强免疫后进行免疫效果的评价。结果ELISA方法检测到免疫鼠体内有特异性抗体产生，淋巴细胞增殖实验（MTT和CCK-8）、细胞因子和CD^4＋、CD^8＋分子测定表明DNA疫苗可以诱发TH1型免疫；中和实验表明表达蛋白诱导小鼠产生的抗体具有中和病毒的作用。结论构建的犬传染性肝炎pVAX1-CpG-Loop核酸疫苗具有诱导特异性细胞和体液免疫应答的能力。     

细菌c-di-AMP在宿主免疫中的作用研究

环状二聚腺苷-3′,5′-单磷酸（cyclic diadenosine monophosphate, c-di-AMP）是细菌和古细菌中新发现的第二信使。通过直接与靶蛋白结合或影响靶蛋白表达，c-di-AMP调节多种细菌的生理功能，包括维持渗透压、平衡中枢代谢、监测DNA损伤以及控制生物膜和孢子形成。作为一种新型病原体相关分子模式与宿主模式识别受体结合，通过激活干扰素基因刺激蛋白（stimulator of interferon genes, STING），诱导环磷酸鸟苷-磷酸腺苷合酶（cyclic GMP-AMP synthase, cGAS）-STING信号轴产生Ⅰ型干扰素，并通过核因子-κB信号通路促进炎症因子分泌，在宿主对细菌感染及肿瘤的免疫中发挥重要作用。因其良好的免疫原性，c-di-AMP可作为免疫佐剂为疫苗的研发提供新的靶点。然而，对c-di-AMP在宿主免疫中的具体作用机制有待进一步探索。本文介绍了c-di-AMP的结构及生物学特性，总结了c-di-AMP对宿主免疫应答调控的可能机制，同时跟进其作为免疫佐剂应用于临床的治疗新进展。研究c-di-AMP的功能及对宿主免疫应答的作用机制可为临床上解决细菌耐药、感染控制、肿瘤防治以及疫苗开发提供新的思路。     

弓形虫核酸（DNA）免疫系列研究

本系列研究筛选了弓形虫（Toxoplasma）速殖子表膜主要抗原（SAG1或P30）及分泌排泄抗原棒状体蛋白基因（ROPl），并将二者拼接构建复合基因（sAG1／ROP1），对其进行扩增、克隆、表达，制备真核表达质粒，接种小鼠，研究其免疫保护效应，为弓形虫核酸疫苗的研制提供有积极意义的科学根据。     

DNA免疫

１前言随着分子免疫学研究与基因治疗的开展，新一代疫苗随之涌现。其中以ＤＮＡ免疫（ＤＮＡｂａ－ｓｅｄｌｍｍｕｎｌｚａｔｉｏｎ）或ＤＮＡ疫苗（ＤＮＡＶａｃＣｉｎｅ）最为引人注目，它是将含有编码抗原基因的真核表达质粒直接接种机体，该抗原即在体内合成，从而诱发机体产生相应的特异性免疫应答。自１９９３年Ｕｌｍｅｒ等用编码流感病毒内部保守蛋白—核蛋白（ＮＰ）的ＤＮＡ免疫小鼠，产生了ＮＰ特异性抗体及细胞毒性Ｔ细胞（ＣＴＬ）反应“’，从而开始了ＤＮＡ免疫在动物模型中保护作用的研究。目前，ＨＩＶ，轮状病毒及ＨＢＶ…     

戊型肝炎病毒（HEV）基因疫苗的初步实验研究

戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）基因疫苗的初步实验研究北京医科大学流行病学教研室鲁凤民，庄辉，朱晓洁，李凡基因疫苗是近年来发展起来的一种免疫接种技术，其基本原理是将表达病原体抗原的基因ＤＮＡ直接导入宿主靶组织的细胞中，利用宿主细胞合成该病原体的抗原蛋白，并引发...     

弓形虫核酸（DNA）免疫系列研究

 本系列研究筛选了弓形虫（Toxoplasma）速殖子表膜主要抗原（SAG1或P30）及分泌排泄抗原棒状体蛋白基因（ROPl），并将二者拼接构建复合基因（sAG1／ROP1），对其进行扩增、克隆、表达，制备真核表达质粒，接种小鼠，研究其免疫保护效应，为弓形虫核酸疫苗的研制提供有积极意义的科学根据。     

日本血吸虫大陆株副肌球蛋白全基因核酸疫苗诱生免疫应答的实验研究

目的初步研究日本血吸虫大陆株副肌球蛋白核酸疫苗在C57BL／6小鼠诱生的免疫应答特征。方法利用TRIzol方法抽提日本血吸虫大陆株成虫总RNA，并通过逆转录聚合酶链反应；扩增编码日本血吸虫大陆株副肌球蛋白（SjC97）的全基因cDNA，将其克隆入质粒表达载体（pcDNA／Amp）构建成日本血吸虫大陆株副肌球蛋白全基因核酸疫苗（pCMV－SjC97）；将其通过后腿胫前肌免疫C57BL／6小鼠，共免疫3次，每次间隔3周；利用酶联免疫吸附试验（ELISA）分析pCMV－SjC97免疫所诱生的特异性抗体IgG及IgG亚类，以及特异性抗体IgM及IgE。并初步分析了pCMV－SjC97免疫C57BL／6小鼠脾淋巴细胞抗原特异性体外增殖能力。结果pCMV－SjC97免疫能够诱生特异性抗体IgG及IgM；pCMV－SjC97诱生的抗体滴度与注射的DNA间存在一定的量-效关系；IgG亚类分析显示，pCMV-SjC97免疫主要诱生IgG2a和IgG2b亚类，未测到IgG1及IgG3亚类。PCMV-SjC97免疫能够诱导小鼠Th细胞激活。结论pCMV-SjC97核酸疫苗能够在C57BL／6小鼠诱生较强的体液免疫应答；pCMV-SjC97免疫主要诱生Th1型细胞免疫应答。     

我国弓形虫病核酸疫苗研究概况

刚地弓形虫（简称弓形虫）呈世界性分布,哺乳动物及鸟类普遍易感.人类对弓形虫有较强的自然免疫力,感染后绝大多数无明显症状表现,或只出现亚急性弓形虫病.但在孕妇及免疫功能低下（如ADIS病、器官或组织移植后接受免疫抑制剂治疗的病人等）感染弓形虫后引起的危害严重.人体弓形虫感染日益受到关注,弓形虫病疫苗成为当前研究的热点.动物实验发现,弓形虫全虫疫苗,弓形虫特异抗原组分疫苗有预防弓形虫感染或降低感染度作用,但前可能会引起再感染,后的免疫保护效果较差.弓形虫病核酸疫苗克服了上述疫苗存在的不足,具有良好的开发应用前景.我国从上世纪90年代后期开始了弓形虫病核酸疫苗的研制,通过对表达保护性抗原蛋白基因进行重组,先后研制出弓形虫基因单价疫苗、复合疫苗和混合疫苗.动物实验证明部分疫苗具有良好的免疫预防效果.