干扰素α对肝癌细胞中转录因子Sp1的表达及活性的影响

目的:研究干扰素α对肝癌细胞中转录因子Sp1(specificity protein 1)的表达和活性的影响。方法:采用蛋白免疫印迹法分析干扰素α对肝癌细胞株MHCC97H中Sp1的表达及磷酸化水平的影响。采用凝胶电泳迁移率变动分析法检测干扰素α对Sp1活性的影响。结果:干扰素α可显著下调Sp1的表达和磷酸化水平,以对磷酸化水平的下调更为明显;干扰素α可显著抑制Sp1的活性。结论:Sp1可能作为干扰素α抗肝癌的临床疗效的预测指标。     

转录因子Sp1在乳腺癌中的表达及意义

目的探讨转录因子Sp1在乳腺癌中的表达及意义。方法采用免疫组化方法检测转录因子Sp1在53例乳腺浸润性导管癌2、5例导管内癌组织和13例乳腺囊性增生病组织中的表达。结果 Sp1在乳腺浸润性导癌、导管内癌及乳腺囊性增生组织中表达逐渐降低,有统计学意义。在浸润性导管癌中其表达与病理分级、脉管浸润和腋窝淋巴结转移显著相关。结论 Sp1与乳腺浸润性导管癌的发生、发展及淋巴结转移关系密切。     

肝癌MHCC97H细胞肝细胞生长因子(HGF)/c-Met通路激活对血管内皮生长因子表达的影响

目的:研究肝癌MHCC97H细胞中肝细胞生长因子(HGF)诱导血管内皮生长因子(VEGF)表达过程中的转录因子Sp1的活性.方法:将MHCC97H细胞分为对照组、HGF组、光辉霉素组,分别用RT-PCR及Western blot分析与VEGF mRNA、蛋白质表达及Sp1水平、磷酸化Sp1水平变化以及应用Sp1阻断剂光辉霉素后上述目标蛋白的变化情况.结果:外源性HGF 60 ngmL-1孵育15 min、16 h后分别可以使MHCC97H细胞的VEGF mRNA及其蛋白质的表达明显提高(P<0.01).这一过程中Sp1水平无明显变化(P>0.05).进一步分析发现磷酸化Sp1水平明显升高(P<0.01).用Sp1抑制剂光辉霉素预先处理MHCC97H细胞1 h后,再加入HGF 60 ngmL-1VEGFmRNA及其随后蛋白质表达均受到抑制(P<0.01).结论:HGF诱导MHCC97H肝癌细胞VEGF表达是通过增强Sp1磷酸化实现的.     

转录因子与造血调控

血细胞生成过程中特异表达一些转录因子,在转录水平调控造血,而转录因子的表达具有阶段和细胞系特异性。本文简要介绍调节转录因子和造血调控的关系。     

VEGF、VEGFR-1在非小细胞肺癌中表达及其意义的研究

目的：研究血管内皮生长因子（VEGF）和血管内皮生长因子受体-1（VEGFR-1）在非小细胞肺癌（NSCLC）肿瘤细胞和正常肺组织中的表达情况,探讨VEGF和VEGFR-1在NSCLC发生与发展过程中的意义及两者之间的关系。方法采用免疫组化法,检测40例非小细胞肺癌组织和部分癌旁组织及5例正常肺组织中VEGF和VEGFR-1的表达。采用 Log-rank test检测生存率间的差异。采用 Cox 比例风险回归模型分析临床多因素对生存时间的影响。结果40例NSCLC组织中,VEGF阳性表达33例,占82.5%;VEGFR-1阳性表达35例,占87.5%。VEGF和VEGFR-1在癌旁组织及正常组织中几乎不表达。在NSCLC组织中VEGF和VEGFR-1的阳性表达率呈正相关（r＝0.4428,P＜0.01）。VEGF和VEGFR-1在NSCLC细胞中的表达与患者年龄、性别、病理类型、临床病理分期、肿瘤大小、有无淋巴转移均无显著相关（P＞0.05）。病理类型和临床病理分期可以作为独立危险因素影响NSCLC术后生存时间,而VEGF、VEGFR-1的表达等其他特征作为独立危险因素影响NSCLC术后生存时间尚无统计学差异（P＞0.05）。结论本研究中VEGF和VEGFR-1在NSCLC细胞胞浆中表达,VEGF可通过VEGFR-1直接作用于NSCLC细胞。VEGF和VEGFR-1在NSCLC细胞中的表达与肿瘤组织生物学性质和预后无明显相关。     

P^53和VEGF在肝细胞肝癌组织中的表达及其意义

目的研究P^53和VEGF在肝细胞肝癌（HCC）组织中的表达状况和意义。方法应用免疫组化SP法检测50例HCC组织、50例癌旁组织和20例正常肝脏标本组织石蜡切片中P^53和VECF的表达。结果D53和VEGF在正常肝脏组织中均无表达,在癌旁组织和HCC组织中的表达率分别为22％、52％和44％、87％,二者比较差异均有统计学意义（P〈0．01）;P^53和VEGF在HCC组织中的表达与患者的年龄、性别无明显相关性,但与肿瘤大小密切相关。结论P^53和VEGF的异常表达与HCC的发展密切相关,在HCC的发展过程中可能起重要的作用。     

转录因子Twist 1和PPARγ在3T3-L1细胞中的作用及调控关系

目的探讨转录因子Twist 1和PPARγ在3T3-L1细胞中的表达水平及其与基因调控的关系。方法体外培养3T3-L1细胞,诱导分化为成熟3T3-L1细胞,western blot检测Twist 1和PPARγ在诱导分化第0、2、4、8、12天时的表达水平;采用PPARγ激动剂匹格列酮和抑制剂T0070907分别处理3T3-L1细胞24 h,western blot检测Twist 1蛋白的表达水平;用基因重组技术分别构建靶向干扰和过表达Twist 1基因的慢病毒载体并感染3T3-L1细胞,通过形态学观察、油红O染色及western blot分析Twist 1表达变化对诱导分化进程及对PPARγ的影响。结果随着3T3-L1细胞诱导分化时间的延长,PPARγ和Twist 1表达水平均显著升高,且分别自诱导分化第2天(t=2.78,P0.05)和第4天上调显著(t=2.13,P0.05)。western blot检测结果显示,匹格列酮和T0070907作用3T3-L1细胞24 h后Twist 1和PPARγ均表达下调;干扰和过表达Twist 1基因不影响3T3-L1诱导分化进程,但干扰Twist 1基因能够下调PPARγ的表达(P0.05),且过表达Twist 1能够上调PPARγ的表达(P0.05)。结论在3T3-L1细胞中Twist 1和PPARγ存在正向相互调控关系。     

转录调节因子ETS-1在血管生成中的作用

学术背景:ETS-1是ETS家族转录因子的第一个亚族,在血管生成中起重要的调控作用.近年研究显示ETS-1对血管内皮细胞的凋亡也有重要的调控作用,在血管生成开始,ETS-1决定局部内皮细胞的凋亡.目的:总结血管生长因子ETS-1在血管生成及细胞凋亡中的作用和研究进展.检索策略:由该论文的研究人员应用计算机检索PubMed, Sciencedirect, Ovid数据库1990-01/2007-09的相关文献,检索词为"ETS-1, angiogenesis, apoptosis, osteoblast, osteoclast",限定文章语言种类为English.同时计算机检索中国期刊全文数据库、万方数据库2000-01/2007-06 期间的相关文章,检索词为"ETS-1,血管生成,细胞凋亡,内皮细胞",限定文章语言种类为中文.共检索到128篇文献,对资料进行初审,纳入标准:①与ETS-1在血管生成和细胞凋亡密切相关.②同一领域选择近期发表或在权威杂志上发表的文章.排除标准:重复性研究.文献评价:文献的来源主要是EST-1在血管生成和细胞凋亡方面的试验研究.所选用的31篇文献中,2篇为综述,29为临床或基础实验研究.资料综合:①正畸牙齿移动中,牙槽骨的改建是骨吸收和新骨形成的动态平衡过程.这一过程机制复杂,受多种因子的调节.②在众多正调控因子中ETS-1是主要的促血管形成因子,在血管形成中起重要作用.③研究表明,4种典型的血管生长因子:酸性成纤维细胞生长因子,碱性成纤维细胞生长因子,血管内皮生长因子和表皮生长因子能够诱导血管内皮细胞的ETS-1的表达,ETS-1通过诱导血管生成的相关因子如基质金属蛋白酶和整合素β3的表达促进血管生成.④关于ETS-1在调控血管生成方面取得很大的进展,但仍存在许多问题,如ETS-1如何精确的调控血管生成,如何精确的调节细胞凋亡的基因表达等.结论:作为血管生成和细胞凋亡的一种重要调节因子,ETS-1对血管的生成和细胞凋亡具有重要的调节作用.     

转录因子Sp1与AP-2的研究进展

正转录因子是能与位于转录起始位点上游50~5 000bp的顺式作用元件、沉默子或增强子结合并参与调节靶基因转录效率的一组蛋白,并能将来自细胞表面的信息传递至核内基因。转录因子通常有几个功能域,可分为DNA结合域、转录调控域及自身活性调控域,DNA结合域可与特定的DNA序列(一般长8~20bp)相互作用,使转录因子与靶基因中特定转录因子结合位点结合起来,进而转录调控域就可发挥其激活或抑制     

VEGF及其受体KDR在肝细胞癌中的表达

目的:研究VEGF及其受体KDR蛋白在人肝细胞癌组织中表达及其意义。方法:应用免疫组化方法检测42 例人肝细胞癌及其癌周组织与10例正常肝组织标本的VEGF及KDR。结果:VEGF及KDR在肝癌组织表达明显高于癌周及正常肝组织,与门静脉内癌栓、包膜浸润密切相关(分别为P<0.05, P<0.01)。VEGF及KDR阳性表达在生存时间2 年及2 年以上组分别为23.5%(4/17)、35%(7/20),在生存时间短于2年分别为42.1%(8/19)、56.3%(9/16)(P<0.05)。结论:肝细胞癌组织中VEGF及其受体KDR的表达与浸润转移密切相关,其阳性表达有助于判断预后。     

肝细胞肝癌中核RNA输出因子3的表达及其意义

目的：探讨核RNA输出因子3（nuclear RNA export factor 3,NXF3）在肝细胞肝癌（HCC）患者中的表达及意义.方法：采用免疫组织化学法检测96例HCC患者的癌组织及癌旁组织中NXF3的表达.采用Cox比例风险模型与Kaplan-Meier法分析NXF3与患者的临床和病理特征及生存期的关系.结果：NXF3在HCC患者癌组织中的表达显著高于癌旁组织（P＜0.001）,且在合并有肝硬化的HCC患者中显著高表达[比值比（odds ratio,OR）为0.018,95％可信区间（confidence interral,CI）为1.2～10.9].与癌组织中NXF3低表达HCC患者相比,NXF3高表达HCC患者总体生存率与无瘤生存率均较低（P=0.022和P=0.014）.采用Cox比例风险模型对影响HCC患者预后的临床和病理特征进行单因素与多因素分析,结果均表明,NXF3为HCC患者的独立危险因素.与癌组织中NXF3低表达的患者相比,NXF3高表达的患者的病死率和复发率更高（OR=3.2,P=0.006;OR=2.5,P=0.008）.结论：NXF3在HCC患者癌组织中呈高表达,并与HCC患者的总体生存率以及肿瘤复发有关,可以作为判断HCC患者肝切除术后的预后指标.     

IGF-1、HIF-1a在肝细胞肝癌中的表达及其临床意义

目的:研究胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、低氧诱导因子-1α(HIF-1α)在肝细胞肝癌(HCC)中的表达及其意义。方法:采用免疫组织化学SABC法检测54例HCC及14例正常肝组织中IGF-1和HIF-1α的表达情况,研究其与HCC生物学行为的关系。结果:54例HCC中IGF-1、HIF-1α的表达均较正常肝组织高,差异具有显著性(χ2=9.112,13.369;P<0.05)。HCC中IGF-1与HIF-1α的表达呈正相关(rs=0.539,P<0.05)。HIF-1α的表达与肿瘤的侵袭转移密切相关(P<0.05),IGF-1在AFP≥400μg/ml的HCC组织中表达明显高于AFP<400μg/ml者,差异具有显著性(P<0.05)。结论:HCC中IGF-1和HIF-1α表达反映HCC的生物学行为,可作为预测肝癌浸润转移的一项重要指标。     

IGF-1、HIF—1α在肝细胞肝癌中的表达及其临床意义

目的：研究胰岛素样生长因子-1（IGF-1）、低氧诱导因子-1α（HIF-1α）在肝细胞肝癌（HCC）中的表达及其意义。方法：采用免疫组织化学SABC法检测54例HCC及14例正常肝组织中IGF-1和HIF-1α的表达情况，研究其与HCC生物学行为的关系。结果：54例HCC中IGF-1、HIF-1α的表达均较正常肝组织高，差异具有显著性（x^2=9．112，13．369；P〈0．05）。HCC中IGF-1与HIF-1α的表达呈正相关（rx=0．539，P〈0．05）。HIF-1α的表达与肿瘤的侵袭转移密切相关（P〈0．05），IGF-1在AFP≥400μg／ml的HCC组织中表达明显高于AFP〈400μg／ml者，差异具有显著性（P〈0．05）。结论：HCC中IGF-1和HIF-1α表达反映HCC的生物学行为，可作为预测肝癌浸润转移的-项重要指标。     

胃癌患者血浆血管内皮生长因子浓度变化的测定及意义

目的　探讨胃癌患者血浆血管内皮生长因子 (VEGF)浓度变化与胃癌生物学行为的关系。方法　应用酶联免疫吸附法 (ELISA)测定 40例胃癌患者血浆VEGF含量 ,并与胃癌生物学行为进行分析。结果　胃癌患者血浆VEGF浓度为 12 0 .16± 86.45pg/ml,显著高于正常对照组 (n =15) 73 .41± 11.56pg/ml(P <0 .0 1) ,胃癌≥ 5cm组 (n =2 7)血浆VEGF较 <5cm组 (n =13 )明显升高 ,分别为 12 8.78± 74.51pg/ml与 98.45± 3 8.91pg/m1(P <0 .0 5)。另外 ,血浆VEGF与胃癌TNM分期、有无淋巴结转移 ,细胞病理类型无明显关系。结论　血浆VEGF的水平与胃癌肿瘤负荷有关 ,血浆VEGF是诊断胃癌的客观指标之一     

趋化因子受体 CXCR7在原发性肝细胞肝癌中的表达及意义

【目的】探讨趋化因子受体 CXCR7在原发性肝细胞肝癌（PHC）中的表达情况及其临床意义。【方法】应用组织芯片和免疫组化法检测35对肝癌、癌旁组织和6例正常肝组织中 CXCR7的表达,并分析其表达与肝癌临床病理特征及预后的相关性。【结果】CXCR7在 35例 PHC 患者组织中的阳性表达率为88．6％（31／35）,显著高于配对癌旁肝组织37．14％（13／35）以及正常肝组织0（0／6）;CXCR7的高表达与 PHC 组织学分型、临床分期、淋巴结转移和血清 AFP 含量呈正相关（ P ＜0．05）,与其他临床指标无相关性（ P ＞0．05）;CXCR7阳性表达患者的中位生存时间相对于阴性表达患者均较短,且差异具有统计学意义（ P ＝0．001）。【结论】CXCR7在 PHC 患者中的阳性表达情况与临床预后密切相关,并且可分别作为独立的预测 PHC 患者预后的指标。     

重组腺病毒r-caspase3的靶向性实验研究

目的:观察构建靶向性反向半胱氨酸蛋白酶3(r-caspase3)重组腺病毒对AFP表达阳性肝癌细胞凋亡诱导的效果和特异性.方法:采用AFP表达强阳性细胞HepG2、表达弱阳性细胞7721、正常肝细胞L-02以及AFP表达阴性乳腺癌细胞 MDA-MB-231,分别感染构建之重组腺病毒Ad-r-caspase3、Ad-E(AFP)P(ALB)/r-caspase3及Ad-P(ALB)/r-caspase3,SRB染色测定O.D值,计算细胞死亡率和IC50;流式细胞术检测细胞凋亡指数.结果:HepG2、7721细胞对各腺病毒敏感程度为Ad-E(AFP)P(ALB)/r-caspase3>Ad-PALB/r-caspase3>Ad-r-caspase3;流式细胞术检测结果显示重组腺病毒Ad-E(AFP)P(ALB)/r-caspase3具有极强的凋亡选择性,AFP表达越强,凋亡指数越高.结论:靶向性 Ad-E(AFP)-P(ALB)/r-caspase3重组腺病毒具有肝细胞性肝癌凋亡选择性,同AFP表达呈正相关.     

UHRF1在肝细胞肝癌中的表达及意义

目的:探讨UHRF1(Ubiquitin-like,containing PHD and RING finger domains 1)在肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达及其与临床病理特征的关系。方法:采用免疫组织化学方法检测556例HCC组织及其癌旁组织中UHRF1的表达,分析其与HCC患者临床病理特征的关系。结果:免疫组织化学结果显示,UHRF1蛋白阳性表达定位于HCC细胞核,UHRF1蛋白在HCC组织中的表达显著高于癌旁组织。HCC组织中UHRF1蛋白阳性表达率为59%,其表达与肿瘤大小(P0.01)、肿瘤分化(P0.05)和微血管侵犯(P0.01)相关。结论:HCC中UHRF1的表达与其恶性表型相关,UHRF1可能参与HCC的侵袭和转移。     

原发性肝癌中多药耐药基因表达及其对介入治疗疗效的影响

目的探讨原发性肝癌中多药耐药基因编码的P-糖蛋白(Pgp)表达对介入治疗疗效的影响. 方法 47例原发性肝癌介入治疗前穿刺活检,采用SABC免疫组化方法检测Pgp表达.依肿瘤分期及病人状况,应用常规剂量及半剂量化疗药物进行栓塞治疗. 结果 Pgp 阳性率为72.3%(34/47).常规剂量组Pgp阴性患者有效率明显高于阳性患者(P<0.05),半剂量组二者无显著差异(P>0.05);Pgp阳性患者应用不同药物剂量疗效间无显著差别(P>0.05),Pgp阴性患者疗效与剂量呈正相关. 结论多药耐药是影响介入治疗疗效的重要因素,治疗前检测Pgp表达对制定个体化治疗方案有重要意义.