应用改良的辣根过氧化物酶与单克隆抗体结合的方法提高ELISA的敏感性(文摘)

辣根过氧化物酶(HRPO)是非同位素免疫测定和免疫组化分析最常用的酶之一。应用偏过碘酸钠法可最有效地进行HRPO与抗体的化学结合,但由于该法中加入HRPO与IgG的克分子比为4和HRPO的强氧化作用,可导致特异性抗体的活性下降,并形成大的凝集物,从而产生明显的非特异性     

单克隆抗体ELISA捕捉法检测传染性法氏囊病病毒抗体(文摘)

作者用抗传染性法氏囊病病毒(IBDV)McAb 2 G10,建立了检测幼鸡血清中IBDV抗体的单克隆抗体ELISA捕捉法(McAb-ELISA),并与常规ELISA进行了比较。McAb-ELISlA的操作程序为:用0.05mol/L碳酸盐缓冲液(pH9.6)400倍稀释的McAb 2 G10包被ELISA板,每孔50ul,37℃孵育2h,PBST液(含0.05％吐温-20的PBS液)冲洗3次后,每孔加入50ul PBS液80倍     

应用单克隆抗体定量检测突变种链球菌的简便方法(文摘)

突变种链球菌是侵犯人体的主要致病菌。在此之前,虽有应用选择性培养基进行同菌种的定量检测方法的报道,但在特异性、快速性、简便性等方面仍存在着问题。作者将以往的突变种链球菌制成各种单克隆抗体,并对其特异性及共同抗原的免疫学特性和其定位进行了调查。本研究的目的在于应用对突变种链球菌(C/eff型)具有特异性反应的单克隆抗体McAb f89,开发一种特异、简便、迅速、定量检测本菌种的方法。     

乙肝标志物ELISA检测不同方法的比较研究

目的 探讨全自动ELISA系统检测HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HbcAb(HBV-M)是否在重复性、准确度等方面优于手工法和半自动法,为其更好地在临床实验室开展工作提供进一步的数据和基础.方法 用以上各项指标的弱阳性质控品,分别做手工法、半自动法和全自动法的批内和批间重复性试验.另用三种方法分别检测临床血清标本,每项810人份.定性结果不完全一致的标本,HBsAg用中和法做确证试验,其余四项用化学发光法作为参考方法进行验证.结果 批内与批间重复性比较,全自动法的CV小于手工法和半自动法.三种方法检测临床标本,定性结果两两比较,均显示一致性非常好(k＞0.8,P＜0.05);进行卡方检验,除HBcAb的半自动法阳性率显著高于全自动法(P＜0.0125)外,其余项目三种方法两两比较,均无显著性差异(P ＞0.0125).经过确证/参考试验验证,全自动法、半自动法、及手工法不完全一致的标本,HBsAg17份,符合个数分别为15、9和4;HBsAb 24份,符合个数分别为17、13、7;HBeAg 9份,符合个数分别为7、2、5;HBeAb 34份,符合个数分别为19、16、19;HBcAb 36份,符合个数分别为28、15、19.结论 ①全自动法比半自动法和手工法具有更好的重复性.②三种方法有非常好的一致性,均能较好的诊断乙型肝炎.③全自动法ELISA检测HBV-M比半自动法和手工法准确度更高,可进一步提高这些项目的检验质量.     

单克隆抗体的多重反应性(文摘)

单克隆抗体存在抗原特异性的同时,还发现相当多的McAbs能与复合的无关抗原反应。由于其反应程度尚未完全弄清,因此作者用ELISA系统地检测了31株纯化McAbs与10种普通的无关蛋白抗原非特异性反应的程度。本试验所用McAbs的特异性和数量是:抗DNP7,抗人IgE9,抗riscosus放线菌T14v9,抗苄青霉素2,抗卵清蛋白1,抗鼠嗜碱性白血病细胞Fc受体3。     

单克隆抗体与原位杂交检测早期培养细胞中巨细胞病毒的比较(文摘)

巨细胞病毒(CMV)感染人群(如AIDS病人,化疗患者和新生儿等)日益增多,迫切需要一种快速敏感检测诊断CMV的方法。目前,检验诊断CMV的方法有:用免疫荧光法检测CMV早期抗原和分离培养病毒,观察CPE的出现等。本文详细地比较了4种检测早期培养细胞CMV诊断方法。这4种方法是 (1)直接McAb荧光染色法(DFA);(2)间接McAb荧光染色法(IFA);(3)生物素标记DNA探针的原位杂交及 (4)辣根     

DNA探针,单克隆抗体酶免疫检测和细胞培养检测沙眼衣原体的比较(文摘)

诊断生殖器沙眼衣原体感染的方法除细胞培养外,现有采用直接检测抗原的酶免疫测定法、直接荧光抗体法、细胞免疫化学及DNA探针法。尽管各种细胞培养方法的敏感性一般认为是低于100％,但直接检测抗原法和其他非培养的免疫法仍缺乏客观标准。当抗原检出阳性和阴性与培养结果不符时解决的方法可重新培养和再进行抗原检测试验,结合临床症状和流行病学调查以及采用另外独立检测原体的试验,例如常用的直接荧光显微镜检测。 本研究目的是比较IDEIA(Ⅳ)(EIA)放大的单克隆抗体免疫检测和同位素DNA探针检测,以及细胞培养方法检测沙眼衣原体     

一种使用新的温育方式定量测定单克隆抗体的快速、有效的ELISA方法(文摘)

酶联免疫吸附试验(ELISA)广泛应用于单克隆抗体的制备,应用于克隆化时筛选大量标本中的单抗和定量测定单抗,同时也需要一种实用、快速、安全、敏感,适于大量标本检测的方法。本文介绍一种全部反应过程采用振荡温育方式定量测定单抗的方法。该法用羊抗人IgM(GAH-IgM)包被于聚苯乙烯平底微量滴板孔中作为捕捉抗体。     

分析不同单克隆抗体识别的表位特异性的三种ELISA方法比较

<正> 在单克隆抗体(McAb)的特性鉴定中,确定其对抗原构象表位(或抗原决定簇)的特异性是十分重要的。它可为抗原分子的结构和功能分析以及进行生物学方面的研究提供必要的实验依据。本文采用McAb相加试验、竞争抑制试验和双位点夹心法三种简便的ELISA,分析了已建立的抗甲胎     

有助于诊断的单克隆抗体新技术(文摘)

一种新的制备单克隆抗体的方法若被证明和stratacyte公司作为商品化的技术一样有效,那么制备一种主要诊断工具-单克隆抗体的费用将会下降。 这项工作的研究者们克隆了识别相应抗原的抗体分子片段的基因,并在E.coli中表达成功。具体讲,他们将免疫球蛋白可变区的重链和轻链基因克隆进入表达载体,这些基因来自经抗原免疫后,小鼠的全部脾细胞mRNA。用PCR技术扩增这些基因,其探针可以识别可     

用ELISA检测白色念珠菌单克隆抗体

本文介绍了用于检测白色念珠菌单克隆抗体的ELISA方法与实验结果。采用戊二醛固定菌细胞而不用离心的方法,调整了抗原抗体反应时间,采用HRP-OPD酶底物反应显示系统,能大批量处理标本,成功地应用于白色念珠菌单克隆抗体的筛选检测及鉴定。本法在定性水平上与凝集试验结果一致。若稍加改进,可能适用于临床念珠病患者血清特异性抗体水平的检测,以达到辅助诊断目的。     

用单克隆抗体ELISA检测人血清中甲状腺球蛋白的探讨(摘要)

本文作者应用白制的3个鼠抗人甲状腺球蛋白(Alg)单克隆抗体建立厂快速、敏感、特异的3位抗体夹心的ELISA法。本法的标准曲线是用TG标准品连续稀释所得,共检测TG     

抗K物质单克隆抗体的制备(文摘)

本文报道速激族肽,包括K物质、P物质、神经素B等都具有神经递质的功能,它们越来越引起人们的关注。免疫方法诸如:放射免疫测定法、免疫组化法等对神经肽的分布、定位和生物学功能等方面的研究提供了极大的方便。作者以K物质-甲状腺球蛋白偶联物免疫动物,Wistar大鼠对K物质-甲状     

淋巴瘤对单克隆抗体出现意外的反应性(文摘)

CD_3(T_3)是确定成熟T细胞标记的一种单克隆抗体(McAb),而正常B细胞为阴性。成熟B细胞的典型标记是有表面免疫球蛋白(SIg)表达,而T细胞则SIg阴性.作者最近发现2例无细胞白血病,1例为分化良好的淋巴细胞性淋巴瘤,另1例为慢性淋巴细胞性白血病(CLL),这2例患者SIg和CD_3同时阳性。通过各种方法检查,认为SIg和CD_3似乎是内源性的。     

艾塞那肽单克隆抗体的制备及其ELISA检测方法的建立

正艾塞那肽(exenatide)是Exendin-4的人工合成品,是首获批准应用于2型糖尿病的胰高血糖素样肽1受体激动剂(glucagon-like peptide-1 receptor agonist,GLP-1RA)~([1-2])。注射给药后,通过模拟胰岛素抑制胰高血糖素的分泌,减慢     

抗人C_(1q)单克隆抗体检测方法—固相C_(1q)—ELISA的建立

为检测抗人C_(1q)单克隆抗体，我们建立了固相C_(1q)—ELISA。经取代试验、阻断试验及交叉试验，证明本法具有特异性；检测15份鼠抗人C_(1q)血清，结果其抗体滴度ELISA较双向免疫扩散法高22425倍;用6份血清试验批内及批间的变异系数范围分别为1.8—6.5%及6.2—16 .5%，表明有较好的重表性。本法适用于杂交瘤细胞上清中抗人C_(1q)单克隆抗体的检测。     

筛选抗霍乱弧菌单克隆抗体的ELISA方法

本文报道了有关抗霍乱弧菌单克隆抗体的ELISA方法。为使颗粒性抗原简便、快速、可靠地包被在载体上,而不出现非特异性显色,本文就菌体浓度、封闭条件、固定方法等方面进行了探讨。     

单克隆抗体快速方法(CLEARVIEW)宫颈标本中直接检出衣原体的评价(文摘)

沙眼衣原体是一重要的性传播性疾病病原体。在过去的十多年中,已有多种直接检测沙眼衣原体抗原的产品,这较传统的组织培养法实用,但这些第一代检测法仍需要数小时出结果,或需要特殊仪器,而敏感性和特异性又不高。本文报道一种以单克隆抗体研制的30min就出结果,只用单一试剂的免疫学方法“CLEARVIEW Chlamydia Test(CCT)”快速诊断衣原体感染,并以Mc