人参皂苷Rb1对肥胖小鼠骨骼肌胰岛素抵抗及AMPK信号通路的影响

目的:观察人参皂苷Rb1对肥胖模型小鼠体质量、体成分、血脂、骨骼肌耐力及胰岛素敏感性等指标的影响,研究其药理作用;并进一步探讨其对骨骼肌AMPK信号通路的影响。方法:选取8周龄C57BL/6J小鼠高脂喂养12周诱导肥胖模型,将成模小鼠随机分为模型对照组,二甲双胍组,人参皂苷Rb1组,以正常饲料喂养的小鼠作为正常对照,给药干预8周。每周定期检测小鼠体质量、摄食量;第3和7周行小鼠跑台实验;第4和8周行口服葡萄糖耐量实验;第8周用磁共振成像清醒动物体成分分析仪检测小鼠体成分;实验结束后取材,检测血脂4项及游离脂肪酸水平,实时荧光定量PCR检测骨骼肌组织单磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)α及过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1(PGC-1)α的mRNA水平,免疫印迹法检测脂肪组织AMPKα、p-AMPKα,PGC-1α蛋白的表达。结果:人参皂苷Rb1组小鼠体质量(自给药第5周起)、摄食量均明显低于模型对照组小鼠(P 0. 05),有一定的时效关系。人参皂苷Rb1可显著降低三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇,提高高密度脂蛋白胆固醇的水平,并降低血清游离脂肪酸水平(P 0. 05)。人参皂苷给药8周可降低肥胖小鼠体脂肪含量,并增加筋肌含量(P 0. 05),增加小鼠骨骼肌运动耐力(P 0. 05),改善其口服糖耐量。人参皂苷Rb1能上调肥胖小鼠骨骼肌组织AMPKαmRNA及蛋白表达,且p-AMPKα蛋白表达亦明显增加(P 0. 05),同时提高肥胖小鼠骨骼肌组织PGC-1α的mRNA及蛋白表达(P 0. 05)。结论:人参皂苷Rb1能通过激活骨骼肌AMPK信号通路相关蛋白,达到减轻肥胖小鼠体质量,降低血脂水平,提高骨骼肌耐力,并增加其胰岛素敏感性的作用。     

人参皂苷Rb1对C2C12骨骼肌细胞葡萄糖利用及AMPK信号通路相关基因表达的影响

目的:观察人参皂苷Rb1对胰岛素抵抗(IR)的C2C12骨骼肌细胞葡萄糖利用的影响,并基于AMPK信号通路探讨其可能的作用机制。方法:将C2C12细胞分为正常组、模型组、人参皂苷Rb1组,模型组以0. 25 mmol/L棕榈酸,1%小牛血清白蛋白培养16 h诱导IR,人参皂苷Rb1组在模型组的基础上以1、3、10、30、100μmol/L浓度的人参皂苷Rb1分别干预24 h和48 h,通过检测培养液中的葡萄糖含量反映葡萄糖消耗量,并应用CCK8试剂盒及光镜观察不同浓度人参皂苷Rb1对C2C12细胞活性及形态的影响,实时荧光定量PCR扩增分析人参皂苷Rb1对C2C12细胞AMPKα、SIRT-1、PGC-1α基因表达的影响。并应用shRNA沉默AMPKα的表达,构建AMPKα低表达的骨骼肌细胞模型,以1、3、10、30、100μmol/L浓度的人参皂苷Rb1分别干预24 h和48 h,与不含人参皂苷Rb1的培养液比较,再次验证人参皂苷Rb1对C2C12细胞葡萄糖利用的影响及其与AMPK信号通路的关系。结果:1、3、10、30μmol/L人参皂苷Rb1对C2C12细胞形态及活性无显著影响,而100μmol/L人参皂苷Rb1造成C2C12细胞活性降低及部分细胞死亡。10,30μmol/L人参皂苷Rb1能够促进IR的C2C12骨骼肌细胞葡萄糖消耗量,与模型组比较,差异有统计学意义(P 0. 05),且人参皂苷Rb1能够上调C2C12细胞AMPKα、SIRT-1、PGC-1α的基因表达(P 0. 05)。10、30μmol/L人参皂苷Rb1亦能增加AMPKα低表达的骨骼肌细胞的葡萄糖消耗量(P 0. 05),而该作用程度低于其对棕榈酸诱导的C2C12细胞IR的影响,且RT-PCR结果显示人参皂苷Rb1能上调AMPKα低表达的C2C12细胞SIRT-1、PGC-1α的基因表达。结论:人参皂苷Rb1能够有效促进IR的C2C12骨骼肌细胞葡萄糖消耗,该作用与调节AMPK信号通路有关,但除AMPK信号通路亦有其他作用途径。     

PERK Signaling of Unfolded Protein Response Activated in Acute Hypobaric Hypoxia and Effect of Ginsenoside Rb1

Objective To observe pancreatic ER kinase (PERK) signaling of unfolded protein response (UPR). Methods The rats were divided into control, model, and ginsenoside Rb1 (Rb1) groups, and put into hypoxia chamber to establish the acute plateau stress model. The water solutions of Rb1 were given to rats in Rb1 group for 7 d. After that, The behavior of rats was observed by Y-maze and passive avoidance test and the rats were sacrificed in a batch for detection by Western blotting. Results Hypobaric hypoxia mediated UPR pathway accompanied the activation of protective pathways such as PERK-eIF2a-ATF4 and Grp78/Bip pathways. On the other hand, Rb1, the extract from herbal medicine ginseng, increased on the expression of PERK, eIF2a, ATF4, and Grp78/Bip in rats. Conclusion The results indicate that PERK-eIF2a-ATF4-GRP78 pathway is a potential target for therapeutic applications in high altitude diseases and Rb1 can attenuate the injury to memory function caused by hypobaric hypoxia neurotoxicity.     

Inhibitory Effects of Ginsenoside Rb1 on Neuroinflammation Following Systemic Lipopolysaccharide Treatment in Mice

Ginsenoside Rb1 (GRb1) is a major ingredient of ginseng and has a wide range of neuroprotection effects. Neuroinflammation is a feature of neurodegenerative conditions and is characterized by microglia activation and the expression of major inflammatory mediators. The present study investigated the modulatory effect of GRb1 on microglia activation, the expression of pro‐inflammatory cytokines and cyclooxygenase (COX)‐2 in the brain induced by systemic lipopolysaccharide (LPS) treatment in C57BL/6 mice. Systemic LPS treatment induces immediate microglia activation in the brain. Based on this information, GRb1 was administered orally, at doses of 10 and 20 mg/kg, 1 h prior to the LPS (3 mg/kg, intraperitoneally) injection. At a dose of 20 mg/kg GRb1 attenuated Iba1 protein expression and morphological activation of microglia by LPS. GRb1 significantly reduced the upregulation of tumor necrosis factor‐α, interleukin (IL)‐1β and IL‐6 mRNA in the brain tissue at 4 h after LPS injection. In addition, the expression of COX‐2 mRNA and protein in the brain tissue were also attenuated at the 20 mg/kg dose of GRb1. These results indicate that GRb1 plays a modulatory role in microglia activation and neuroinflammation. This study shows that GRb1 attenuates microglia activation in the brain using an in vivo animal model. Copyright © 2012 John Wiley & Sons, Ltd.     

基于信号通路的中药治疗2 型糖尿病胰岛素抵抗的研究进展

胰岛素抵抗与2型糖尿病的发病密切相关。中药治疗2型糖尿病胰岛素抵抗具有安全、多靶点等优势,已成为目前的研究热点。越来越多的临床和实验研究表明,中药可以有效地改善胰岛素抵抗。其中中药通过胰岛素信号转导通路干预胰岛素抵抗的研究在阐明中药作用机制方面尤为重要,本文基于信号通路对IRS、PI3K/Akt、AMPK、GLUT、GSK-3、NF-κB、p38 MAPK、JNK、Nrf2、PPARs、PTP1B等主要靶标对在中药干预胰岛素抵抗的机制作了总结,以期为以后的相关研究提供基础。     

HPLC-ELSD法测定三七止血胶囊中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的含量

目的:采用高效液相色谱法-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)测定三七止血胶囊中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的含量.方法:以乙腈-水为流动相梯度洗脱(0～12 min,乙腈19%→36%),Hypersil ODS柱(4.0 mm × 200mm,5 μm)为固定相,流速为1.0 mL·min-1,ELSD参数:漂移管温度45℃,载气流量1.5 L·min-1.结果:三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的回收率分别为97.86%,96.24%和97.58%,RSD分别为1.36%,1.58%和1.13%(n=6).结论:该方法简便、快速、重现性好,可用于三七止血胶囊的质量控制.     

HPLC测定复方血栓通胶囊中人参皂苷Rg_1Rb_1和三七皂苷R_1的含量

目的:建立HPLC测定复方血栓通胶囊中人参皂苷Rg1、Rb1和三七皂苷R1含量的方法。方法:采用Shi-madzu-C18柱,以乙腈为流动相A,以水为流动相B,进行梯度洗脱,检测波长为203nm,流速为1.0mL/min,柱温为40℃,理论板数按三七皂苷R1峰计算应不低于2000。结果:测得人参皂苷Rg1在0.868～8.680μg(r=0.9999,n=6)、人参皂苷Rb1在0.892～8.920μg(r=1.0000,n=6)、三七皂苷R1在0.308～3.080μg(r=1.0000,n=6)线性关系良好;平均回收率人参皂苷Rg1为100.11%,RSD0.71%;人参皂苷Rg1为99.91%,RSD0.87%;三七皂苷R1为99.90%,RSD1.61%,(n=5)。结论:本法准确,专属性强。     

双益方、组方中药及有效成分对骨骼肌及HepG2细胞胰岛素抵抗的影响

目的:研究双益方、组方中药及有效成分对骨骼肌细胞胰岛素抵抗模型葡萄糖消耗量及人肝癌HepG2细胞糖原合成,己糖激酶(hexokinase,HK),丙酮酸激酶(pyruvate kinase,PK)活性的影响,初步探讨其作用机制,为其临床应用奠定基础。方法:采用高胰岛素方法建立骨骼肌细胞的胰岛素抵抗(IR)模型,观察双益方低、中、高剂量组、组方中药(黄芪、山茱萸、黄连、桑白皮、葛根、佩兰),有效成分(黄芪甲苷,毛蕊异黄酮葡萄糖苷,熊果酸,马钱苷,小檗碱,1-脱氧野尻霉素,葛根素)组(30,120,480μg·L-1)对骨骼肌细胞胰岛素抵抗模型的葡萄糖消耗量的影响,蛋白质免疫印迹法(Western blot)测定骨骼肌细胞蛋白酪氨酸磷酸酶-1B(protein tyrosine phosphatase-1B,PTP-1B),葡萄糖转运蛋白4(glucosetransporters 4,GLUT4)表达;建立HepG2细胞的胰岛素抵抗模型,研究双益方、组方中药及其有效成分对HepG2细胞糖原合成及己糖激酶、丙酮酸激酶活性的影响。结果:双益方,黄芪,山茱萸,黄芪甲苷,1-脱氧野尻霉素,葛根素可降低骨骼肌细胞细胞上清液葡萄糖浓度(P0.05),以480μg·L-1双益方,黄芪甲苷组及葛根素组效果较好;与模型组比较,双益方、黄芪及有效成分组方可降低PTP-1B,提高GLUT-4的表达(P0.05,P0.01)。与正常组比较,模型组糖原合成量及HK,PK活性显著降低(P0.01);与模型组比较,各浓度组单味中药及有效成分均能一定程度的增加糖原合成量及HK,PK活性(P0.05,P0.01),其中黄芪甲苷、黄芪提取液增加糖原合成及提高HK活性作用较好;双益方提取液及葛根素增加PK活性作用较好。结论:双益方、组方中药及有效成分对骨骼肌,HepG2细胞胰岛素抵抗具有一定缓解作用,降低PTP-1B表达、提高GLUT4表达、增加糖原合成、提高HK,PK活性可能是其作用机制。     

黑果枸杞子对过度训练大鼠骨骼肌MAPK信号通道蛋白表达及抗氧化应激损伤能力的影响

目的:研究黑果枸杞子对过度训练大鼠骨骼肌MAPK信号通道蛋白表达及抗氧化应激损伤能力的影响。方法:以等量负荷有氧运动训练和大强度耐力训练大鼠为模型,50只SPF级Wistar 49 d龄雄性大鼠为对象,随机分为4组,分别为正常组、有氧训练组、过度训练组、过度训练+黑果枸杞子组,每组12只(剔除不符合实验要求的大鼠)。每天灌胃(ig)给药1次,黑果枸杞子干预组剂量为4.48 mg·kg-1,ig体积为5 m L·kg-1,其他组ig等体积生理盐水。42 d负荷游泳训练后,测试各组大鼠骨骼肌丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)信号系统蛋白表达及氧化应激损伤相关指标,分光光度法检测骨骼肌超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量;蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测MAPK信号通道蛋白表达;酶联免疫吸附测试法(ELISA)检测3-硝基酪氨酸(3-NT),8-羟基脱氧鸟苷(8-OHd G)含量;乙酰半胱氨酸法检测血清肌酸激酶(CK)活性;苯肼显色法检测乳酸脱氢酶(LDH)活性。结果:力竭游泳时间,有氧训练组较正常组有所延长,黑果枸杞子干预组较过度训练组显著增加(P0.01)。骨骼肌SOD活性,有氧训练组略高于正常组;过度训练组较正常组和有氧训练组明显下降(P0.05),黑果枸杞子干预组较过度训练组明显升高(P0.05)。骨骼肌MDA含量,有氧训练组略低于正常组;过度训练组较正常组和有氧训练组显著升高(P0.01),黑果枸杞子干预组较过度训练组显著降低(P0.01)。骨骼肌3-NT,8-OHd G,有氧训练组略高于正常组;过度训练组较正常组和有氧训练组显著升高(P0.01);黑果枸杞子干预组较过度训练组明显降低(P0.05)。血清LDH活性,有氧训练组略高于正常组;过度训练组较正常组和有氧训练组均显著升高(P0.01);黑果枸杞子干预组较过度训练组明显升高(P0.05)。血清CK活性,有氧训练组略高于正常组;过度训练组较正常组和有氧训练组显著升高(P0.01);黑果枸杞子干预组较过度训练组显著降低(P0.01)。p38 MAPK,细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)信号通路蛋白表达,有氧训练组高于正常组(P0.05),低于过度训练组(P0.05);过度训练组高于安静组(P0.01);黑果枸杞子干预组高于正常组(P0.05),低于过度训练组(P0.05)。结论:补充黑果枸杞子可以有效缓解过度训练导致的机体内环境失衡,抑制MAPK信号通路蛋白的过度表达,激活过度训练大鼠骨骼肌MAPK信号转导系统诱导抗氧化酶基因表达,提高机体尤其是骨骼肌的氧自由基清除能力,调节机体的抗氧化应激损伤能力,预防和延缓氧化应激损伤及运动疲劳的发生与发展。     

黄芪多糖对肥胖模型大鼠胰岛素抵抗的作用研究

目的:观察黄芪多糖对高脂饲料诱导肥胖大鼠的影响,探讨黄芪多糖改善胰岛素抵抗的作用机制,为其应用于临床提供理论依据。方法:采用高脂饲料连续喂养6周的方法复制大鼠肥胖模型,将其分为模型组、黄芪多糖组(400 mg·kg^-1)、吡格列酮组(20 mg·kg^-1),另设空白组,各组给予相应的药物灌胃,连续给药4周。检测血清中空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、三酰甘油(triglyceride,TG)、胆固醇(total cholesterol,TC)、胰岛素(insulin,INS)水平,计算胰岛素敏感指数(ISI)、内脏脂肪含量(VF/W);PCR法检测大鼠骨骼肌磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)mRNA表达;Western Blot法检测大鼠骨骼肌PI3K p85蛋白的表达。结果:黄芪多糖组及吡格列酮组TG、TC、INS、VF/W水平明显降低(P<0.05),ISI水平升高(P<0.05),PI3KmRNA表达水平明显升高(P<0.05),PI3Kp85α的蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论:黄芪多糖改善肥胖大鼠胰岛素抵抗可能是通过降低血清中TC、TG及上调骨骼肌中PI3K来实现的。     

HPLC法测定抗瘤丸中三七皂苷R1及人参皂苷Rg1、Rb1的含量

目的建立以高效液相色谱法测定抗瘤丸中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1含量的方法。方法色谱柱为Kromasil C18柱（4．6mm×150mm，5um），使用梯度洗脱系统，流动相为乙腈-0．05％磷酸溶液；流速为1．0mL／min；检测波长为203nm；进样量为10μL；柱温为30℃。结果三七皂苷R1的线性范围为82．8～621μg（，=0．9999），平均回收率为100．057％（RSD=0．3996％）；人参皂苷Rg1的线性范围为109．8～823，5μg（，=0．9996），平均回收率为99．248％（RSD=1．0046％）；人参皂苷Rb1的线性范围为112．6～844．5μg（，=0．9999），平均回收率为99．812％（RSD=1．4744％）。结论本方法操作简便、准确，重复性好，可用于抗瘤丸中三七皂苷R1及人参皂苷Rg1、Rb2的含量测定。     

匙羹藤对2型糖尿病db/db小鼠骨骼肌葡萄糖转运信号通路的影响

目的观察匙羹藤(Gymnema sylvestre(Retz.)Schult.对自发性db/db小鼠胰岛素抵抗及骨骼肌葡萄糖转运信号通络中关键蛋白表达的影响。方法将SPF级27只db/db小鼠随机分3组(n=9):模型组、匙羹藤提取物组、吡格列酮组;并选8只db/+m鼠为正常组。连续灌胃给药4周后检测FBG、Fins、血脂、FFA,采用Western blot对骨骼肌葡萄糖转运信号通路中的关键蛋白和基因进行了研究。结果模型组和治疗组的体重、FBG、Fins、TG、CHOL、LDL、FFA水平明显高于正常组,而ISI指数低于正常组;与模型组相比,匙羹藤组db/db小鼠的FBG、Fins、TC、LDL-C水平降低,提高ISI指数,上调骨骼肌组织中PI3-K/Akt途径中磷酸化Akt(Ser473)蛋白表达和GLUT m RNA表达水平。结论匙羹藤可改善糖脂代谢紊乱,增加胰岛素的敏感性,其改善胰岛素抵抗的机制可能与胰岛素信号转导的"经典途径"PI3-K/Akt通路有关,通过调节靶蛋白或基因的表达及活性以增加葡萄糖的转运。     

金匮肾气丸对糖尿病大鼠骨骼肌胰岛素受体表达的影响

目的:探讨金匮肾气丸(Jinkui Shenqi Wan,JKSQ)对糖尿病大鼠骨骼肌胰岛素受体(insulin receptor,InsR)基因表达的影响,阐明其降低血糖的分子机制。方法:6周龄的SPF级雄性SD大鼠高脂高糖饲料喂养4周后,腹腔注射链脲佐菌素制备糖尿病模型。4 d后模型大鼠随机分成模型组、二甲双胍组、JKSQ低、高剂量组。正常组与模型组给予生理盐水,二甲双胍组给予二甲双胍(100 mg·kg-1),JKSQ低、高剂量组分别给予JKSQ(10,20 g·kg-1)灌胃4周。以酶学方法检测各组大鼠骨骼肌的己糖激酶(hexokinase,HK),6-磷酸果糖激酶-1(6-phosphofructokinase-1,PFK)活性,逆转录实时荧光定量PCR及蛋白印迹法检测骨骼肌InsR mRNA及蛋白表达水平变化。结果:与正常组比较,模型组出现了HK,PFK活性下降(P<0.01),InsR mRNA及蛋白质表达下降(P<0.01);给药治疗4周后,与模型组相比较,二甲双胍组、JKSQ低、高剂量组HK,PFK活性明显上升(P<0.05);同时各组InsR mRNA及蛋白质表达量明显提高(P<0.05)。结论:JKSQ能上调2型糖尿病大鼠骨骼肌InsR基因在mRNA及蛋白质的表达,增加HK与PFK活性,促进葡萄糖的氧化利用。     

丹蛭降糖胶囊改善肥胖大鼠骨骼肌胰岛素抵抗机制的初步研究

目的:探讨丹蛭降糖胶囊对高脂饮食诱导的肥胖大鼠骨骼肌脂联素(APN),脂联素受体结合蛋白(APPL1)及葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)表达的影响。方法:雄性SD大鼠随机分为普通饮食组(NC组)、单纯高脂饮食组(HF组)、高脂饮食+丹蛭降糖胶囊组(FD组,470 mg·kg-1·d-1)、高脂饮食+吡格列酮组(PIO组,10 mg·kg-1·d-1)、高脂饮食+丹蛭降糖胶囊联合吡格列酮组(FD/PIO组,丹蛭降糖胶囊470 mg·kg-1·d-1+吡格列酮10 mg·kg-1·d-1),ig给药4周。NC组继续普通饲料喂养,给予蒸馏水ig。应用全自动生化分析仪测定骨骼肌甘油三酯(TG)含量;免疫组化及Western blot检测APN,APPL1,GLUT4在骨骼肌组织中的定位以及蛋白表达。结果:1HF组骨骼肌内TG含量显著高于NC组(P<0.01)。相较于HF组,各干预组大鼠骨骼肌TG含量均明显下降(P<0.05)。2免疫组化以及Western blot检测结果显示,HF组APN,APPL1,GLUT4表达较NC组明显降低(P<0.05);各干预组APN,APPL1,GLUT4表达均较HF组明显增加(P<0.05)。3相关分析发现,大鼠骨骼肌TG含量与HOMA-IR呈正相关(r=0.63,P<0.01),与APN,APPL1,GLUT4蛋白均呈负相关(r分别为-0.57,-0.51,-0.62,均P<0.01);HOMA-IR与APN,APPL1,GLUT4蛋白均呈负相关(r分别为-0.49,-0.44,-0.52,均P<0.05,P<0.01)。结论:丹蛭降糖胶囊可减轻骨骼肌脂质沉积,上调骨骼肌组织中的APN,APPL1,GLUT4表达,从而改善骨骼肌胰岛素抵抗。     

芒果苷对HepG2细胞胰岛素抵抗的影响

目的探讨芒果苷在体外的降糖效果及对胰岛素传导关键信号蛋白磷酸化蛋白激酶B[p-AKT(Thr308)]、磷酸化糖原合成激酶3β[p-GSK-3β(Ser9)]、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPKα)、葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)表达的影响。方法培养HepG2细胞,用CCK-8法检测芒果苷对HepG2细胞增殖的影响;采用浓度为1×10^-6 mol/L的胰岛素刺激细胞36 h建立胰岛素抵抗模型;用葡萄糖检测试剂盒检测芒果苷对胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖消耗的影响,用western blot法探讨其可能的作用机制。结果芒果苷浓度在>125μg/mL浓度后对HepG2细胞生长有抑制作用,故采用浓度为60、30、15μg/mL的芒果苷进行葡萄糖消耗实验,发现实验组与模型组比较,葡萄糖消耗量明显增加且具有显著性差异(P<0.01,P<0.05)。western blot结果表明,与正常组比较,模型组p-AKT(Thr308)、p-GSK-3β(Ser9)、AMPKα、GLUT2蛋白表达明显降低且存在显著性差异(P<0.05);与模型组比较,实验组蛋白表达均明显增加,且高剂量组均存在显著性差异(P<0.01,P<0.05),低剂量组除GLUT2蛋白表达具有显著性差异(P<0.05),其他蛋白虽有增加但无统计学意义。结论芒果苷对HepG2细胞胰岛素抵抗有改善作用,其作用机制可能是通过调控p-AKT(Thr308)、p-GSK-3β(Ser9)、AMPKα及GLUT2等蛋白的表达来改善2型糖尿病的胰岛素抵抗。     

黄芪散对高脂饮食诱导肥胖大鼠肝脏内质网应激信号通路的影响

目的:观察黄芪散对高脂饮食诱导的肥胖大鼠肝脏内质网应激信号通路的影响,并探讨其机制。方法:选择雄性SD大鼠,通过高脂饲料连续喂养7周建立肥胖大鼠模型后,将其随机分为模型组,黄芪散低、高剂量组(1. 2,2. 4 g·kg-1),立普妥组(2 mg·kg-1),模型组和正常组给予等量生理盐水,灌胃给药,连续15周。分别测定各组大鼠的体质量、附睾脂肪系数、肝脏系数;采用生化试剂测定血浆空腹血糖(FPG),总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的水平;采用苏木素-伊红(HE)染色法观察各组大鼠附睾脂肪及肝脏病理变化;同时采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肝组织中固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c),蛋白激酶R样内质网激酶(PERK),肌醇依赖酶1α(IRE1α),磷酸化IRE1α(p-IRE1α)的蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠的体质量和肝脏系数显著升高(P 0. 01); FPG,TC,TG,LDL-C水平均明显升高(P 0. 05,P 0. 01)。模型组大鼠的脂肪细胞和肝细胞体积明显增大,细胞中可见大量脂肪小泡。同时肝组织中内质网应激相关因子SREBP-1c,PERK,IRE1α,p-IRE1α的蛋白表达明显升高(P 0. 05,P 0. 01)。与模型组比较,黄芪散高、低剂量组均能明显降低肥胖大鼠的体质量、附睾脂肪系数、肝脏系数和糖脂水平(P 0. 05,P 0. 01),且能明显改善附睾脂肪和肝脏的病变程度。黄芪散高、低剂量组及立普妥组大部分可不同程度地降低肝组织中SREBP-1c,PERK,IRE1α/p-IRE1α的蛋白表达水平(P 0. 05,P 0. 01)。结论:黄芪散具有调节糖脂代谢、保护肝脏和减轻体质量的作用,其机制可能与调控肝脏内质网应激相关因子SREBP-1c,PERK,IRE1α/p-IRE1α的蛋白表达有关。     

生芪降糖颗粒对胰岛素抵抗鼠的作用及机制研究

目的 观察生芪降糖颗粒干预胰岛素抵抗（IR）模型大鼠的作用,并探讨其作用机制。方法 选取Wistar大鼠以高脂饮食、链脲佐菌素腹腔注射制造IR模型,随机分组分别给予不同剂量的生芪降糖颗粒、罗格列酮治疗,同时设立正常对照组,观察血糖以及主动脉内皮素-1（ET-1）、蛋白激酶（PKC）蛋白表达的变化。结果 生芪降糖颗粒中、高剂量组和罗格列酮组大鼠的血糖均明显下降,并以生芪降糖颗粒高剂量组下降最明显。模型组主动脉ET-1、PKC表达量较正常组显著升高（P〈0．05）。罗格列酮组和生芪降糖颗粒高剂量组主动脉ET-1、PKC表达量较模型组均下降,与模型组比较差异具有显著性（P〈0．05）,且呈剂量依赖性。结论 生芪降糖颗粒通过降糖、抑制ET-1、PKC表达等作用,改善血管内皮功能,从而起到胰岛素增敏及减轻胰岛素抵抗的作用。     

12种西洋参中总皂苷及人参皂苷Rb1的测定比较

目的建立西洋参中人参皂苷Rb1含量测定的现代分析方法,并对12种西洋参中的总皂苷及人参皂苷Rb1进行测定,以观察不同产地对其含量变化的影响.方法人参总皂苷含量测定采用比色法,人参皂苷Rb1含量测定采用高效液相色谱法.结果人参皂苷Rb1含量在62～1 230μg·ml-1之间呈良好线性,平均回收率为99.2%(RSD=1.69%).12种西洋参中,有10种西洋参所含人参总皂苷均大于4%,人参皂苷Rb1含量大于1%.结论该法操作简便,快速,重现性好,结果准确,可作为西洋参质量控制方法.     

Ginsenoside Rg1 promotes glucose uptake through activated AMPK pathway in insulin-resistant muscle cells

Ginsenoside Rg1, a protopanaxatriols saponin, is one of the major active constituents from Panax ginseng and possesses various biological activities. A recent study reported that insulin resistance in skeletal muscle is a major contributor to the development of type 2 diabetes mellitus (T2DM). We examined the effects of ginsenoside Rg1 on glucose uptake and the associated molecular mechanisms of the glucose transport system in insulin-resistant muscle cells. The insulin resistance of the muscle cell was induced by treatment of differentiated C2C12 cells with chronic insulin. The results showed that chronic treatment of insulin resulted in reduced glucose uptake in the muscle cells. The treatment of ginsenoside Rg1 significantly enhanced glucose uptake in the differentiated muscle cells and the relative abundance of GLUT4 through the adenosine-monophosphate-activated protein kinase pathway. These results suggest that ginsenoside Rg1 improved the insulin resistance in C2C12 muscle cells, which might be useful for prevention of T2DM and metabolic syndromes.     

基于N-糖基化修饰组学探究人参皂苷Rb1改善高脂血症大鼠脂代谢紊乱机制

目的 通过研究人参皂苷Rb1对高脂血症大鼠血浆N-糖基化修饰组学的影响，在蛋白质修饰水平探讨人参皂苷Rb1对脂代谢紊乱的作用机制。方法 SPF级SD大鼠24只，随机分为正常对照组、高脂组与Rb1组，每组8只。高脂组与Rb1组饲喂高脂饲料4周。Rb1组从第5～12周给予人参皂苷Rb1 200 mg/（kg·d）灌胃，正常对照组与高脂组同期给予等体积生理盐水灌胃，给药期间高脂组与Rb1组继续给予高脂喂养。12周后，全自动生化分析仪检测血清血脂[总胆固醇（TC）、总甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）]水平，HE与油红O染色观测肝组织形态学变化与脂质沉积情况。N-糖基化修饰组学探究人参皂苷Rb1改善高脂血症大鼠脂代谢紊乱的作用机制。结果 与正常对照组比较，高脂组血清TC、TG、LDL-C水平升高，HDL-C水平降低（P<0.01）；与高脂组比较，Rb1组血清TC、TG降低（P<0.01,P<0.05）,HDL-C水平升高（P<0.05）。形态学结果显示人参皂苷Rb1能够显著改善高脂血症大鼠肝脏组织结构与脂质沉积。N-糖基...