天麻多糖与蜜环菌多糖抗眩晕症作用研究

目的研究天麻多糖(GEP)与蜜环菌多糖(AMP)抗眩晕症效果。方法由机械旋转使小鼠产生眩晕后,通过迷宫实验与跳台实验测定各组眩晕小鼠逃避电击所用时间,并观察眩晕小鼠的进食量。结果GEP与AMP活性相似,均能显著缩短眩晕小鼠逃避电击所用的时间(P<0.01),增加眩晕后小鼠的进食量。结论GEP与AMP对机械旋转所致眩晕症均具有一定疗效。     

蜜环菌不同发育阶段多糖成分的研究

目的 :对蜜环菌不同发育阶段体内多糖的性质和含量进行研究。方法 :提取、分离、纯化蜜环菌菌丝体、发酵液、菌索和子实体多糖 ,应用红外光谱分析法、高效液相色谱法、凝胶渗透色谱法和凝胶色谱法等方法测定蜜环菌 4种多糖的性质、多糖组成、多糖含量和多糖分子量。结果 :蜜环菌菌丝体和发酵液多糖为单一葡萄糖组成的葡聚糖 ;菌索和子实体多糖由葡萄糖、木糖组成 ,这两种单糖在菌索多糖中的摩尔比为 1∶14,在子实体多糖中的摩尔比为 1∶10。蜜环菌多糖的分子量为 1万～7万。蜜环菌不同发育阶段多糖含量分别为菌丝体含 9.00% ;发酵液含 0.87g·(100ml)^-1;菌索含 1.12% ;子实体含 2.27%。结论 :蜜环菌不同发育阶段多糖成分的研究 ,为综合开发利用蜜环菌提供了科学依据。     

蜜环菌菌索多糖抗衰老作用研究

目的:研究蜜环菌菌索多糖(ARP)抗衰老活性。方法:选用黑腹果蝇和D-半乳糖致衰老模型小鼠,观察ARP对果蝇寿命的影响,跳台法与迷宫法测定衰老小鼠学习记忆能力,称小鼠体重,测定脾脏、胸腺指数,取血清、肝、脑组织测定SOD、MDA、GSH-Px、NO。结果:ARP可显著延长果蝇寿命,明显改善衰老模型小鼠的学习记忆能力,增加其体重,拮抗胸腺、脾脏的萎缩,显著提高SOD、GSH-Px活性并降低MDA、NO含量。结论:ARP可通过调节机体免疫功能、清除自由基等方面发挥其延缓衰老的作用。     

蜜环菌多糖的分离纯化及组成分析

 蜜环菌粗多糖经溴代十六烷基三甲铵处理后分为可溶性部分和不溶性部分。不溶性部分经ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ－２５柱层析得酸性纯多糖。可溶性部分经ＤＥＡＥ纤维素柱，Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ６８柱层析得中性多糖。它们的分子量分别为１４０００，１８０００。中性多糖组成是甘露糖，葡萄糖，半乳糖，比例为１．７：５：１。酸性多糖组成是半乳糖，木糖，阿拉伯糖，岩藻糖，鼠李糖，比例为２．８：２．７１１：１．７：１；２，另外还含有半乳糖醛酸。     

蜜环菌菌索多糖的分离纯化及其部分理化性质

 目的：测定纯化蜜环菌菌索多糖（简称Am）组分的部分理化性质，以进一步了解Am结构和功能的关系。方法：用超滤、醇析法将蜜环菌(Armillariella mellea)菌索的水溶性多糖进行粗提，再经Saphadex G-150柱色谱纯化。结果和结论：Am为均一性组分，其[α]²⁵_D为+50°，不含蛋白质，相对分子量为13.8万，Dische反应呈阳性。水解产物为D-葡萄糖、D-甘露糖、D-半乳糖、D-木糖和半乳糖醛酸。红外光谱分析证明Am的组成单体为吡喃糖，含有乙酰氨基官能团。     

不同蜜环菌菌株生物学特性及菌丝体多糖含量的研究

 目的 对不同来源的11种蜜环菌菌株的生物学特性及多糖含量进行研究。方法 蜜环菌菌株生物学特性的观察采用平板培养法,菌丝体多糖含量的测定采用比色法。结果 菌株A₁,A₄,A₅,A₇,A₉及A₁₀菌索比较发达,而菌株A₂,A₃,A₆,A₈及A₁₁菌丝体比较发达;平均生长速度最快的菌株为A₉,A₁₀;发酵物中每克菌丝体多糖含量,以菌株A₁₀中含量最高。结论 不同蜜环菌菌株之间的生物学特性以及菌丝体多糖含量均存在着显著的差异     

蜜环菌发酵液在猪苓菌发酵过程中的应用

 试验证明不同蜜环[lArmillaria mellea (Vahl. ex Fr. )]菌株的发酵液均对猪苓菌[_Grifora .umbellata (Fr. Pildt)]发酵生产过程中菌丝体的生长及多糖的产生具有促进作用，表现在菌球数量多、重 量大、多糖的含量高。其中尤以Am23-4号及Am28-1号蜜环菌株效果最佳，在其最佳产糖期发酵液中粗多糖含量达7. Omg/ml,而未加蜜环菌发酵液的对照仅有5. 2mg/ml。     

蜜环菌不同发育阶段甲素和戊素含量变化研究

利用高效液相色谱法,对蜜环菌不同发育阶段蜜环菌甲素、戊素的含量进行了研究。结果表明:菌丝体含甲素0.0085%、戊素0.0002%;发酵液中甲素0.54mg/L、戊素未检出;菌索含甲素0.0008%、戊素0.0011%;子实体含甲素0.002%、戊素0.0011%。     

蜜环菌菌株对天麻素含量的影响

目的:研究蜜环菌对天麻素含量的影响,为蜜环菌菌株选育提供科学依据。方法:采用蜜环菌不同菌株与天麻不同品种伴栽试验。结果:天麻品种和蜜环菌都能影响天麻素含量,杂交种F1的天麻素含量优势明显,与采自韩国的蜜环菌B1伴栽的天麻素含量最高。     

蜜环菌抑制天麻种子发芽的研究

继1978年初步研究观察到蜜环菌有降低天麻种子发芽率的现象后,又研究证实蜜环菌主要对种子萌发初期起抑制作用。将具有蜜环菌代谢产物的无菌滤液加入培养基播种证明,蜜环菌的代谢产物对天麻种子发芽有抑制作用。     

蜜环菌菌索多糖延缓秀丽隐杆线虫衰老机制研究

目的 探讨蜜环菌菌索多糖（AMP）延缓秀丽隐杆线虫衰老的作用机制。方法 以模式生物秀丽隐杆线虫作为活体模型,测定其在正常培养条件下的生存期与后代平均数量,氧化应激条件下的存活率和热休克蛋白16.2（HSP-16.2）、超氧化物歧化酶-3（SOD-3）的表达。结果 在正常培养条件下,蜜环菌菌索多糖（AMP-1、AMP-2）显著延长秀丽隐杆线虫的生存期,对其生殖力没有损害;在氧化应激条件下,显著提高秀丽隐杆线虫HSP-16.2和SOD-3的表达。结论 提高秀丽隐杆线虫的氧化应激能力可能是AMP延缓秀丽隐杆线虫衰老的作用机制。     

黄芪和当归配伍对环磷酰胺所致骨髓造血功能抑制小鼠造血功能的影响

目的探讨黄芪和当归不同比例配伍对环磷酰胺(CTX)所致骨髓造血功能抑制小鼠造血功能的影响,分析二者配伍的相互作用。方法采用CTX ip复制小鼠骨髓造血功能抑制模型,以重组人粒细胞集落刺激因子(NG-CSF)作为阳性对照药物,药物组分别ig给予当归、黄芪、当归一黄芪不同比例(10:1、5:1、2.5:1、1:1、1:2.5、1:5、1:10)配伍的提取物。测定外周血象,血清造血生长因子粒单系集落刺激因子(GM-CSF)、促红细胞生成素(EPO)、血小板生成素(TPO)的量,计数骨髓有核细胞数(BMNC),测定骨髓造血组织面积及脾指数(SI)。以综合指数法整合所有检测指标,采用多重线性回归分析法分析黄芪、当归2种药物间的相互作用。结果在连续注射CTX后的5~7d,小鼠外周血象显著降低,同时伴有血清GM-CSF、TPO量降低,骨髓BMNC减少,SI升高,骨髓造血组织面积减少。单用黄芪对外周血象、血清造血生长因子(HGF)量、骨髓造血组织面积和BMNC均无显著影响。单用当归可升高外周血中白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血小板(PLT)数,增加骨髓造血组织面积,但能不增加血清HGF的量和BMNC。黄芪-当归(5:1、2.5:1、1:1、1:2.5、1:5、1:10)配伍可升高外周血WBC、RBC、PLT数量,增加HGF的量、BMNC数量和骨髓造血组织面积,降低SI。综合效应分析表明,黄芪-当归1:1、1:2.5、1:5比例配伍时发挥促造血的作用最强。相互作用分析表明,黄芪-当归配伍后,当归发挥促造血作用的重要性大于黄芪,黄芪和当归配伍时其交互作用对药物效应的发挥产生了不可忽视的正面影响,二者配伍对促进造血具有增效作用。结论黄芪-当归配伍具有促进造血的作用,当归的促造血作用大于黄芪,黄芪配伍当归后对促进造血具有协同增效作用,黄芪与当归以1:1、1:2.5、1:5比例配伍时的促造血作用为佳。     

蜜环菌与天麻共生分子机制的转录组分析

目的以蜜环菌和昭通乌天麻营养繁殖茎为实验材料,通过转录组测序比较分析,初步揭示蜜环菌天麻共生的分子机制。方法采用Trizol Reagent(Invitrogen)提取营养繁殖茎样品中的RNA,建立测序文库并进行测序。结果蜜环菌与天麻共生时有38 838条序列得到注释,在FDR(False Discovery Rate)0.05和log2|FC|1筛选条件下,共有23 333条基因发生显著差异表达,其中1 595条基因呈上调表达,21 738条呈下调表达。基于转录组数据分析结果,与胞外酶纤维素酶、木聚糖酶、漆酶以及多聚半乳糖醛酸酶相关的Unigene分别有21、6、39和6个,集中差异表达基因分别有9、3、23和4个,除1个纤维素酶基因上调表达外,其他均呈下调表达;与抗氧化酶超氧化物歧化酶、过氧化物酶和过氧化氢酶有关的Unigene基因分别有13、7和17个,其中差异表达的基因分别有6、7和7个,都呈下调表达。此外,q RT-PCR分析验证了这些基因呈下调表达。结论蜜环菌侵染天麻与其共生的过程中,蜜环菌的生命活动减弱,同时未受到天麻胁迫作用。这为进一步研究天麻蜜环菌共生分子机制提供了大量有价值的基因资源。     

黄芪多糖对甲醛染毒人骨髓间充质干细胞DNA损伤的保护作用

目的研究黄芪多糖(APS)对甲醛染毒人骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)DNA损伤的保护作用及潜在机制。方法体外培养人BM-MSCs,随机分为对照组、模型组(甲醛)和APS 40、100、400μg/mL组。利用MTT法检测细胞增殖活性,彗星实验检测DNA断裂,KCl-SDS沉淀实验检测DNA-蛋白交联(DPCs),q RT-PCR和Western blotting检测着色性干皮病基因A(XPA)、着色性干皮病基因C(XPC)、DNA修复切除修复交叉互补基因1(ERCC1)、复制蛋白A1(RPA1)、复制蛋白A2(RPA2)m RNA和蛋白表达水平。结果与模型组比较,APS 40、100、400μg/m L作用后,细胞增殖活性显著升高(P0.01),DNA断裂和DPCs形成显著减少(P0.01),XPA、XPC、ERCC1、RPA1、RPA2 mRNA和蛋白表达水平显著升高(P0.05、0.01),其中APS 100μg/mL组效果最明显。结论 APS可以保护甲醛诱导的人BM-MSCs DNA损伤,APS100μg/mL保护作用最为明显,其机制可能与上调XPA、XPC、ERCC1、RPA1和RPA2基因表达,促进DNA修复有关。     

蜜环菌的化学成分及生物活性研究进展

蜜环菌Armillaria mellea为口蘑科(Tricholomataceae)蜜环菌属Armillaria(Fr.:Fr.)Staude.药食兼用真菌,具有催眠、镇静、改善心脑血液循环、降血糖、抗氧化、调节免疫、抑制肿瘤等多种生物活性。蜜环菌含有特征性化学成分原伊鲁烷(protoilludane)型倍半萜醇的芳香酸酯类,以及二萜、三萜、多糖、腺苷类等多种类型次生代谢产物。对蜜环菌的化学成分及生物活性进行综述,为蜜环菌的开发利用提供参考。     

猪苓与蜜环菌化学成分研究的相关分析进展

共生的猪苓Polyporus umbellatus与蜜环菌Armillaria mellea均为药食兼用真菌,具有降血糖、调节免疫、抑制肿瘤等多种生物活性。猪苓菌核经菌丝体发育而来,其生长过程与共生蜜环菌有关;受其侵染,猪苓菌丝体可形成菌核。该文通过分析猪苓菌丝体、菌核和蜜环菌的化学成分,发现三者均含有甾体和含氮杂环等化合物,且猪苓菌核与蜜环菌中还含有三萜类次生代谢产物。猪苓菌核及其菌丝体的甾体种类存在显著差异,但部分成分存在一定的相关性。此外,猪苓菌核还特有长链脂肪酸、酰胺和苯酚等多种化合物,推测这些可能是因蜜环菌入侵而形成的多种次生代谢产物;而蜜环菌自身主要产生倍半萜、二萜等物质。猪苓与蜜环菌的化合物含量、种类与其共生繁殖密切相关,目前尚需对二者的共生机制进行深入研究,为提高二者产量及质量提供科学依据。     

当归多糖与阿糖胞苷联合注射对人白血病模型小鼠骨髓单核细胞的影响

目的 探讨当归多糖(ASP)与阿糖胞苷(Ara-C)联合注射对移植性人白血病模型小鼠骨髓单个核细胞(BMMCs)的影响,并探讨其调控白血病细胞衰老的可能机制.方法 每只小鼠尾静脉移植2×10⁷个K562细胞,建立移植性人白血病NOD/SCID小鼠模型,模型建立后随机分为模型组、ASP组、Ara-C组和ASP+Ara-C组,移植K562细胞第31天开始分别ip ASP(200 mg/kg)、Ara-C(2.5 mg/kg)和ASP(200 mg/kg)+Ara-C(2.5 mg/kg)治疗,共14 d,模型组注射等量生理盐水.药物注射完成第2天眼球取血检测外周血白细胞总数与分类计数,取股骨测定每只股骨BMMCs细胞数;CCK8测定BMMCs增殖能力,流式细胞术分析BMMCs增殖周期,混合集落(CFU-Mix)培养检测BMMCs形成集落能力;衰老β半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色观察衰老细胞百分率;Western blotting检测衰老相关蛋白P16、Rb、CDK4及CyclinD1表达.结果 与模型组比较,无论是ASP、Ara-C单独注射或ASP+Ara-C联合用药均能有效降低白血病模型小鼠外周血白细胞总数,降低中性粒细胞百分率,提高淋巴细胞百分率;降低股骨BMMCs细胞数,明显抑制BMMCs增殖,降低CFU-Mix产率,提高G₁期细胞比例,减少S期细胞比例;显著提高SA-β-Gal染色阳性细胞百分率;上调P16、Rb表达,下调CDK4、CyclinD1表达,且联合用药组效果更为明显.结论 ASP与Ara-C可能通过调节衰老相关蛋白P16、Rb、CDK4及CyclinD1表达,进而促进移植小鼠白血病细胞衰老,为临床治疗白血病提供了新思路.