结核分枝杆菌肝素结合血凝素与纯蛋白衍化物的细胞免疫作用比较

目的 通过结核分枝杆菌肝素结合血凝素(HBHA)与纯蛋白衍化物(PPD)的免疫作用比较,探讨HBHA的免疫保护作用及诊断应用价值.方法 选取阴性对照者、潜伏感染者、肺结核患者,分离入选者的外周血单个核细胞,分为无刺激、HBHA、PPD刺激组,培养4 d后收集细胞培养上清,ELISA方法检测上清中的γ-干扰素(IFN-γ)和白介素4.结果 HBHA刺激后3组产生的IFN-γ中位数分别为49.5 ng/L、781.9 ng/L、341.8 ng/L,潜伏感染者产生的IFN-γ水平远高于阴性对照者,略高于肺结核患者.HBHA特异的IFN-γ在不同治疗时间肺结核之间有显著差异.结论 HBHA有较好的免疫原性,可以刺激潜伏感染者产生高水平的IFN-γ,潜伏感染者未发展为活动性结核病可能与HBHA的免疫保护作用有关.HBHA特异的IFN-γ释放反应有利于鉴别潜伏感染者.     

结核分枝杆菌肝素结合血凝素在结核病免疫应答中的研究

目的探讨结核分枝杆菌肝素结合血凝素的免疫应答作用及其在结核病诊断中的应用价值。方法选取PPD（-）的健康对照、PPD（＋）的潜伏感染者、肺结核患者,分离入选者的外周血单个核细胞,用天然HBHA刺激,培养4天后收集细胞培养上清,ELISA方法检测上清中的γ-干扰素（IFN-γ）。同时用ELISA方法检测各组血清中的HBHA特异的IgG型抗体。结果HBFIA刺激后三组产生的IFN—γ中位数分别为：49．5pg／ml、781．9pg／ml、341．8pg／ml,潜伏感染者产生的IFN-γ水平远高于健康对照,略高于肺结核。三组血清IgG抗体浓度吸光度的均值分别为0．212±0．066,0．224±0．076,0．285±0．078。肺结核患者的HBHA特异的IgG抗体远高于健康对照及潜伏感染者。结论HBHA有较好的免疫原性,HBHA特异的IFN—γ释放反应有利于鉴别潜伏感染者。HBHA的抗体水平在结核病的诊断中有一定的辅助应用价值。     

结核分枝杆菌肝素结合血凝素与纯蛋白衍化物的细胞免疫作用比较

目的通过结核分枝杆菌肝素结合血凝素（HBHA）与纯蛋白衍化物（PPD）的免疫作用比较,探讨HBHA的免疫保护作用及诊断应用价值。方法选取阴性对照者、潜伏感染者、肺结核患者,分离入选者的外周血单个核细胞,分为无刺激、HBHA、PPD刺激组,培养4d后收集细胞培养上清,ELISA方法检测上清中的γ-干扰素（IFN-γ）和白介素4（IL-4）。结果HBHA刺激后3组产生的IFN—γ中位数分别为：49．5ng／ml、781．9ng／ml、341．8ng/ml,潜伏感染者产生的IFN-γ水平远高于阴性对照组,略高于肺结核组,HBHA特异的IFN-γ在不同治疗时间肺结核之间有显著差异。结论HBHA有较好的免疫原性,可以刺激潜伏感染者产生高水平的IFN-γ,潜伏感染者未发展为活动性结核病可能与HBHA的免疫保护作用有关,HBHA特异的IFN-γ释放反应有利于鉴别潜伏感染者。     

结核分枝杆菌HBHA的研究进展

HBHA是结核分枝杆菌的一种表面蛋白,它与细菌的黏附作用、诱导MФ细胞凋亡以及肺外播散型结核的发生相关,在抗肿瘤免疫中也有一定的作用;也可以作为新一代的血清学诊断标识,鉴别诊断活动性与非活动性结核病,并在开发结核新疫苗及抗结核病新药中显示出潜在的的应用价值。     

结核分枝杆菌肝素结合血凝黏附素与结核病

细菌黏附（bacterial adherence）是细菌与宿主细胞之间相互作用的复杂过程，是细菌侵入宿主细胞的第一步，也是细菌寄生活动的基础和前提条件。细菌的黏附素是细菌在其表面表达或其分泌的参与黏附宿主细胞的一种物质。有关细菌与动物细胞粘附的研究始于20世纪之初，直至1980年前后细菌的粘附素的概念才逐渐地系统、明确。     

结核分枝杆菌ATP结合盒超家族外排泵的研究进展

近年来,结核分枝杆菌的耐药菌株日益增多,使得治疗难度也在加大.其耐药主要是通过细胞壁的阻碍作用和基因突变所导致.但是仅凭这两种因素不能够完全解释分枝杆菌的耐药机制.据研究,分枝杆菌的主动外排是另一种重要的耐药机制.主动外排泵对结核分枝杆菌的耐药方面的影响也越来越受人们的关注,而外排泵的类型有很多,其中ATP结合盒超家族是外排泵家族中的大家族,在外排作用中起到了重大影响,通过总结近年来发表的文献,现对结核分枝杆菌ATP结合盒超家族的抑制剂和作用底物的研究进行了综述.     

三种结核分枝杆菌分泌抗原的血清学诊断价值

目的 研究3种结核分枝杆菌分泌抗原（相对分子质量分别为81000和38000的抗原、CF-10抗原）在结核病血清学诊断中的价值。方法 收集安徽省2002年3月至2005年4月结核病患者的血清标本149例，其中痰涂片阳性结核病患者108例，痰涂片阴性结核病患者41例；非结核性肺部疾病患者血清标本24例；健康对照170例。取指数生长中晚期结核分枝杆菌培养液，纯化38000天然抗原，以和6个组氨酸融合的形式表达，镍离子螫合的层析柱亲和纯化81000抗原和C-10抗原，通过酶联免疫吸附测定方法检测3种结核分枝杆菌分泌抗原的抗原性与特异性。结果 纯化的抗原具备较高的纯度（〉95％）和检测特异性（〉98％）。结核病患者的81000抗原、38000抗原和CF-10抗原阳性检出率分别为64．4％（96／149）、57．0％（85／149）和37.6％（56／149），阴性符合率均大于98％。3种抗原联合使用对结核病患者的阳性检出率达到81．2％（121／149），阴性符合率大于98％。结论 3种抗原均具有较好的特异性，3种抗原联合使用具有良好的敏感性与特异性，明显优于任何一种抗原单独使用的效果，将多个抗原联合使用是进行高质量的结核分枝杆菌血清学诊断切实可行的手段。     

结核分枝杆菌肝素结合血凝素与人IL12融合基因重组耻垢分枝杆菌的构建及鉴定

目的构建表达肝素结合血凝素与人IL12融合基因的重组耻垢分枝杆菌并对其进行鉴定。方法通过RT-PCR从人淋巴细胞获得hIL12基因模板,采用PCR技术克隆hIL12的P40和P35两个亚基及结核分枝杆菌的HBHA基因,通过酶切鉴定及DNA测序证实连接的基因片段均正确后,构建分枝杆菌穿梭表达质粒pSMT3-HBHA-hIL12,并用电穿孔法将重组质粒转到耻垢分枝杆菌中。分别用HBHA单克隆抗体和hIL12多克隆抗体检测HBHA和hIL12蛋白在重组耻垢分枝杆菌中的表达,并测定重组耻垢分枝杆菌生长状态的改变。结果重组耻垢分枝杆菌构建成功,通过HBHA单抗和hIL12多抗进行免疫荧光法检测证实HBHA和hIL12均有表达,并且重组的耻垢分枝杆菌的生长速度比正常组有较大的提高。结论成功构建了表达结核分枝杆菌HBHA基因和人IL12的重组耻垢分枝杆菌,为构建一种结核病的候选疫苗提供了实验基础。     

结核分枝杆菌抗原诊断研究进展

回顾性调查结果表明,我国结核病的误诊率可达24％,提高结核病的实验诊断率已刻不容缓。结核病的免疫学检测方法在诊断结核病中起到了重要的作用,其早期采用的抗原为菌体抗原、结核菌素、细胞壁及细胞膜成分的复合抗原等,1998年Cole等在《Nature》杂志上报道了结核分枝杆菌（MTB）H37Rv株的全基因组序列,加速了对重组抗原的克隆、表达,近年来对重组抗原有了较多的研究,特据抗原在菌体中的定位,将之分为分泌抗原、胞壁脂膜抗原和胞浆应激蛋白抗原三类讨论之。     

分枝杆菌鉴定的分子生物学方法研究进展

分枝杆菌属包括结核分枝杆菌群（mycobacterium tuberculosis complex，MTC）、麻风分枝杆菌及非结核分枝杆菌（nontuberculosis mycobacteria，NTM）。自1882年Koch发现结核菌以来，已报道了100余种分枝杆菌，其中约30种与不同的人类或动物疾病有关。其中结核分枝杆菌（MTB）是最常见且最重要的致病菌，世界卫生组织2008年全球结核控制报告显示，2006年患病例数约1440万，新发病例估计有920万，比上年增加约10万，而死于结核的患者估计有170万。     

结核分枝杆菌肝素结合血凝黏附素与结核病

结核分枝杆菌肝素结合血凝黏附素是一种表面蛋白,有3个功能结构域,其C末端在翻译后进行甲基化修饰,与其免疫特性相关.可结合硫酸化糖,可通过补体C3介导与巨噬细胞的结合,与上皮细胞结合在肺外结核发病中有重要作用.通过对其细胞免疫及体液免疫作用的研究发现,其在诊断中有较好的作用,在免疫预防及免疫治疗中有广阔的应用前景.     

非结核分枝杆菌病50例临床分析

目的探讨非结核分枝杆菌病的临床特点和提高非结核分枝杆菌病的诊断和治疗水平。方法1999年8月—2006年3月间在北京胸科医院住院治疗的患者,痰培养分枝杆菌阳性、菌种鉴定为非结核分枝杆菌的50例患者,进行耐药试验并对其临床表现及治疗效果进行总结。结果非结核分枝杆菌肺病患者对一线抗结核药物均有不同程度的耐药,其中对异烟肼(H)、链霉素(S)耐药率最高,对丁胺卡那霉素(Am)、卡那霉素(Km)耐药率较低。结论非结核分枝杆菌肺病确诊靠菌种鉴定,早期给予合理的化疗方案可取得一定的效果。     

山东省非结核分枝杆菌感染的菌种分布研究

目的研究山东省13个哨点县2004—2007年非结核分枝杆菌临床分离率和菌种分布情况。方法对山东省13个哨点县2004—2007年送到汉光中心的2625株分枝杆菌菌株,进行分枝杆菌菌群鉴定试验,鉴定为非结核分枝杆菌的菌株应用16SrDNA测序方法进行菌种鉴定。结果2625株菌株分枝杆菌菌群鉴定39株为非结核分枝杆菌菌群,39株菌株16SrDNA序列分析结果有36株是非结核分枝杆菌,其中29株为胞内分枝杆菌株（80.6%）, 其余分别为堪萨斯分枝杆菌、偶然分枝杆菌各2株、戈登分枝杆菌、龟脓肿分枝杆菌复合物、瘰疬分枝杆菌各1株;结核分枝杆菌复合群2株;鼻疽诺卡氏菌1株。山东地区非结核分枝杆菌临床分离率占分枝杆菌培养阳性菌株的1.4%。结论山东地区流行的非结核分枝杆菌以慢生长分枝杆菌的胞内分枝杆菌为主。     

日本血吸虫病诊断抗原研究进展

血吸虫病免疫诊断技术的发展为血吸虫病控制做出了重要贡献。血吸虫抗原检测特异性抗体是目前血吸虫病免疫诊断的常用方法,所使用的抗原可分为粗制虫源抗原、纯化虫源抗原和重组抗原。研制高敏感性、高特异性和具有早期诊断价值的抗原是免疫诊断研究的重点。本文对近年日本血吸虫病诊断抗原研究进展进行了综述。     

复方PCR用于分支杆菌菌种鉴定的初步研究

目的　寻找新的、快捷简便的分支杆菌菌种鉴定技术,进一步提高临床结核病诊断的水平。方法 将3套分支杆菌基因组DNA的不同标记引物同时放入一个体系中,并在同一退火温度下进行PCR扩增,通过对扩增产物的不同带型进行分析,对已知标准株和部分临床株进行菌种鉴定。结果 复方PCR方法可将结核复合群中的结核分支杆菌、牛结核分支杆菌与非结核分支杆菌一次性地区分开,特异性达到100%,灵敏度为10ng/反应。结论 复方PCR技术是一种有效而又简捷的分支杆菌诊断方法,可用于临床上分结核与非结核分支杆菌或分支杆菌与非分支杆菌的初步区分。     

PCR-荧光探针法检测临床痰标本结核分枝杆菌的可靠性研究

目的 评价PCR-荧光探针法快速检测Mtb和非结核分枝杆菌（NTM）的临床应用价值。方法 应用分枝杆菌核酸检测试剂对1015 例痰标本和56株临床分离株进行检测,与Mtb核酸扩增（PCR）荧光（目前临床上认可惟一同类产品）检测结果进行比较。采用SPSS 11.5统计软件进行数据统计处理,采用χ²检验,以P＜0.05为差异有统计学意义。结果 PCR-荧光探针法检测痰标本分枝杆菌灵敏度50.3%（373/741）,特异度98.9%（271/274）;菌阳肺结核标本检测灵敏度97.0%（257/265）,菌阴肺结核标本检测灵敏度24.4%（116/476）;1015份痰标本中检测出11例非结核分枝杆菌（NTM）核酸阳性标本（占1.1%）,经16S rDNA 测序确认,准确率100.0%。随机数字量表法抽取138例标本重复进行第2次检测,符合率100.0%。对56株临床分离株（1株Mtb临床分离株,55株NTM临床分离株）检测,准确率100.0%。对临床需要的226份标本同时与达安公司试剂盒检测结果比较,总体符合率95.1%（215/226）,经统计学分析,两者之间差异无统计学意义（χ²=2.98,P=0.226）。结论 PCR-荧光探针法可快速检测和区分痰标本Mtb与NTM,具有临床推广应用价值。     

对硝基苯甲酸(PNB)替代BACTEC460NAP进行分支杆菌分群的初步研究

用PNB替代BACTEC系统中NAP药物,将PNB加入7H_(12)B培基内,鉴定结核菌与非结核分支杆菌两大菌群。实验10株标准菌株和115株临床菌株;结果:人、牛型标准菌株在PNB12B10μg/ml生长抑制。8株非结核标准菌株抑菌浓度PNB>500μg/ml。以PNB100μg/ml12B为界限,115株临床菌株PNB与NAP方法平行对照实验,鉴定结果:结核菌群符合率97.8％,非结核菌群符合率95.8％,总符合率97.4％(P>O.05)。其中18株用PNB法间隔一个月重复实验,两次结果一致。结果显示,PNB12B菌群鉴定方法可以做为一种准确、经济的菌型初筛实用方法。     

不同结核分支杆菌抗原对结核病的诊断价值

目的　研究不同结核分支杆菌单体蛋白抗原在结核病体液免疫诊断中的价值。方法以快速免疫色谱法（ＩＣＴＴＢ卡） 检测结核分支杆菌５ 种单体蛋白的抗原性，观察其在结核病诊断中的敏感性和特异性，并与ＰＰＤ 皮试及脂阿拉伯糖甘露糖（ＬＡＭ） 相比较。结果　ＩＣＴＴＢ 卡、ＬＡＭ 及ＰＰＤ皮试诊断结核病的敏感性分别为５５．９％ 、５２．６％ 、７５．０％ ，后者与前二者间差异均有显著意义（ Ｐ＜０ ．０５）；ＩＣＴＴＢ卡、ＬＡＭ、ＰＰＤ皮试诊断肺结核的特异性为８７ ．６％ 、６２．９％ 、６８．９％ ，前者与后二者间差异均有非常显著意义（ Ｐ＜ ０．０１）；ＩＣＴＴＢ卡诊断肺结核病的临床阳性预计值为８８ ．５％ ，临床阴性预计值为５３ ．８ ％ ；非结核病例中的ＩＣＴＴＢ阳性主要由抗原４、５ 阳性所致，如果去除抗原４ 、５，那么ＩＣＴＴＢ诊断结核病的特异性将提高到９８．９％ 。结论　血清结核分支杆菌单体蛋白抗原性的测定是肺结核病一项有用的辅助诊断手段。     

结核分枝杆菌重组耻垢分枝杆菌疫苗的研究进展

结核分枝杆菌引起的结核病是一种人兽共患的慢性传染病，短程督导化疗是治疗该病的主要措施，卡介苗是预防该病的唯一疫苗，但其免疫效果极不稳定。文章介绍了4种结核分枝杆菌重组耻垢分枝杆菌疫苗的构建及其免疫机制等方面的研究进展。