SARS CoV抗原决定簇的预测和制备

目的获得严重急性呼吸道综合征（SARS）冠状病毒（CoV）中和性抗原蛋白.方法使用Blast工具将SARSS蛋白的氨基酸序列与其他蛋白进行比对分析.冠状病毒鼠肝炎病毒的刺突蛋白在S2段存在中和性抗体表位.通过对鼠肝炎病毒和SARS CoVS2的氨基酸序列分析,SARS CoV的S2段类似于鼠肝炎病毒的S2段.使用DNASTAR软件对2段的相似性进行分析.选取SARS CoVS2蛋白基因在大肠埃希菌中进行表达.表达产物进行免疫印迹分析.结果在SARS刺突蛋白C端发现了与其他冠状病毒S2蛋白具有较高的同源性的片段.在SARS病毒刺突蛋白的S2段可能存在中和性表位.将该肽段在大肠埃希菌中获得表达.表达的蛋白片段可以和来自SARS恢复期的人抗SARS-CoV免疫球蛋白特异性结合.结论表达的蛋白片段有可能成为预防SARS的候选疫苗.     

严重急性呼吸综合征患者抗病毒结构蛋白抗体和总抗体的变化规律

严重急性呼吸综合征（severe acute respiratory svndrome，SARS）的病原体是一种新型的冠状病毒（SARS-CoV），目前已确定有6种主要蛋白。本研究对恢复期SARS患者不同时间段体内抗体进行随访测定，以观察不同时期特异性抗体的动态变化规律，同时还分别检测了SARS-CoV N抗体和SARS-CoV S抗体，并与SARS-CoV IgG总抗体进行比较研究。     

SARS冠状病毒多抗原表位融合蛋白的表达及其诊断应用

目的 制备SARS冠状病毒(SARS-CoV)多抗原表位融合蛋白,建立一种可特异性诊断SARS的血清学方法,用于SARS的明确诊断和流行病学调查研究.方法 设计含有SARS冠状病毒S、M和N蛋白优势抗原表位区的多表位融合蛋白SMN,利用大肠杆菌表达SMN蛋白,并作为包被抗原建立ELISA方法,用于SARS患者血清检测.结果 设计出包含S603-635 M2-31、N362-412表位区的多表位融合蛋白SMN,并在大肠杆菌中成功表达.以SMN蛋白为包被抗原,ELISA检测74份SARS患者血清全部为阳性,另44份非SARS-CoV感染的发热病人血清和62份健康人血清均为阴性.结论 SARS-CoV多抗原表位融合蛋白SMN在大肠杆菌中成功表达,以SMN为检测抗原建立的ELISA方法为SARS血清学诊断奠定了基础.     

抗SARS新药指日可待

美国研究者近日表示，他们已经找到导致严重急性呼吸道症候群（SARS）病毒的特异性蛋白，抗SARS新药指日可待。虽然接种疫苗也是抗SARS相当有效的方式，但疫苗会随着病毒突变而失效。新发现的这个蛋白酶，对于病毒侵入细胞扮演决定性角色。研究指出，单一蛋白酶其实并不具这种功能。在两两结合为双倍体后便能活化，协助病毒侵入细胞。研究者使用X线照射法来解开此蛋白酶的结构，并顺利找到其活化区段。在克服了数个大量筛选的困难之后，研究者现在开始着手筛选能够阻断该蛋白酶的药物。研究者说：“希望能够赶在下次流行之前，成功找出抗SARS新药。”     

SARS冠状病毒S2基因原核表达及免疫学特性

目的研究严重急性呼吸道综合征（SARS）冠状病毒S2蛋白表达并对其免疫学特性。方法克隆SARS冠状病毒S2基因。并在大肠埃希菌中表达谷胱甘肽硫转移酶（GST-S2）融合蛋白。通过免疫印迹（Western blot）和酶联免疫吸附试验（ELISA）方法鉴定表达GST—S2融合蛋白的活性。结果通过原核系统表达的GST-S2融合蛋白可与谷胱甘肽硫转移酶（GST）多克隆抗体结合，并在85千道尔顿（KD）处出现特异性结合条带。GST-S2蛋白能与SARS患者恢复期血清反应，而不与正常人血清反应。结论本项研究获得了SARS冠状病毒GST-82融合蛋白，它可与GST多克隆抗体特异性结合，并与SARS患者恢复期血清发生特异性反应。     

P22 VLPs载体多表位幽门螺杆菌疫苗的构建及表征分析

目的 利用生物信息学软件分析幽门螺杆菌主要抗原蛋白的T/B淋巴细胞表位,评估不同表位组合的抗原性与致敏性,预测优势表位组合与P22噬菌体病毒样颗粒（ VLPs）融合后的三级结构,构建基于P22 VLPs的多表位幽门螺杆菌疫苗。方法 利用IEDB数据库、NetMHCIIpan-3.2 和BepiPred 2.0在线工具对抗原蛋白的T/B淋巴细胞表位进行搜索和预测;利用VaxiJen v2.0、AllerTOP v2.0和ProtParam在线服务器分别对随机串联组成的不同表位组合进行抗原性、致敏性和理化性质进行分析;采用AlphaFold2、ProSA-web、RAMPAGE及ERRAT等软件对融合蛋白的三级结构进行预测、评估;构建P22 VLPs载体多表位幽门螺杆菌疫苗P22-C3,通过诱导表达及纯化获得疫苗实体;运用SDS-PAGE、透射电子显微镜和动态光散射技术对疫苗实体进行表征分析。结果 将筛选得到的高保守、非致敏优势抗原表位进行随机串联,获得了20个表位组合（C1-C20）,这20个表位组合均具有良好的抗原性和非致敏性。其中,表位组合C3不仅抗原评分高、理化性质稳定且预测的结构模型符合天然构象。将C3序列融合至P22 VLPs衣壳蛋白（Gp5）的C端,获得了基于P22 VLPs的幽门螺杆菌疫苗P22-C3。表征分析显示P22-C3较野生型的P22 VLPs,衣壳更厚,直径更大。结论 本研究通过多维生物信息学软件分析了不同Hp表位组合的理化特性和三维结构,成功构建了基于P22 VLPs的幽门螺杆菌疫苗,为疫苗后期的动物试验和I期临床试验奠定了基础。     

SARS冠状病毒S基因序列及细胞抗原表位预测

目的 比较SARS冠状病毒各分离株S基因序列及氨基酸序列之间的差异，预测SARS-CoV的S蛋白的抗原表位。方法 利用Lasergene软件包中的EditSeq从21株SARS冠状病毒分离株截取S基因序列并翻译成氨基酸序列，然后用ClustalX软件对截取序列进行比较分析，确定基准株，最后用Protean软件对基准株进行抗原表位预测。结果 在21株分离株的S基因中有8株核苷酸序列、13株氨基酸序列没有发生点突变；预测出78个可能性抗原表位。结论 SARS-CoV的S蛋白相当保守，只发生个别点突变，可能性抗原表位多，且在其中的14个区域中可能性最显著。     

mxA基因多态性与SARS病毒易感性的病例对照研究

目的探讨黏病毒抗性蛋白1（MxA）基因多态性与人群严重急性呼吸综合征（SARS）发病间的关系。方法采用病例对照研究，用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析检测mxA基因启动子-88位G／T多态性位点，对SARS传播的相关因素进行问卷调查，并用SPSS软件进行单因素和多因素分析。结果选取了66例SARS病例和64名对照进行研究。与GG基因型相比，含等位基因T的基因型（GT＋TT）在病例中的构成比（81．3％）显著高于对照组（62．5％），0R值（95％CJ）为2．700（1．208～6．037）。多因素logistic回归分析结果表明，在调整了与SARS病例接触时戴口罩，穿防护服，戴眼罩等相关因素后，与GG基因型相比，含等位基因T的基因型（GT＋TT）仍与SARS发病有显著性关联，调整OR值（95％CI）为2．911（1．027～8．250）。结论mxA基因启动子-88位G／T多态性可能与中国汉族人群SARS发病的基因易感性有关。     

用噬菌体肽库筛选SARS病原体的模拟抗原表位

目的筛选SARS病原体的模拟抗原表位。方法以混合SARS患者恢复期血清Ig作为筛选分子，从噬菌体肽库中筛选出能与患者血清Ig结合的模拟抗原表位，并研究其抗原特性。结果得到2个能与SARS患者恢复期血清Ig特异性结合的阳性克隆；DNA测序结果显示这2个模拟抗原表位与SARS抗原无同源性。结论用噬菌体肽库成功筛选得到SARS的模拟表位，为开展用SARS模拟抗原表位探索SARS的防治研究创造了条件。     

泸州市传染性非典型肺炎流行病学分析

传染性非典型肺炎 (又称严重急性呼吸道综合征 ,以下简称SARS)是一种新发现的、传染性强的急性呼吸系统疾病 ,其病原体是一种人类过去从未发现的新型冠状病毒———SARS冠状病毒。以近距离空气飞沫和密切接触为主要传播途径。目前尚无疫苗、特效药物防治。泸州市从 2 0 0 3- 0     

冠状病毒致病的分子机制及其相关研究

急性呼吸窘迫综合征(the severe acute respiratory syndrome,SARS)是由冠状病毒(SARS-coronavirus，SARS—CoV)引起的一种高病死率急性呼吸系统传染病，可在发病早期便出现肺实变体征，除高热、乏力外。可伴有腹泻、肌痛等症状和体征。该病毒是一种正义、单链RNA病毒，具有29727个碱基，11个阅读框，并可编码23种不同的蛋白质C13。对其分子机制的深入研究将有助于该疾病的防治．并为可能出现的其它新的类似性病毒传染病的防治提供借鉴。本文将概要介绍SARS-CoV致病的分子生物学机制、传播途径以及相关药物和疫苗的研究进展。     

广东省SARS冠状病毒分离株S基因全序列分析

目的 测定并分析广东省传染性非典型肺炎病人标本中分离到的严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒的S基因全序列。方法 选取3株来自中山市、广州市、江门市传染性非典型肺炎病人的SARS冠状病毒分离株，设计8对相互嵌套的S基因特异引物扩增病毒的S基因，直接进行PCR产物测序，将所测的序列与从GemBank上获得的世界各地10株SARS冠状病毒分离株的S基因序列用DNASTAR软件包进行基因变异分析。结果 3株毒株经P(R扩增后，均可获得大小分别为513、589、527、509、621、501、578、678bp的基因片段，测序并拼接可获得一长3768个碱基S基因全基因序列，编码1256个氨基酸；基因序列比对结果显示，与世界各地10株毒株比较，核苷酸和氨基酸的最大同源性在99．7％～100．0％和99．2％～99.9％之间，其变异主要发生在S蛋白的S1片段。结论 SARS冠状病毒的S蛋白是比较保守的．但S1片段上某些位点的变异可能是病毒的毒力不同的主要原因。     

230例HBsAg阳性血清中HBeAg及前S2检测结果分析

乙型肝炎病毒（HBV）外膜蛋白包括S抗原，前S2抗原（以下称PreS2）和前S1抗原三种成分。前S2抗原是HBV外膜蛋白，又是聚合人血清白蛋白受体，是乙肝病毒入侵肝细胞的主要结构组份之一。为了解PreS2在乙肝系列测定中的分布情况，对230例表抗阳性患者进行了PreS2的检测，并与HBsAg、HBeAg检测结果进行了比较，现将结果报道如下：     

传染性非典型肺炎病毒和疫苗的研究

2002年11月16日中国广东省报道首例传染性非典型肺炎(严重急性呼吸系统综合征，SARS)。2003年7月5日，WHO宣布最后一个SARS疫区中国台湾被解除，标志着SARS得到了初步控制，但是我们应意识到对于SARS，我们还知之甚少，还有许多问题需要我们去解决。为此就SARS病毒和疫苗研究等方面的问题进行了探讨。     

发热患者SARS冠状病毒抗体分析

目的了解临床发热患者中是否存在严重急性呼吸综合征（SARS）冠状病毒（SARS-CoV）隐性感染或亚临床感染。方法对2003年5月～7月，SARS流行期间湖北地区临床发热患者373例血清进行SARS冠状病毒（SARS-CoV）抗体（IgG、IgM、N蛋白抗体）酶联免疫吸附法（ELISA）检测和分子生物学（RT—PCR）检测。结果373例发热患者中，检出冠状病毒抗体阳性者24例，阳性率6．43％（24／373），其中SARSIgG抗体、IgM抗体、N蛋白抗体阳性率分别为0．54％，1．34％和5．09％，但SARS-CoVRT—PCR检测均为阴性。结论临床发热患者可能存在SARS-CoV隐性或亚临床感染，患者体内产生针对SARS-CoV的保护性抗体，应具有免疫力和抵抗力。     

回顾SARS教训 控制新出现传染病

21世纪人类出现的第一个严重流行的新疾病——严重急性呼吸道综合征（SAILS），表明一种新出现的传染病可以造成全球的巨大破坏。经过各国科学家的努力，目前对SARS的认识有了比较清晰的轮廓。现就SARS流行特点、发病机制及传播控制研究等进行简述，以避免因其他因素（例如人感染高致病性禽流感）产生严重呼吸道症状疾病，而被误认为是SARS的再次来临，造成不必要的恐慌，并为将来应对SARS再次来临或新出现类似传染病提供借鉴。     

回顾SARS教训控制新出现传染病

21世纪人类出现的第一个严重流行的新疾病——严重急性呼吸道综合征（SAILS），表明一种新出现的传染病可以造成全球的巨大破坏。经过各国科学家的努力，目前对SARS的认识有了比较清晰的轮廓。现就SARS流行特点、发病机制及传播控制研究等进行简述，以避免因其他因素（例如人感染高致病性禽流感）产生严重呼吸道症状疾病，而被误认为是SARS的再次来临，造成不必要的恐慌，并为将来应对SARS再次来临或新出现类似传染病提供借鉴。[第一段]     

医学动态

抗SARS新药指日可待美国研究者近日表示,他们已经找到导致严重急性呼吸道症候群(SARS)病毒的特异性蛋白,抗SARS新药指日可待。虽然接种疫苗也是抗SARS相当有效的方式,但疫苗会随着病毒突变而失效。新发现的这个蛋白酶,对于病毒侵入细胞扮演决定性角色。研究指出,单一蛋白酶其实     

对症下药中西结合

严重急性呼吸系统综合症（SARS，即通常所说的传染性非典型肺炎）是一种急性的呼吸系统感染。这种病例颇为罕见，极易误诊，即使是医务工作者，稍不注意也会中招。     

桂林市人工饲养野生动物及与动物接触者中SARS的流行病学调查

严重急性呼吸综合征（SARS）是一种新发传染病。在SARS流行期间，广西自治区总共报道了20例SARS病例，但均为外源性。桂林市未有SARS病例，为了解该市人群SARS冠状病毒的隐性感染状况及SARS相关的传染源，我们于2002年1—12月对与动物接触者及饲养的部分野生动物开展了流行病学调查。