顺铂对耳蜗单离听觉细胞─氧化氮合酶表达的影响

目的 探讨顺铂对耳蜗单离听觉细胞诱导型─氧化氮合酶（ｉＮＯＳ／ＮＯＳⅡ）表达的影响。方法 以单 离毛细胞和单离螺旋神经节神经元为模型，用免疫组化方法（ＡＢＣ法）研究顺铂对细胞内ＮＯＳⅡ表达的影响。结果 在１ｍＭ顺铂平衡盐溶液中室温下培养两小时的外毛细胞及培养半小时的单离螺旋神经元与对照组相比显示了 对ＮＯＳⅡ抗体较强的免疫反应。结论 提示顺铂诱导了单离外毛细胞及单离螺旋神经元内ＮＯＳⅡ的合成增加，ＮＯ 可能参与了顺铂的耳毒作用。     

L-NAME 对顺铂耳毒性影响的实验研究

目的本研究旨在通过建立顺铂内耳中毒的动物模型,探索一氧化氮合酶(NOS)在顺铂的耳毒性机制中的影响,为临床预防和治疗顺铂的耳毒性提供理论依据.方法将豚鼠随机分成三组.对照组给予生理盐水;试验组给予顺铂;拮抗组预先给予N-硝基-L-甲基-精氨酸(L-NAME)后再给顺铂.对耳蜗的iNOS的活性进行免疫组化的研究,对L-NAME对顺铂的耳蜗损害所起的作用进行扫描电镜观察.结果光镜下,对照组螺旋器的结构正常,呈iNOS阴性染色;试验组的内、外毛细胞明显变性,呈iNOS阳性染色.扫描电镜下,对照组内、外毛细胞的纤毛排列整齐;试验组的绝大部分内、外毛细胞的纤毛散乱,倒伏,甚至消失;拮抗组的大多数内、外毛细胞的纤毛排列整齐,少数可见纤毛融合或消失.结论一氧化氮(NO)在顺铂的内耳毒性作用机制中发挥着重要的作用,应用NOS的拮抗剂可以减轻其内耳毒性.     

离体培养时bFGF对顺铂耳蜗毒性的拮抗作用

目的 研究不同浓度的顺铂对耳蜗基底膜毛细胞的损伤、不同浓度的bFGF对顺铂耳蜗基底膜毛细胞损伤的保护作用以及caspase-9的表达。方法 对耳蜗基 底膜进行离体培养,用荧光染色方法对毛细胞数量和caspase-9的表达进行观察。结果 在不同浓度中,15μg/ml顺铂对基底膜毛细胞损伤最大;bFGF浓度≥100ng/ml时,对顺铂所致的基底膜毛细胞损伤具有良好的拮抗作用。结论 顺铂对耳蜗基底膜上毛细胞的损伤具有剂量依赖性; bFGF拮抗顺铂所致的耳蜗基底膜毛细胞的损伤;caspase-9的表达与bFGF对顺铂耳蜗毒性的拮抗作用相关。     

顺铂损伤后幼年斑马鱼侧线毛细胞STAT3的表达及意义

目的建立斑马鱼侧线神经丘的顺铂损伤模型,检测STAT3基因的表达情况,探讨其在毛细胞顺铂损伤过程中所发挥的作用,为抗顺铂耳毒性的研究提供理论依据。方法将受精后5天的斑马鱼幼鱼利用250μM顺铂溶液浸泡3小时建模,通过Yo-pro-1荧光染色、TUNEL染色了解毛细胞损伤情况,利用RT-q PCR、原位杂交等技术检测STAT3基因的表达改变。结果使用250μM顺铂溶液浸泡斑马鱼幼鱼3小时,可使其侧线神经丘毛细胞数降低(P<0.001),可诱导侧线神经丘出现细胞凋亡(P<0.001),且在此过程中,STAT3基因的表达出现上升(P<0.001)。结论STAT3在顺铂对斑马鱼侧线神经丘毛细胞的损伤过程中可能与毛细胞凋亡相关并扮演一定角色。STAT3表达的升高与细胞凋亡的升高同时发生,表明STAT3在一定条件下可能存在促凋亡的作用。     

L—NAME对顺铂耳毒性影响的实验研究

目的：本研究旨在通过建立顺铂内耳中毒的动物模型，探索一氧化氮合酶（NOS）在顺铂的耳毒性机制中的影响，为临床预防和治疗顺铂的耳毒性提供理论依据。方法：将豚鼠随机分成三组。对照组给予生理盐水；试验组给予顺铂；拮抗组预先给予N－硝基－L－甲基－精氨酸（L－NAME）后再给顺铂。对耳蜗的iNOS的活性进行免疫组化的研究，对LNAME对顺铂的耳蜗损害所起的作用进行扫描电镜观察。结果：光镜下，对照组螺旋器的结构正常，呈iNOS阴性染色，试验组的内、外毛细胞明显变性，呈iNOS阳性染色。扫描电镜下，对照组内、外毛细胞的纤毛排列整齐；试验组的绝大部分内、外毛细胞的纤毛散乱，倒伏，甚至消失；拮抗组的大多数内、外毛细胞的纤毛排列整齐，少数可见纤毛融合或消失。结论：一氧化氮（NO）在顺铂的内耳毒性作用机制中发挥着重要的作用，应用NOS的拮抗剂可以减轻其内耳毒性。     

大鼠耳蜗中三磷酸腺苷表达及来源的初步研究

目的 研究大鼠耳蜗中三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)的表达部位、来源及其可能的存在形式.方法 运用喹丫因染色技术,观察培养的大鼠耳蜗血管纹缘细胞、全膜迷路铺片和新鲜分离的单离外毛细胞;用免疫组化荧光染色法,观察突触素(synaptophysin,SYN)和小泡相关膜蛋白-2(vesicle-associated membrane protein-2/synaptobrevin,VAMP-2)在大鼠耳蜗中的表达.结果 培养的缘细胞胞浆中存在星点状喹丫因染色,全膜迷路铺片血管纹以外的区域和单离毛细胞中均未发现喹丫因的特异性染色.SYN和VAMP-2在大鼠耳蜗的内螺旋束、外螺旋束、Deiters细胞内侧缘和螺旋神经元(spiral ganglion neurons,SGNs)有共同表达.结论 大鼠耳蜗缘细胞胞浆中存在大量囊泡状的ATP,而毛细胞、支持细胞中的ATP可能以非囊泡的形式储存.内螺旋束、外螺旋束和SGNs中有可能存在SYN染色的ATP囊泡.     

顺铂致聋后大鼠耳蜗螺旋神经元NeuroD的表达

目的检测神经分化因子NeuroD在大鼠耳蜗螺旋神经元顺铂损伤后的表达变化。方法通过免疫组织化学及Real-TimePCR技术,观察耳蜗螺旋神经元损伤1d、3d、5d后NeuroD的表达变化。正常成年SD大鼠32只随机分为对照组(生理盐水5ml/kg,1次/d,腹腔注射,连续5d),用药1d组(顺铂5mg/kg,腹腔注射),用药3d组(顺铂5mg/kg,1次/d,腹腔注射,连续3d),用药5d组(顺铂5mg/kg,1次/d,腹腔注射,连续5d),每组8只,建立顺铂耳毒性模型。采用Real-TimePCR、免疫组织化学染色检测不同时间螺旋神经元NeuroD的mRNA及蛋白表达变化。结果成功建立顺铂耳毒性大鼠模型,随着用药时间的延长,神经分化因子NeuroD在耳蜗螺旋神经元中呈动态变化。NeuroD的mRNA和蛋白表达在用药1d及3d组分别为2.17±0.39、1.15±0.20及7.02±0.69、2.42±0.40,与对照组及用药5d组比较具有统计学意义(P值<0.01)。结论 NeuroD在用药1d后开始增加,3d后达到高峰,5d后下降;在用药早期有一过性表达增强,后期表达下降同时听力损失明显。表明NeuroD可能参与顺铂损伤螺旋神经元后的修复过程。     

内质网应激在顺铂诱导离体小鼠耳蜗毛细胞凋亡中的作用

目的 研究内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)在顺铂诱导离体培养小鼠耳蜗毛细胞凋亡中的作用.方法 选取出生后3d的健康昆明小鼠380只(760耳),分离出耳蜗基底膜760条,体外培养24 h后,随机分为对照组和4、8、16 μg/ml顺铂组,每组190条,对照组加入2 ml新鲜培养基,顺铂组分别加入2 ml含不同浓度顺铂(4、8、16 μg/ml)的新鲜培养基,再继续培养24 h后,应用Hoechst 33258荧光染色观察耳蜗毛细胞凋亡情况,并应用Western blot检测ERS标志物葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)和内质网凋亡途径标志物半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-12(cysteinyl aspartate specific proteinase 12,caspase-12)在耳蜗毛细胞中的表达.结果 4、8、16 μg/ml顺铂组耳蜗毛细胞凋亡率分别为10.53％±0.50％、27.12％±2.64％和60.01％±2.75％,均高于对照组(3.67％±0.76％),呈现明显的量效关系;不同浓度顺铂组耳蜗GRP 78和caspase-12的蛋白表达水平亦较对照组明显增高(P＜0.01),并随顺铂浓度增大而显著增强(P＜0.01).结论 顺铂可诱发小鼠耳蜗毛细胞ERS,ERS可能在其诱导的小鼠耳蜗毛细胞凋亡中发挥了作用.     

HO-1在顺铂诱导豚鼠螺旋神经元损伤中的作用

目的检测血红素加氧酶-1在豚鼠耳蜗螺旋神经节顺铂损伤后的表达变化。方法通过免疫组织化学及Western Blot技术,观察耳蜗螺旋神经元损伤后HO-1在不同组间的表达变化。将32只健康豚鼠随机分为4组,每组8只。A组对照组:按体重以0.9%生理盐水12ml/kg腹腔注射,早晚各一次,持续3天。B组顺铂组:按体重12mg/kg顺铂腹腔注射(IP),早晚各一次,持续3天。C组阿魏酸(FA)+顺铂组:先150mg/kg FA腹腔注射预处理1h,再以12mg/kg顺铂IP,早晚各一次,持续三天。D组FA+锌原卟啉Ⅸ(ZnppⅨ)+顺铂组:同时给予150mg/kg FA+ZnppⅨ15umol/kg IP预处理1h,再以12mg/kg顺铂IP,早晚各一次,持续三天。采用免疫组织化学及Wstern Blot技术检测不同组间螺旋神经元HO-1蛋白表达变化。结果在不同的分组中,HO-1在耳蜗螺旋神经节中表达量不同。空白组中,螺旋神经节组织存在微弱的HO-1表达,其蛋白表达量为0.48±0.07;A组蛋白表达量为0.81±0.07,B组蛋白表达量为0.9±0.05,C组蛋白表达量为0.61±0.07。4个组两两间差异均有统计学意义(p<0.0001)。结论 HO-1在C组中表达量最多,B组次之,D组最少,表明HO-1可能参与顺铂损伤螺旋神经元后的修复过程。     

胆红素对离体培养大鼠耳蜗基底膜的药理效应观察

目的观察胆红素对离体培养的新生SD大鼠耳蜗器官的损伤效应。方法健康新生3日龄SD大鼠18只,雌雄不限,分离其双侧的内耳共得到耳蜗器官组织36个,体外培养,12h后换液。选择贴壁、存活良好的组织30个入选实验,并随机分为两组(15个/组):实验组于贴壁第二天开始进行胆红素处理,对照组加入相应体积的生理盐水。处理后24h,实验组和对照组同时终止培养,并对其进行固定、免疫组织化学染色,共聚焦显微镜观察毛细胞及螺旋神经节神经元的形态变化并计数,统计对比。结果胆红素组离体培养的耳蜗器官中螺旋神经节神经元胞体及其树突纤维与对照组相比有明显的减少,内外毛细胞形态完整,数量无明显变化。结论大鼠耳蜗器官螺旋神经节神经元对胆红素的毒性敏感,而内外毛细胞对其毒性相对不敏感。     

脑源性神经营养因子和神经生长因子对顺铂诱导的内耳毒性的保护作用

目的研究豚鼠耳蜗内脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)和神经生长因子(nerve growthfactor,NGF)在顺铂致耳中毒后的表达,并探讨其对内耳的保护作用。方法将豚鼠分成对照组、顺铂组,分别给生理盐水、顺铂腹腔注射,于注射后3、5、7天取豚鼠耳蜗行石蜡切片,进行BDNF和NGF免疫组织化学染色,观察螺旋神经节BDNF和NGF蛋白表达。结果对照组耳蜗螺旋神经节细胞中BDNF几乎不表达,NGF呈中度阳性表达。顺铂组BDNF在3天时达到高峰,以后减弱;NGF在5天时达到高峰,以后减弱。结论正常豚鼠耳蜗有中度NGF的表达,表明NGF可能对内耳的正常生理功能起重要作用。顺铂干预后螺旋神经节BDNF和NGF出现高表达,提示BDNF和NGF对顺铂诱导的螺旋神经元损伤有保护作用。     

肌醇需求酶1对顺铂所致小鼠耳蜗毛细胞凋亡的作用研究

目的 研究肌醇需求酶1(inositol-requiring enzyme 1,IRE1)对顺铂所致小鼠耳蜗毛细胞凋亡的作用。方法 分离生后3～5 d的健康昆明小鼠(500只)耳蜗基底膜并进行体外培养,24 h后随机分为对照组和不同浓度顺铂组(4、8、16和32μg/ml)(每组200条),再培养24 h。应用异硫氰酸荧光素(FITC)染色观察小鼠耳蜗毛细胞的缺失;应用Hoechst 33258和四甲基异硫氰酸罗丹明(TRITC)标记的鬼笔环肽双重荧光染色观察小鼠耳蜗毛细胞的凋亡;并用Western blot检测小鼠耳蜗中p-IRE1α、p-JNK、Bax及caspase-3的蛋白水平。结果 与对照组比较,顺铂组小鼠耳蜗毛细胞缺失、细胞凋亡率以及p-IRE1α、p-JNK、Bax、caspase-3等蛋白水平显著增高(P<0.01),并且p-IRE1α与Bax、caspase-3表达和细胞凋亡率呈正相关(P<0.05)。结论 IRE1可能参与调控顺铂所致小鼠耳蜗毛细胞凋亡。     

顺铂对离体培养小鼠耳蜗毛细胞钙蛋白酶表达的影响

目的：观察顺铂对离体培养小鼠耳蜗毛细胞钙蛋白酶（calpain ）表达的影响,探讨顺铂致耳蜗毛细胞凋亡的机制。方法取出生后3 d的昆明小鼠300只（600耳）,分离出耳蜗基底膜600条,体外培养24 h后,随机分为对照组和4、8、16μg／ml顺铂组,每组150条;对照组加入2ml新鲜培养基,顺铂组分别加入2 ml含不同浓度顺铂（4、8、16μg／ml）的新鲜培养基,再继续培养24 h后,应用Hoechst 33258荧光染色观察耳蜗毛细胞凋亡情况,并应用免疫荧光染色和免疫印迹（Western blot）技术检测calpain 1（μ－calpain）和calpain 2（m －calpain）在耳蜗毛细胞的表达。结果4、8、16μg／m l顺铂组耳蜗毛细胞凋亡率分别为15．63％±0．20％、38．40％±2．64％和64．24％±0．05％,均高于对照组（5．55％±0．12％）,呈现明显的量效关系;不同浓度顺铂组μ－calpain和m －cal‐pain的表达均较对照组明显增强（ P＜0．01）,且m －calpain的表达随顺铂浓度的增高而明显增强（ P＜0．01）。结论顺铂可通过calpain通路诱导小鼠耳蜗毛细胞凋亡,从而发挥毒性效应。     

顺铂对离体C57小鼠耳蜗毛细胞的损害作用

目的探讨离体培养条件下顺铂致C57小鼠耳蜗毛细胞损伤的特点。方法出生后3～4天的C57小鼠耳蜗基底膜离体培养6～8小时后,加入不同浓度的顺铂（0、10、50、100、400、1000μmol/L）无血清培养液继续培养48小时,其中0μmol/L为正常对照组,10～1000μmol/L组为实验组,0～100μmol/L4组,每组各7只耳蜗,400和1000μmol/L两组各6只耳蜗。采用TRITC-Phalloidin和DAPI染色,荧光显微镜下观察耳蜗毛细胞生长情况并拍照计数、绘制毛细胞缺失图,运用SARS8.0软件进行直线回归分析比较各组的毛细胞缺失率。结果对照组耳蜗基底膜毛细胞在离体培养条件下生长良好,偶见缺失。实验组中顺铂引起毛细胞的缺失程度从底回至顶回大致均匀。随着顺铂浓度从10μmol/L增加到100μmol/L,毛细胞的缺失率从14.5%上升到78.4%;顺铂浓度升高至400μmol/L及1000μmol/L时,毛细胞缺失率下降至48.8%和8.77%。细胞缺失区域可见DAPI着色的浓缩核。结论离体培养条件下,顺铂对耳蜗毛细胞的损伤在一定浓度范围内呈剂量依赖性,超过一定剂量后顺铂所致毛细胞损伤又逐渐减少;内外毛细胞的损伤从底回至顶回呈现均一性。     

顺铂诱导斑马鱼侧线毛细胞损伤及再生模型的建立

目的建立顺铂诱导斑马鱼侧线毛细胞损伤及再生模型。方法采用顺铂溶液直接孵育斑马鱼方法,通过免疫组化、荧光特异性标记侧线细胞的转基因鱼活体成像、原位杂交等方法统计分析顺铂处理前后斑马鱼侧线毛细胞剩余情况以及药物撤除后毛细胞再生情况。结果顺铂引起斑马鱼侧线毛细胞丢失具有剂量依赖效应,相同的孵育时间较高浓度的顺铂孵育后几乎可杀死全部侧线毛细胞;毛细胞再生与顺铂的毒性积累程度有关,较低浓度孵育较短时间毛细胞再生速度较快。毛细胞再生数目随着时间的延长不断增加,72小时后可再生原有数目的90%以上。结论斑马鱼侧线毛细胞经不同浓度顺铂孵育不同时间后,其毛细胞丢失与再生具有剂量和时间依赖效应。     

地塞米松对顺铂致斑马鱼毛细胞损伤的保护作用研究

目的 探讨地塞米松对顺铂致斑马鱼侧线神经丘毛细胞损伤的保护作用.方法 ① 将受精后5天(5 dpf)斑马鱼幼鱼分为对照组、顺铂组、顺铂+地塞米松组,每组10条.对照组置于系统水中;顺铂组斑马鱼幼鱼中加入50μmol/L顺铂孵育24小时;顺铂+地塞米松组预先给予25μmol/L地塞米松作用24小时,再给予50μmol/L...     

顺铂作用下沙鼠耳蜗螺旋神经节神经元和Corti器细胞的凋亡

目的　探讨顺铂是否可引起沙鼠耳蜗螺旋神经节 (spiralganglion ,SG)神经元和Corti器细胞的凋亡。方法　对沙鼠进行顺铂连续腹腔注射 ,每日 4mg kg体重 ,分别于健康对照组及给药 4、5、6、7d各处死沙鼠 12只 ,取左侧耳蜗 ,每组动物取 10只耳蜗做平行蜗轴的石蜡切片 ,另 2只耳蜗做底回蜗轴及基底膜超薄切片。通过末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记技术 (terminaldeoxynucleotidyltransferase mediateddUTPnickendlabelingmethod ,TUNEL)及透射电镜检测连续用药不同时间后底回SG及Corti器的细胞凋亡情况。结果　连续应用顺铂 5～ 7d ,在透射电镜下可以观察到底回SG神经元及外毛细胞中出现凋亡特征性病理改变 ,TUNEL标记的石蜡切片中可见给药 5d后SG和Corti器出现的阳性细胞明显高于健康对照组 ,给药 6～ 7d阳性细胞进一步增加。结论　细胞凋亡是顺铂损伤沙鼠SG神经元和Corti器细胞的重要方式     

豚鼠耳蜗单离螺旋神经节细胞外毛细胞同时分离法

随着细胞生物学及分子生物学技术的进步 ,保持活性的单离螺旋神经节细胞 ( SGC)和 (或 )外毛细胞 ( OHC)已成为听觉生理、生化、病理及药理实验的重要模型。OHC为听觉的感受细胞 ,SGC为听觉初级神经元 ,观察同一因素对 OHC及 SGC的影响有重要意义 ,这就需要同时获得来源于同一耳蜗的单离的 SGC和 OHC。为此 ,我们尝试了在同一耳蜗同时分离单离的 SGC和 OHC的可能性 ,获得较好结果 ,报告如下。1　材料与方法1 .1 　 实验动物及溶液配制选用耳廓反射阳性、体重 2 0 0～ 30 0 g的花色豚鼠 6只 ,雌雄兼有。培养液为标准细胞外液 ,组…     

应用FLIVO探测顺铂引起的多器官细胞凋亡

顺铂是一种用于治疗恶性肿瘤的有效铂类化疗药物。然而顺铂对机体许多组织器官,如肾脏、肝脏、神经系统以及内耳等都具有毒性损害作用。FLIVO是一种能够穿越机体组织屏障进入到机体每个细胞并用荧光标记处于凋亡活动状态半胱天冬酶的亲脂性注射用示踪剂。本研究应用袢利尿剂(利尿酸钠,40mg/kg,Ⅰ.V.)暂时性破坏南美栗鼠的血-迷路屏障,促使顺铂(0.8 mg/kg,I.P.)经蜗管外壁屏障消除处进入耳蜗从而引起耳蜗毛细胞凋亡。受试南美栗鼠在联合应用利尿酸钠和顺铂后6小时和18小时终止实验。为了检测顺铂引起的发生在耳蜗和中枢以及肝肾等器官的细胞凋亡,在终止实验前经颈静脉注入100μlFLIVO探测液体并使之随着血液循环60分钟以探测出现在全身各个脏器的凋亡细胞。终止实验时,对麻醉动物常规施行心脏灌流磷酸盐缓冲液5分钟,再经心脏灌流10%福尔马林磷酸盐固定液,然后分别取出耳蜗、耳蜗核、听皮层、海马以及肝肾组织并浸入上述固定液继续固定6小时。在解剖显微镜下分离取出全耳蜗基底膜并制备成全耳蜗基底膜铺片,耳蜗核、听皮层、海马、肝脏和肾脏则常规制备成冰冻切片。在共聚焦显微镜下,观察FLIVO在上述各个器官标记出的凋亡细胞。在正常南美栗鼠各个组织器官中,均未发现FLIVO标记的凋亡信号;在用药后6小时,仅在耳蜗外毛细胞及肾组织中检测出凋亡细胞,但在其它器官也未发现FLIVO标记的凋亡细胞;与用药后6小时相比,在用药后18小时,所有的耳蜗外毛细胞和耳蜗底回大部分内毛细胞都呈现出荧光标记的凋亡信号,出乎意料的是,尽管耳蜗腹侧核神经元出现了大量凋亡神经元,但耳蜗背侧核的神经元却未检测到明显的凋亡信号;值得注意的是,凋亡信号还出现在更为核心的中枢海马神经元和听皮层神经元。此外,肾脏组织和肝脏组织在用药后18小时也出现大量的凋亡细胞。这些结果表明,联合应用利尿酸钠和顺铂不仅导致大量耳蜗毛细胞凋亡,而且顺铂的神经毒性作用还造成了耳蜗腹侧核大量神经元的凋亡和耳蜗背侧核和海马及听皮层的部分神经元凋亡,顺铂同样导致大量的肾脏细胞和肝脏细胞凋亡,出现在上述各个脏器的细胞凋亡现象与顺铂的耳毒性作用、神经毒性作用、肾毒性作用及肝毒性作用完全一致。     

顺铂对豚鼠耳蜗毛细胞的损伤

目的观察顺铂中毒后豚鼠耳蜗毛细胞损伤特点,并探讨半胱胺酸蛋白酶蛋白-3(caspase-3)在耳蜗毛细胞凋亡过程中的作用机制。方法健康豚鼠随机分为实验组和对照组各10只,实验组顺铂2mg·kg~(-1)·d~(-1),腹腔注射,连续6天：对照组用生理盐水等量腹腔注射,连续6天。动物实验期间每天测体重以调整药量,用药前及用药后第7天检测DPOAE,第7天处死豚鼠。左耳冰冻连续切片,免疫组织化学方法检测细胞中Caspase-3的表达;右耳冰冻连续切片,DNA末端转移酶介导的缺口末端标记法检测毛细胞凋亡。结果实验组中毛细胞受损,在细胞内观察到Caspase-3免疫阳性反应,并见凋亡细胞;对照组中未见毛细胞损伤,未见Caspase-3表达,未见凋亡细胞。结论顺铂可以通过诱导凋亡造成耳蜗毛细胞损伤,同时Caspase-3的表达,提示Caspase家族参与了耳蜗毛细胞凋亡过程。