吲哚-2,3-二酮对SH-SY5Y细胞增殖与迁移的影响及其机制

目的 研究吲哚-2,3-二酮(ISA)对SH-SY5Y细胞增殖与迁移的影响及其机制。方法 采用CCK-8实验检测ISA对SH-SY5Y细胞活力的影响,并计算其半致死浓度(IC₅₀值)作为后续实验中浓度设定的参考值。以IC₅₀值为依据,向SH-SY5Y细胞中分别加入总浓度为0、50、100、200μmol/L的ISA(A、B、C、D组),采用平板克隆实验、划痕实验、细胞凋亡率检测及PI染色流式细胞仪(FCM)分析实验检测ISA对各组SH-SY5Y细胞增殖、迁移、凋亡及细胞周期的影响。采用Western blot实验检测各组SH-SY5Y细胞中Bax、Bcl2等蛋白的相对表达量。结果 CCK-8实验结果显示,随着ISA浓度的增加,SH-SY5Y细胞活力明显下降(F=1 632.62,P<0.05);平板克隆结果显示,随着ISA药物浓度的增加,细胞的集落形成能力被抑制(F=1 038.21,P<0.05);划痕实验结果显示,细胞的迁移能力随着ISA浓度的增加而明显下降(F=147.86,P<0.05);流式细胞仪检测结果显示,随着...     

Ndfip1蛋白对神经细胞凋亡的保护作用探讨

目的探讨神经细胞损伤后高表达的Ndfip1蛋白对神经细胞凋亡的抑制作用及其可能机制。方法以SN-MC-1细胞(过表达Ndfip1的神经母细胞瘤细胞)及SH-SY5Y细胞作为研究对象,分别经过细胞培养及奥沙利铂作用后,通过MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡。结果 MTT法检测细胞增殖发现奥沙利铂对SH-SY5Y细胞、SN-MC-1细胞的增殖具有抑制效应,且具有剂量和时间依赖性;流式细胞仪检测细胞凋亡实验发现高表达Ndfip1的SH-SY5Y(SN-MC-1)细胞凋亡率有所下降。结论奥沙利铂能够抑制神经细胞增殖,其增殖抑制效应可能是通过诱导细胞凋亡而实现,SN-MC-1细胞过表达的Ndfip1可能与NEDD4家族蛋白结合,通过泛素化清除错误折叠的蛋白,通过抗凋亡作用来保护神经细胞。     

LiCl通过抑制GSK-3β的活性防治AD的研究

目的探讨氯化锂(LiCl)通过调节糖原合成激酶-3β(GSK-3β)的活性防治AD的机制。方法通过LipofectaminTM2000将pBACE1-mychis和pAPPswe质粒瞬时转染入SHSY5Y细胞中,LiCl处理细胞后12小时收集细胞总蛋白,采用Western blot分别检测GSK-3β、β-链蛋白(β-catenin)和核内转录因子CyclinD1的表达,并通过MTS、Brdu实验观察LiCl对细胞增殖的影响。结果 LiCl处理后,细胞内GSK-3β蛋白的表达明显减少;β-catenin、CyclinD1的表达明显增加,LiCl明显抑制转染后SHSY5Y细胞的生长,较未处理组相比,MTS实验、Brdu实验的抑制率分别为23.45%、22.58%。结论 GSK-3β是一个潜在的AD治疗靶点,LiCl可以通过抑制其活性发挥保护细胞的作用。     

新型Hsp90/HDAC双靶点抑制剂对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、侵袭和迁移的影响及其机制

目的 研究新型热休克蛋白90(Hsp90)/组蛋白去乙酰化酶(HDAC)双靶点抑制剂FXX-W-12-4对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响及其机制。方法 采用CCK-8实验检测FXX-W-12-4对MDA-MB-231细胞活力的影响,并计算其半致死浓度(IC₅₀)作为后续实验中浓度设定的参考值。以IC₅₀值为依据,在MDA-MB-231细胞中分别加入终浓度为0、100、200、300 nmol/L的FXX-W-12-4(分别设为A、B、C、D组),采用划痕实验、Transwell实验分别检测FXX-W-12-4对各组MDA-MB-231细胞侵袭以及迁移能力的影响。采用Western Blot实验检测各组MDA-MB-231细胞中ac-H3、Hsp70等蛋白的相对表达量。结果 CCK-8实验结果显示,随着FXX-W-12-4浓度的升高,MDA-MB-231细胞活力逐渐下降(F=2 663.00,P<0.05)。划痕实验结果显示,与A组相比,B～D组MDA-MB-231细胞在第12、24、48小时时迁移能力均明显降低...     

松油烯-4-醇与α-红没药醇对金黄色葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌协同抑菌作用研究

目的 探讨松油烯-4-醇(T4O)和α-红没药醇(Bis)对于金黄色葡萄球菌(S.aureus)和痤疮丙酸杆菌(C.acnes)的协同抑菌作用。方法 采用微量棋盘稀释法测定T4O、Bis联用时上述两种实验菌的最小抑菌浓度(MIC),并计算部分抑菌浓度指数(FICI)。对两种实验菌各设置MIC组(加入MIC的T4O、Bis)、2×MIC组(加入2倍MIC的T4O、Bis)及阴性对照组(不加T4O、Bis),绘制T4O、Bis联用时两种实验菌各组的时间-杀菌曲线,测定联用时两种实验菌各组的菌株表面Zeta电位(ZP)、细胞内核酸及蛋白质泄漏情况、细菌生物膜破坏情况以及S.aureus的呼吸链脱氢酶活性,透射电镜观察联用对两种实验菌各组菌株形态的影响。结果 T4O和Bis联用时S.aureus及C.acnes的FICI<0.5,其中T4O对S.aureus的MIC为0.62 g/L,对C.acnes的MIC为0.31 g/L;时间-杀菌曲线显示,联用可明显抑制两种细菌生长。与阴性对照组相比,联用时两种细菌的ZP均降低,细菌细胞内核酸、蛋白质泄漏增加,菌体丧失正常形态,细菌生物膜被破坏,...     

转化生长因子β1对膀胱癌细胞增殖与迁移能力的影响及其机制

目的 探讨转化生长因子β1(TGF-β1)对膀胱癌T24细胞增殖、迁移能力的影响及其机制。方法以浓度为0、1、5、10、20、40μg/L的TGF-β1处理T24细胞24 h,采用MTT法检测细胞的增殖活性,采用细胞划痕方法检测其迁移能力,采用Western blot检测细胞中程序性死亡配体-1(PD-L1)蛋白的相对表达量;使用浓度为5μg/L的TGF-β1处理T24细胞0、0.5、1、2、6、24 h,采用Western blot实验检测细胞PD-L1蛋白及磷酸化丝苏氨酸蛋白激酶(p-AKT)和磷酸化细胞外调节激酶(p-ERK)蛋白的相对表达量;将T24细胞分为A～C组,A组使用正常培养基培养,B组培养基中加入终浓度为5μg/L的TGF-β1培养,C组培养基加入终浓度为5μg/L的TGF-β1及SB431542培养,Western blot方法检测A～C组细胞中PD-L1相对表达量;将T24细胞分为D～G组,D组使用正常培养基培养,E组培养基中加入终浓度为5μg/L的TGF-β1培养,F组培养基中加入终浓度为5μg/L的TGF-β1、AKT抑制剂MK2206培养,G组培养基加入终浓...     

地佐辛联合芬太尼对冠心病患者非心脏手术术后镇痛及心肌损伤的影响

目的探讨地佐辛联合芬太尼对冠心病患者非心脏手术术后镇痛及心肌损伤的影响。方法将40例心功能Ⅰ或Ⅱ级择期行上腹部手术的冠心病患者随机分为地佐辛组(F组)与对照组(C组),每组各20例。分别于气管插管后(切皮前15分钟)静脉注射地佐辛3 mg/kg(F组)和安慰剂(C组)各10 ml。两组患者术后均行静脉自控镇痛(PCIA)。连续监测患者血流动力学及心电图变化,记录患者苏醒后、术后4、8、12、24、48小时视觉模拟评分(VAS),在术前(T1)、手术2小时(T2)、术毕(T3)及术后24小时(T4)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)及心肌肌钙蛋白I(c Tn I)浓度。结果 F组患者于苏醒后及术后4、8小时VAS评分明显低于C组(P<0.05);F组患者在T2^T3时点血清TNF-α含量低于C组(P<0.05);在T2T3时点血清TNF-α含量低于C组(P<0.05);在T2^T4时点,F组血清IL-6含量及c Tn I浓度低于C组,血清IL-10含量高于C组(P<0.05)。结论地佐辛联合芬太尼能够提高冠心病患者非心脏手术术后镇痛的效果,减轻心肌损伤。     

IL-21基因对宫颈癌HeLa细胞抑制作用的体外试验研究

目的探讨白介素-21(interleukin-21,IL-21)基因对宫颈癌细胞(HeLa细胞)的作用。方法构建人源性IL-21质粒并电转染至体外培养的宫颈癌细胞(HeLa细胞),选择性培养获得表达IL-21的HeLa细胞(HeLa-IL-21)。将96只重症联合免疫缺陷(severe combined immune deficiency,SCID)小鼠随机分为免疫重建组与非免疫重建组,每组各48只。采用人外周血淋巴细胞重建免疫重建组小鼠的免疫功能。再分别将两组小鼠随机均分为A、B、C 3个亚组,每组各16只。其中A组小鼠接种HeLa细胞,B组小鼠接种HeLa-空载体细胞,C组小鼠接种HeLa-IL-21细胞。比较各组小鼠肿瘤生长情况、小鼠脾细胞与不同靶细胞作用时干扰素-γ(IFN-γ)表达水平及脾细胞毒性,以探究IL-21基因抗肿瘤的作用机制。结果接种后第20、30、40天,非免疫重建A组小鼠肿瘤体积分别为(28.4±3.7)mm~3、(95.7±13.0)mm~3、(232.4±21.6)mm~3,均明显大于免疫重建A组小鼠[(19.7±2.9)mm~3、(65.7±12.7)mm~3、(154.7±16.9)mm~3](P<0.05),免疫重建C组小鼠肿瘤体积分别为(16.4±2.7)mm~3、(48.5±11.0)mm~3、(53.4±10.7)mm~3,均明显大于免疫重建C组小鼠[(12.4±2.1)mm~3、(22.7±5.6)mm~3、(37.4±10.3)mm~3,](P<0.05),免疫重建C组小鼠肿瘤体积均明显小于免疫重建A组小鼠(P<0.05),非免疫重建C组小鼠肿瘤体积均明显小于非免疫重建A组小鼠(P<0.05)。检测不同来源小鼠脾细胞与不同靶细胞作用时IFN-γ表达水平发现,HeLa细胞作为靶细胞时,各组小鼠IFN-γ高表达(P<0.05);较非免疫重建组小鼠,免疫重建组小鼠对不同靶细胞IFN-γ高表达(P<0.05);较免疫重建A、B组小鼠,免疫重建C组IFN-γ高表达(P<0.05)。小鼠脾细胞毒性实验发现,转染IL-21质粒能增加小鼠脾细胞对HeLa细胞的杀伤毒性。结论细胞因子IL-21有一定的抗肿瘤作用,可能与其增强T细胞对肿瘤细胞的杀伤作用有关,为宫颈癌患者的免疫治疗奠定了一定的研究基础。     

miR-1250-3p对肝细胞癌细胞侵袭迁移能力的影响及其作用机制

目的 探究miR-1250-3p对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞侵袭和迁移能力的影响及其作用机制.方法 采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测miR-1250-3p在正常肝细胞L02和HCC细胞系QGY-7703、PLC/PRF/5、HccL-M3中的表达情况;将QGY...     

TGF-β1干预构建的人支气管上皮细胞上皮-间质转化模型中lncRNA和miRNA表达及其意义

目的 探讨人转化生长因子β1(TGF-β1)干预构建的人支气管上皮细胞16HBE上皮-间质转化(EMT)模型中lncRNA和miRNA的表达情况。方法 体外培养16HBE细胞,设立对照组和处理组。处理组以TGF-β1诱导细胞构建EMT细胞模型,对照组加入等量RPMI基础培养液。分别于TGF-β1处理细胞后24、48、72 h使用倒置显微镜观察两组细胞形态及分布。当处理组细胞开始出现明显梭形改变时,采用RNA分离、逆转录以及实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法检测两组细胞中lncRNA和miRNA相对表达量。结果经TGF-β1处理细胞48 h后,处理组细胞梭形改变明显,细胞间隙增大,显示EMT模型构建成功。同时在该时间点,两组细胞中TBILA、NKILA、LNCRNA-ATB、HOTAIR、NEAT1、miR-125b-5p、miR-21-3p、miR-21-5p、miR-27a-3p、miR-27a-5p、miR-141-3p、miR-200c-3p、miR-17-5p、miR-34a-5p的相对表达量比较差异均具有显著意义(t=-16.353～6.460,P<0.05)。结...     

左乙拉西坦治疗儿童癫痫的疗效及其对肝功能、血清MDA和8-OHDG的影响

目的 探讨左乙拉西坦(LEV)治疗儿童癫痫的疗效及其对肝功能、血清丙二醛(MDA)和8-羟基脱氧鸟苷(8-OHDG)的影响.方法 选取2017年1月-2019年1月在新郑市人民医院儿科接受治疗的160例癫痫患儿为研究对象.采用随机数字表法将患者随机分为观察组(n =80)与对照组(n=80),分别给予LEV和丙戊酸钠(...     

矽肺模型大鼠肺组织及血清中瓜氨酸化组蛋白H3等的表达及其意义

目的 探讨矽肺模型大鼠肺组织及血清中瓜氨酸化组蛋白H3(CitH3)等的表达及其意义.方法雄性Wistar-Kyoto大鼠30只,随机分为矽肺组和对照组,每组15只大鼠.矽肺组大鼠气管内一次性注入50 g/L的SiO2混悬液1 mL建立矽肺大鼠模型,对照组大鼠气管内一次性注入等体积的生理盐水.两组大鼠均常规饲养,第28...     

克唑替尼治疗ALK基因突变阳性晚期非小细胞肺癌的效果和安全性评估

目的 探讨克唑替尼治疗ALK基因突变阳性晚期非小细胞肺癌的有效性和安全性.方法 回顾性分析2015年1月—2018年12月就诊于我院的ALK基因突变阳性的晚期非小细胞肺癌88例患者的临床资料.主要观察指标为患者的无进展生存期(PFS)和用药后的不良反应.所有患者均口服克唑替尼每次250 mg,每日2次,每8周进行一次疗...     

止锁扩弓非拔牙矫治技术治疗重度牙列拥挤1例并文献复习

目的 探讨球面自锁托槽止锁扩弓非拔牙矫治技术治疗重度牙列拥挤的效果.方法 安氏Ⅰ类错重度牙列拥挤患者1例,应用球面自锁托槽止锁扩弓非拔牙矫治技术进行扩弓,测量矫治前后上下颌牙弓宽度、下颌3、4、5、6牙位的冠中心(FA)点距离、下颌WALA嵴宽度以及下颌4、5、6牙位FA点-WALA嵴距离.结果 矫治7个月时,患者牙...     

5-氟尿嘧啶与4,4'-联吡啶共晶的合成与表征的研究

目的 以5-氟尿嘧啶(5-FU)为活性药物成分,4,4'-联吡啶(BPY)为共晶配体,运用共结晶技术制备一种新的5-FU-BPY共晶,并对该共晶进行结构表征及性质研究.方法 采用结合超声技术的溶剂蒸发法制备共晶,使用X-射线单晶衍射(SCXRD)测定单晶结构,通过X-射线粉末衍射(PXRD)、差示扫描量热法(DSC)、傅里叶变换红外光谱法(FT-IR)、扫描电镜(SEM)对共晶进行表征分析.结果 5-FU与BPY以4:1的化学计量比形成共晶.SCXRD测定结果表明,该晶体属于单斜晶系,P21/c空间群.5-FU-BPY的PXRD图谱在衍射角2θ为12.94°、14.90°、16.78°及33.83°处有新的特征衍射峰.DSC结果显示,5-FU-BPY在256.66℃处具有新的熔点峰.FT-IR分析结果显示,5-FU在3068、1725/cm处对应的亚酰胺基伸缩振动峰以及BPY在1401/cm处对应的吡啶氮伸缩振动峰均发生位移.SEM下该共晶呈现出不同于5-FU和BPY的长条状形态.结论 一种具有新熔点的5-FU-BPY新晶相形成.FT-IR结果表明5-FU的亚酰胺基和BPY的吡啶氮参与了5-FU-BPY结构中氢键的形成.SCXRD结构研究揭示,4个5-FU分子通过分子间氢键相连形成超分子环形单元,中间连接1个BPY分子,形成双孔状环形结构,这种罕见的超分子孔洞结构将对共晶的理化性质产生一定影响.     

PGAM1和Ki67在脑胶质瘤中的表达及意义

目的 探讨脑胶质瘤组织中磷酸甘油酸变位酶1(PGAM1)和Ki67蛋白的表达情况及其与临床病理特征的相关性.方法 收集2014年1月—2018年12月行手术治疗并经病理确诊为脑胶质瘤的83例患者肿瘤组织标本和10例正常的脑组织标本(对照组).对标本进行HE染色,观察脑组织的病理形态变化,通过免疫组织化学方法检测脑组织中PGAM1和Ki-67蛋白的表达情况,分析其表达与患者临床病理特征的关系.结果 HE染色结果显示对照组脑组织细胞分布均匀,未见异型性细胞,脑胶质瘤组随着级别升高,细胞数量增多,细胞异型性也越明显.免疫组织化学方法检测结果显示,两组脑组织中PGAM1和Ki-67蛋白的表达差异有显著性(χ2=21.029、28.105,P<0.05).PGAM1和Ki67表达与肿瘤病理分级密切相关,高级别胶质瘤组织中PGAM1和Ki67蛋白的表达显著高于低级别胶质瘤组织(χ2=14.906、20.415,P<0.05),与患者性别、年龄及肿瘤原发位置无关(P>0.05).脑胶质瘤组织中PGAM1高表达、低表达组组间Ki67阳性指数比较差异具有显著性(Z=-3.038,P<0.05).Kaplan-Meier分析结果显示,脑胶质瘤组织中PGAM1和Ki67表达水平越高,患者的总生存期越短(χ2=4.363、11.370,P<0.05).结论 PGAM1可能参与脑胶质瘤的发生发展过程,有望作为判断脑胶质瘤预后的指标和潜在的治疗靶点.     

老年新型冠状病毒肺炎死亡患者临床特征及危险因素

目的 探讨老年新型冠状病毒肺炎(COVID-19)死亡患者临床特征及其危险因素.方法 选取2020年2月10—26日武汉同济医院住院的老年COVID-19患者85例,依据转归分为死亡组(33例)和治愈组(52例),回顾性分析两组患者的临床表现、实验室和影像学检查资料,探讨其临床特征及危险因素.结果 死亡组患者年龄、白细胞计数、中性粒细胞计数及谷丙转氨酶、乳酸脱氢酶、D-二聚体、高敏肌钙蛋白I、IL-6水平明显高于治愈组(Z=-6.530～-4.367,P<0.05),而淋巴细胞计数、血小板计数明显低于治愈组(Z=-5.305、-5.049,P<0.05);死亡组肺部实变影的比例高于治愈组(χ2=13.222,P<0.05).死亡组qSOFA评分≥2分及CURB-65评分≥3分患者比例高于治愈组(χ2=6.245、45.114,P<0.05).多因素Logistic回归分析显示,CURB-65评分≥3分、淋巴细胞计数下降及D-二聚体水平升高可能是导致老年COVID-19患者死亡的独立危险因素.结论 CURB-65评分≥3分、高D-二聚体水平及淋巴细胞计数下降可能会增加老年COVID-19患者的死亡风险.     

血浆中二氯二苯二氯乙烯与阿尔茨海默病患者脑脊液中生物标志物相关性分析

目的 探讨血浆中二氯二苯二氯乙烯(DDE)水平与阿尔茨海默病(AD)患者脑脊液生物标志物的相关性.方法 检索阿尔茨海默病神经影像学倡议数据库(ADNI),获得符合纳入标准的研究对象207例(男111例,女96例),分为AD组和健康对照组.采用多元线性回归分析分析血浆中DDE水平与AD患者脑脊液中生物标志物[脑脊液β-淀...     

济南市远郊县农村中老年居民首诊意愿及影响因素分析

目的 分析济南市远郊县农村中老年居民首诊意愿及影响因素,为促进居民有序就医、落实分级诊疗政策提供理论依据和可行性建议.方法 采用问卷调查的方法对远郊县农村中老年居民进行首诊意愿调查,采用卡方检验和多因素Logistic回归分析分析影响远郊县农村中老年居民首诊意愿的因素.结果 远郊县农村中老年居民基层首诊意愿为85.27％;首诊意愿主要受教育程度、到基层医疗机构时间、家庭人均年收入、健康自评状况及是否患慢性疾病等因素影响.结论 远郊县农村中老年居民基层首诊意愿较高,应通过增加基层卫生服务可及性,提高基层医务人员慢性疾病综合防治能力,使基层医疗机构成为远郊县农村中老年居民就医的首选.     

烟草依赖程度与大脑奖赏网络的相关性研究

目的 探讨烟草依赖者静息态功能磁共振(rs-fMRI)下大脑奖赏网络是否会发生变化,并分析吸烟依赖程度与奖赏网络的相关性.方法 招募2019年7月—2020年2月于我院保健科和体检中心查体的男性烟草依赖者28例(吸烟组),同时招募与吸烟组相匹配的从未吸烟者27例(对照组).应用GE3.0 T磁共振对所有受试者行脑部rs...