神经调节素1β对氧糖剥夺/复氧诱导PC12细胞损伤的保护作用及其机制

目的 探讨神经调节素1β(NRG1β)对氧糖剥夺/复氧(OGD/R)诱导的PC12细胞损伤的保护作用及其机制。方法 建立PC12细胞OGD/R模型,随机分为对照组(常规培养)、模型组(OGD/R处理)以及干预组(给予OGD/R处理+NRG1β干预),采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测各组细胞的活力,采用荧光强度分析技术检测各组细胞活性氧(ROS)水平,采用荧光分光光度法检测各组细胞丙二醛(MDA)水平及还原型谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽(GSH/GSSG)吸光度比值,采用透射电镜观察各组细胞线粒体损伤情况,采用Western blot方法检测各组细胞中谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的表达情况。结果 与对照组比较,模型组的细胞活力显著下降(t=25.76,P<0.01),ROS水平显著升高(t=12.43,P<0.01),GSH/GSSG吸光度比值显著降低(t=9.17,P<0.01),MDA水平显著升高(t=29.46,P<0.01);与模型组比较,干预组的细胞活力显著升高(t=8.03,P<0.01),ROS水平显著降低(t=10.34,P<0.0...     

CMS121对氧糖剥夺再灌注神经元及缺血再灌注模型小鼠脑神经损伤的保护作用及其机制

目的 研究CMS121对氧糖剥夺再灌注(OGD/R)神经元及缺血再灌注(I/R)模型小鼠脑神经损伤的保护作用及其机制。方法 将皮质神经元分为对照组、OGD/R组和OGD/R+CMS121组,分别进行正常培养、OGD/R处理和OGD/R+CMS121治疗处理。24 h后,检测3组神经元的细胞活力和乳酸脱氢酶(LDH)释放水平。通过蛋白免疫印迹实验分析3组神经元再灌注6、24 h蛋白激酶B(Akt)和磷酸化Akt(p-Akt)的表达。将C57BL/6J小鼠随机分为Sham组、I/R组和I/R+CMS121组,分别进行假手术、I/R模型构建和I/R模型构建+CMS121处理,再灌注24 h后,通过神经严重度评分(NSS)评估小鼠神经系统受损情况,通过TTC染色计算小鼠的脑梗死体积占全脑体积的比例。结果 3组神经元的细胞活力和LDH释放水平比较差异有显著性(F=71.21、88.93,P<0.01);与OGD/R组相比,OGD/R+CMS121组的神经元细胞活力升高,LDH释放水平下降(t=5.56,11.63,P<0.05)。时间、分组、时间与分组交互作用对神经元p-Akt表达有...     

颞叶癫痫中两类胶质细胞标志基因表达的分析

目的：分析颞叶癫痫患者海马样本中星形胶质细胞和小胶质细胞标志基因的表达情况,探索其功能改变及影响。方法：利用现有的公共数据库,定量分析两类胶质细胞标志基因在不同病理条件下的表达量,评估两类胶质细胞的激活情况,并通过相关性分析探索二者之间可能的相互作用。结果：与对照样本相比,部分颞叶癫痫患者海马样本中这两类胶质细胞标志基因表达水平均增高,二者存在相关性(P<0.05)。其中GFAP、S100B、TMEM119和AIF1的升高有统计学意义(均P<0.05)。进一步分析显示,出现海马硬化后,星形胶质细胞标志基因的表达进一步上调,但与小胶质细胞标志基因的表达没有显著相关性(P>0.05)。结论：标志基因表达水平的显著升高提示了这两类胶质细胞在颞叶癫痫发病过程中都被激活。海马硬化时,星形胶质细胞可能通过不同的调控通路发生进一步激活。     

淫羊藿苷对缺糖缺氧条件下间充质干细胞活性及旁分泌功能的影响

目的:研究淫羊藿苷对缺糖缺氧(OGD)环境下移植的间充质干细胞(MSCs)活性和促血管生成相关细胞因子、microRNA等旁分泌功能的影响。方法:MTT法检测OGD时间、淫羊藿苷浓度对MSCs增殖活性的影响,流式细胞仪分析细胞凋亡水平,Hoechst 33342染色观察凋亡细胞形态;ELISA评估VEGF、bFGF的细胞分泌水平;实时荧光定量PCR测定MSCs及外泌体中5种促血管生成相关microRNA的表达水平。结果:高、低浓度的淫羊藿苷对OGD处理6h的MSCs表现出明显的促细胞增殖活性(P<0.05),淫羊藿苷孵育显著抑制OGD诱导的MSCs早、晚期凋亡,增加细胞上清中VEGF、bFGF的分泌水平。除了miR_103_3p,淫羊藿苷显著上调mi R_126a_5p、miR_210_3p、miR_378a_5p和miR_322_5p在MSCs的表达(P<0.05),外泌体中的表达水平低于细胞内。结论:淫羊藿苷可显著提高OGD条件下M SCs的增殖活性和旁分泌功能。     

二甲双胍对缺氧状态下高血糖诱导N9小胶质细胞释放炎性因子的调节作用

目的探讨二甲双胍对缺氧状态下高血糖诱导小胶质细胞释放炎性因子的调节作用。方法将体外培养的N9小胶质细胞分为四组:正常血糖组、正常血糖+二甲双胍组、高血糖组、高血糖+二甲双胍组。正常血糖+二甲双胍组与高血糖+二甲双胍组细胞均加入2 mmol/L二甲双胍处理12小时,四组细胞均进行缺氧处理24小时(3%O2)。采用小干扰RNA(si RNA)靶向沉默腺苷酸活化蛋白激酶α1(AMPKα1),采用实时定量聚合酶链式反应(q RT-PCR)和蛋白质印迹法检测AMPKα1的m RNA和蛋白水平,并采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测各组细胞白细胞介素(IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)分泌水平。结果二甲双胍对缺氧状态下高血糖诱导的炎性因子(IL-6、IL-1β、TNF-α)蛋白分泌具有抑制作用,并随着浓度的增加,抑制作用增强。高血糖组IL-6、IL-1β、TNF-αm RNA及蛋白分泌水平高于正常血糖组(P<0.05);高血糖+二甲双胍组IL-6、IL-1β、TNF-α蛋白分泌水平低于高血糖组(P<0.05);正常血糖组与正常血糖+二甲双胍组IL-6、IL-1β、TNF-α蛋白分泌水平比较差异无显著性(P>0.05)。而沉默AMPKα1能够上调高血糖+二甲双胍状态下IL-6、IL-1β、TNF-α蛋白分泌水平,与仅转染si-control细胞比较差异具有显著性(P<0.05)。结论二甲双胍能够抑制缺氧状态下高血糖诱导小胶质细胞炎性因子的释放,而AMPKα1在其中发挥关键作用。     

特发性突聋患者听阈与血浆胆固醇水平的相关性研究

目的:探讨特发性突聋患者听阈与血浆胆固醇水平的相关性。方法:选取我科诊治的28例特发性突聋患者作为实验组,以健康志愿人群28例为对照组。2组患者均检测血浆胆固醇(CHOL)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)及血浆甘油三酯(TG)水平,并进行比较。将各临床指标与患者听阈进行直线回归和相关分析及逐步回归分析。结果:与对照组相比,实验的CHOL、LDL及TG明显较高(P0.05),而HDL明显较低(P0.05)。听阈与CHOL、LDL呈正相关,与HDL呈负相关(P0.05),与TG无显著相关性(P0.05);而多元回归分析显示听阈仅与LDL正相关。结论:血浆LDL水平升高是诱发特发性突聋的危险因素之一,LDL含量检测可作为反映特发性突聋患者耳聋程度的客观指标。     

基于阿尔茨海默症神经胶质细胞增生所致炎症反应的研究

目的 基于阿尔兹海默症神经胶质细胞增生所致炎症反应的研究.方法 2019 年7 月-2020年1 月实验选取雄性小鼠16只,随机分为两组,各8 只.模型组中双侧海马注射凝胶态Aβ 致阿尔兹海默症,对照组中注射生理盐水,硫堇染色观察皮层神经元形态变化及数量,酶联免疫吸附试验观察小鼠血清中炎症因子变化,免疫组化检测胶质细胞...     

不同浓度吗啡对小胶质细胞极化状态的影响

目的 探讨高、低浓度吗啡对小胶质细胞M1/M2极化状态的影响.方法 体外培养大鼠小胶质细胞HAPI,将稀释好的细胞混悬液接种于6孔板中,当细胞融合度约达70％时,采用随机数字表法将细胞分为空白对照组(C组)、10-7 mol/L吗啡组(L组)和10-4 mol/L吗啡组(H组).C组细胞不做任何处理,L组和H组细胞分别...     

肠道微生物群诱发炎症导致阿尔茨海默病的研究进展

阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是一种进行性中枢神经系统退行性病变,其发病机制尚不明确.近年来,外周及中枢神经炎症在AD发生发展中的作用日益受到关注,而现有研究发现肠道微生物群可通过小胶质细胞、肠上皮屏障与代谢产物等途径诱发机体炎症反应,从而导致AD的发生.本文通过对肠道微生物群诱发炎症导致...     

母系表达基因3对卵巢癌细胞侵袭和迁移能力的影响机制研究

目的探究长链非编码RNA母系表达基因3(maternally expressed gene 3,MEG3)对卵巢癌细胞基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的表达和侵袭、迁移能力的影响。方法荧光定量聚合酶链反应检测卵巢上皮细胞和卵巢癌细胞MEG3表达情况。通过慢病毒转染携带MEG3全长序列的载体和空白载体于SKOV3人卵巢癌细胞中,分别作为实验组细胞和对照组细胞,通过Transwell侵袭实验检测两组细胞的侵袭能力,通过Transwell迁移实验检测两组细胞的迁移能力,通过蛋白质印迹法检测两组细胞MMP-2和MMP-9的表达情况。结果人卵巢癌细胞SKOV3、OVCAR3和A2780中MEG3的表达显著低于人卵巢上皮细胞IOSE80(均P<0.05)。通过慢病毒转染外源性上调SKOV3细胞MEG3的表达,实验组细胞MEG3表达显著高于对照组(P<0.05)。Transwell侵袭实验结果显示实验组穿过基质胶的细胞数显著少于对照组(P<0.05);Transwell迁移实验结果显示实验组迁入下室的细胞数显著少于对照组(P<0.05)。蛋白质印迹法结果显示实验组细胞MMP-2和MMP-9表达水平均显著低于对照组(均P<0.05)。结论 MEG3低表达于人卵巢癌细胞系,并可下调MMP-2和MMP-9的表达,抑制卵巢癌细胞的侵袭和迁移能力。