乳腺癌及良性病变中P16蛋白与基因5′CpG岛甲基化的病理意义的探讨

目的:探讨P16蛋白在乳腺良性病变,乳腺导管内癌,浸润性导管癌中的表达,p16基因5′CpG岛甲基化在原发性乳腺癌组织中与P16蛋白失表达的关系及意义。方法:用限制性酶PCR检测45例乳腺浸润性导管癌及15例乳腺良性病变p16基因中5′CpG岛甲基化状态,甲基化检测结果与免疫组织化学方法检测的P16蛋白表达结果进行比较。结果:p16蛋白在乳腺癌中强表达,但随组织学分级升高,淋巴结的转移,肿瘤直径的增加,p16蛋白表达率降低。p16基因甲基化与p16蛋白表达负相关,且与组织学分级相关。结论:p16基因甲基化是其失表达的可能机制之一。     

乳腺癌及良性病变中P16蛋白与基因5'CpG岛甲基化的病理意义的探讨

目的：探讨P16蛋白在乳腺良生病变,乳腺导管内癌,浸润性导管癌中的表达,p16基因5＇CpG岛甲基化在原发性乳腺癌组织中与P16蛋白失表达的关系及意义.方法：用限制性酶PCR检测45例乳腺浸润性导管癌及15例乳腺良性病变p16基因中5＇CpG岛甲基化状态,甲基化检测结果与免疫组织化学方法检测的P16蛋白表达结果进行比较.结果：p16蛋白在乳腺癌中强表达,但随组织学分级升高,淋巴结的转移,肿瘤直径的增加,p16蛋白表达率降低.p16基因甲基化与p16蛋白表达负相关,且与组织学分级相关.结论：p16基因甲基化是其失表达的可能机制之一.     

乳腺癌中MTS1基因外显子2及蛋白表达的初步研究

目的 :初步探测 MTS1 基因外显子 2缺失及其表达的 P16蛋白阴性在乳腺癌发生发展中的作用。方法 :采用多重PCR扩增 MTS1 基因外显子 2 ,免疫组化染色 (SP法 )检测 P16蛋白表达。结果 :本组乳腺癌中 MTS1 基因外显子 2的纯合子缺失频率为 35 .8% (19/ 5 3)。蛋白阴性占 19.4% (7/ 36 )。三种类型的乳腺癌中 MTS1 基因变异及 P16蛋白阴性频率有明显差异 ,淋巴转移组的基因变异及蛋白阴性频率极显著高于未转移组 (P <0 .0 1)。结论 :MTS1 基因外显子 2变异及 P16蛋白阴性与乳腺癌的病理组织分型相关 ,与乳腺癌的恶性进程密切相关。     

乳腺癌p^16基因研究进展

90年代以来随着分子生物学技术及学科的发展 ,已充分认识到乳腺癌多基因、多阶段的发病机理。p16基因又称多肿瘤抑制基因 ( MTS1 ) ,定位于人类染色体 9p2 1 ,编码相对分子量为 1 60 0 0的蛋白蛋 ,可抑制细胞周期蛋白依赖性激酶 4和 6的活性 ,其是细胞周期的负性调节因子 ,一些学者认为 :p16基因在肿瘤发生中的意义与 p53 基因相当。故研究 p16基因在乳腺癌中的改变有重要的理论意义。本文就乳腺癌 p16基因研究进展进行综述。1　乳腺癌 p16基因表达状况利用免疫组化和原位杂交技术检测 p16蛋白和m RNA的表达情况发现 :原发性乳腺癌中 p16…     

乳腺癌p16基因甲基化及与蛋白表达的关系

目的:探讨散发性乳腺癌中p16基因异常甲基化状况及其与蛋白表达的关系,进而研究散发性乳腺癌中p16基因异常的表遗传学作用。方法:用甲基化特异PCR(MSP)和SP法研究68例乳腺癌组织及相应癌旁正常组织中p16基因启动子甲基化状况及蛋白表达情况。结果:p16基因在68例散发性乳腺癌组织中的甲基化率为29%,且其甲基化与肿瘤组织分型、患者居住地及淋巴结转移相关(P<0.05),而与肿瘤患者绝经与否及组织分级无关(P>0.05);P16蛋白在所有肿瘤标本中的表达下降率为51%,在相应癌旁组织中均呈阳性表达,二者有显著性差异(P<0.05),P16蛋白表达下降与肿瘤患者淋巴结转移及患者居住地明显相关(P<0.05),与患者绝经、组织分级和分型无关(P>0.05);在20例p16甲基化的癌组织标本中,P16蛋白表达下降率(95%),显著高于48例未发生甲基化的乳腺癌标本下降率(33%),两者有显著性差异(P<0.05),乳腺癌患者组织p16基因甲基化检出率与P16蛋白表达下降率具有良好的一致性(Kappa=0.506),而p16未发生甲基化的正常乳腺组织和乳腺良性病变组织其蛋白均呈阳性表达。结论:在散发性乳腺癌中p16启动子甲基化改变会明显降低P16蛋白表达,p16基因启动子甲基化是其蛋白表达下降的重要原因,这种机制更倾向于农村乳腺癌患者。     

乳腺导管癌及癌前病变中端粒酶基因与p53,bcl-2的表达及相关性

目的观察端粒酶基因（hTR、hTRT）、凋亡相关基因（p53、bcl-2）在乳腺癌及癌前病变中的表达及相互关系。方法应用原住杂交方法检测端粒酶基因（hTR、hTRT）和凋亡相关基因（p53、bcl-2）mRNA在44例乳腺导管非典型增生组织中的表达，应用免疫组化方法检测p53基因蛋白在上述病例中的表达，并与6例乳腺良性乳腺增生及26例乳腺癌病例进行了比较。结果端粒酶基因（hTR、hTRTmRNA）在乳腺导管重度非典型增生组织中表达增强（60．90,6，52．1％），其表达与在轻、中度非典型增生中（分别为22．2％，11．1％和33．3％。25．0%）和乳腺癌组织中（88．5％，80．896）的表达差异显著（P〈0．05）．p53mRNA在乳腺导管非典型增生组织中的表达随着异型性的增加而下降，而p53基因蛋白则相应增加。Bcl-2在乳腺导管非典型增生组织中呈中度表达，其中以在重度中表达明显。结论端粒酶基因hTR、hTRT的表达与乳腺非典型增生细胞的恶性转化密切相关。同时可检测到p53mRNA的表达缺失、p53蛋白突变及bcl-2mRNA的过表达，且表达水平与端粒酶活性有相关关系。     

Ki-67 p53蛋白在乳腺癌病理组织中的表达及临床意义

目的：检测Ki-67、p53蛋白在乳腺癌病理组织中的表达情况,探讨其临床诊断意义。方法采用免疫组化法检测65例乳腺癌病理组织及12例乳腺良性病变中Ki-67、p53蛋白的表达情况。结果 Ki-67、p53蛋白在乳腺癌病理组织中的阳性表达率分别为90.77%,53.85%,在乳腺良性病变中阳性表达率分别为0%,0%,两者差异有统计学意义（P<0.01）;Ki-67、p53蛋白的阳性表达率与临床分期、有无淋巴结转移均密切相关（P<0.01）。结论联合检测Ki-67、p53蛋白的表达,对乳腺癌与良性病变的鉴别及预后判断具有重要的参考价值。     

乳腺癌中Survivin和p16蛋白表达及其病理学意义

目的探讨Survivin和p16蛋白在乳腺癌中的表达及其与病理生物学行为的关系。方法用免疫组化SP法检测100例乳腺癌、10例乳腺腺瘤及10例瘤旁正常乳腺组织中Survivin和p16基因蛋白的表达。结果乳腺癌中Survivin和p16蛋白阳性表达率分别为74%、52%。在乳腺癌组Survivin表达与p16呈负相关;p16与病理分级、分期、转移有关,Survivin与病理分级、转移有关。结论Survivin的过度表达与p16抑癌作用的缺失可能在乳腺癌的发生、发展机制中有协同作用,联合检测Survivin和p16可为乳腺癌的诊断、治疗及预后判断提供参考。     

P53、Caspase-3和凋亡调节蛋白FasL在乳腺癌的表达及其意义

目的:通过在人乳腺癌组织和癌旁(相对正常)乳腺组织中观察p53、Caspase-3和FasL凋亡调节蛋白的表达,探讨p53、Caspase-3及FasL在乳腺癌疾病发生、发展过程中的作用及关系,为提高生物治疗乳腺癌疾病提供一定的实验依据。方法:运用免疫组织化学方法检测21例收集于手术切除患者的乳腺癌组织和癌旁相对正常乳腺组织中的p53、Caspase-3及FasL。结果:P53蛋白在乳腺癌组织中的阳性表达率为61.9%明显高于癌旁组织(相对正常)乳腺组织的0%;而Caspase-3蛋白在乳腺癌组织中的阳性表达率为38.0%明显低于癌旁乳腺组织的80.9%;FasL蛋白在乳腺癌组织中的阳性表达率为57.1%明显高于癌旁乳腺组织的19.0%。结论:在乳腺癌发生、发展过程中p53、Caspase-3和FasL蛋白发挥着既独立又协同的作用。     

FHIT蛋白在乳腺癌进展过程中的表达

目的　探讨FHIT基因蛋白 (Fhit)表达情况与乳腺癌发生发展的关系。方法　用免疫组化法检测了6 1例乳腺浸润癌 ,4 3例导管内癌及上皮不典型增生 ,37例导管上皮增生和 4 2例正常乳腺上皮Fhit表达水平。结果　 90 .5 %正常乳腺上皮Fhit表达为强阳性 ,有 4 9.2 %乳腺癌Fhit表达阴性或明显降低 ,另有 32 .8%中度降低 (P <0 .0 0 1) ;在乳腺上皮增生发展为癌的过程中 ,Fhit表达水平逐渐降低 (P <0 .0 5 ) ;有异常 p5 3蛋白表达的乳腺癌 ,其Fhit低表达率明显高于无异常p5 3蛋白表达者 (P <0 .0 5 )。结论　实验结果提示Fhit表达降低可能对乳腺癌的演化和进展具有一定重要作用 ,Fhit低表达可能与 p5 3基因异常相关     

Clusterin在乳腺癌中的表达及临床意义

目的:探讨凋亡抑制因子Clusterin在乳腺癌组织中的表达及临床意义。方法:应用免疫组织化学法检测60例乳腺癌、10例乳腺良性病变和10例乳腺正常组织中Clusterin的表达情况,并探讨Cluslerin表达与乳腺癌各临床病理学参数间的关系。结果:Clusterin在乳腺正常组织、乳腺良性病变及乳腺癌组织中的阳性表达率分别为0%、10%及78_33%,乳腺癌组织中的Clusterin表达水平明显高于乳腺良性病变及乳腺正常组织(均P<0.01);Clusterin在乳腺癌中的表达与组织学分级、淋巴结转移相关(P<0.05),与年龄、肿瘤直径及临床分期无关;在乳腺癌组织中Cluslerin与ER、PR的表达负相关,与C-erbB-2的表达无明显相关,与p53、Ki67的表达呈正相关。结论:Clusterin可能通过抑制细胞凋亡在乳腺癌的发生发展中发挥重要作用,并有可能成乳腺癌治疗的新靶点。     

定量RT-PCR法检测乳腺癌前哨淋巴结CK19的研究

目的探讨定量RT-PCR法检测细胞角蛋白(CK19)在乳腺癌前哨淋巴结(SLN)中的表达,提高前哨淋巴结活检中微转移的检出率。方法采用常规病理检查法(HE染色)和定量RT-PCR法检测了40例乳腺癌患者SLN的CK19的表达量,同时选取10例来源于胃肠道的良性病变淋巴结作为定量RT-PCR检测的对照组。结果CK19在良性病变的淋巴结中没有表达。常规病理检查的敏感度为42.9%(9/21),假阴性为57.1%(12/21),准确率为70.0%(28/40)。定量RT-PCR法检测出常规病理未检出的微小转移病例12例,敏感度为95.2%(20/21),假阴性为4.8%(1/21),准确率为97.5%(39/40)。结论前哨淋巴结活检可有效判断乳腺癌腋淋巴结转移状态,应用定量RT-PCR法检测CK19在SLN中的表达,可提高敏感度及准确率。     

VEGF、MMP-2在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在乳腺癌发生、发展过程中的临床意义.方法:运用免疫组织化学二步法检测64例乳腺癌(乳腺癌组)和16例乳腺良性病变(对照组)中的VEGF、MMP-2的表达情况,并分析其与临床病理参数的关系.结果:(1)VEGF、MMP-2在乳腺癌中阳性表达率分别为78.10%(50/64)、62.50%(40/64),在乳腺良性病变中的阳性表达率分别为37.50%(6/16)、31.30%(5/16),差异有统计学意义(P＜0.05).(2)VEGF和MMP-2的表达与组织学分级和腋窝淋巴结转移呈正相关;乳腺癌组织中MMP-2和VEGF的表达呈正相关.结论:VEGF和MMP-2参与乳腺癌的发生、发展过程,可作为评估乳腺癌浸润和转移的重要生物学指标.     

HERC2在乳腺癌中的表达及其与病理参数关系的初步研究

目的 探讨HERC2在不同乳腺癌组织中的表达及其在浸润性导管癌中表达与病理参数之间的关系.方法 用免疫组化检测HERC2在正常乳腺组织、乳腺良性病变、导管原位癌和浸润性导管癌中的表达;用Western blot检测HERC2在正常乳腺组织和浸润性导管癌组织中的表达.结果 (1)免疫组化显示HERC2在乳腺良性病变、导管原位癌、浸润性导管癌中阳性率分别为8%(4/50)、32%(16/50)、58%(29/50),其组间差异均有统计学意义(P<0.01),HERC2在正常乳腺组织中阳性率为4%(2/50).(2)HERC2在浸润性导管癌中的表达与腋窝淋巴结转移、组织学分级相关(P<0.05).(3)Western blot显示HERC2在浸润性导管癌组织中的表达高于其在正常乳腺组织中的表达,差异有统计学意义(P<0.05).结论 HECR2可能与乳腺癌的发生、发展、预后评估相关.     

乳腺浸润性导管癌患者中Fhit基因的表达及其与雌、孕激素受体表达的相关性

目的:探讨乳腺浸润性导管癌组织中Fhit基因表达及其与雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)的关系。方法:采用免疫组化SP法检测128例乳腺浸润性导管癌及50例良性增生病变标本中Fhit基因及128例乳腺浸润性导管癌ER、PR的表达情况。结果:Fhit基因在乳腺浸润性导管癌病例中阳性表达率为27.34%(35/128),明显低于其在乳腺腺病中的阳性表达率70.00%(35/50)。差异有统计学意义(P<0.05)。在乳腺癌组织中,Fhit蛋白表达与组织学分级、腋窝淋巴结的转移的差异有统计学意义(P<0.05),与绝经情况、肿瘤长径、TNM分期差异无统计学意义(P>0.05)。通过相关性分析得出Fhit蛋白表达与ER及PR表达相关(P<0.05)。结论:联合检测乳腺癌组织ER、PR和Fhit蛋白的表达对于乳腺癌诊断、肿瘤恶性程度判定及预后有意义。     

肌糖蛋白在乳腺癌中的表达与侵袭的关系

目的:探讨肌糖蛋白(tenascin,TN)、增殖细胞核抗原(PCNA)在乳腺癌中的表达并分析其与肿瘤侵袭的关系。方法:应用免疫组化(SP法)检测TN、PCNA在78例乳腺癌,16例乳腺良性病变和10例正常乳腺组织中的表达,以PCNA阳性细胞标记数(PCNALI)分析肿瘤细胞的增殖情况,并分析其与肿瘤临床病理特征之间的关系。结果:TN在正常乳腺组织中无表达(0/10),在乳腺良性病变中弱表达,在乳腺癌中的高表达与肿瘤的大小,组织学分级,局部或远处的转移相关(P<0.05),而与患者的年龄无关(P>0.05)。TN高表达组与低表达组相比有较高的PCNALI。结论:TN足一个与肿瘤侵袭相关的标记,可以作为乳腺癌预后的判断指标。     

Egr—1在乳腺良性病变和癌组织中的表达

目的 探讨早期生长反应基因（Ｅｇｒ－１）在乳腺良性病变和癌组织中的表达及其与乳 癌的临床理联系，方法 用免疫组织化学法７５例乳腺病变组织进行Ｅｇｒ－１检测，观察乳腺良性病变和乳腺癌的表达情况，并比较其阳性率，结果：乳腺良性病变可见相对高水平的Ｅｇｒ－１表达，而乳腺癌Ｅｇｒ－１阳性仅１９例（４２．２％），Ｅｇｒ－１表达与乳腺癌的组织学类型和淋巴结转移有关（Ｐ〈０．０５）。结论：Ｅｇｒ－１表达的减少或     

p27蛋白在乳腺癌中的表达及其临床病理意义

目的 :研究 p2 7蛋白在乳腺癌中的表达并探讨其临床病理意义 .方法 :应用免疫组织化学方法检测 80例乳腺癌、2 7例乳腺不典型增生以及 2 0例正常乳腺组织中p2 7表达并分析其与临床病理的相关性 .结果 :乳腺癌组织中 p2 7高表达率为 5 3.8% (4 3/ 80 ) ,明显低于乳腺不典型增生和正常乳腺组织 (P <0 .0 1) .p2 7表达与淋巴结转移、临床分期、组织学分级相关 (P <0 .0 5 ) .p2 7高表达的乳腺癌术后 5a无病生存率明显高于 p2 7低表达者 (P <0 .0 5 ) .结论 :乳腺癌组的p2 7高表达率明显低于对照组 ;p2 7高表达的乳腺癌患者预后好 ;p2 7是乳腺癌独立的预后因子 .     

p16及cyclin D1在乳腺癌组织中的表达及其临床意义

目的观察p16、cyclin D1在乳腺癌组织中的表达水平,并探讨其临床意义。方法采用免疫组织化学法对2010年2月至2013年4月武汉大学人民医院肿瘤中心手术切除的54例乳腺癌组织和乳腺癌旁正常组织及50例乳腺增生组织p16、cyclin D1的表达水平进行检测,探讨其与临床病理学指标间的关系。结果乳腺癌组织中p16蛋白阳性表达率为55.6%(30/54),而乳腺癌旁正常组织及乳腺增生组织中p16蛋白均为阳性表达;各组cyclin D1过度表达情况为:乳腺癌37.0%(20/54),乳腺癌旁正常组织20.4%(11/54),乳腺增生组织4.0%(2/50),乳腺癌组织中过度表达阳性率与其他组织的差异有统计学意义(P<0.05);p16蛋白表达在组织学分级的差异及cyclin D1表达在雌激素受体的差异均有统计学意义(P<0.05)。结论乳腺癌组织中存在着cyclin D1的过度表达及p16蛋白的异常表达,p16、cyclin D1可成为判断乳腺癌组织分化程度和预后的实验室指标。