八肽胆囊收缩素在ONOO~-介导内毒素致肺动脉内皮细胞损伤中的保护作用

目的和方法 :我们以往的实验显示 ,内皮源性过氧亚硝基阴离子 (ＯＮＯＯ- )参与介导ＬＰＳ引起的培养肺动脉内皮细胞损伤 ;在离体血管水平 ,ＣＣＫ对ＬＰＳ损害肺动脉内皮功能有保护作用。本实验在培养的牛肺动脉内皮细胞 (ＢＰＡＥＣ)水平 ,进一步观察八肽胆囊收缩素 (ＣＣＫ - 8)对ＬＰＳ诱生内皮源性ＯＮＯＯ- 和对ＬＰＳ诱导ＢＰＡＥＣ损伤的影响 ,旨在初步探讨ＣＣＫ的保护作用机制。结果 :( 1 )ＣＣＫ可抑制ＬＰＳ诱导的ＢＰＡＥＣ生成ＯＮＯＯ- 增多的标志物硝基酪氨酸 (ＮＴ)的荧光强度由ＬＰＳ组的 6 55± 0 30降低至 4 37± 0 0…     

AngⅡ、mm-LDL和TNFα对ECV304细胞 PDGF-B链基因转录调控的影响

目的 :从基因转录水平探讨ＡｎｇⅡ、ｍｍ -ＬＤＬ及ＴＮＦα对ＥＣＶ30 4细胞ＰＤＧＦ -Ｂ链基因表达的影响。方法 :( 1 )以ＧＡＰＤＨ为内参照 ,用反转录 -多聚酶链反应 (ＲＴ -ＰＣＲ)方法检测 1 0 - 6 ｍｏｌ/ＬＡｎｇⅡ、1 0 0 μｇ/ｍＬｍｍ -ＬＤＬ及 2 0 0Ｕ/ｍＬＴＮＦα作用于ＥＣＶ30 4细胞 1 8ｈ后各实验组ＰＤＧＦ -Ｂ链基因ｍＲＮＡ水平 ,分别为对照组的 1 5倍、2 0倍和 1 3倍 ,提示ＡｎｇⅡ、ｍｍ -ＬＤＬ及ＴＮＦα在转录水平对ＥＣＶ30 4细胞ＰＤＧＦ -Ｂ链基因的表达有促进作用。 ( 2 )构建一系列含人ＰＤＧＦ -Ｂ链基…     

山莨菪碱减轻TNF-α所致内皮细胞凋亡

目的 :从转录因子水平观察山莨菪碱能否减轻ＴＮＦ -α所致内皮细胞的凋亡 ,并探讨其机制是否与其抑制ＮＦ -κＢ活化有关。方法 :培养小牛肺动脉内皮细胞 (ＢＰＡＥＣ) ,将山莨菪碱 ( 0 2ｍｇ/ｍＬ)加入细胞培养基中 ,30ｍｉｎ后再加入ＴＮＦ -α( 2 50 0Ｕ/ｍＬ)损伤 2 4ｈ ,采用Ｈｏｅｃｈｓｔ 332 58染色 ,荧光显微镜观察细胞凋亡情况 ,并进行显微照相。采用Ｓｅｌｌｉｎ法抽提细胞上清片段ＤＮＡ及琼脂糖电泳 ,观察是否出现ＤＮＡ梯状条带 ,用二苯胺法测定上清液及沉淀物中ＤＮＡ含量 ,计算细胞ＤＮＡ断裂百分率。ＢＰＡＥＣ表达Ｉ-κ…     

八肽胆囊收缩素对脂多糖诱导离体兔肺动脉反应性变化的影响

目的与方法：为探讨胆囊收缩素（ＣＣＫ）缓解内素休克时肺动脉压增高的作用机制。应用离体血管技术观察ＣＣＫ对内毒素主要成分脂多糖（ＬＰＳ）诱导兔肺动脉反应性变化的影响。结果 ＬＰＳ（４μｇ／ｍＬ,２ｈ）引起离肺动脉对α受体激动剂苯肾上腺素（ＰＥ）的收缩反应增强,降低对乙酰胆碱（ＡＣｈ）介导的内皮依赖性舒张反应,ＣＣＫ－８（０．１μｇ／ｍＬ和０．５μｇ／ｍＬ）逆转了ＬＰＳ的上述作用,ＣＣＫ－８（０．５μ     

抗氧化剂和NFκB对大鼠肺微血管内皮细胞iNOS表达的影响

目的 :探讨ＮＦκＢ以及抗氧化剂在大鼠肺微血管内皮细胞中对ＴＮＦ α加ＬＰＳ诱导的ｉＮＯＳ基因表达的作用及其机制。方法 :通过免疫组化染色ＡＢＣ法用抗内皮细胞抗体ＣＤ31对培养的大鼠肺微血管内皮细胞进行鉴定。Ｇｒｉｅｓｓ法测定细胞培养上清液中的亚硝酸盐浓度以反映ＮＯ的生成。Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ结合ＲＴ ＰＣＲ分析ｉＮＯＳｍＲＮＡ水平。ＥＭＳＡ法测定细胞核内ＮＦκＢ的结合活性。结果 :ＴＮＦα(10 0Ｕ/ｍｌ)加ＬＰＳ(1ｕｇ/ｍｌ)处理内皮细胞 2ｈ后ｉＮＯＳｍＲＮＡ水平明显上升 (Ｐ <0 .0 5 ) ,2 4ｈ后能明显增加…     

常氧及慢性缺氧的肺动脉内皮细胞急性缺氧后血栓素合酶(TXS)基因及PGI2、TXA2代谢产物的变化

目的 :前列环素 (ＰＧＩ2 )和血栓素Ａ2 (ＴＸＡ2 )均是花生四烯酸经环氧合酶 (ＣＯＸ)途径生成的代谢产物 ,分别由前列环素合酶和血栓素合酶催化产生。本实验动态观察了常氧及慢性缺氧的肺动脉内皮细胞血栓素合酶 (ＴＸＳ)基因表达的变化及培养基上清中ＰＧＩ2 及ＴＸＡ2 的代谢产物 6-Ｋｅｔｏ -ＰＧＦ1 α、ＴＸＢ2 随急性缺氧的变化。方法 :采用连代常氧和缺氧培养的肺动脉内皮细胞 ,分别在 2、4、6代给予急性缺氧刺激 6ｈ ,分为四组 :常氧组 (Ｎ)、急性缺氧 6ｈ组 (ＮＨ)、慢性缺氧后复氧 1 2ｈ组 (Ｈ)、慢性缺氧后复氧 1 2ｈ再急性缺…     

皮质醇导致脓毒症大鼠TNF-α释放增加

目的：探讨皮质醇对脓毒症大鼠ＴＮＦ－α、ＩＬ－６释放的影响及其临床意义。方法：ＳＤ大鼠５８只,分为５组,Ａ、Ｃ组于盲肠结扎穿孔ＣＬＰ后每１２ｈ皮下注射氢化可的松（３０ｍｇ／ｋｇ）,Ｂ、Ｄ组于ＣＬＰ后同时点注等量生理盐水,Ｅ组为对照组。Ａ、Ｂ组于４８ｈ,Ｃ、Ｄ组于２４ｈ处死,测定血及腹水中ＴＮＦ－α、ＩＬ－６含量和血中皮质醇水平。结果：Ａ组死亡３例,余各组无死亡。Ａ组血浆皮质醇和ＴＮＦ含量均显著高于Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ组（Ｐ＜００５）。Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ组腹腔液中ＴＮＦ－α含量显著高于Ｅ组（Ｐ＜００５）。所有大鼠腹腔液中ＴＮＦ－α、ＩＬ－６含量均显著高于血浆（Ｐ＜００５）。结论：脓毒症时,应用皮质醇可使血浆ＴＮＦ－α含量升高,且随作用时间延长ＴＮＦ－α升高愈显著,并伴有动物死亡率增加。但对血浆及腹腔液中ＩＬ－６含量无显著影响。     

FAS， NF-κB及Caspases在TNFα介导的微血管内皮细胞凋亡中的作用

目的 :研究肿瘤坏死因子α(ＴＮＦ)引起微血管内皮细胞凋亡的特点及ＦＡＳ ,ＮＦ -κＢ和Ｃａｓｐａｓｅｓ在此种凋亡中的作用。方法 :用ＴＵＮＥＬ ,流式细胞仪等方法测定ＴＮＦ引起体外培养的大鼠肺微血管内皮细胞(内皮细胞 )凋亡。用免疫组化方法测定ＴＮＦ引起内皮细胞ＮＦ -κＢ的活化 ,研究其活化对ＴＮＦ引起的内皮细胞凋亡的影响。用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ、ＦＡＳ抗体测定ＴＮＦ对内皮细胞ＦＡＳ表达的影响及ＦＡＳ在内皮细胞凋亡中的作用。用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ、免疫组化测定ＴＮＦ作用后凋亡蛋白酶Ｃａｓｐａｓｅ- 8,Ｃ…     

过敏性紫癜TNFα变化及意义

利用ＥＬＩＳＡ法检测３５例急性期和２５例恢复期ＨＳＰ患儿血清ＴＮＦα浓度，结果显示，急性期ＨＳＰ病人血清ＴＮＦα浓度明显高于正常对照组（Ｐ〈０．０１），恢复期接近正常（Ｐ〉０．０５）。急性期与恢复期之间也有显著差异（Ｐ〈０．０１），ＣＩＣ阳性与否与ＴＮＦα浓度无相关性，提示ＴＮＦα在ＨＳＰ的发病中可能具有重要意义。     

TNF-α对内皮细胞粘附分子NFκB表达的影响

目的 :目前认为动脉粥样硬化 (ＡＳ)是一种炎症性疾病 ,其致病因素多种 ,细胞因子生长因子等在其发病机制中起着重要的作用。因而通过ＴＮＦ α作用于内皮细胞 (ＥＣ)后 ,观察单核细胞对其粘附的变化 ,粘附分子表达以及对调控粘附分子基因的转录因子 (ＮＦκＢ)变化 ,以探讨ＴＮＦ α在ＡＳ发生早期细胞行为中的作用。方法 :人脐静脉内皮细胞和γＴＮＦ α(5ｎｇ/ｍｌ)作用 4ｈ后 ,用细胞计数法测Ｕ937细胞以ＥＣ粘附率 ,用ＥＬＩＳＡ法检测ＥＣ膜上粘附分子ＶＣＡＭ 1、ＩＣＡＭ 1、Ｐ ｓｅｌｅｃｔｉｎ的表达 ,以及采用细胞免疫化学方法测…     

TNF-α促进鼠模型中免疫复合物的清除

近来研究证明ＬＰＳ能显著增强ＢＡＬＢ/Ｃ小鼠单核吞噬细胞系统 (ＭＰＳ)清除免疫复合物 (ＩＣ)的功能。该实验作者以同源ＩｇＧ致敏红细胞 (ＥＡ)作为ＩＣ ,给小鼠静脉注射 ,建立鼠模型 ,用以研究小鼠注射ＬＰＳ后最早诱导释放的细胞因子之一—ＴＮＦ α在清除ＩＣ中的作用。方法 :给ＢＡＬＢ/Ｃ小鼠静脉注射 5 0 μｇ/ｍｌＬＰＳ 1 0 0 μｌ,1小时后血清ＴＮＦ α达最高峰 ,取此时血清为ＴＮＦ α( )血清 ,血清ＴＮＦ α浓度用Ｌ92 9细胞测定 ,注射后 4小时和 2 4小时ＴＮＦ α活性与注射前及盐水处理组无差别。取注射后 4小时血清为ＴＮ…     

TNFα、LPS诱导EA、hy926细胞一氧化氮合酶基因的转录

一氧化氮 (ＮＯ)由一氧化氮合酶 (ＮＯＳ)催化Ｌ -精氨酸生成。诱导型一氧化氮合酶 (ｉＮＯＳ)是ＮＯＳ三种亚型中催化产生ＮＯ较多的一种 ,可被多种炎症因子诱导 ,而诱导环节多在基因转录水平。目的 :观察肿瘤坏死因子α(ＴＮＦα)、脂多糖 (ＬＰＳ)对内皮细胞系ＥＡ .ｈｙ92 6细胞ｉＮＯＳ基因转录的影响 ,并探讨蛋白激酶Ｃ(ＰＫＣ)和丝裂素活化蛋白激酶 (ＭＡＰＫ)的作用。方法 :传代培养的ＥＡ .ｈｙ92 6细胞用ＴＮＦα ,ＬＰＳ处理 1 8小时 ,并同时加入或不加蛋白激酶Ｃ抑制剂Ｈ - 7、Ｃａｌｐｈｏｓｔｉｎ和丝裂素原活化蛋白激酶抑制…     

缺氧对肺动脉平滑肌细胞增殖的影响及其传递途径

本文观察了低氧对离体培养成年牛肺动脉平滑肌细胞（ＰＡＳＭＣ）＾３Ｈ－ＴｄＲ参入的影响，并用异搏定、Ｈ７、ＰＭＡ和ＥＧＦ进行干预实验，对ＭＳＣ增殖中信息传递途径作了初探。结果显示：（１）缺氧２４ｈ，ＰＡＳＭＣ＾３Ｈ－ＴｄＲ参入显著增高。（２）异搏定及Ｈ７显著降低低氧Ｈ－ＳＭＣ＾３Ｈ－ＴｄＲ参入，而ＰＭＡ及ＥＧＦ显著增加ＨＳＭＣ＾３ＨＴｄＲ参入。（３）Ｈ－ＳＭＣ对ＰＭＡ和ＥＧＦ反应强于常氧Ｎ－ＳＭＣ；     

转铁蛋白受体介导肿瘤坏死因子α基因转移的抗肿瘤效果

肿瘤坏死因子α(ＴＮＦα)对多种肿瘤细胞产生直接杀伤。使用超分子复合物载体,通过受体介导内吞作用使ＴＮＦα基因转移到肿瘤细胞并表达,提高肿瘤局部ＴＮＦα浓度,可能激发和加强机体抗肿瘤免疫效应。构建转铁蛋白(ＴＦ)和多聚赖氨酸交联蛋白,ｐＳＶｋ3ＴＮＦα为含人ＴＮＦα全序列ｃＤＮＡ的真核细胞复制表达质粒,与交联蛋白静电引力结合成超分子复合物。体外基因转移分3组:超分子复合物处理组,不处理组和质粒单独处理对照组。基因转移后ＥＬＩＳＡ检测ＴＮＦα浓度;抽提细胞总ＲＮＡ,进行ＲＴＰＣＲ,引物序列1:5′ＧＣＣＡＴＴＧＧＣ…     

登革病毒对人血管内皮细胞产生细胞因子的影响

目的了解登革病毒感染对人血管内皮细胞产生几种细胞因子的影响。方法用登革病毒Ⅱ型（ＤＶ－２）及ＬＰＳ单独作用或联合作用于人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ），于作用后４，２４，４８，７２和９６小时分别收集培养上清液，用ＥＬＩＳＡ法检测ＧＭ－ＣＳＦ，ＩＬ－６和ＴＮＦα的含量。实验数据采用方差分析处理。结果ＤＶ－２感染能使ＨＵＶＥＣ分泌ＧＭ－ＣＳＦ和ＩＬ－６的能力增强。病毒感染后４小时，ＧＭ－ＣＳＦ和ＩＬ－６的水平开始升高，并分别于感染后７２和２４小时达高峰，然后开始下降。然而，ＤＶ－２感染并不能提高ＨＵＶＥＣ分泌ＴＮＦα的能力。ＬＰＳ单独作用或ＤＶ－２与ＬＰＳ联合作用均可提高ＨＵＶＥＣ分泌ＧＭ－ＣＳＦ和ＩＬ－６的能力，但对分泌ＴＮＦα的能力没有明显的促进作用。结论登革病毒感染能提高ＨＵＶＥＣ分泌ＧＭ－ＣＳＦ和ＩＬ－６的能力。细胞因子在登革病毒的致病与免疫过程中可能起重要作用。     

原因不明习惯性流产患者抗子宫内膜抗体和肿瘤坏死因子α的测定

目的：探讨抗子宫内膜抗体（ＥｍＡｂ）和肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）与原因不明习惯性流产（ＨＡ）的关系。方法：应用酶免和放免法对５９例原因不明ＨＡ（研究组）和２０名正常对照的血清ＥｍＡｂ和ＴＮＦα含量进行测定,其中研究组分为Ａ组（每次流产均小于１２ｗ,３１例）和Ｂ组（至少有一次流产大于１２ｗ,２８例）。结果：原因不明ＨＡ的ＥｍＡｂ阳性率为５０８５％,ＴＮＦα水平为０５８５±０３０９μｇ／Ｌ,而正常对照未见ＥｍＡｂ阳性（Ｐ＜０００５）,其ＴＮＦα为０３３４±０２６５μｇ／Ｌ（Ｐ＜０００５）;Ａ组ＥｍＡｂ阳性率及ＴＮＦα水平均明显高于Ｂ组（Ｐ＜０００５,Ｐ＜００２）。结论：ＥｍＡｂ和ＴＮＦα在ＨＡ发病中可能起着重要作用,尤其对早期流产患者。     

热休克反应对大鼠感染性脑水肿细胞因子和一氧化氮的 …

为研究ＩＬ－１β－、ＴＮＦ－α及ＮＯ在感染性脑水肿时的变化和热休克反应对它们的影响，探讨热休克反应对大鼠感染性脑水中的保护作用是否与其有关，本实验采用ＥＬＩＳＡ法和Ｇｒｉｅｓｓ法分别检测各组大鼠脑组织均浆中ＩＬ－１β－、ＴＮＦ－α及ＮＯ的含量，大鼠分３组：①正常对照组（ＮＳ）；②感染性脑水肿组（ＰＢ）；③热休克处理组（ＨＳ＋ＰＢ）。每组又分为４ｈ、８ｈ、２４ｈ三个时间点。结果显示：与ＮＳ组比较，４     

内源性过氧亚硝基阴离子参与介导内毒素致 肺动脉内皮细胞的损伤作用

目的 :在培养的小牛肺动脉内皮细胞 (ＢＰＡＥＣ)水平 ,观察ＬＰＳ对ＢＰＡＥＣ诱生ＯＮＯＯ- 能力及内皮源性ＯＮＯＯ- 在ＬＰＳ致ＢＰＡＥＣ损伤中的作用 ,以探讨ＬＰＳ引起肺动脉内皮细胞损伤的新机制。方法 :用流式细胞分析技术检测ＯＮＯＯ- 生成标志物ＮＴ的荧光强度 (任意单位 ,代表内源性ＯＮＯＯ- 的生成量 )和ＮＴ阳性细胞数 ,计算ＮＴ阳性细胞百分率。结果 :( 1 ) 1 μｇ、5μｇ和 1 0 μｇ/ｍＬＬＰＳ剂量依赖性引起ＢＰＡＥＣ诱生ＮＴ(亦即ＯＮＯＯ- )明显增多 ,分别为 6 36± 0 1 1、6 55± 0 30和 7 2 4± 0 40 ,显著高于…     

DEVELOPED AND CLINICAL APPLICATION OF LOCK-RING TYPE BIPOLAR HIP PROSTHESIS

ＤＥＶＥＬＯＰＥＤＡＮＤＣＬＩＮＩＣＡＬＡＰＰＬＩＣＡＴＩＯＮＯＦＬＯＣＫ－ＲＩＮＧＴＹＰＥＢＩＰＯＬＡＲＨＩＰＰＲＯＳＴＨＥＳＩＳＤＥＶＥＬＯＰＥＤＡＮＤＣＬＩＮＩＣＡＬＡＰＰＬＩＣＡＴＩＯＮＯＦＬＯＣＫ－ＲＩＮＧＴＹＰＥＢＩＰＯＬＡＲＨＩＰＰＲＯ...     

慢性肝病患者血清细胞因子变化与临床意义

目的：为探讨慢性乙型肝炎病毒性肝病患者血清细胞因子ＴＮＦ－α、ＩＬ－１、ＩＬ－６、ＩＬ－８活性变化及其在慢性肝病发生发展中的作用及临床意义。方法：采用ＥＬＩＳＡ法对慢性乙型肝炎（ＣＨ）、慢性乙型重型肝炎（ＣＳＨ）、乙型肝炎性肝硬化（ＨＣ）患者血清中细胞因子ＴＮＦ－α、ＩＬ－１、ＩＬ－６、ＩＬ－８活性进行了测定。结果：慢肝患者血清ＴＮＦ－α、ＩＬ－１、ＩＬ－６、ＩＬ－８水平明显高于健康对照组（Ｐ〈０