丹参酮ⅡA磺酸钠对重症急性胰腺炎大鼠血管内皮的保护作用

目的 探讨丹参酮ⅡA磺酸钠对重症急性胰腺炎 （SAP）大鼠内皮细胞的保护作用以及对主动脉内皮细胞凋亡的影响。方法 采用8%L-精氨酸溶液腹腔注射制作大鼠SAP模型,分为SAP组和丹参酮治疗组。丹参酮治疗组于SAP造模成功后立即腹腔注射丹参酮ⅡA磺酮钠20 mg/kg。各组动物分别于术后12 h和24 h各取12只腹主动脉穿刺取血后处死,HE染色观察胰腺组织病理学变化;取腹主动脉行TUNEL和RT-PCR检测。检测:①采用双抗夹心酶联免疫吸附法 (ELLSA)定量测定血清血管内皮细胞损伤标志物血管性血友病因子 （vWF）、可溶性血管内皮细胞蛋白C受体 （sEPCR）以及肿瘤坏死因子-α （TNF-α）和一氧化氮(NO)的浓度。②TUNEL法检测主动脉内皮原位凋亡。③采用RT-PCR检测主动脉内皮Bcl-2和Bax基因mRNA表达。结果 SAP组病理改变较丹参酮组严重。与SAP组相比,丹参酮治疗组降低各时点TNF-α和血管内皮损伤标志物vWF、sEPCR的表达、增加NO的表达,并降低主动脉内皮细胞的凋亡以及增加Bcl-2基因mRNA表达、降低Bax基因mRNA表达,同时也增加SAP大鼠主动脉内皮Bcl-2/Bax基因表达的比值 （P均<0.05）。结论 丹参酮ⅡA磺酸钠可以减轻SAP大鼠主动脉内皮损伤及内皮细胞的凋亡,其机制与抑制TNF-α表达的增加有关。     

次声诱导的大鼠心肌细胞凋亡和血管内皮损伤

目的: 检测次声诱导的大鼠心肌细胞凋亡和血管内皮损伤. 方法: 用8 Hz, 130 dB的次声分别作用大鼠0, 7, 14, 21和28 d,每日2 h,观察大鼠心肌凋亡蛋白Bax, Bcl-x的表达,测定大鼠血浆NO, ET-1的含量变化. 结果: 大鼠心肌凋亡蛋白与对照组比较Bax, Bcl-x的表达均增强,Bcl-x的表达增加比Bax表达增加少(P<0.01),有统计学意义. 大鼠血浆ET-1含量在暴露期间均明显升高(P<0.01),7 d时升高最多,14 d时升高最少,21和28 d时较14 d时有所升高;次声暴露7 d NO含量减少(P<0.05),14 d时显著降低(P<0.01),在次声作用的0,21和28 d时,与对照组比较无差别(P>0.05). 结论: 次声可引起大鼠心肌凋亡,血管内皮受损伤,这些变化和次声暴露的时间和量有关.     

胰岛素样生长因子1对重症急性胰腺炎大鼠肺损伤细胞凋亡的影响

目的:探讨细胞凋亡和bax,bcl-2基因表达在重症急性胰腺炎(SAP)肺损伤发病机制中的作用以及胰岛素样生长因子1(IGF-1)对SAP肺损伤细胞凋亡的影响.方法:将Wistar大鼠72只随机分为对照组、SAP组和IGF-1组,每组24只.大鼠SAP模型采用50 g/L的牛磺胆酸钠自胆胰管注入建立,三组在建模后6,12,24 h各取8只测定血清淀粉酶、肺损伤病理评分;光镜和电镜下观察肺组织病理变化,细胞凋亡原位检测法测定肺组织内细胞凋亡,RT-PCR法测定肺组织baxmRNA,bcl-2 mRNA的表达.结果:SAP组血清淀粉酶、肺损伤病理评分、细胞凋亡指数、bax mRNA和bcl-2 mRNA表达较对照组升高,透射电镜下肺组织内细胞凋亡明显增多;经IGF-1 干预后,血清淀粉酶、肺组织内细胞凋亡指数及肺损伤病理评分较SAP组下降,bax mRNA表达下降,bcl-2 mRNA表达增强,透射电镜下见肺组织内细胞凋亡明显减少.结论:肺组织细胞凋亡及bax,bc1-2基因表达参与了SAP肺损伤发病机制,IGF-1可通过抑制肺组织细胞凋亡减轻肺损伤,其机制可能部分是通过调节凋亡相关基因bax,bcl-2的表达来实现的.     

胰岛素对大鼠血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响

目的　探讨胰岛素对血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响 .方法　体外进行大鼠血管平滑肌细胞的培养 ,以 5～ 10代细胞为实验对象 ,随机分成空白对照组和胰岛素组 ,胰岛素组又按浓度 1× 10 - 9、1× 10 - 8、1× 10 - 7和 1× 10 - 6 mol· L- 1分为 4小组 ,在加药后 2 4 h、4 8h和 72 h用 MTT法分析细胞增殖活力 ,免疫细胞化学观察细胞核增殖抗原 (PCNA)的表达 ,用末端脱氧核苷酸转移酶介导的 d UTP缺口末端标记法检测 H2 O2 诱导的细胞凋亡 .结果　加药 4 8h后 ,1× 10 - 9mol· L- 1胰岛素组的 MMT A值 (0 .4 2± 0 .0 4 )高于空白组(0 .30± 0 .0 2 ) ,P<0 .0 5 ,低于 1× 10 - 6 mol· L- 1 胰岛素组(0 .5 2± 0 .0 5 ) ,P<0 .0 5 ;1× 10 - 9mol·L- 1胰岛素作用 4 8h后细胞的 MMT A值比空白组增加 4 0 % ,高于 2 4 h细胞的MMT A值增加率 (2 7% ) ,P<0 . 0 5 ;1× 10 - 9～ 1× 10 - 6mol· L- 1 胰岛素作用 4 8h后细胞 PCNA的表达率 (5 0 %～80 % )均高于空白对照组的 (30 % ) P<0 .0 5 ;加药 2 4 h后 ,1× 10 - 6 mol· L- 1胰岛素组细胞凋亡率 (30 % )低于空白组(70 % ) P<0 .0 5 .结论　胰岛素有明显促 VSMC(vascularsmooth m uscle cells)增殖的作用 ,并且这种作用时间和浓度依赖性 ;同时胰岛素     

重症急性胰腺炎大鼠DDFA对肺损伤细胞凋亡及Bax,Bcl-2表达的影响

目的:探讨DDFA对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肺组织内细胞凋亡及Bax,Bcl-2基因表达的影响. 方法:大鼠45只随机分为对照组(CG), SAP组和DDFA治疗组,每组15只. 大鼠SAP模型采用分2次ip 200 g/L-精氨酸溶液方法建立,建模后24, 48和72 h时测定血清TNF-a,淀粉酶. 血钙及光镜观察肺组织病理变化,细胞凋亡原位检测(TUNEL)法测定肺组织内细胞凋亡,SABC免疫组化染色法测定肺组织Bax, Bcl-2基因表达. 结果:SAP组血清淀粉酶, TNF-a和肺组织内细胞凋亡指数, Bax, Bcl-2基因表达较CG组升高,光镜下见肺组织损害明显;经DDFA治疗后,血清淀粉酶, TNF-a和肺组织内细胞凋亡指数, Bax基因表达下降,而Bcl-2基因表达增强,光镜下见肺组织损害减轻. 结论:肺组织细胞凋亡, Bax, Bcl-2基因表达参与SAP发病机制,在SAP早期给予DDFA治疗对减轻肺脏损害是有益的.     

血管内皮细胞凋亡与动脉粥样硬化

细胞凋亡 (ａｐｏｐｔｏｓｉｓ)是不同于细胞坏死的一种死亡形式 ,指细胞在生理或病理情况下发生有序的主动的非炎症死亡 ,又称程序性死亡 (ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄｃｅｌｌｄｅａｔｈ ,ＰＣＤ)。血管内皮是循环血液与血管平滑肌之间的中介组织 ,对于维持血管内环境的平衡具有重要意义。现已发现 ,血管内皮受损是动脉粥样硬化症 (ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ,ＡＳ)发生的关键因素。本文就诱导内皮细胞 (ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌ)凋亡的一些因素与ＡＳ的发生之间的关系以及有关机制作一综述。1　内皮细胞凋亡的细胞及分子基础在外界…     

异丙酚对大鼠肠源性肺损伤Fas、Caspase-3的影响

目的　研究异丙酚对急性肺损伤时Fas、Caspase - 3的影响。方法　健康SD大鼠 36只随机分 3组 ,空白对照组 (S组 )、缺血再灌注组 (I/R组 )、异丙酚组 (P组 ) ,每组 12只。采用小肠缺血再灌注复制急性肺损伤模型。光镜观察组织病理改变 ;免疫组织化学检测Fas和Caspase - 3的蛋白表达 ,并测量光密度值 (OD值 ) ;原位末端标记法(TUNEL)检测凋亡的肺细胞并计算凋亡指数。结果　I/R组Fas和Caspase - 3OD值明显高于S组和P组 (P <0 0 1) ,且P组Caspase- 3OD值高于S组 (P <0 .0 5 ) ;I/R组细胞凋亡指数明显高于S组和P组 (P <0 0 1) ,而P组高于S组 (P <0 0 5 )。结论　异丙酚能降低Fas和Caspase - 3蛋白的表达 ,抑制细胞凋亡 ,保护急性肺损伤。     

wortmannin对重症急性胰腺炎大鼠肺损伤的保护作用

目的:观察磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)抑制剂wortmannin对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肺损伤的保护作用并探讨其机制.方法:将健康成年SD大鼠54只随机分为对照组、SAP组和SAP wortmannin组,每组18只,逆行胆胰管注射50 g/L牛磺胆酸钠制备SAP模型.检测血清TNF-α水平、肺组织湿/干质量比值、肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性、支气管肺泡灌洗液(BALF)蛋白含量;观察肺组织及胰腺组织的病理变化.结果:SAP组较对照组血清TNF-α水平、肺组织湿/干质量比值、BALF蛋白含量及肺组织MPO活性均显著升高(P《0.01),胰腺、肺组织病理损伤随病情进展而逐渐加重;SAP wortmannin组较对照组各项指标均升高,但较SAP组均明显降低(P《0.01), 胰腺、肺组织病理损伤较SAP组减轻.结论:wortmannin对SAP大鼠肺损伤有一定的保护作用, 其机制可能与其抑制了中性粒细胞内PI3K信号转导通路的活化, 使多种炎症细胞的活化和TNF-α等炎症因子的释放受到抑制有关.     

中性粒细胞在大鼠急性重症胰腺炎肺损伤中的作用机制

目的:探讨急性重症胰腺炎(ASP)合并急性肺损伤时肺泡灌洗液中性粒细胞(PMN)凋亡和坏死的发生规律及可能涉及的作用机制.方法:选取雄性SD大鼠48只,分为ASP实验组(24只)、对照组(24只).实验组大鼠穿刺胰胆管并注入35g/L牛磺胆酸钠制作ASP大鼠模型,分别在制模后3,6,12 h剖杀,于预定时相取支气管灌洗液,密度梯度离心分离PMN,用流式细胞仪测定PMN凋亡、坏死比例,同时测定乳酸脱氢酶(LDH)含量、肺通透指数.结果:ASP组大鼠肺灌洗液中PMN存活细胞比例增加(P＜0.01),凋亡延迟.同时,肺灌洗液LDH明显升高(P＜0.01),肺通透指数显著增加(P＜0.01).结论:ASP合并急性肺损伤时,PMN凋亡延迟,造成PMN持续处于激活状态及毒性内容物的持续释放,与急性肺损伤密切相关.     

黄芪对大鼠急性肺损伤早期血管内皮生长因子表达的影响

目的探讨油酸诱导大鼠急性肺损伤(ALI)早期血管内皮生长因子(VEGF)表达的变化及黄芪对VEGF和ALI的影响。方法将18只Wistar大鼠随机分成3组:正常组、油酸组、黄芪组。测定支气管肺泡灌洗液(BALF)及血浆VEGF的水平,观察肺组织病理形态学变化。结果油酸组大鼠BALF中VEGF的水平较正常组和黄芪组显著降低(P<0.01),而血浆VEGF的水平显著增加(P<0.05),BALF与血浆VEGF的表达有明显的相关性(r=-0.522,P<0.05)。结论ALI早期BALF及血浆VEGF的水平可反映肺损伤的严重程度,黄芪对ALI具有一定的治疗作用。     

大剂量地塞米松对SAP肺损伤的治疗作用

目的: 探讨大剂量地塞米松对重症急性胰腺炎(SAP)肺损伤的治疗机制及作用. 方法: 建立SD大鼠急性胰腺炎模型,随机分为对照组、SAP组及地塞米松治疗组. 取肺组织行组织病理观察、组织含水量、微血管通透性及肺髓过氧化物酶(MPO)活性检测,同时检测肺组织中血管内皮细胞凋亡及TNF-α,ICAM-1基因表达. 结果: SAP组大鼠微血管内大量白细胞浸润,肺组织血管内皮细胞凋亡增加;治疗组肺间质水肿及白细胞浸润程度均较SAP组减轻,微血管内皮细胞数量明显减少. SAP组与对照组相比,肺组织含水量、微血管通透性、MPO活性及TNF-α,ICAM-1基因表达均明显升高,地塞米松治疗组上述指标均较SAP组明显好转(P<0.01). 结论: 大剂量地塞米松可通过抑制炎症介质、改善血管内皮细胞的功能损伤、降低肺组织血管通透性等作用治疗SAP肺损伤.     

ICAM-1基因表达对大鼠急性重症胰腺炎肺损伤的影响

目的:探讨急性重症胰腺炎(ASP)大鼠肺组织细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的基因表达及其与肺损伤的关系. 方法:将ASP大鼠分别在制模后1, 3, 5, 7和9 h点剖杀,取肺组织行病理观察、微血管通透性、组织含水量及髓过氧化物酶(MPO)活性测定,RT-PCR法检测肺组织ICAM-1基因表达. 结果:制模后肺组织ICAM-1基因表达在1 h后逐渐上升,至9 h达到峰值(P<0.05). 同时肺损伤程度逐渐加重,肺组织微血管通透性、组织含水量及MPO活性逐渐升高. 结论:ASP大鼠肺组织ICAM-1基因过度表达,且与肺损伤严重程度相关.     

己酮可可碱对重症急性胰腺炎大鼠肺损伤的保护作用

目的 观察己酮可可碱对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠相关肺损伤的保护作用,并探讨其可能的发病机制.方法 36只雌性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、治疗组.采用5%牛磺胆酸钠逆行胰胆管注射的方法,复制大鼠SAP相关肺损伤模型.治疗组在模型制作前30min给予己酮可可碱.12h后分别对胰腺损伤、肺损伤程度进行病理评分,测定肺系数、胰腺湿重、血清淀粉酶,用ELISA法检测血清和支气管肺泡灌洗液中TNF-α、IL-6、IL-1β含量,用半定量RT-PCR法检测肺组织中NF-κB p65 mRNA的表达.结果与模型组比较,治疗组胰腺及肺损伤程度明显减轻;其血清和支气管肺泡灌洗液中TNF-α、IL-6、IL-1β含量明显下降,肺组织中NF-κB p65 mRNA的表达亦明显减少.结论己酮可可碱对SAP相关急性肺损伤具有保护作用,其机制可能与抑制肺组织中NF-κB p65 mRNA的表达,从而抑制促炎细胞因子TNF-α、IL-6、IL-1β的产生相关.     

Pathogenesis of acute lung injury in severe acute pancreatitis

Objective：To study the pathogenesis of acute lung injury in severe acute pancreatitis （SAP）. Methods：Rats were sacrificed at 1, 3, 5, 6, 9 and 12 h after establishment of inducing model. Pancreas and lung tissues were obtained for pathological study, microvascular permeability and MPO examination. Gene expressions of TNF-α and ICAM-1 in pancreas and lung tissues were detected by RT-PCR. Results： After inducing SAP model, the injury degree of the pancreas and the lung increased gradually, accompanied with gradually increased MPO activity and microvascular permeability. Gene expressions of TNF-α and ICAM-1 in pancreas rose at 1 h and reached peak at 7 h. Relatively, their gene expressions in the lungs only rose slightly at 1 h and reached peak at 9-12 h gradually. Conclusion：There is an obvious time window between SAP and lung injury, when earlier protection is beneficial to prevent development of acute lung injury.     

大鼠提睾肌神经损伤后血管内皮细胞的凋亡

目的：研究大鼠提睾肌神经损伤后血管内皮细胞的凋亡。方法：以免疫组织化学SP法,对大鼠提睾肌神经损伤后的血管内皮细胞Bcl-2,Bax和p53表达进行研究。结果：支配提睾肌的神经损伤后,Bcl-2,Bax和p53的表达均有增强,但Bax和p53的表达明显强于Bcl-2(P＜0.01和P＜0.05)。神经损伤1wk后凋亡水平最高（与24h组比较P＜0.01)。结论：大鼠提睾肌血管内皮细胞失去神经支配后可产生过度凋亡,并可能对微循环产生不利影响。     

重症急性胰腺炎合并肺损伤的发生机制研究进展

重症急性胰腺炎(sever acute pancreatitis,SAP)在起病初期,即有由细胞因子介导的全身炎症反应综合征(systematic inflammatory response syndrome,SIRS)引起的多器官功能衰竭(multiple organ dysfunction failure,MOF).SIRS和MOF是危及患者生命的主要并发症,其特点是多器官功能不全,其中急性肺功能不全合并MOF是最常见的、也是发病率最高的胰腺外器官.临床上表现为急性呼吸窘迫症,病情危急,严重危及生命.因此,研究SAP并发MOF的机制可为SAP治疗提高理论基础,本文就近年来国内外有关SAP合并急性肺损伤的机制进行综述.     

精氨酸对急性胰腺炎大鼠胰腺腺泡细胞凋亡的影响

目的:探讨左旋精氨酸与急性胰腺炎(AP)大鼠胰腺腺泡细胞凋亡的关系.方法: 以蛙皮素制造AP模型,观察不同剂量L-Arg治疗AP大鼠后,胰腺组织中一氧化氮合酶(NOS)活性、一氧化氮(NO)的含量、胰腺腺泡细胞凋亡及胰腺组织病理改变.结果: AP胰腺组织中NOS活性较正常胰腺组织中升高,而此时胰腺组织NO浓度反而降低,低剂量L-Arg(75, 150 mg/kg)使胰腺组织中NO浓度升高致接近正常组水平,促进了胰腺腺泡细胞凋亡,减轻胰腺病理损害;高L-Arg剂量(1200, 2400 mg/kg),胰腺组织中NO浓度升高超出正常组,胰腺腺泡细胞凋亡减少,胰腺病理损害加重.结论: L-Arg对AP的的双重作用与NO的生物活性有关.小剂量可通过诱导胰腺腺泡细胞凋亡, 而起保护作用, 大剂量则有害.     

胰腺腺泡细胞凋亡在大鼠急性胰腺炎病程中的作用

目的 :探讨胰腺腺泡细胞凋亡与急性胰腺炎 (acutepancreatitis ,AP)严重度的关系 ,进一步研究AP的发病机制。方法 :2 4只SD大鼠随机分为对照组、APⅠ组和APⅡ组。采用胰胆管共同通道内逆行注射不同浓度的脱氧胆酸钠制备不同重症程度的AP模型。应用TUNEL技术 ,分析AP时胰腺腺泡细胞凋亡情况。结果 :AP时 ,腺泡细胞死亡包括坏死和凋亡两种形式 ;病变程度轻的APⅠ组大鼠腺泡细胞凋亡指数比病变程度重的APⅡ组高 (6 36± 2 4 1VS 2 34± 1 15 ,P <0 0 5 )。结论 :AP时 ,腺泡细胞死亡包括坏死和凋亡两种形式 ;在急性期 ,腺泡细胞凋亡与AP病情严重程度呈负相关 ,腺泡细胞凋亡可能是一种保护现象     

重型急性胰腺炎并发急性肺损伤的诊治（附23例报告）

目的：探讨重型急性胰腺炎（SAP）并发急性肺损伤（ALI）的诊治方法。方法：对23例SAP并发ALI患者的资料进行回顾性分析。结果：SAP并发ALI发生率为59％,经机械通气及生长抑素等综合治疗,多器官功能障碍综合征发生率为21．9％,ALI治愈率为91．3％,结论：ALI是SAP早期最常见的并发症,根据预警指标警惕ALI的发生是避免漏误诊的关键,早期合理应用呼吸机及生长抑素是主要的综合治疗措施。