用于耳科手术的一种自身纤维蛋白原胶

术前1月至1天内采集患者全血40ml,用3.8%枸橼酸抗凝,立即冰冻保存。3400转离心5分钟分离,将血浆移至带塞的无菌试管中,可冰冻保存于-30℃,待用。取20ml血浆加至含BaNa_4和MgSO_4的无菌试管中,将此试管在20℃-24℃孵育1小时,2000转(636×g)离心20分钟,从血浆中除去凝血酶原和凝血酶,将上清移至含30%PEG(分子量1000)的无菌试管中,摇动试管混匀血浆和PEG,当管底有沉淀出现时8000转(10200×g)离心10分钟,移除上清,沉淀重悬于0.5ml无菌枸橼酸钠溶液中,在手术时,将等体积的含40mMCaCl_2和牛凝血酶的溶液加入终产品(即纤维蛋白原-因子Ⅷ浓缩物)中,使之     

用4种方法制备用作纤维蛋白胶的纤维蛋白原浓制剂

作者由30单位全血制备CPDA-1血浆,并用单采血小板术采集20单位ACD血浆,4 C存放0～1天或5～6天后置—70℃冰冻至少24小时,再置冰箱内(1～6℃)15～18小时,直至冰晶几乎消融。以6500×g离心5分钟或5000×g离心7分钟后移去上清血浆,直到仅余10～20ml血浆以形成富含纤维蛋白原(纤原)浓制剂恳液,然后置—30℃ 5天至5月,直到进行检测。     

血液儿茶酚胺在体外的稳定性

血浆儿茶酚胺分析采血的标准方法,是将标本采于含有肝素的容器后,立即置冰水中.然后,尽快将标本于4℃离心,分离血浆贮在-20℃冰冻保存,直至试验前.据Carruthers全血儿茶酚胺在室温迅速降解的报道用荧光法测得儿茶酚胺在离体30分钟时,丧失40%,24小时丧失60%.近来一些研究表明,用放射酶法分析全血儿茶酚胺,在20℃可稳定22小时,室温稳定48小时以上.HPLC法分析室温至少可稳定3小时.本试验,取志愿献血静脉血30ml肝素抗凝,取一部分立即于4℃静心,并取1ml血浆冰冻,贮于-20℃,其余血样置室温(20-25℃)48小时,并在不同时间间     

测定血浆瓜氨酸的一种简易快速法

瓜氨酸和尿素都能与二乙酰一肟反应,生成有色产物。前者最大吸收峰在490nm,而后者最大吸收峰为480nm。作者利用这一特性,用尿素酶分解尿素后测定瓜氨酸浓度。将血标本收集于锂-肝素管中,立即离心分出血浆。取0.7ml 血浆,加入0.1ml 脲酶(30U/mg,15mg/ml)溶液,37℃孵育15分钟。再加0.2ml 三氯醋酸(200g/L),混匀。离心(1200×g)2分钟,取上清液,再按血尿素氮二乙酰一肟法测定。用本法测定26例正常人,均值±SD 为32.5±     

用过期血浆制备血型鉴定用标准血清

收集不宜输用的库血,分离血浆置无菌瓶中,加盖置56℃水箱一小时,并不时振摇,使纤维蛋白原形成絮状沉淀;800×g 离心沉淀25～30分钟,用无菌吸管     

免疫荧光检查沙眼衣原体两种制片法的比较

两种方法制片,用荧光素标记单克隆抗体染色检查沙眼衣原体,优点是快速、敏感且具有特异性。操作程序是:将贮存于-70℃的ELISA标本解冻后涡旋混合30秒,两种制片法均取150μl标本分别用下法处理。1.微量离心法:将标本放入1.5ml Eppendorf管,18363×g于Biofuge15微量离心机离心15分钟,弃去上清液,小粒再悬浮于20μl蒸馏水,取5μl置于Teflon涂布载玻片上,空气干燥,甲醇固定10分钟。2.细胞离心法:将标本置于Cytospin3~(TM)点样夹内,在4472×g(2000rPm)条件下离心10分钟,从点样夹中取出载玻片,空气干燥,如上述固定。     

血液样本在不同处理条件下促肾上腺皮质激素测定的稳定性分析

目的探讨血浆中促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH)检测结果与血浆处理方式(离心血浆分离、离心血浆不分离和全血组)、保存温度(4℃和22℃)及存放时间(0,2,4,12,24h)的关系,探讨分析前ACTH样本的有效处理方式。方法按照血浆处理方式将待检标本分为离心血浆分离组、离心血浆不分离组和全血组,分别在4℃和22℃下保存,Roche601全自动电化学发光仪检测24h内0,2,4,12,24h时血浆ACTH的浓度水平。结果离心分离血浆和离心后不分离血浆处理方式在4℃,22℃时2h变化率5.0%,4h变化率5.0%;12h变化率约为10%。全血在4℃和22℃2h时变化率10%。结论离心分离血浆和离心后不分离血浆在4℃和22℃时ACTH可稳定12h,全血在4℃和22℃时ACTH稳定性不超过2h。     

不同规格全血制备富血小板血浆的最佳离心条件研究

目的研究不同规格全血分离制备富血小板血浆(PRP)的最佳离心条件。方法共采集54例健康献血者的新鲜全血,根据离心次数和离心条件分为两次离心组(A、B、C三种分离方法)和三次离心组(D、E、F三种分离方法)共6组,每组含200、300和400 ml全血各6袋。检测每组制备PRP的血小板计数和红细胞混入量,计算血小板回收率并进行比较。结果两次离心法所制备PRP的血小板回收率最高,但红细胞混入量较多,其中200 ml全血采用方法A最佳(即初次850g离心8 min,第2次4 650 g离心5 min),300 ml全血为方法B(初次1 000 g离心6 min,第2次4 650 g离心5 min),400 ml全血为方法C(初次1 220 g离心5 min,第2次4 650 g离心6 min)。三次离心法与二次离心法相比,红细胞混入量明显减少(P0.05),但血小板回收率有所降低。结论不同规格全血制备PRP应采用不同的离心条件,两次离心法适用于制备新鲜PRP或血小板胶,而三次离心法更适合冰冻或冻干PRP或血小板胶。     

血清丙氨酸转氨酶活性的稳定性

近期的报告证明血清丙氨酸转氨酶(ALT)水平升高与输血后非甲非乙肝炎(NANB)的发病率相关。检测ALT酶水平应在血标本采集后立即进行。为此作者研究了各种典型的血液处理方法对ALT稳定性的影响,这些包括检测的推迟,各种温度下短期或长期血清的贮存。取14人的凝血标本用280×g,离心10分钟,血清立即作ALT基线水平的测定。标本分别贮存在22,4,-20和-80℃中。另外还有的血清未和凝血块分离,而将其上的血清贮存在22和4℃中,间隔3,6,9和24小时,以及在2,4,6和8天时测定ALT含量。对未分离管内血     

酶免疫测定法——一种测定HbA_1c的新技术

本文介绍一种用市售酶免疫测定系统测定血红蛋白A_1c(HbA_1c)的方法.这种方法基于微量反应板技术,使用了一种抗Hb的抗体,其表位为葡萄糖与Hbβ链N端的起始八个氨基酸加成的Amadori重排产物.方法:采集静脉血(糖尿病组n=20;非糖尿病组n=20).加入EDTA抗凝.100μl全血加入500μl0.15md/L NaCl溶液清洗红细胞.2000×g离心5分钟.弃去上清液.再加入2ml蒸馏水即成溶血物.标本与标准品(50μl)溶血物用等体积试剂(3.3mmpol/L铁氰化钾)处理,室温下孵育10分     

用葡萄糖消耗试验(GCT)测定淋巴细胞转化率

在用促有丝分裂剂刺激淋巴细胞转化的过程中,葡萄糖的消耗增加.作者利用此原理来进行淋巴细胞转化的定量测定,并与通常采用的形态学计数法和〔~3H〕胸腺嘧啶核苷掺入法相比较.1.淋巴细胞分离在无菌条件下,用25U/ml的肝素抗凝血以422×g离心30分钟,取出富有血小板的血浆层,弃去红细胞和粒细胞,以1,173×g离心10分钟,除去血小板,将血浆层转入含放射性羰基铁(1mg/ml)的锥形瓶内,放置37℃保温30分钟,用盐水将上述处理过的血浆作1∶2稀释后放入聚蔗糖—泛影葡胺分离液中分离,在422×g离心30分钟,把界面处的淋巴细胞吸出来,用含10?型人血清的Eagle氏基础培养基4-(2-羟乙基)-1-对二氮巳环乙烷磺酸(4-2-(hydroxyethyl)-1-pipera-     

由轻度酸化的CPD血快速制备浓缩血小板

制备浓缩血小板(PC)一般是通过两次离心程序来完成。先将抗凝全血离心制备富血小板血浆(PRP),再以更高的离心力第二次离心。结果沉淀中常含有不易再混悬的血小板聚集物。有两种方法可使压实的血小板沉淀物容易再混悬:(1)在第二次离心前加ACD,使PRP的pH降低;(2)在第二次离心后将PC在室温静置1小时。本文比较了从CPD全血制备PC的这两种方法。作者对14名健康人,每人采450ml全血,置含有63mlCPD抗凝剂的标准塑料袋中。在采血过程中不断摇动血袋,采后1小时内将血袋在20℃以275g离心     

知识角

成分血具有哪些优点?输注时需要注意哪些问题?答:成分血的优点有:(1)纯度高,体积小,由于加工制备及时,其有效成分高且优于全血,比全血疗效好,副反应少;(2)成分血比全血含钾、氨和枸橼酸盐都低,更适合心、肝、肾功能不全的病人;(3)成分血稳定性好,便于保存和运输;(4)成分血一血多用,达到节约用血、有针对性使用的目的。输注成分血需注意的问题:(1)冰冻血浆应在37℃水浴中溶化后轻轻摇动,溶解后立即输注。冰冻干燥血浆用200 ml蒸馏水溶解后立即输注;(2)纤维蛋白元用蒸馏水或生理盐水100 ml溶解,不可用力震荡,溶解后立即输注,以免变为不溶性纤…     

细胞悬液的电子显微镜标本制作

本文介绍一种电子显微镜标本制作方法,适用于胸腹水等细胞悬液(Cytological Cells Suspension)的处理。其优点在于既能使细胞团中细胞数量足够,又能使细胞轮廓保持完整无缺。具体方法如下:(1)取细胞悬液约10ml,离心沉淀(300×g,2分钟)弃上清液,加入0.05M二甲砷酸盐缓冲液(以下简称缓冲液)约10ml使成细胞悬液,离心沉淀(300×g,30秒)弃上清液;(2)加入缓冲液2 ml及2.5%戊二醛缓冲液约10ml,固定20分钟后用缓冲液漂洗;(3)1%锇酸缓冲液固定20分钟,蒸馏水漂洗;(4)醋酸铀饱和水溶液染色10分钟,蒸馏水     

用前到腺素E_1制备的浓缩血小板在体内的恢复与存活

贮存5-7天的浓缩血小板(PC)在输注后恢复和存活不如新鲜血小板。作者首先在新鲜富血小板血浆(PRP)中加入一种生化激活剂后进行制备,并与常规PC制备法对照。方法:采集至少10天未服药的男性献血者全血,枸橼酸-磷酸-葡萄糖(CPD)抗凝,室温离心(1000g,7分钟)制备PRP。加入用正常盐水稀释的前列腺素E_1(PGE_1)使其最终浓度为1.3×10(~-8)M,然后室温3500g离心7分钟制备PC。PC于22℃±1℃贮存5天后,在使用前2-3小时以自身血浆浸泡血小板,然后弃液体,计数血小板、白细胞,测定pH,按Kunickl法作形态学积分,每个单位浓缩血小板加入250μCi铬酸钠(~(51)Cr)标记,22℃孵育30分钟,以自身血浆洗涤后配成30ml悬液,于输入后1.5、2.0、24、     

应用除白细胞的血小板和CMV血清阴性的红细胞以预骨髓移植后早期的CMV感染

应用巨细胞病毒(CMV)血清阴性的血液制品能够有效地预防早期CMV 感染,但此种血液制品并非易得,由于感染的白细胞是CMV 的却源,输注中除掉白细胞部分就可降低或消除CMV 感染的危险。骨髓移植前用乳胶凝集试验和酸免疫分析检测所有病人及供者的CMV 抗体。病人随机分组,一组接受去白细胞的血小板浓缩物(PC)和CMV 阴性的红细胞输注(治疗组),另一组接受未筛选的血液制品输注(对照组),保持观察至CMV 感染发生或骨髓移植后100天,少白细胞PV 从未筛选的效单位全血中制备(约50%献血员CMV 阳性)。全血先以1025g 离心9分钟,再用3000g离心20分钟,血小板扣用50ml 少血小板血浆重悬,将4～6个PC 混合,最后用400g 离心10分钟可除去约99.8%的白细胞,输注前作白细胞计数和血小板计数。用乳胶凝集     

比较 CPD 和 CPDA-1贮存红细胞的生物化学特征

作者将CPD和CPDA-1保存的全血,置20-24℃4小时后,2665×g,3.5分钟离心,制备血比积80%的红细胞浓缩物,立即放4±2℃直立贮存。按无菌操作从混匀的红细胞和全血中抽样测定ATP、ADP、AMP和血糖等。结果:ATP和总腺嘌呤核苷酸水平,第二周内在CPDA-1红细胞中可维持很好,CPD红细胞中却有实质性降低,2周后,两者的AMP和ADP水平缓慢增加。第一周两者均能很好维持2,3DPG水平,其中CPD     

体外试验评价照射后贮存5天的浓缩血小板

为了评价照射后在标准条件下于室温贮存5天的浓缩血小板(PC),作者应用成对的山同一单位全血制备的PC进行研究。方法:15单位全血采于Fenwal 1618PL1240四联袋,于采血后立即制备PC,用Bcckman离心机1700 g离心4分钟,随后将富血小板血浆移至两个相同体积的袋中。然后再以2500 g离心10分钟,弃上层血浆,在每一袋中得到50-60mlPC,于室温放置60分钟,悬浮后每对PC中的一份立即应用Gamma Cell 2000,铯     

过滤对血小板浓缩物贮存的影响

作者采用混合的白膜层(BC)制备血小板浓缩液(PC):用含有CPD抗凝剂和氯化钠-腺嘌呤-葡萄糖-甘露醇添加剂的三联袋采集全血450～500ml,于2小时内冷至20℃。血袋于室温放置约20小时,经2960g离心5分钟,分出50±5ml白膜层。将4单位ABO血M型相同的BC于300ml带6个接头的PVC袋中混合,再加入这4名献血者之一的血浆200ml,充分混匀,并再连接一个300mlPVC空袋。混合物于22℃、400g离心7分钟,将富血小板血浆慢慢转移到300ml空袋中,当红细胞距袋子的出口约0.5～1cm时,中止转移。 为了减少差异,将上述3份PC混匀后再分成重量、体积等同的3份PC作为一组试验,其中1份     

联结酶链反应检测妇女尿中沙眼衣原体

本文作者报道应用联结酶链反应检测妇女尿中沙眼衣原体,并将其与宫颈拭子培养和EIA法加以比较。收集447例妇女(平均年龄24.2岁)。收集其首段尿液20ml于无菌试管中。置-20℃贮存4～6天。子宫颈拭子作细胞培养。用Accellon-multi-in-strument刷采集,拭子立即置于200μl含有0.02M蔗糖、5％胎牛血清(FCS)、庆大霉素(25μg/ml)和两性霉素B(2.5μg/ml)的蔗糖磷酸盐缓冲液(pH=7)中。沙眼衣原体的细胞培养法选用McCoy细胞,于48孔微量板中进行。细胞(2×10~5)在RPMI1640培养液中孵育24小时,制成单层细胞。培养物以1,500g离心60分钟,用放线菌酮(2.0μg/ml)处理,并加入标本。感染48小时后,单层细胞用乙醇固定10分钟,再用异硫氰酸荧光素标记的单克隆抗体染色,最后在荧光显微镜下检查。EIA按厂商IDEIA-Ⅲ药盒说明书检测尿标本中沙眼衣原体。LCR标本冻融和摇动30秒后,取1ml尿液置于1.7cm微量离心管中,13,000转离心10分钟。上清液用1ml尿缓冲液置换,将试管加热(95～100℃)