131I标记17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素的制备及生物分布

目的 建立131I标记17-丙烯胺基-17.去甲氧基格尔德霉素(17-AAG)的方法,并观察其在动物体内的生物分布.方法 采用过氧化氢法对17-AAG进行131I标记.测定131I.17.AAG注射后0.5,1,4,8和24 h在ICR健康小鼠体内的生物分布,通过显像动态观察131I-17-AAG在兔Vχ2肝癌模型中的分布.结果 建立了131I过氧化氢法标记17-AAG的最佳条件,131I-17-AAG标记率达85.65%,纯化后其乙酸乙酯相、生理盐水水溶液和4℃下放置5 d的生理盐水水溶液的放化纯分别为(96.51±0.80)%,(95.57±0.09)%和(90.96±1.29)%.尾静脉注射131I-17-AAG,健康ICR小鼠胆囊的摄取(每克组织百分注射剂量率,%ID/g)在0.5 h达到峰值(3.0963±1.3394)%ID/g,胃和小肠的摄取均在4 h达到高峰,24 h时肠道放射性明显减少,肝、肾摄取较少.瘤体给药后于2 h和4,6,14 d进行显像,可见131I-17-AAG在兔肿瘤中持续浓聚,肿瘤/非肿瘤组织放射性(T/NT)比值分别为10.36,3.62,4.32和3.50,其他脏器未见显影.结论 成功建立了131I-17-AAG标记方法,标记物保留了17-AAG生物学活性,体外稳定性好.兔肝肿瘤间质给药提示131I-17-AAG对肿瘤具有理想靶向性作用.     

靶向肽结合131I-PAMAM(G5.0) 抑制甲状腺髓样癌细胞增殖的研究

目的研究131I标记靶向肽丝氨酸-精氨酸-谷氨酸-丝氨酸-脯氨酸-组氮酸-脯氨酸（SRESPHP）（简称SR）修饰的第五代聚酰胺-胺（PAMAM（G5.0））的体外性质及其作为甲状腺髓样癌细胞靶向探针的可行性。方法用氯胺T法进行PAMAM（G5.0）-SR和PAMAM（G5.0）的131I标记,通过薄层层析法分别测定所制备的两种探针的标记率及稳定性,并考察131I标记物的脂水分配系数;通过阻断摄取实验分别考察两种探针的靶向性;计算两种探针对细胞的半数致死剂量并分析其对细胞生长的影响。采用GraphPad Prism 5.01分析软件对符合正态分布及方差齐性的数据进行样本t检验。结果 131I-PAMAM（G5.0）-SR和131I-PAMAM（G5.0）的标记率均大于70%,纯化后的放化纯度均大于90%。两种探针在体外PBS体系中的稳定性好,且均显示出良好的水溶性。细胞阻断实验结果显示,加入PAMAM（G5.0）-SR阻断的131I-PAMAM（G5.0）-SR细胞摄取率明显降低,差异均有统计学意义（t=7.315、22.590和22.570,均P < 0.01）,提示131I-PAMAM（G5.0）-SR对细胞具有较好的靶向性。131I-PAMAM（G5.0）-SR的细胞半数致死剂量为513.6 kBq/mL。细胞摄取实验结果显示,随着时间的延迟,细胞对半数致死剂量下的131I-PAMAM（G5.0）-SR的摄取逐渐降低,但在48 h细胞摄取出现上升的现象,随后细胞摄取再次下降。结论 131I-PAMAM（G5.0）-SR具有良好的生物学性质,可靶向甲状腺髓样癌细胞并抑制细胞增殖。     

综合干预措施下评估首次131I清甲治疗对分化型甲状腺癌患者唾液腺的慢性损伤

目的研究探讨分化型甲状腺癌（DTC）患者在采取综合干预措施后首次131I清甲治疗对唾液腺功能的慢性损伤情况。方法选取2016年8月至2017年9月在攀枝花市中心医院核医学科首次行131I（4200.24±604.21）MBq清甲治疗的DTC患者52例,所有患者均在131I清甲治疗后立即采取综合干预措施（饮食护理、心理护理、物理护理、口腔卫生护理、健康宣教及药物治疗等）,并分别于131I清甲前和治疗后6个月行99TcmO₄-唾液腺动态显像,计算其摄取峰值和排泌分数,所得数据采用自身配对t检验分析,同时联合口干评分法评估唾液腺功能的损伤情况。结果（1）左侧腮腺摄取峰值在131I清甲前为45.157±19.421,治疗后6个月为52.600±21.716,差异有统计学意义（t=2.470,P=0.018）。（2）右侧腮腺、双侧颌下腺的摄取峰值及双侧腮腺、双侧颌下腺的排泌分数之间的差异均无统计学意义（t=0.784、0.524、0.514、0.362、0.731、0.596、0.507,均P>0.05）。（3）对52例患者行问卷调查和口干评分法分析,其中,50例（96.2%）患者无口干症状,仅有2例（3.8%）出现轻度口干症状。结论（1）首次131I清甲治疗可引起DTC患者唾液腺功能受损,损伤主要以单侧腮腺摄取功能为主,呈非对称性损伤。双侧颌下腺的摄取和排泌功能则未受到明显影响。（2）症状上,在综合干预保护措施下,绝大部分患者在接受首次131I清甲治疗后6个月无明显口干情况,生活质量无明显影响。     

131I-17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素对人乳腺癌细胞生长的抑制作用

目的 探讨^131I-17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素（17-AAG）对人乳腺癌细胞生长的影响及其相关机制。方法 采用过氧化氢标记法制备^131I-17-AAG。细胞杀伤实验分为5组：二甲基亚砜（DMSO）对照（A）组，Na^131I370kBq（B）组，17-AAG2．5mg／L（C）组，^131I-17-AAG370kBq（D）组，^131I-17-AAG370kBq＋17-AAG2．5mg／L（E）组。用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测各种药物对人乳腺癌细胞MCF-7的生长抑制作用，流式细胞术分析细胞凋亡及细胞周期变化，RT—PCR检测药物处理前后MCF-7细胞中Akt2基因的mRNA表达情况。结果 ^131I-17-AAG的标记率为83％，放化纯为96．6％，比活度为1．48×10^5MBq／μmol。各组药物对细胞的杀伤呈时间效应，随着时间的延长，细胞的抑制率都呈明显上升趋势，尤以E组趋势明显。A～E组药物作用48h后，通过亚G1峰检测MCF-7细胞凋亡率分别为（1．54±0．13）％，（5．72±1．05）％，（12．97±1．44）％，（20．65±1．36）％，（35．39±4．15）％，各组细胞凋亡率差异有统计学意义（P均〈0．05）。C组，D组及E组Akt2基因的mRNA表达均比A组降低，其中E组降低尤为明显。结论 ^131I-17AAG能够抑制MCF-7细胞的生长并促进其凋亡，且能有效抑制Akt2基因的mRNA表达，和17-AAG联合应用能够增强肿瘤细胞对放疗的敏感性。     

131I-Tyr-Nivolumab用于结肠癌PD-1表达相关诊疗一体化的初步研究

目的 研制靶向程序性死亡受体1（PD-1）的131I-Tyr-Nivolumab诊疗剂,并研究其在高表达PD-1的原位结肠癌小鼠模型中的初步应用。 方法 采用间接标记法制备131I-Tyr-Nivolumab,测量产物的放射化学纯度及评估体外稳定性。PD-1高表达原位结肠癌小鼠10只,随机分成治疗组和对照组。治疗组尾静脉注射131I-Tyr-Nivolumab（11.1 MBq/10 μg）后,通过SPECT/CT观察在给药后不同时间点（2、4、24、65 h）诊疗剂在小鼠体内的分布情况。治疗5 d后,采用免疫组织化学法量化治疗组肿瘤组织中Bax、Bcl-2蛋白的表达。 结果 131I-Tyr-Nivolumab放射化学纯度>99%,24 h的体外稳定性>90%。131I-Tyr-Nivolumab主要分布于心脏、肝脏及肠道肿瘤,通过肾脏代谢清除,给药后2 h,肿瘤组织摄取131I-Tyr-Nivolumab逐渐增加,给药后4 h可见肝脏显影,给药后24 h肠道疑似肿瘤区显影清晰,给药后65 h肝脏非特异性摄取几乎被排出;给药后4、24、65 h肠道疑似肿瘤区放射性计数与全身总放射性计数的比值分别为（2.8±0.3）%、（8.4±0.2）%和（1.8±0.5）%。治疗组比未治疗组的Bax蛋白表达率明显增高[（22.23±1.61）% vs.（13.64±2.43）%,t=?5.476,P=0.006],治疗组比未治疗组的Bcl-2蛋白表达率明显降低[（13.81±4.64）% vs.（25.57±2.33）%,t=3.902,P=0.017）]。 结论 成功合成靶向PD-1的131I-Tyr-Nivolumab诊疗剂,其可作为结肠癌SPECT显像及内照射的诊治试剂,为实现诊疗一体化提供了依据。     

靶向TSPO显像剂99Tcm-DTPA-CB86的制备及其对关节炎症的SPECT/CT显像研究

目的制备99Tcm标记的转运蛋白（TSPO）配体CB86[99Tcm-DTPA（二亚乙基三胺五乙酸）-CB86],探讨其作为TSPO靶向关节炎症显像新型分子探针的可行性。方法通过偶联双功能螯合剂制备DTPA-CB86,进行99Tcm标记,经高效液相色谱纯化,测定其放化纯度和体外稳定性。选用巨噬细胞RAW264.7进行体外细胞结合实验,测定99Tcm-DTPA-CB86的结合率和外排率。采用弗氏佐剂建立左踝关节炎症小鼠模型,对其行99Tcm-DTPA-CB86 Micro SPECT/CT显像,并观察探针的体内分布情况。采用SPSS 18.0统计软件对符合正态分布及方差齐性的数据进行t检验。结果99Tcm-DTPA-CB86的标记率为（95.86 ±2.45）%,放化纯度为（97.45 ±0.69）%,其在室温下的磷酸盐缓冲液中的稳定性良好,放置4 h后,其标记率仍>90%。99Tcm-DTPA-CB86能与巨噬细胞RAW264.7特异性结合,3 h的摄取率达到最高峰[（36.45 ±2.18）%],在加入过量未标记的DTPA-CB86后,RAW264.7细胞对99Tcm-DTPA-CB86的摄取明显受到抑制[（10.43 ±2.01）%],与未阻断时相比差异具有统计学意义（t=6.217,P < 0.05）;RAW264.7细胞对99Tcm-DTPA-CB86外排较少,摄取率从4.5 h时的（33.31 ±2.34）%到8 h时的（19.32 ±2.01）%,减少了13.99%。Micro SPECT/CT显像结果显示,99Tcm-DTPA-CB86在小鼠左踝关节炎症部位清晰可见,且能被过量的DTPA-CB86明显抑制;体内生物学分布结果表明,其具有较好的炎症靶向性;注射后3 h踝关节炎症部位的摄取仍可达（2.35 ±0.10）% ID/g。结论99Tcm标记CB86易于制备,具有较好的理化性质及体内代谢学性质,同时具有较好的关节炎症摄取,有望发展成新的TSPO靶向SPECT关节炎症显像分子探针。     

分子探针131I-ch4E5的制备及其动物实验研究

目的 探讨靶向B细胞淋巴瘤的分子探针131I-ch4E5的制备方法及其对荷人B细胞淋巴瘤裸鼠的抑瘤作用。 方法 采用Iodogen法用131I标记抗CD80的人-鼠嵌合抗体ch4E5,采用放射性薄层色谱扫描法测定标记率和放射化学纯度。（1）体外实验:在含细胞数为1×108、1×109、1×1010、5×1010、1×1011个/L的人B细胞淋巴瘤Raji细胞的离心管中分别加入131I-ch4E5溶液,同时设置非特异结合对照管,测量每管沉淀的放射性计数,计算Raji细胞与131I-ch4E5的特异性结合率。（2）体内实验: 3只荷瘤裸鼠尾静脉注射7.4 MBq的131I-ch4E5,72 h后处死,分别取肿瘤、血等14种脏器或组织,分别计算肿瘤与正常组织的放射性比值（T/NT）;将15只荷瘤裸鼠按随机数字表法分为3组,分别经尾静脉注射131I-ch4E5（131I-ch4E5组）、未标记的ch4E5（ch4E5组）及生理盐水（对照组）,观察3组荷瘤裸鼠的肿瘤生长情况,给药后第15天计算肿瘤生长抑制率;之后处死荷瘤裸鼠取肿瘤组织,采用苏木精-伊红染色法做组织病理学检查。2组间的比较采用两独立样本t检验。 结果 131I-ch4E5的标记率为（84.2±2.4）%、放射化学纯度为（97.1±1.1）%。（1）体外实验:131I-ch4E5与Raji细胞的结合率随细胞数量的增加而升高,最大结合率为（38.2±2.3）%。（2）体内实验:131I-ch4E5在荷人B细胞淋巴瘤裸鼠体内的分布具有靶向性,肿瘤与肌肉的T/NT最大为7.30;与ch4E5组、对照组比较,131I-ch4E5组肿瘤生长减慢,差异均有统计学意义（t=2.889 、6.516,均P<0.05）;给药后第15天,131I-ch4E5组肿瘤抑制率为71.7%、ch4E5组为43.4 %。组织病理学检查结果同样显示131I-ch4E5的治疗效果更明显。 结论 自制分子探针131I-ch4E5的标记率及放射化学纯度高,且对荷人B细胞淋巴瘤裸鼠肿瘤生长有明显的抑制作用,为进一步研究131I-ch4E5在放射免疫治疗中的应用提供了实验依据。     

131I-PAMAM(G5.0)介导靶向肽在甲状腺髓样癌模型中的实验研究

目的 评价新型分子靶向探针131I-PAMAM（G5.0）-SR、131I-PAMAM（G5.0）-GP及131I-PAMAM（G5.0）-SR/GP[其中,PAMAM（G5.0）:第五代聚酰胺-胺;SR:丝氨酸-精氨酸-谷氨酸-丝氨酸-脯氨酸-组氨酸-脯氨酸（SRESPHP,简称SR）;GP:甘氨酸-脯氨酸-亮氨酸-脯氨酸-亮氨酸-精氨酸（GPLPLR,简称GP）]在荷瘤甲状腺髓样癌（MTC）模型中的靶向性。 方法 采用高效液相色谱法纯化和分析靶向肽SR、GP及SR/GP,分别将其与修饰后的PAMAM（G5.0）共价连接,合成前体药物PAMAM（G5.0）-SR、PAMAM（G5.0）-GP及PAMAM（G5.0）-SR/GP。采用动态光散射粒度分析法检测PAMAM（G5.0）键合靶向肽前后的纳米粒径及Zeta电位。采用氯胺T法对修饰后的PAMAM（G5.0）、PAMAM（G5.0）-SR、PAMAM（G5.0）-GP、PAMAM（G5.0）-SR/GP进行131I标记,合成阳性对照组[131I-PAMAM（G5.0）]及实验组[131I-PAMAM（G5.0）-SR、131I-PAMAM（G5.0）-GP、131I-PAMAM（G5.0）-SR/GP]的4种探针。通过薄层色谱法分别测定探针的标记率、放射化学纯度及稳定性。经模型鼠腹腔注射阴性对照组（Na131I）、阳性对照组及实验组探针后,分别于4、8、12、24及48 h进行SPECT/CT显像,并计算靶/非靶值（T/NT）,同时处死裸鼠取肿瘤及重要脏器测定放射性,以每克组织百分注射剂量率（%ID/g）表示。组间同一时间点T/NT、组内不同时间点T/NT及组间24 h肿瘤放射性摄取值的比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t检验。 结果 纯化后的靶向肽SR、GP和SR/GP的纯度均达99%。PAMAM（G5.0）键合SR、GP、SR/GP前后的纳米粒径分别为4.47、5.70、4.71、5.95 nm,Zeta电位分别为+37.95、+20.02、+28.34、+24.37 mV。131I标记4种探针的标记率均>75%,放射化学纯度均>90%,48 h的体外稳定性显示,放射化学纯度均在85%以上。SPECT/CT图像显示,实验组探针在不同时间的T/NT均较对照组有增高趋势:131I-PAMAM（G5.0）-GP 在4 h的T/NT（6.03±1.45）与阳性对照组（2.18±0.39）、阴性对照组（1.36±0.00）比较,且差异均有统计学意义（t=3.235,P=0.033;t=3.843,P=0.019）;而131I-PAMAM（G5.0）-SR在8、12、24 h的T/NT（5.12±1.65、4.82±0.09、3.41±1.01）均较阴性对照组（1.50±0.00、1.43±0.65、1.34±0.81）高,且差异均有统计学意义（t=4.004,P=0.017;t=3.388,P=0.027;t=4.180,P=0.009）。实验组组内比较,131I-PAMAM（G5.0）-SR在24 h的T/NT（3.41±1.01）较131I-PAMAM（G5.0）-GP（2.10±0.67）高,差异有统计学意义（t=3.990,P=0.016）。注射131I-PAMAM（G5.0）-SR的肿瘤放射性摄取在24 h[（1.80±0.18）%ID/g]均较实验组其他探针、阴性对照组及阳性对照组高,但差异无统计学意义（F=3.366,P=0.059）。T/NT及肿瘤放射性摄取的达峰时间:131I-PAMAM（G5.0）-GP和131I-PAMAM（G5.0）-SR/GP 为4 h,131I-PAMAM（G5.0）和131I-PAMAM（G5.0）-SR为8 h。131I-PAMAM（G5.0）-GP的放射性洗脱较快,12 h的T/NT较4 h下降约57%。 结论 SR及GP提高了131I-PAMAMM（G5.0）对MTC的靶向性,131I-PAMAM（G5.0）-GP靶向MTC肿瘤新生血管使其在瘤体的摄取及代谢较快,有望应用于MTC SPECT显像,而131I-PAMAM（G5.0）-SR对MTC细胞具有很好的靶向性和滞留性,有望应用于MTC的靶向诊治及预后评估。     

非高危分化型甲状腺癌低剂量和高剂量131I清甲疗效的分析

目的 研究应用低剂量（1.11 GBq）和高剂量（3.70 GBq）放射性131I清除非高危分化型甲状腺癌（DTC）术后残留甲状腺组织的疗效。 方法 回顾性分析行131I清甲治疗的63例非高危DTC患者的临床资料,采用Binary Logistic回归分析年龄、首次手术距清甲的时间间隔、甲状腺24 h摄碘率、血清TSH水平和清甲剂量对清甲疗效的影响;27例患者给予低剂量、36例患者给予高剂量的131I清甲治疗,采用Pearsonχ2检验分析低剂量和高剂量131I清甲疗效的差异,P < 0.05表示差异有统计学意义。 结果 63例非高危DTC患者中,清甲成功者46例（73.02%,46/63）、未成功者17例（26.98%,17/63）;Binary Logistic回归分析显示,131I清甲剂量是清甲成功与否的主要影响因素（Wald=6.42,P=0.011）;27例给予低剂量131I清甲患者中有15例清甲成功,36例给予高剂量131I清甲者中31例清甲成功,Pearsonχ2检验结果表明,高剂量131I清甲成功率（86.11%,31/36）明显高于低剂量（55.56%,15/27）（χ2=7.311,P=0.007）。 结论 在临床实践中,当残余甲状腺组织较少时,对于非高危DTC患者可考虑采用高剂量131I清甲治疗,提高一次清甲成功率。     

分化型甲状腺癌术后首次131I清甲效果影响因素的分析

目的 探讨分化型甲状腺癌（DTC）患者术后首次行131I清甲治疗疗效的影响因素。 方法 回顾性分析2013年4月至2022年3月于河北医科大学第四医院行DTC全切或近全切术后首次行131I 治疗的159例患者的临床资料,其中男性51例、女性108例,年龄24~78（46.5±11.9）岁。将患者按首次行131I治疗的剂量（2.96 GBq、3.70 GBq和5.55~7.40 GBq）分为3组进行研究。按清甲成功的判断标准,即131I 治疗后（4±1）个月131I诊断性全身显像示甲状腺床无放射性浓聚,分析患者的性别、年龄、手术方式、131I治疗前血清甲状腺球蛋白（Tg）水平及促甲状腺激素（TSH）水平、131I治疗距离手术的时间、131I治疗剂量对清甲效果的影响。计数资料的组间比较采用χ2检验。 结果 159例DTC患者首次行131I清甲的成功率为70.4%（112/159）。2.96 GBq组的首次131I清甲成功率为58.3%（21/36）,3.70 GBq组为69.2%（63/91）,5.55~7.40 GBq组为87.5%（28/32）,3组间的差异有统计学意义(χ2=7.071,P<0.05) 。手术方式为全切的DTC患者的清甲成功率为74.2%（95/128）,高于近全切患者的54.8%（17/31）,且差异有统计学意义（χ2=4.502,P<0.05）。治疗前TSH水平≥30 mU/L患者清甲成功率为73.9%（99/134）,高于治疗前TSH水平<30 mU/L患者的52.0%（13/25）,且差异有统计学意义（χ2=4.844,P<0.05）。患者在性别、年龄、131I治疗前血清Tg水平以及131I治疗距离手术的时间之间的差异均无统计学意义（χ2=0.311~3.073,均P>0.05）。 结论 131I治疗剂量、手术方式、131I治疗前TSH水平是影响DTC全切或近全切患者清甲成功率的因素。     

An experimental study on the antitumor effect of 131I-17-AAG in vitro and in vivo

Objective  To observe the antitumor effect of ¹³¹I-17-allylamino-17-demethoxygeldanamycin (¹³¹I-17-AAG) in vitro/in vivo and explore its antitumor mechanism with a view to its potential therapeutic application. Methods   ¹³¹I-17-AAG was prepared by the reaction of 17-AAG with Na [¹³¹I] in the presence of hydrogen peroxide. The effects of ¹³¹17-AAG on cell growth inhibition and cell cycle distribution in vitro were studied in BEL-7402 cells lines. Following BEL-7402 tumor implantation by subcutaneous xenografts into nude mice, the reagents were injected through the tail vein, and the tumor volume was measured and analyzed. At the end of the experiment, tumor specimens were processed for histopathological analysis. Terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end labeling (TUNEL) was used to investigate apoptosis. The expression change of Akt2 was tested by Western-blot analysis. Results  Methyl-thiazolyl-tetrazolium assay showed inhibition rates of 27.7 ± 5.3%, 57.3 ± 4.3%, and 63.7 ± 3.1%, in Na¹³¹I group, 17-AAG group, and ¹³¹I-17-AAG group, respectively. The inhibition rate in the ¹³¹I-17-AAG group differed significantly between N^a131I group and 17-AAG group (F = 229.49, P < 0.001). Following 48 h of treatment with the drug in each group, flow cytometry analysis indicated that detected sub-G peaks (black) were 1.54 ± 0.13%, 5.72 ± 1.05%, 12.97 ± 1.44%, and 20.65 ± 1.36%, in dimethyl sulfoxide (DMSO) group, Na¹³¹I group, 17-AAG group, and ¹³¹I-17-AAG group, respectively. Following infusion for 32 days, the tumor volumes in the ¹³¹I-17-AAG group were significantly smaller than those in the DMSO group (F = 24.18, P < 0.001) or the ¹³¹I group (F = 20.68, P < 0.001). Histopathological and TUNEL analyses showed that ¹³¹I-17-AAG inhibited the proliferation of tumor cells and induced apoptosis. The expression of Akt2 in ¹³¹I-17-AAG was significantly lower than that in the DMSO group or ¹³¹I group. Conclusions   ¹³¹I-17-AAG can effectively inhibit the growth of BEL-7402 tumor cells in vitro and in vivo. ¹³¹I-17-AAG is a promising agent for the treatment of BEL-7402 cell tumor.     

17-AAG对转染NIS基因的未分化甲状腺癌摄碘动力学的影响

目的 探讨17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-AAG)对已转染NIS基因的未分化甲状腺癌(ATC)细胞摄碘动力学的影响.方法 采用脂质体转染法,将携带NIS基因的重组质粒pcDNA3.1-NIS转染入ATC细胞株FRO细胞中,G418抗性筛选获得稳定表达细胞系NIS-FRO.在NIS-FRO细胞的培养基中引入125I,进行125I内流及外流的系列实验,绘制时间-放射性曲线.进一步分析经1μmol/L的17-AAG作用24 h后NIS-FRO细胞125I内流及外流的变化,并与未经转染的细胞进行对比,2组间各个时间点的放射性计数采用两样本t检验进行统计学分析.结果 NIS-FRO细胞的摄125I能力明显提高,约为FRO细胞的10.68倍(t=45.329,P＜0.001),但去除孵育环境中的125I后30 min,细胞内的125I滞留率仅为初始的10.5％.1μmol/L的17-AAG作用于NIS-FRO细胞后24h,细胞摄125I能力进一步提高,在含125I的培养基中孵育20～60 min,其放射性计数为31771.8～54815.5 min-1,摄125I能力较对照组( 24020.3～41293.8)提高了24.8％～ 35.5％(t值依次为3.096、4.275、3.055、4.292和5.496,P均＜0.05);撤掉孵育环境中的131I后5～30 min,细胞内的125I滞留率为32.7％ ～85.2％,较对照组(10.5％～56.8％)明显增加(t值依次为22.801、13.096、19.631、38.205、43.519和29.322,P均＜0.01),125I的外流减少,30 min后17-AAG作用组的细胞内125I滞留率为32.7％,为对照组的3.1倍.结论 把NIS转染入ATC细胞后获得的稳定表达细胞株在经一定浓度的17-AAG作用后,可进一步提高肿瘤细胞的摄碘率,并可明显延迟碘的外流,提高细胞内碘的滞留率.     

125I-脱氧尿嘧啶核苷-壳聚糖载药纳米微粒的研制和鉴定

目的 研制直径100～200 nm的¹²⁵I-脱氧尿嘧啶核苷-壳聚糖载药纳米微粒( ¹²⁵I-UdR-CS-DLN),并进一步分析其药物缓释性能和肿瘤靶向性。方法 采用离子交联法制备CS纳米微粒,以单因素分析和正交试验优化制备条件和工艺;用动态透析法分析其释放特性;激光共聚焦显微镜观察其肿瘤靶向性。结果 按照CS浓度1 g/L,搅拌速度600 r/min,TPP浓度2 g/L,相对分子质量为3×10³的条件下得到平均粒径(70.39±5.12) nm的纳米微粒(PDI为0.16±0.012)。透射电镜观察其外观为规整的球形,大小均匀,分散度较好。在投药量为2.96 MBq/ml、pH值为5的条件下, ¹²⁵I-UdR-CS-DLN的载药量1253.55 MBq/g,包封率42.35%,具有明显的缓释作用。激光共聚焦显微镜观察结果证明肿瘤细胞在2 h内摄入的纳米粒子明显多于正常细胞。结论 成功制备了直径为(127.81±15.25) nm (PDI 为0.240±0.035)的 ¹²⁵I-UdR-CS-DLN,确定了最佳工艺条件。所制备的纳米粒子具有典型的长效缓释制剂特性,并具有肿瘤细胞被动靶向性,为 ¹²⁵I-UdR应用于肿瘤内照射治疗提供了更有效的途径。     

Gamma camera dual imaging with a somatostatin receptor and thymidine kinase after gene transfer with a bicistronic adenovirus in mice

PURPOSE: To compare two systems for assessing gene transfer to cancer cells and xenograft tumors with noninvasive gamma camera imaging. MATERIALS AND METHODS: A replication-incompetent adenovirus encoding the human type 2 somatostatin receptor (hSSTr2) and the herpes simplex virus thymidine kinase (TK) enzyme (Ad-hSSTr2-TK) was constructed. A-427 human lung cancer cells were infected in vitro and mixed with uninfected cells at different ratios. A-427 tumors in nude mice (n = 23) were injected with 1 x 10(6) to 5 x 10(8) plaque-forming units (pfu) of Ad-hSSTr2-TK. The expressed hSSTr2 and TK proteins were imaged owing to internally bound, or trapped, technetium 99m ((99m)Tc)-labeled hSSTr2-binding peptide (P2045) and radioiodinated 2'-deoxy-2'-fluoro-beta-D-arabinofuranosyl-5-iodouracil (FIAU), respectively. Iodine 125 ((125)I)-labeled FIAU was used in vitro and iodine 131 ((131)I)-labeled FIAU, in vivo. The (99m)Tc-labeled P2045 and (125)I- or (131)I-labeled FIAU were imaged simultaneously with different window settings with an Anger gamma camera. Treatment effects were tested with analysis of variance. RESULTS: Infected cells in culture trapped (125)I-labeled FIAU and (99m)Tc-labeled P2045; uptake correlated with the percentage of Ad-hSSTr2-TK-positive cells. For 100% of infected cells, 24% +/- 0.4 (mean +/- SD) of the added (99m)Tc-labeled P2045 was trapped, which is significantly lower (P <.05) than the 40% +/- 2 of (125)I-labeled FIAU that was trapped. For the highest Ad-hSSTr2-TK tumor dose (5 x 10(8) pfu), the uptake of (99m)Tc-labeled P2045 was 11.1% +/- 2.9 of injected dose per gram of tumor (thereafter, dose per gram), significantly higher (P <.05) than the uptake of (131)I-labeled FIAU at 1.6% +/- 0.4 dose per gram. (99m)Tc-labeled P2045 imaging consistently depicted hSSTr2 gene transfer in tumors at all adenovirus doses. Tumor uptake of (99m)Tc-labeled P2045 positively correlated with Ad-hSSTr2-TK dose; (131)I-labeled FIAU tumor uptake did not correlate with vector dose. CONCLUSION: The hSSTr2 and TK proteins were simultaneously imaged following dual gene transfer with an adenovirus vector.     

131I标记纳米脂质体靶向治疗结肠癌的实验研究

目的 研究¹³¹I-antiEGFR-BSA-PCL对LS180细胞结肠癌裸鼠移植瘤内照射的治疗效果。方法 构建抗表皮生长因子受体(EGFR)标记的纳米脂质体及EGFR靶向性。通过荧光共聚焦显微镜、细胞摄碘实验观察纳米载体的靶向性及LS180细胞对其摄取情况。将裸鼠40只按随机数字表法分为4组,通过瘤体内注射的方式向移植瘤内分别注射74 MBq (740 MBq/ml) ¹³¹I-antiEGFR-BSA-PCL、¹³¹I-BSA-PCL、¹³¹I及相同体积的生理盐水。通过研究裸鼠体重、肿瘤体积、SPECT显像及组织病理学方法,观察纳米脂质体的抑瘤效果。结果 共聚焦实验显示,与BSA-PCL组相比,antiEGFR-BSA-PCL组细胞内绿色荧光较明显,其介导的胞吞效应显著。摄碘率实验中,LS180细胞对¹³¹I-antiEGFR-BSA-PCL的摄取率明显高于¹³¹I-BSA-PCL(t=2.77~5.40,P<0.01)。¹³¹I-antiEGFR-BSA-PCL组与¹³¹I-BSA-PCL组裸鼠肿瘤增殖均较慢,二者差异无统计学意义(P>0.05)。给药后72 h,¹³¹I-antiEGFR-BSA-PCL与¹³¹I-BSA-PCL的肿瘤摄取率分别为(21.61±1.01)和(20.58±0.65)% ID/g,均明显高于¹³¹I组(t=9.36、8.69,P<0.01)。SPECT显像显示纳米脂质体主要特异性积聚在肿瘤区。结论 ¹³¹I-antiEGFR-BSA-PCL对LS180结肠癌裸鼠移植瘤有明显的抑制作用。     

131I-17-AAG对荷H460人非小细胞肺癌裸鼠的抗癌效应

目的 观察131I标记17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-KAG)对荷H460人非小细胞肺癌裸鼠移植瘤的抑癌效应.方法 过氧化氢法制备131I-17AAG.建立荷H460人非小细胞肺癌BALB/c裸鼠模型,28只荷瘤裸鼠按随机数字表法分为7组(n=4),瘤内和尾静脉注药各3组,剂量依次为5.5 MBq×2(间隔8 d)、11.0 MSq和5.5 MBq及空白对照组.另设Na131I瘤内给药对照组.8组分别于注药后2,6,24 h及2,3,7,10,16 d各取2只鼠行γ显像.观察肿瘤生长情况,16 d后处死全部小鼠,计算抑瘤率,并做光学显微镜、电镜及免疫组织化学检测.计量数据以x±s表示,采用SPSS 13.0软件进行统计分析.结果 SPECT显像证实131I-17-AAG靶向定位好,能较长时间聚集在瘤体内;各治疗组存在不同程度抑瘤效应,以瘤内间隔给药(5.5 MBq×2)组疗效最好,抑瘤率高达(86.77±4.57)%,尾静脉给药5.5 MBq×2组和11.0 MBq组间差异无统计学意义(q=1.67,P>0.05),余各组间抑瘤率差异均有统计学意义(q=3.16～24.34,P均<0.05);形态学显示抑瘤效应越好,瘤组织破坏越明显;免疫组织化学显示瘤内及尾静脉注药组热休克蛋白90(HSP90)a阳性率[分别为(26.01±3.71)%、(61.57±5.98)%]均较空白对照组[(84.13±5.71)%]下降(t值分别为20.91和6.68,P均<0.05).结论 131I-17-AAG能有效抑制裸鼠非小细胞肺癌的生长,以瘤内注药及间隔给药抑癌效应最佳.     

Prediction of risk for symptomatic sialadenitis by post-therapeutic dual 131I scintigraphy in patients with differentiated thyroid cancer

Objective

The aim of this study is to predict the risk of symptomatic sialadenitis after ¹³¹I therapy using the early (third day post-therapy) and delayed (fifth or sixth day post-therapy) post-therapeutic ¹³¹I scintigraphy images in patients with differentiated thyroid cancer (DTC).

Methods

Included in the study were 112 patients with DTC who underwent early and delayed ¹³¹I scans after ¹³¹I treatment. All patients had normal salivary gland function on salivary scintigraphy performed in the week before the ¹³¹I treatment. Scintigraphy images were visually analyzed and the salivary gland-to-background uptake ratio (SUR) and percent change of the SUR between early and delayed scans were calculated. Calculation of effective half-life and absorbed dose in the salivary glands was performed based on the MIRD schema.

Results

Of 112 patients, symptomatic sialadenitis was diagnosed in 46 patients (41 %). Of these 46 patients, 83 % (38 patients) had persistent ¹³¹I uptake in the salivary glands on both early and delayed scans. Among 55 patients with persistent ¹³¹I uptake in the salivary glands, 69 % experienced symptomatic sialadenitis, while only 14 % of the other 57 patients experienced symptomatic sialadenitis (p < 0.0001). On the early ¹³¹I scintigraphy, SURs of bilateral parotid glands on early scan in patients with symptomatic sialadenitis were significantly higher than in other patients (p = 0.001 for right and p = 0.004 for left). Further, patients with symptomatic sialadenitis had a higher decreasing rate of the SUR and shorter effective half-life of ¹³¹I in bilateral parotid glands than other patients. Using visual analysis and SURs of right and left parotid glands on early ¹³¹I scan as parameters, the sensitivities for predicting symptomatic sialadenitis were 83, 80, and 93 %, respectively. The mean values of effective half-life and absorbed dose in the parotid and submandibular glands were 20.8 ± 6.3 h and 2.7 ± 0.8 Gy, and 22.1 ± 7.9 h and 2.8 ± 1.1 Gy, respectively.

Conclusions

Symptomatic sialadenitis can be predicted by post-therapeutic ¹³¹I scintigraphy with high sensitivity. Post-therapeutic ¹³¹I scintigraphy could provide effective information on the risk of symptomatic sialadenitis in DTC patients who underwent ¹³¹I treatment.