表皮生长因子及其受体与早期自然流产相关性研究

目的探讨表皮生长因子(EGF)及其受体(EGFR)在绒毛及蜕膜组织中的表达与早期自然流产的关系。方法应用免疫组织化学法(SP法)检测20例早期流产患者(流产组)及20例正常早孕人工流产组(对照组)绒毛及其蜕膜组织中EGF及其受体(EGFR)蛋白表达情况,用放射免疫法测定两组孕妇外周血中绒毛膜促性腺激素(HCG-β)水平。结果EGF及其受体在早孕绒毛滋养细胞、蜕膜组织的腺上皮及间质细胞中均有阳性染色,两组表达部位相同。EGF及其受体在流产组绒毛及其蜕膜组织中的表达强度明显低于正常早孕组,差异有显著性意义(P<0.01)。孕妇外周血HCG-β水平与EGF及其受体在绒毛中的表达作相关分析,rEGF=0.559,rEGFR=0.567,成正相关(P<0.01)。结论EGF及其受体在自然流产患者绒毛及蜕膜组织中表达下降,EGF可能是影响HCG分泌的重要因素之一。EGF及其受体表达异常在自然流产发病中起重要作用,可能是导致自然流产的原因之一。     

HLA-G mRNA在原因不明复发性流产患者绒毛中的表达

目的 探讨人类白细胞抗原G mRNA在原因不明复发性流产患者绒毛中的表达和临床意义.方法 采用实时荧光定量聚合酶链技术分别检测30例正常妊娠人工流产患者、24例单次自然流产患者、28例原因不明复发性流产患者绒毛中人类白细胞抗原G mRNA的表达水平,用聚合酶链反应循环阈值(Ct值)表示其表达水平.结果 3组人类白细胞抗原G mRNA的表达水平由高到低依次为:正常妊娠人工流产组、单次自然流产组、原因不明复发性流产组.原因不明复发性流产组、单次自然流产组分别与正常妊娠人工流产组人类白细胞抗原G mRNA表达水平比较,差异均有统计学意义(原因不明复发性流产组:t=9.681,P<0.001;单次自然流产组:t=8.890,P<0.001).结论 人类白细胞抗原G mRNA的表达水平与维持妊娠有一定的关联.     

米非司酮配伍米索前列醇对母胎界面孕酮诱导阻断因子及孕酮受体表达的影响

目的 研究米非司酮配伍米索前列醇对母胎界面孕酮诱导阻断因子（PIBF）及孕酮受体（PR）表达的影响. 方法 应用免疫组织化学染色法检测米非司酮药物流产成功（药流成功组,n =30）、失败（药流失败组,n=30）及正常早孕负压吸宫流产（手术组,n=30）绒毛及蜕膜组织中PIBF及PR的表达情况. 结果 PIBF表达于绒毛合体滋养层细胞、细胞滋养层细胞和蜕膜细胞胞质,PR表达于蜕膜组织细胞核.与手术组相比,药物流产的两组绒毛滋养层细胞中PIBF的表达差异无统计学意义,而在蜕膜细胞中,药物流产的两组PIBF、PR的表达明显下降,差异有统计学意义,且药流成功组PIBF及PR的表达低于药流失败组,差异有统计学意义. 结论 米非司酮配伍米索前列醇终止早期妊娠可能与PIBF及PR的表达降低有关,其成功率与PIBF、PR表达降低程度相关.     

巨噬细胞移动抑制因子在不明原因早期复发性流产者血清、绒毛和蜕膜中的表达及意义

目的:研究巨噬细胞移动抑制因子(MIF)在正常早孕和不明原因早期复发性流产血清、绒毛和蜕膜中的表达水平及在不明原因早期复发性流产(UERSA)发病中的作用。方法:选取2008年1～12月在天津医科大学第二医院计划生育科因不明原因早期复发性流产就诊的患者30例(UERSA组)以及同孕龄正常早孕妇女30例(正常早孕组),采用ELISA方法检测两组外周血清中MIF的浓度,并采用实时荧光RT-PCR检测两组绒毛、蜕膜组织中MIF-mRNA的表达水平,进行统计学比较。结果:UERSA组血清MIF水平(10.98±3.02ng/ml)低于正常早孕组(17.53±5.34ng/ml),绒毛、蜕膜组织中MIF-mRNA的2-△△CT值(0.022±0.001;0.97±0.58)均较正常早孕组(1.290±1.110;1.20±0.85)显著降低。经过相关分析,血清MIF水平与绒毛、蜕膜组织中MIF-mRNA的水平呈正相关(r=0.69,0.71)。结论:妊娠期母胎界面MIF表达降低,可能在不明原因早期复发性流产的发生发展中起重要作用。     

母胎界面MCP-1表达异常与不明原因早期复发性流产的关系

目的:探讨绒毛、蜕膜组织中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达异常与不明原因早期复发性流产(UERSA)的关系。方法:选取UERSA患者30例(UERSA组)以及同孕龄正常早孕妇女30例(正常早孕组),应用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测两组绒毛、蜕膜组织中MCP-1mRNA的表达水平,应用酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测两组血清中MCP-1蛋白的含量。结果:早孕绒毛、蜕膜组织均有MCP-1mRNA的表达;UERSA组绒毛、蜕膜组织中MCP-1mRNA的表达量(1.96±0.39,3.67±0.98)均较正常早孕组(1.42±0.28,1.90±0.85)显著升高(P<0.01);UERSA组血清MCP-1蛋白含量为85.74±12.31pg/ml,较正常早孕组(59.41±9.70pg/ml)显著升高(P<0.01);血清MCP-1蛋白的含量与绒毛、蜕膜组织中MCP-1mRNA的水平分别呈正相关(r=0.595,0.655)。结论MCP-1表达于早孕母胎界面,绒毛、蜕膜组织MCP-1mRNA高表达可能与UERSA的发病机制有关,提示血清MCP-1升高在胚胎停育的早期诊断中具有重要的临床意义。     

IL-2受体和IL-6在复发性自然流产患者胚胎组织中的表达

目的:测定IL-2受体和IL-6在复发性自然流产绒毛、蜕膜组织中的含量变化,探讨IL-2和IL-6与复发性自然流产的关系。方法:采用化学发光法,检测32例正常早孕及33例不明原因复发性自然流产患者绒毛、蜕膜组织中IL-2受体、IL-6含量变化。结果:复发性自然流产患者绒毛、蜕膜组织中IL-2受体的含量高于正常早孕妇女(P<0.05),IL-6含量低于正常早孕妇女(P<0.05);在不同流产次数中,IL-2受体、IL-6含量在绒毛、蜕膜组织中的变化差异无统计学意义(P>0.05)。结论:复发性自然流产的发生与Th1/Th2细胞因子的失衡有关。     

雌激素及其受体与原因不明复发性流产

复发性自然流产病因复杂,仍有近50%的复发性流产病因不明。辅助性T细胞1型(Th1)和2型(Th2)失衡是复发性流产的重要特征。雌激素与其受体结合后可通过基因途径和快速信号反应途径影响T细胞功能,进而影响Thl/Th2型细胞因子间的动态平衡,可能导致复发性流产。雌激素受体在绒毛和蜕膜组织中表达量降低也可能导致复发性流产的发生。通过对雌激素受体与T细胞功能的分析,着重对雌激素受体与复发性流产的相关研究综述。     

雌激素及其受体与原因不明复发性流产

复发性自然流产病因复杂,仍有近50%的复发性流产病因不明。辅助性T细胞1型(Th1)和2型(Th2)失衡是复发性流产的重要特征。雌激素与其受体结合后可通过基因途径和快速信号反应途径影响T细胞功能,进而影响Thl/Th2型细胞因子间的动态平衡,可能导致复发性流产。雌激素受体在绒毛和蜕膜组织中表达量降低也可能导致复发性流产的发生。通过对雌激素受体与T细胞功能的分析,着重对雌激素受体与复发性流产的相关研究综述。     

血清甲胎蛋白、人绒毛膜促性腺激素及组织中血管生成素水平与孕早期复发流产关系

目的：探讨血清甲胎蛋白(AFP)、人绒毛膜促性腺激素(HCG)及血管生成素(Ang)水平与孕早期复发流产的关系。方法：选取2019年5月-2020年5月于本院行流产清宫术女性112例临床资料,将正常妊娠行人工流产60例为对照组,自然流产≥2次52例为流产组,采用全自动电化学发光分析仪检测两组血清AFP、HCG水平,免疫组化SP法检测绒毛及蜕膜组织中Ang-1和Ang-2表达水平。结果：流产组血清AFP(3.15±0.24 ng/ml)和HCG(78.16±3.67 IU/L)水平均低于对照组(8.35±1.62 ng/ml、89.74±4.58 IU/L),利用Pearson相关性分析发现,两组血清AFP与HCG均呈正相关(均P<0.05);通过病理学切片分析,Ang-1和Ang-2在两组绒毛组织的滋养层细胞、间质细胞的胞浆内以及蜕膜组织腺上皮细胞及基质胞胞浆内均有表达,但在绒毛组织中流产组高于对照组、蜕膜组织中流产组低于对照组(均P<0.05)。结论：在复发性流产女性孕早期血清AFP和HCG水平均发生异常降低且二者呈正相关,绒毛蜕膜组织中Ang-1和Ang-2过度表达。提...     

早期自然流产妇女肿瘤坏死因子受体1的表达

目的 探讨自然流产妇女蜕膜组织肿瘤坏死因子受体1和血清中可溶性受体表达情况及其意义.方法 采用激光共聚焦显微镜检测技术,检测30例早期自然流产患者和30例同期正常妊娠要求人工流产者蜕膜组织肿瘤坏死因子受体1的表达含量;采用酶联免疫吸附试验测定两组血清可溶性受体的表达水平.结果 早期自然流产患者蜕膜间质细胞肿瘤坏死因子受体1表达高于正常妊娠人工流产者,腺体上皮细胞肿瘤坏死因子受体1表达低于正常妊娠人工流产者(t值分别为2.442和-2.130,均P＜0.05).早期自然流产患者血清可溶性受体的表达水平显著高于正常妊娠人工流产者(t=-2.033,P＜0.05).结论 早期自然流产妇女蜕膜基质细胞肿瘤坏死因子受体1的表达明显增高,腺体上皮细胞的表达明显降低.这种改变可能与不明原因早期自然流产有关.血清可溶性受体水平的升高可能对自然流产的发生起重要作用.     

VDR与乳腺癌临床病理因素的关系

目的:研究维生素D受体(VDR)在乳腺癌组织中的表达,初步探讨维生素D受体与乳腺癌各病理类型、雌孕激素受体表达情况、肿瘤大小、患者年龄及临床分期的相关性。分析VD/VDR对乳腺癌治疗的意义。方法:采用免疫组化S-P法对65例乳腺癌组织及30例乳腺良性肿瘤组织进行维生素D受体标记。结果:4种病理类型的乳腺癌组织中VDR的表达有显著性差异(P<0.05),VDR的表达与雌、孕激素受体表达情况、肿瘤大小、患者年龄及临床分期无相关性。结论:在临床上检测VDR并应用VD的类似物进行乳腺癌治疗。     

我国汉族妇女维生素D 受体基因多态性和骨质疏松关系的研究

旨在探讨维生素D受体 (VDR)基因多态性与骨质疏松的关系 ,采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性技术对 162例健康汉族中老年妇女和 17例骨质疏松患者的VDR基因进行分型 ,并计算其基因频率分布。结果 :正常对照组VDR基因bb、Bb、BB基因型分别为 91.36%、8.64%、0 % ;骨质疏松组分别为 82 .35%、17.65%、0 % ,两组各型均无显著性差异。VDR基因多态性具有种族差异性 ,就目前调查例数而言 ,我国汉族人骨质疏松与BB基因型无明显相关性。     

维生素D受体基因多态性与青少年代谢综合征空腹血糖受损的关系研究

目的探讨维生素D受体(VDR)基因多态性与青少年代谢综合征(MS)空腹血糖受损(IFG)的关系。方法选取2017年3月至2019年8月在上海市松江区中心医院接受治疗的青少年代谢综合征患者(MS组)242例和体检中心健康检查的青少年(NC组)200例作为研究对象。MS组按照是否出现空腹血糖受损分为IFG亚组和Non-IFG亚组,分析维生素D受体基因ApaⅠ位点多态性及与相关临床资料的关系。结果三组研究对象VDR基因ApaⅠ基因型及等位基因分布频率比较差异具有统计学意义,且aa基因型频率、a等位基因频率均在IFG亚组中最高,在NC组中最低(χ2值分别为36.954、31.501,均P<0.01);不同基因型患者空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹胰岛素(Fins)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、1,25-二羟基维生素D3[1,25-(OH)2D3]比较差异有统计学意义,且aa基因型患者的FPG、HbA1c、Fins水平更高,HDL-C、1,25-(OH)2D3水平更低(F值分别为6.278、5.536、9.663、6.012、11.547,均P<0.05);Logistic回归分析结果显示,体质指数(BMI)、FPG、HbA1c、稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、aa基因型及a等位基因为MS患者空腹血糖受损的危险因素,HDL-C及1,25-(OH)2D3为MS患者空腹血糖受损的保护因素,其OR值及95%CI分别为2.416(1.397~6.222)、2.978(1.694~8.996)、1.896(1.207~7.554)、2.021(1.832~7.449)、2.142(1.214~8.094)、2.423(1.353~7.939)、0.421(0.384~0.852)、0.527(0.436~0.847),均P<0.05。结论维生素D受体基因ApaⅠ位点多态性与MS患者空腹血糖受损存在一定相关性,其可能通过降低维生素D受体水平引起MS空腹血糖受损。     

基底细胞样型浸润性乳腺癌组织中VDR和EGFR的表达及意义

目的探讨基底细胞样型浸润性乳腺癌(BLBC)组织中维生素D受体(VDR)、表皮因子生长受体(EGFR)的表达情况,并分析其病理作用。方法采用免疫组织化学SP法对50例BLBC和54例非BLBC乳腺癌(对照组)组织进行VDR、EGFR检测,并行相关性分析。结果 BLBC组织标本中的VDR、EGFR阳性表达率分别是24.00%(12/50)、82.00%(41/50),与对照组相比,差异有统计学意义(P0.05)。VDR与EGFR表达水平的相关分析发现,VDR蛋白与EGFR蛋白在BLBC组织中表达呈负相关(P0.01)。结论 VDR和EGFR参与BLBC的发生与发展;VDR低表达及EGFR表达率较高,提示BLBC可能对1,25(OH)2D3及类似物不敏感,而EGFR可以作为BLBC治疗的新靶点。     

缺锌对大鼠小肠粘膜维生素D受体及钙结合蛋白基因表达的影响

目的:研究锌缺乏对生长期大鼠小肠粘膜维生素D受体(VDR)和钙结合蛋白(CaBP)基因表达水平的影响。方法:刚断奶的雄性大鼠随机分为缺锌(ZD)、配饲(PF)、对照(ZA)三组,每组10只。喂养15d后处死,取小肠粘膜,用试剂盒抽提组织RNA,用实时荧光定量PCR检测小肠粘膜VDRmRNA及CaBPmRNA的表达。结果:ZD组大鼠小肠粘膜VDR基因表达较PF组下调88.89%,PF组较ZA组VDR基因表达下调50.00%,ZD组较ZA组VDR基因表达下调94.5%。ZD组CaBP基因表达较PF组下调80.16%,PF组较ZA组CaBP基因表达下调39.76%,ZD组较ZA组CaBP基因表达下调88.50%。结论:锌缺乏通过改变VDR的活性而影响VDRmRNA,从而影响靶基因CaBP转录,进而影响钙吸收,导致骨生成障碍。     

维生素D受体异常表达对大鼠肾小管上皮细胞增殖凋亡的影响

目的 研究维生素D受体（VDR）异常表达对大鼠肾小管上皮细胞增殖凋亡的影响。方法 制取大鼠肾小管上皮细胞,并构建VDR干扰和过表达载体。将VDR干扰和过表达载体分别转染到大鼠肾小管上皮细胞中,通过MTT法检测VDR干扰和过表达后大鼠肾小管上皮细胞的增殖;流式细胞术检测细胞周期;Annexin - PI法检测细胞凋亡情况。结果 与对照组相比,过表达VDR后,大鼠肾小管上皮细胞的VDR蛋白表达显著上调,增殖速度下降,发生G1期阻滞,凋亡比例增多,差异具有统计学意义。而干扰VDR表达后,结果与上述相反,即大鼠肾小管上皮细胞的VDR蛋白表达显著下调,增殖速度加快,细胞凋亡比例降低,差异具有统计学意义。结论 VDR能促进大鼠肾小管上皮细胞发生细胞周期G1期阻滞,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡。     

孕期鼠补充维生素D对子鼠胸腺维生素D受体表达

目的 研究给予母孕期大鼠补充不同剂量维生素D,检测子代鼠胸腺中VDR表达变化。方法 健康雌性Wistar大鼠18只,雄性Wistar大鼠9只,以每日晚间17时将雌鼠、雄鼠按2∶1合笼,次日8时对雌鼠阴道分泌物涂片,在40倍光学显微镜检查到精子表示受孕,记为妊娠0 d( gestational day 0,GD0) 。将孕鼠随机入对照组、维生素D低剂量、维生素D高剂量组。于GD 15 d起对照组每日给予肌肉注射生理盐水0.25 ml/(kg·次),低剂量组给予肌肉注射维生素D 20 μg/kg,高剂量组给予肌肉注射维生素D 100 μg/kg,直至子鼠娩出。子鼠哺乳21 d后分离子鼠胸腺,Real-time PCR检测VDRmRNA表达水平,Western blot检测VDR蛋白表达水平。结果 通过Real-tine PCR分析仔鼠胸腺VDR基因表达三组之间差异无统计学意义(P＞0.05)。Western blot检测VDR蛋白水平的表达显示,低剂量及高剂量组VDR蛋白的表达量均高于对照组,三组之间差异存在统计学意义(P＜0.05)。结论 给予母鼠补充维生素D,其仔鼠胸腺VDR蛋白表达量明显增加,与维生素D补充量呈正相关。     

维生素D受体基因多态性与汉族、维吾尔族和哈萨克族儿童铅中毒遗传易感性

目的探讨汉族、维吾尔族和哈萨克族儿童VDR-BsmI基因多态性位点及其铅中毒遗传易感性的关系。方法PCR-RFLP方法对新疆乌鲁木齐市的汉族469名、维吾尔族443名和哈萨克族516名儿童VDR-BsmI基因多态性进行分析。分析探讨汉族、维吾尔族和哈萨克族儿童VDR-BsmI基因多态性与血铅水平的关系。结果在汉族人群中,BsmI B和BsmI b等位基因频率分别为6%和94%;在维吾尔族人群中,BsmI B和BsmI b等位基因频率分别为18%和82%;在哈萨克族人群中,BsmI B和BsmI b等位基因频率分别为43%和57%,三者差异有统计学意义(P<0.01)。维吾尔族和汉族儿童BsmI位点基因多态性与血铅水平间有相关关系。结论VDR-BsmI位点基因多态性对铅毒性影响的方式可能与机体铅的负荷量密切相关。     

瘦素和瘦素受体在子宫内膜异位症患者在位内膜和异位内膜的表达

目的通过测定瘦素(leptin)和瘦素受体(leptin receptor,Ob-R)在卵巢子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)患者异位内膜及在位内膜中的表达,探讨瘦素系统在子宫内膜异位症发生发展中的作用及意义。方法收集2008年7月至11月,在本院因卵巢子宫内膜异位症行腹腔镜手术的25例患者的异位内膜和在位内膜为研究对象,分别纳入A组和B组。收集同期在本院因子宫肌瘤行腹腔镜手术的24例患者的正常内膜组织,纳入对照组。对研究组和对照组患者的子宫内膜组织,分别采用免疫组化SP法检测瘦素和瘦素受体水平(本研究遵循的程序符合本院人体试验委员会所制定的伦理学标准,得到该委员会批准,分组征得受试对象本人的知情同意,并与之签署临床研究知情同意书)。A,B组和对照组患者年龄、体重指数(body mass index,BMI)、末次月经及内膜组织学Noyes分期等比较,差异无显著意义(P>0.05)。结果瘦素和瘦素受体在B组、A组和对照组子宫内膜腺体及间质内,均可见阳性表达。瘦素在A组腺体的表达,明显高于间质,且差异有显著意义(P<0.05)。瘦素在A组、B组和对照组的表达比较,差异无显著意义(P>0.05),但瘦素在A组间质的表达,低于对照组和B组,且差异有显著意义(P<0.05)。瘦素受体在A组腺体和间质的表达比较,差异无显著意义(P>0.05);瘦素受体在A组腺体的表达,低于B组和对照组,差异有显著意义(P<0.05);而其表达在间质比较,则差别无显著意义(P>0.05)。瘦素在B组增生期腺体和间质的表达,高于分泌期,但差异无显著意义(P>0.05);而瘦素在对照组增生期腺体和间质的表达,高于分泌期,且差异有显著意义(P<0.05);瘦素受体在B组和对照组增生期和分泌期表达比较,差异均无显著意义(P>0.05,P>0.05)。结论瘦素和瘦素受体在卵巢内膜异位症异位内膜中的低表达,表明瘦素系统在卵巢异位病灶发展过程中的作用有限。     

上皮钙通道基因在维生素D受体和Calbindin-D28k双基因敲除鼠中的变化

目的研究上皮钙通道TRPV5和TRPV6基因与维生素D受体(VDR)和钙结合基因Calbindin-D28k的关系,以及肾钙的重吸收减少是否与TRPV5和TRPV6基因表达减少有关。方法制备VDR和CaBP-D28k双基因敲除小鼠,普通和高钙食物喂养下,检测野生型鼠(WT),CaBP-D28(-/-),VDR(-/-),和VDR(-/-)/CaBP-D28k(-/-)鼠的体重、摄食量及血尿参数值,用实时RT-PCR的方法检测各种鼠肾脏TRPV5和TRPV6的mRNA水平。结果普通饮食下,双基因敲除小鼠尿钙的分泌和血清甲状旁腺激素水平更高。TRPV5和TRPV6两者的表达在CaBP-D28k敲除鼠中均无变化,而在VDR敲除鼠和双基因敲除鼠中下调的幅度相当。高钙饮食下,VDR及双基因敲除小鼠的血离子钙水平正常。所有小鼠这两个基因的表达普遍降低,而在VDR和双基因敲除鼠中的表达更低。结论这些结果证实了上皮钙通道基因受钙和维生素D的调节,CaBP-D28k的缺失对两者无影响。肾钙的重吸收减少与TRPV5和TRPV6基因表达无明显关系。